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大鼠microRNA-145慢病毒表达载体的构建及其对血管平滑肌细胞表型转化的影响 被引量:7
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作者 王泽慧 边云飞 +2 位作者 卫娜 车星星 肖传实 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期424-428,共5页
目的构建针对Rno-miR-145的慢病毒表达载体并探讨其在血小板源生长因子(PDGF)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化中的作用。方法人工合成含有酶切位点粘端miR-145 shDNA双链模板序列,克隆于LV3 pGLV/H1/GFP+Puro-miRNA慢病毒穿梭载体中... 目的构建针对Rno-miR-145的慢病毒表达载体并探讨其在血小板源生长因子(PDGF)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化中的作用。方法人工合成含有酶切位点粘端miR-145 shDNA双链模板序列,克隆于LV3 pGLV/H1/GFP+Puro-miRNA慢病毒穿梭载体中,转染293T细胞,收获并浓缩慢病毒颗粒,感染大鼠原代VSMC,倒置荧光显微镜下观察VSMC感染后的荧光表达情况,实时荧光定量PCR检测miR-145的表达情况;实验分为空白对照组、PDGF组、PDGF+miR-145组和细胞转染阴性慢病毒载体组(miR-NC组);采用实时荧光定量PCR测定miR-145对VSMC增殖相关基因PCNA、c-Jun及分化相关基因SM22αmRNA表达水平的影响。结果成功构建了microRNA-145慢病毒载体,测定病毒滴度为1×109TU/mL。倒置荧光显微镜下观察大鼠microRNA-145慢病毒表达载体感染成功,MOI值为50,感染72 h时感染率最高。实时荧光定量PCR结果显示PDGF可使PCNA、c-Jun表达增加,而使SM22α表达降低;miR-145可使PDGF诱导的去分化型VSMC增殖相关基因PCNA、c-Jun表达降低,分化相关基因SM22α表达增加。结论 miR-145慢病毒载体可高效感染大鼠原代VSMC。感染miR-145慢病毒后可抑制VSMC的表型转化。 展开更多
关键词 microRNA-145 慢病毒表达载体 血管平滑肌细胞 表型转化
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人结肠癌细胞系 SP 细胞 microRNA 表达谱的初步分析 被引量:2
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作者 夏忠胜 钟娃 +3 位作者 于涛 练国达 周慧敏 陈广成 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1184-1191,共8页
目的:探讨结肠癌侧群(SP)细胞在结肠癌多药耐药性中的作用及其microRNA生物标志。方法:结肠癌SP细胞的分选采用流式细胞术,细胞活力的测定采用MTT法,microRNA表达谱的检测采用microRNA芯片,microRNA表达的验证采用实时荧光定量PCR。结果... 目的:探讨结肠癌侧群(SP)细胞在结肠癌多药耐药性中的作用及其microRNA生物标志。方法:结肠癌SP细胞的分选采用流式细胞术,细胞活力的测定采用MTT法,microRNA表达谱的检测采用microRNA芯片,microRNA表达的验证采用实时荧光定量PCR。结果:(1)HCT-15、HT-29及LoVo结肠癌细胞系中SP细胞的比例分别为16.75%、13.02%及9.52%。(2)化疗药(5-氟尿嘧啶、草酸铂及阿霉素)对3种结肠癌细胞系SP细胞的IC_(50)均明显高于对非SP细胞的IC_(50)(P<0.05)。(3)microRNA芯片检测表明miR-5000-3p、miR-5009-3p及miR-552在3种结肠癌细胞系的SP细胞中表达均上调,实时荧光定量PCR亦证实此结果。结论:miR-5000-3p、miR-5009-3p及miR-552在结肠癌细胞系的SP细胞中表达上调,有可能成为结肠癌SP细胞的潜在microRNA生物标志。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 侧群细胞 微小RNA miR-5000-3p miR-5009-3p miR-552
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microRNA与肿瘤关系的研究进展 被引量:1
3
作者 罗庆丰 黄传生 《实用癌症杂志》 2009年第5期541-542,共2页
关键词 micmrna分子 肿瘤
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Advances in Negative Regulatory Mechanisms of Sox9 Gene Expression during Cartilage Development 被引量:4
4
作者 刘庆珍 吴尽 +3 位作者 邳晓盟 肖慧 刘学东 郑冬 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2017年第6期1038-1041,共4页
As the main regulator of cartilage development, Sox9 gene can initiate transcription and expression of various enzymes and protein genes required for car- tilage growth and development. During this process, the expres... As the main regulator of cartilage development, Sox9 gene can initiate transcription and expression of various enzymes and protein genes required for car- tilage growth and development. During this process, the expression and function of Sex9 are also regulated by a variety of factors and signaling pathways. More re- search is concerned about the positive regulation. At present, some studies dis- closed that negative regulation of Sox9 expression existed unique mechanisms. This study will discuss and summarize the negative regulatory mechanism of Sox9 gene by microRNA, NF-κB, Wnt, Notch and other factors and signaling pathways, in or- der to provide the basic framework for further investigating the expression and func- tion of Sox9 in cartilage development. 展开更多
关键词 Cartilage development Soxg MICRORNA NF-ΚB WNT NOTCH
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microRNA-34c调控c-Met抑制肝细胞癌的发生发展 被引量:2
5
作者 于晓剑 王燕 +2 位作者 李瑞峰 李莉 刘玉刚 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第9期1250-1254,共5页
目的探讨microRNA-34c及其靶基因c-Met在原发性肝癌发生发展中的作用。方法荧光定量PCR及Western blot分别检测人的肝癌组织及癌旁组织中microRNA-34c与c-Met蛋白的表达、细胞系Hep G2.2.15转染microRNA-34c后c-Met mRNA及蛋白的表达、... 目的探讨microRNA-34c及其靶基因c-Met在原发性肝癌发生发展中的作用。方法荧光定量PCR及Western blot分别检测人的肝癌组织及癌旁组织中microRNA-34c与c-Met蛋白的表达、细胞系Hep G2.2.15转染microRNA-34c后c-Met mRNA及蛋白的表达、细胞系Hep G2.2.15转染microRNA-34c或c-Met干扰RNA后P53蛋白的表达。建立裸鼠成瘤模型并进行瘤内注射治疗,测量计算肿瘤体积。结果 microRNA-34c在人的肝癌组织中表达比癌旁组织明显降低(P<0.01),c-Met在肝癌组织中表达较癌旁组织升高。Hep G2.2.15细胞系中转染microRNA-34c后c-Met表达降低(P<0.01)。Hep G2.2.15细胞系中转染microRNA-34c及c-Met干扰RNA后P53表达升高(P<0.05)。成瘤裸鼠经microRNA-34c质粒瘤内注射后肿瘤体积较对照组明显减小(P<0.05)。结论 microRNA-34c可能通过调节其靶基因c-Met的表达抑制原发性肝癌的发生和发展。 展开更多
关键词 原发性肝癌 微小RNA-34c 肝细胞生长因子受体 P53
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非编码RNA相关重大疾病发病机制和生物标志物筛选的研究进展 被引量:4
6
作者 甘晴 陈洁晶 +4 位作者 欧明林 常燕 刘富华 戴勇 眭维国 《医学综述》 2016年第18期3565-3568,共4页
人类重大疾病因其复杂性给诊断和治疗带来巨大难题,而且一些疾病属于慢性疾病,长期治疗无疑会加重患者负担。非编码RNA是指不编码蛋白质,但是参与基因调控的RNA分子,其在基因转录、基因转录后以及翻译水平发挥重要的调控作用。近年来,... 人类重大疾病因其复杂性给诊断和治疗带来巨大难题,而且一些疾病属于慢性疾病,长期治疗无疑会加重患者负担。非编码RNA是指不编码蛋白质,但是参与基因调控的RNA分子,其在基因转录、基因转录后以及翻译水平发挥重要的调控作用。近年来,研究发现,非编码RNA在相关重大疾病中有抑制或促进的作用,其异常表达与许多疾病相关。重大疾病相关非编码RNA机制的探究以及生物标志物的发现给复杂病理研究带来希望。该文就非编码RNA中的微RNA(miRNA)和长链非编码RNA(lncRNA)参与不同发病机制,以及疾病的非编码RNA生物标志物相关研究进行综述,并对其今后研究方向进行展望。 展开更多
关键词 非编码RNA 微RNA 长链非编码RNA 重大疾病 机制 生物标志物
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血管紧张素Ⅱ1型受体基因多态性与冠心病发病相关 被引量:1
7
作者 杨涛 石毅 +7 位作者 陈敬州 李阳 白永怿 王虎 孙凯 刘峻豪 秦勤 惠汝太 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2008年第2期91-94,共4页
目的研究血管紧张素Ⅱ1型受体基因多态性是否与冠心病的发病相关。方法通过冠状动脉造影检查,共收集了455例冠心病患者和465例对照。采用等位基因特异性PCR对血管紧张素Ⅱ1型受体SNP位点rs5186(A1166C)进行基因分型,最后进行统计分析。... 目的研究血管紧张素Ⅱ1型受体基因多态性是否与冠心病的发病相关。方法通过冠状动脉造影检查,共收集了455例冠心病患者和465例对照。采用等位基因特异性PCR对血管紧张素Ⅱ1型受体SNP位点rs5186(A1166C)进行基因分型,最后进行统计分析。结果共检测了455例冠心病患者和465例对照。基因分型结果显示,在冠心病病人和对照之间,SNP rs5186基因型存在差异,AA基因型降低冠心病的发病风(OR=0.57,P<0.001)。结论血管紧张素Ⅱ1型受体基因多态性与冠心病的发病相关,SNP 1166AA是冠心病发病的保护因素。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ受体 多态性 冠心病 micmrna
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小立碗藓(Physcomitrella patens)植物microRNA结合靶位预测
8
作者 陈文新 李明浩 +4 位作者 孙静松 蒋广龙 姚建庄 吴俊 万平 《生物信息学》 2009年第1期25-27,36,共4页
利用857条植物miRNA序列对27546条小立碗藓mRNA序列进行搜索,预测出162个植物miRNA家族在小立碗藓中存在结合靶位。miRNA结合靶位数目和miRNA协同作用网络分析结果同时显示,miR482和miR1168在小立碗藓中结合靶位多、协同作用广,提示它... 利用857条植物miRNA序列对27546条小立碗藓mRNA序列进行搜索,预测出162个植物miRNA家族在小立碗藓中存在结合靶位。miRNA结合靶位数目和miRNA协同作用网络分析结果同时显示,miR482和miR1168在小立碗藓中结合靶位多、协同作用广,提示它们对于小立碗藓可能具有重要生物学功能。52个莱茵衣藻特有的miRNA被预测在小立碗藓中存在结合靶位,显示小立碗藓在从藻类向种子植物进化过程中处在独特演化位置。 展开更多
关键词 小立碗藓 micmrna 结合靶位预测
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MicroRNAs与肝癌的早期干预与靶向治疗 被引量:5
9
作者 朱夏青 《药物流行病学杂志》 CAS 2017年第6期436-438,共3页
MicroRNAs(miRNAs)是一类高度保守,存在于动植物以及病毒中,长约22个核苷酸的非编码小分子RNA。MicroRNA基因簇(microRNA cluster)是一类miRNA基因在染色体上成簇排列的基因群。本文现结合前期研究成果探索miRNAs调控相关靶基因与肝癌... MicroRNAs(miRNAs)是一类高度保守,存在于动植物以及病毒中,长约22个核苷酸的非编码小分子RNA。MicroRNA基因簇(microRNA cluster)是一类miRNA基因在染色体上成簇排列的基因群。本文现结合前期研究成果探索miRNAs调控相关靶基因与肝癌的密切关系,为肝脏的炎症恶变及干预提供理论依据,同时为肝癌的靶向耐药研究提供研究思路。 展开更多
关键词 MICRORNAS 肝细胞癌 癌前病变 干预 耐药
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探讨人胶质瘤细胞系U87细胞中反义miR-21诱导凋亡机制 被引量:17
10
作者 石磊 程子昊 +3 位作者 张军霞 李瑞 尤永平 傅震 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期497-501,共5页
目的探讨下调miR-21诱导人胶质瘤细胞系U87细胞凋亡机制。方法应用化学方法合成的反义miR-21寡聚核苷酸(anti—miR-21),通过瞬转法转染U87细胞,检测U87细胞凋亡、增殖、侵袭等变化,并结合生物信息学分析、Western印迹验证在U87细胞... 目的探讨下调miR-21诱导人胶质瘤细胞系U87细胞凋亡机制。方法应用化学方法合成的反义miR-21寡聚核苷酸(anti—miR-21),通过瞬转法转染U87细胞,检测U87细胞凋亡、增殖、侵袭等变化,并结合生物信息学分析、Western印迹验证在U87细胞中miR-21和PTEN基因及caspase间关系。结果体外转染反义miR-21寡聚核苷酸能明显抑制U87细胞生长,诱导其凋亡,降低侵袭能力;增加caspase-3表达活性,活化caspase-9表达,但不影响VIEN和caspase-8表达。结论miR-21可能是人胶质瘤U87细胞的抗凋亡微RNA(microRNA,miRNA),反义miR-21可能通过caspase-9、3而不是PTEN诱导肿瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 微RNA 反义寡聚核苷酸 胶质瘤
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微小RNA-30a靶向Beclin1抑制舌鳞状细胞癌细胞自噬活性的研究 被引量:5
11
作者 梁建锋 王成 +2 位作者 翁军权 陈冠辉 侯劲松 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 CAS 2015年第2期5-8,共4页
目的研究微小RNA(mi RNA)-30a转染对舌鳞状细胞癌细胞自噬相关基因Beclin1表达及其自噬活性的影响,探讨舌鳞状细胞癌细胞自噬活性调控的相关机制。方法利用脂质体转染技术,将内源性mi RNA-30a模拟物和抑制物分别转染至舌鳞状细胞癌UM1、... 目的研究微小RNA(mi RNA)-30a转染对舌鳞状细胞癌细胞自噬相关基因Beclin1表达及其自噬活性的影响,探讨舌鳞状细胞癌细胞自噬活性调控的相关机制。方法利用脂质体转染技术,将内源性mi RNA-30a模拟物和抑制物分别转染至舌鳞状细胞癌UM1、UM2和SCC25细胞。实验设mi RNA-30a mimic组、mi RNA-30a inhibitor组和对照组;通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测转染前后Beclin1基因m RNA表达变化,通过Western blot检测Beclin1、LC3的蛋白表达变化。结果在mi RNA-30a mimic组中,Beclin1和自噬标记蛋白LC3-Ⅱ表达量与对照组相比均明显下降(P<0.05);在mi RNA-30a inhibitor组中,Beclin1和LC3-Ⅱ表达量较对照组均明显上升(P<0.05)。结论 mi RNA-30a负调控Beclin1表达,并抑制舌鳞状细胞癌细胞的自噬水平。 展开更多
关键词 微小RNA-30a BECLIN1 鳞状细胞 自噬
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结直肠癌发生发展中miRNAs机制的研究进展 被引量:1
12
作者 唐洁婷 房静远 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期297-299,共3页
microRNAs(miRNAs)是在动植物和病毒中发现的一个非编码单链小RNA,在肿瘤的发生和发展中起重要作用。目前认为,miRNAs对肿瘤的调控属于表观遗传学范畴。近年来,众多研究者开始关注人类结直肠癌的miRNAs表达谱,并深入探究miRNAs所... microRNAs(miRNAs)是在动植物和病毒中发现的一个非编码单链小RNA,在肿瘤的发生和发展中起重要作用。目前认为,miRNAs对肿瘤的调控属于表观遗传学范畴。近年来,众多研究者开始关注人类结直肠癌的miRNAs表达谱,并深入探究miRNAs所处的调节网络。作者综述了有关结直肠癌miRNAs表达异常及作用机制的最新研究,以期为结直肠癌表观遗传学干预找到新的切入点。 展开更多
关键词 MICRORNAS 结直肠癌 表观遗传学
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筛选舌鳞癌中差异表达的miRNA
13
作者 张巨峰 罗霞 邓铃 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2014年第9期63-66,共4页
目的应用miRNA芯片技术检测舌鳞癌组织中差异表达的miRNA,高通量筛选与舌鳞癌相关的miRNAs。方法应用Agilent miRNA芯片比较舌鳞癌和正常舌组织中miRNAs差异表达谱,然后在扩大的样本中用荧光定量PCR(qRT-PCR)对部分差异表达的miRNAs进... 目的应用miRNA芯片技术检测舌鳞癌组织中差异表达的miRNA,高通量筛选与舌鳞癌相关的miRNAs。方法应用Agilent miRNA芯片比较舌鳞癌和正常舌组织中miRNAs差异表达谱,然后在扩大的样本中用荧光定量PCR(qRT-PCR)对部分差异表达的miRNAs进行验证。结果与正常舌组织相比,有95个miRNAs在舌鳞癌中异常表达(差异4倍以上),其中52个基因表达水平增高,43个基因表达水平下降。hsa-let-7a、hsa-let-7c、hsa-let-7d经qRT-PCR验证与miRNA芯片结果一致,即在舌鳞癌中表达下降。结论 hsa-let-7a、hsa-let-7c、hsa-let-7d可能参与了舌鳞癌的发生过程。 展开更多
关键词 鳞状细胞 微RNAS let-7家族
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病毒miRNA研究新进展
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作者 何卓晶 洪艳 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2012年第4期277-280,共4页
MicmRNA(miRNA)是一类由多细胞真核生物编码的长度约为22个核苷酸的调控RNA分子,它们在许多重要细胞过程中参与转录后基因表达调控。某些病毒也能编码miRNA。目前发现的病毒miRNA已经超过200种,病毒利用这些miRNA可以调节细胞及其... MicmRNA(miRNA)是一类由多细胞真核生物编码的长度约为22个核苷酸的调控RNA分子,它们在许多重要细胞过程中参与转录后基因表达调控。某些病毒也能编码miRNA。目前发现的病毒miRNA已经超过200种,病毒利用这些miRNA可以调节细胞及其自身的基因表达。此文就编码miRNA的病毒,病毒miRNA的作用机制、生物学功能、保守性及其与疾病治疗的关系等内容进行综述。 展开更多
关键词 微RNAS 病毒miRNA
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微小RNA-935在食管鳞癌组织和细胞中的表达及其对食管鳞癌细胞增殖和侵袭的影响 被引量:2
15
作者 金成玲 左士宇 +4 位作者 王晓慧 刁长英 谢艺林 李晟磊 李向楠 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期1466-1468,共3页
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-935在食管鳞癌组织和细胞中的表达,并探讨其对食管鳞癌细胞增殖和侵袭的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测食管鳞癌组织和细胞以及正常食管鳞癌组织和细胞中miR-935的相对表达水平... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-935在食管鳞癌组织和细胞中的表达,并探讨其对食管鳞癌细胞增殖和侵袭的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测食管鳞癌组织和细胞以及正常食管鳞癌组织和细胞中miR-935的相对表达水平。将miR-935抑制剂、类似物以及阴性对照转染食管鳞癌EC1细胞,采用FQ—PCR检测转染后48hmiR-935的相对表达水平。进一步采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell小室检测不同处理组别食管鳞癌EC1细胞的增殖和侵袭能力。结果食管鳞癌组织和细胞中miR-935的相对表达水平显著高于正常食管上皮组织和细胞,差异有统计学意义(t=8.349,P=0.000)。此外,miR-935在有淋巴结转移的食管鳞癌患者中的表达水平显著高于非转移的患者,差异有统计学意义(t=4.264,P=0.000)。miR-935的类似物显著提高EC1细胞中miR-935的表达水平,而miR.935抑制剂显著下调EC1细胞中miR.935的表达水平。miR-935表达上调显著促进EC1细胞的增殖和侵袭,而miR-935表达下调显著抑制EC1细胞的增殖和侵袭。结论miR-935在食管鳞癌的发生发展中发挥重要作用。 展开更多
关键词 微小RNA-935 食管鳞癌 细胞增殖 侵袭 转移
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MicroRNAs在复发性流产病理过程中作用的研究进展 被引量:5
16
作者 孟楠 张璇 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期921-925,共5页
MicroRNAs(miRNAs)是一种非编码小RNA分子,其十分稳定,可以通过影响靶蛋白编码基因的转录后翻译过程而调节大部分蛋白的表达水平。越来越多的研究表明,miRNAs可能参与了复发性流产的病理过程。本文主要对miRNAs与复发性流产病理过程的... MicroRNAs(miRNAs)是一种非编码小RNA分子,其十分稳定,可以通过影响靶蛋白编码基因的转录后翻译过程而调节大部分蛋白的表达水平。越来越多的研究表明,miRNAs可能参与了复发性流产的病理过程。本文主要对miRNAs与复发性流产病理过程的相关性及其可能的分子机制进行综述,以期为从事相关研究和临床的专业人员提供参考。 展开更多
关键词 micmrnas 复发性流产 母-胎界面
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食管癌外周血miRNA的研究 被引量:2
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作者 彭学宏 陈暖 +1 位作者 李克 郑邦希 《中国校医》 2013年第5期353-355,共3页
目的研究食管癌外周血miRNA表达情况。方法应用芯片技术,分析研究20例食管癌病人及20例对照者外周血miRNA表达的差异。结果 11个miRNAs在食管癌病人血液中有差异。其中8个基因上调、3个基因下调。结论检测食管癌外周血miRNA可能为食管... 目的研究食管癌外周血miRNA表达情况。方法应用芯片技术,分析研究20例食管癌病人及20例对照者外周血miRNA表达的差异。结果 11个miRNAs在食管癌病人血液中有差异。其中8个基因上调、3个基因下调。结论检测食管癌外周血miRNA可能为食管癌早期诊断提供新的生物学指标。 展开更多
关键词 食管肿瘤/诊断 小分子RNA/血液 肿瘤标记 生物学/血液
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母乳miRNA的研究进展 被引量:3
18
作者 胡瑞 李菁 《国际儿科学杂志》 2017年第11期795-798,803,共5页
母乳是新生儿营养的天然生物学模板,其质量可直接影响婴幼儿的生长发育。母乳不仅可以为新生儿提供生长发育所需要的营养,而且富含多种生物学活性成分,可影响母乳喂养婴儿胃肠道、神经及免疫系统的发育。近年来,研究发现,与其他体... 母乳是新生儿营养的天然生物学模板,其质量可直接影响婴幼儿的生长发育。母乳不仅可以为新生儿提供生长发育所需要的营养,而且富含多种生物学活性成分,可影响母乳喂养婴儿胃肠道、神经及免疫系统的发育。近年来,研究发现,与其他体液相比,母乳中富含多种microRNA(miRNA)。miRNA是一类短链非编码核酸,主要功能是在转录后水平抑制mRNA翻译或使其降解,从而调控基因表达。研究表明母乳miRNA在婴儿胃肠道可免受消化,并被吸收至血液循环,在组织细胞发挥其生物学作用。母乳中miRNA与免疫保护作用相关,在感染和免疫性疾病的预防和治疗中可能有重要意义,并具有调节生物体内物质代谢和促进生长发育等作用。该文就母乳中miRNA在婴儿胃肠道的被吸收机制及其对母乳喂养婴儿的潜在保护作用作一综述。 展开更多
关键词 母乳 micmrna 外泌体 婴儿 免疫保护 脂质代谢
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