两种常用适配体的纳米金比色法快速检测牛奶中黄曲霉毒素M_(1)的评价研究

目的:建立基于不同序列长度适配体的纳米金(Gold nanoparticles,AuNPs)比色传感法快速定量检测牛奶中的黄曲霉毒素M_(1)(Aflatoxin M_(1),AFM_(1)),并评价目前文献报道中常用的21(A21)和72个碱基(A72)长度的AFM1适配体在实际样品中的检测性能。方法:采用柠檬酸钠还原法制备AuNPs溶液,加入AFM1适配体及AFM1标准品后,适配体与AFM1特异性结合形成特殊三维结构,随着NaCl溶液加入,AuNPs溶液的稳定性被破坏而发生聚集,导致溶液颜色变化,通过测定AuNPs溶液的吸光值和吸收光谱定量检测AFM1。结果:通过优化适配体浓度、NaCl浓度、反应温度及pH等实验条件,基于适配体A21和A72的AuNPs比色传感法检测AFM_(1)的检测限分别为25.26和5.77μg/L,线性范围均为10~800μg/L,且均具有良好的选择性及特异性,在牛奶中的加标回收率分别为95.7%~103.6%、94.3%~98.2%。结论:A72检测牛奶中AFM1的效果优于A21,可能与适配体长度、构型及亲和性相关。基于适配体A72建立的比色传感法简单、快速、灵敏、特异性强且可视化,为AFM1适配体在乳制品中的应用提供数据参考。

高效液相色谱法测定猪组织中维吉尼亚霉素M_1的残留

建立了猪组织中维吉尼亚霉素M1残留的高效液相色谱测定方法。样品用甲醇-0.2mol/LNH4H2PO4溶液提取,正己烷洗涤,经C18固相萃取柱净化后做HPLC分析。选用二极管矩阵检测器,波长245nm;色谱柱为ODS 3C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-水(37.5∶62.5,V/V)。维吉尼亚霉素M1标准曲线线性范围在0.1～2.0μg/mL。对不同组织的3种加药浓度进行回收率测定,回收率在72%～85%,变异系数在10%以内。最低检测限为10ng/g。

食品中黄曲霉毒素M_(1)的间接竞争酶联免疫法的建立

该文建立一种间接竞争酶联免疫法(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)快速测定食品中黄曲霉毒素M_(1)(aflatoxin M_(1),AFM_(1))的分析方法。AFM_(1)标准品用甲醇稀释,AFM_(1)标准品与AFM_(1)全抗原竞争结合AFM_(1)单克隆抗体,利用3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(3,3′,5,5′-tetramethylbenzidine,TMB)单组分显色液显色后,酶标仪测定吸光度。在优化好的条件下,浓度范围为9.743~2.605×10^(3)pg/mL时具有良好的线性关系,相关系数(determination coefficient,R^(2))为0.9927,检出限IC_(10)为3.84 pg/mL,加标回收率为88.43%~105.75%。该方法适用性好、操作简单、灵敏度高,满足食品中AFM_(1)分析检测的需求。

先天性急性粒细胞白血病M_1型合并肠道畸形1例

患儿,男,出生20 min,主因胎龄35-（＋5）周,出生后呻吟,吐沫20 min于2014年7月2日上午8点经我院产科收入重症儿科。患儿特点：患儿为生后20 min新生儿;胎龄35-（＋5）周,G4P2,无生后窒息,无胎膜早破,羊水Ⅲ度粪染,量约400 m L,脐带绕颈1周,胎盘未见异常;Apgar评分1 min、5 min、10 min分别为9分（肤色1分,余项均为2分）、10分、10分。体格检查：精神反应弱,呻吟,吐沫,周身胎脂附着,前卤平坦,张力不高,呼吸节律不规整,双肺呼吸音粗,可闻及湿性啰音。心音有力,心律齐,各瓣膜听诊区未闻及杂音。

中国居民谷胱甘肽转硫酶M_1、T_1基因缺失与胃癌易感性关系Meta分析

目的探讨中国居民谷胱甘肽转硫酶M_1(GSTM_1)、谷胱甘肽转硫酶T_1(GSTT_1)基因缺失与胃癌易感性的关系。方法检索有关中国居民GSTM_1、GSTT_1基因缺失与胃癌易感性关系的文献进行Meta分析,以病例组和对照组GSTM_1缺失或GSTT_1缺失的比值比(0R)为效应指标,对文献进行评价筛选,一致性检验,计算合并0R值及95%可信区间(95%CI)。结果最终纳入系统评价进行Meta分析的GSTM1基因缺失或GSTT_1缺失与胃癌关系研究的有13篇,包括胃癌患者1 409例,对照2 022例,Meta分析结果GSTM1基因缺失与胃癌关系合并0R=1.84,95%CI为1.40～2.42。GSTT1基因缺失与胃癌关系合并0R=1.24,95%CI为0.93～1.65。结论目前相关研究结果的Meta分析显示中国居民GSTM_1基因缺失与胃癌易感性有关,而GSTT1基因缺失与胃癌易感性无关。

一种黄曲霉毒素M_1快速检测试纸条检测性能的评估

黄曲霉毒素是天然产生的真菌毒素,是饲料的主要污染源之一。本文对黄曲霉毒素M1快速检测试纸条检测性能指标充分评估,确认其是否符合欧盟CRL Guidelines 2010和519/2014/EC标准。基于欧盟参考实验室方案CRL Guidelines 2010对检测试纸条的精密度、特异性、假阳性率和假阴性率、重复性、稳定性、样本差异影响、批间差异及试剂盒稳定性分别检测,并通过胶体金读数仪对检测数据分析。结果发现:该黄曲霉毒素M1检测试纸条可在10 min中检测牛奶中的黄曲霉毒素M1,肉眼判读定性检测灵敏度为50 ng/L;试纸条特异性良好,除黄曲霉毒素M2(交叉反应为0.86%)外,与呕吐毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1等交叉反应均小于0.5%,其余无交叉反应。用胶体金读数仪分析时,试纸条检测灵敏度为21.58 ng/L,定量限为58.11 ng/L;检测60个添加浓度为50 ng/L的牛奶样本时平均值为49.07 ng/L,标准差为6.45 ng/L。因此,该试纸条可作为定性筛选方法检测牛奶中的黄曲霉毒素M1污染,检测能力满足欧盟MRL(50 ng/L)要求。

DRAWING PREDOMINANCE DIAGRAM OF M_1—M_2—x—y SYSTEM AND ITS APPLICATION

Discussions were made of the principle,method and computer program for drawing the pre- dominance diagrams of the bi-metal co-existed system M_1-M_2-x-y in which the multi-me- tallic compounds may be produced by interaction between compounds of both metals.The formation of zinc ferrite and its stable region have been analyzed through drawing Zn-Fe-S-O system predominance diagrams.The availability of the diagram is given the di- rection to roast the zinc sulfide ore as well.

含水量对新疆鲜食核桃贮藏期黄曲霉生长及黄曲霉毒素M_(1)积累的影响

目的:提高新疆鲜食核桃的贮藏安全性。方法:以新疆“新2”薄皮核桃为材料,无菌水接种为对照组,黄曲霉菌接种为试验组,将从自然霉变核桃上分离纯化出的黄曲霉菌人工接种至不同含水量(10%,15%,20%,25%,30%)的新疆薄皮鲜食核桃上,探究黄曲霉菌生长量及产毒变化情况。结果:最适宜黄曲霉菌生长繁殖并分泌黄曲霉毒素M_(1)的核桃含水量为15%;随着核桃含水量的升高,黄曲霉菌生长量呈先上升后下降趋势,但各含水量之间的生长量各不相同,且黄曲霉菌生长量与产生黄曲霉毒素M_(1)的量成正比。结论:原料的含水量与黄曲霉菌生长量及产生黄曲霉毒素M_(1)的量有着密切的关系。

基于SEER数据库倾向评分匹配分析放疗对不同危险因素分组的pT_(1-2)N_(1)M_(0)期乳腺癌患者的生存影响

目的本研究旨在确定pT_(1-2)N_(1)M_(0)期乳腺癌患者改良根治术后乳腺癌特异性生存(BCSS)的预后危险因素,并讨论可能省略术后放疗的患者的选择,以期提供临床决策。方法对SEER数据库中2010~2017年诊断的11351例患者数据进行回顾性分析,运用倾向评分匹配法(PSM)将7928例匹配患者分为放疗组(n=3964)和未放疗组(n=3964),采用单因素成组X^(2)检验、t检验和多因素Cox回归分析确定总生存(OS)及BCSS的预后因素,并使用Kaplan-Meier进行亚组生存分析,log-rank检验进行组间比较。结果中位随访时间80个月,PSM后放疗对pT_(1-2)N_(1)M_(0)期乳腺癌总人群OS及BCSS均有显著获益,OS放疗组(86.6%)与未放疗组(82.8%)差异有统计学意义(P_(OS)<0.001);BCSS放疗组(91.3%)与未放疗组(89.5%)差异有统计学意义(P_(BCSS)=0.007);PSM后多因素分析显示年龄>62岁、Grade分级III级、腋窝淋巴结转移比例>7%、三阴型、肿瘤大小2.4~5 cm是BCSS的独立预后危险因素(P<0.05);亚组分析中,放疗改善了高风险组患者的BCSS,放疗组与未放疗组(89.5%vs.86.7%,P_(BCSS)=0.001);在中风险组中,放疗组与未放疗组差异无统计学意义(96.4%vs.96.0%,P_(BCSS)=0.764);在低风险组中,放疗组与未放疗组(94.6%vs.98.8%,P_(BCSS)=0.031),放疗增加了患者的特异性死亡率。结论pT_(1-2)N_(1)M_(0)期乳腺癌患者的放疗受益明显不同,因此对于该类人群的放疗应个体化建议。对于高风险组的患者应考虑采用放疗,对于中风险组的患者应谨慎建议,而对于低风险组的患者应不予使用。

牛奶中黄曲霉毒素M族检测能力验证及创建二级全扫描质谱图

目的:验证本检验结构是否有能力按照《食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素M族的测定》(GB 5009.24—2016)中第一法开展牛奶中黄曲霉毒素M_(1)、M_(2)的检验。方法:使用超高效液相色谱串联质谱法进行分析检测,通过验证该方法的线性范围、定量限、正确度和精密度等指标,然后建立液相色谱四极杆串联离子阱复合质谱法,采用多反应监测-信息关联-增强子离子扫描模式(MRM-IDA-EPI),创建黄曲霉毒素M_(1)、M_(2)的二级全扫描质谱图。结果:黄曲霉毒素M_(1)、M_(2)在0.015~0.500μg·kg^(-1)有良好的线性,相关系数在0.995以上,方法定量限满足标准要求,平均回收率在97.0%~108.0%、相对标准偏差≤20%。结论:本实验室具备开展牛奶中黄曲霉毒素M_(1)、M_(2)检测的能力,同时应用离子阱复合质谱特有的MRM-IDA-EPI扫描模式,可实现对牛奶中黄曲霉毒素M1、M2的筛查、确证。

磁性纳米颗粒对牛奶黄曲霉毒素M_(1)的检测研究

首先采用共沉淀方法制备了Fe_(3)O_(4)磁性纳米颗粒,并使用3-氨丙基三乙氧基硅烷对纳米颗粒表面进行修饰。通过抗体的偶联反应,成功制备Ab-NH_(2)-Fe_(3)O_(4)磁性纳米颗粒。研究了不同脂肪含量的牛乳对检测结果的影响,结果显示,在3个不同的加标水平下,AFM 1在全脂牛乳、低脂牛乳和脱脂牛乳中的加标回收率均高于90%,回收率随脂肪含量的波动变化极小,并且Ab-NH_(2)-Fe_(3)O_(4)磁性纳米颗粒表现出对于AFM_(1)良好的特异性分离富集能力。

UPLC法测定婴幼儿配方奶粉中黄曲霉毒素M_(1)

目的:研究婴幼儿配方奶粉中黄曲霉毒素M_(1)的超高效液相色谱测定方法。方法:样品经甲醇-水溶液提取,上清液稀释,经免疫亲和柱净化和富集,再氮吹复溶后,用超高效液相色谱仪(荧光检测器)分析测定。结果:黄曲霉毒素M_(1)在0.0515~5.1500 ng·mL^(-1)线性良好,回归方程为Y=4.00×10^(5)X-8.74×10^(3),相关系数为0.999867,检出限为0.02μg·kg^(-1),定量限为0.05μg·kg^(-1);加标回收率在81.0%~90.3%,变异系数为0.72%~3.18%,且正确度较好。结论:该方法灵敏度高、准确性好,适用于测定婴幼儿配方奶粉中黄曲霉毒素M_(1)的测定。

生乳中黄曲霉毒素M_(1)快速检测方法的比对

[目的]分析酶联免疫吸附法(ELISA)测定生乳中黄曲霉毒素M_(1)残留量结果的重现性、回收率和精密度,以及胶体金免疫层析法与其结果的呼应度,证实2种方法联合使用的可行性。[方法]用胶体金快速检测试纸条对生乳样品中的黄曲霉素M_(1)进行检测,并用黄曲霉毒素M_(1)ELISA检测试剂盒(鲜奶检出下限为0.018μg/kg)做对照试验。[结果]胶体金快速检测试纸条对生乳中不同浓度黄曲霉毒素M_(1)残留量的检测结果呈现梯度效应,并能与ELISA检测试剂盒的定量检测结果呼应。ELISA法对生乳中黄曲霉毒素M_(1)不同浓度残留量的定量试验结果重现性较好,具有较高的稳定性。回收率为94.83%~100.53%,RSD值在1.11%~3.01%之间。[结论]2种快速检测方法对生乳中黄曲霉毒素M_(1)的测定便捷快速,结果稳定准确、可信度高,可作为乳品企业日常快速进行原奶验收工作的基础数据参考。

酶联免疫法测定乳粉中黄曲霉毒素M_(1)含量的不确定度评定

[目的]讨论乳粉中黄曲霉毒素M_(1)含量ELISA(酶联免疫法)检测法结果不确定度的量化和评定。[方法]通过建立数学模型,结合鱼骨图分析引入不确定度的各项目因素,并将其引入的不确定度进行具体量化和比较,得到按照置信水平95%,包含因子k=2,则乳粉中黄曲霉毒素M_(1)测定的扩展不确定度为:0.023μg/kg。[结果]采用ELISA法测定乳粉中黄曲霉毒素M_(1)含量结果应表示为0.480±0.023μg/kg。其中,对该不确定度影响较大的因素是标准曲线拟合引入的不确定度。[结论]以后该项检验中,可酌情增加标样或质控样的测试次数,减少该项引入的不确定度对检验结果影响。

M_(99-1)引诱剂诱捕松墨天牛等松甲虫的研究

报道了松墨天牛成虫活动期间 ,在马尾松 -栎类次生混交林、马尾松 -湿地松人工林和黄山松天然林 3种不同林分中 ,应用 M99-1引诱剂诱捕钻蛀性松甲虫种类、主要钻蛀性松甲虫成虫种群数量及其比率和不同诱捕期松墨天牛雌成虫孕卵量及其比率的情况。研究结果显示 ,M99-1引诱剂诱获鞘翅目害虫达 2 6种 ,其中钻蛀性松甲虫达 14种 ,占诱获种类的 5 3.8%。马尾松角胫象、松墨天牛种群数量比率最高 ,分别达 5 7.3%～ 69.8%和 2 7.2 %～ 2 9.3%。 3种不同松林林分中 ,短角幽天牛、褐幽天牛、薄翅锯天牛等其它主要钻蛀性害虫的数量比率也较高。不同诱捕期松墨天牛雌成虫平均孕卵量及其比率 ,以活动前期 (6月下旬前 )为最高 ,分别达 16.9粒和 4 1.9%。

松墨天牛引诱剂及引诱作用研究

通过连续 2 a的系统研究 ,筛选出对松墨天牛引诱活性最强的 M99-1引诱剂 ,其主要成分为单萜烯、乙醛、丙酮和有机溶剂。在松墨天牛成虫期 ,每个诱捕器可诱捕 151.5头天牛成虫 ,平均降低下代卵量 12 0 4 .4粒。

液质联用法快速测定饲料中维吉尼亚霉素含量

建立了饲料中快速测定维吉尼亚霉素M_1和S_1残留量的高效液相色谱-质谱/质谱(HPLC-MS/MS)方法。样品采用乙腈提取,经冷冻脱脂和饱和氯化钠溶液盐析净化,用甲醇-甲酸铵溶液定容,经SDB-C8色谱柱分离后,采用多反应监测(MRM)正离子模式检测,监测离子对分别为M1:m/z 526.3/355.1和526.3/337.2;S1:824.5/290.1和824.5/205.1。其中526.3/355.1和824.5/205.1分别用于M_1和S_1的外标法定量。维吉尼亚霉素M_1和S_1在1.0μg/kg^1 000.0μg/kg范围内线性关系良好,相关系数为0.998 7~0.999 5,添加饲料中添加水平为2.0、5.0、10.0μg/kg时,回收率在81.0%~105.0%之间,相对标准偏差(RSD)均小于4.0%(n=6),最低检出限和定量限分别为1.0μg/kg和2.0μg/kg。实验结果表明,该方法准确度高,省时,操作简单,成本低,重现性好,结果可靠,实用性强。

知母皂甙元对老年大鼠脑M受体的调节

以３Ｈ－ＱＮＢ和３Ｈ－ＰＺ为放射配基，用放射自显影技术分别测定大鼠大脑皮层、海马、纹状体的Ｍ受体及Ｍ１受体亚型的相对含量。平行实验表明，老年组三个部位的Ｍ及Ｍ１密度均比青年大鼠相应部位的受体密度显著降低；衰老晚期大鼠受体的降低比衰老早期大鼠更显著。衰老早期及晚期的大鼠用知母皂甙元（ＺＭＳ）后，能明显提高相应皮层、海马降低的Ｍ及Ｍ１受体数，有显著性意义；对衰老早期大鼠纹状体部位的Ｍ及Ｍ１受体也有显著提高。三个脑区中，衰老大鼠Ｍ受体的变化和Ｍ１受体亚型的变化趋势基本一致，认为Ｍ受体数的降低主要是Ｍ１受体亚型数减少引起，并且随着衰老进程的发展，降低的程度也愈加明显。ＺＭＳ提高Ｍ受体数，可能是通过提高Ｍ１受体亚型的密度来实现。

一类仿紧连通空间的几乎开映像

讨论了包含仿紧连通空间的一些广义度量空间类的映射性质,证明了T_1的连通第一可数空间是连通Lasnev空间的几乎开映像,部分回答了1998年Tkachuk关于连通空间逆像的一个问题;证明了T_1的连通的具有点G_δ性质的空间是连通M_1空间的几乎开映像,其中建立了M_1空间的一个映射定理,回答了1976年Nyikos提出的一个问题.

运用InSAR技术解算四川长宁M_(S)6.0地震三维形变场及时间序列形变分析

运用升、降轨Sentinel-1A卫星的差分干涉影像,获取2019-06-17四川宜宾长宁M_(S)6.0地震的三维同震形变场。在此基础上,以升降轨同震形变数据为约束条件,基于Okada弹性半空间位错模型反演得到发震断层符合走滑和逆冲特征,断层破裂尺度约为15 km×20 km,断层滑动角为44.37°,断层倾角为56.42°,震源深度约为10.2 km,矩震级为M_(W)5.8。最后,采用SBAS-InSAR技术获取该地区2019-04-05至2019-08-03各时间段的累计形变,结果认为该区域在震前近场形变波动较小,震后一段时间累积形变增长,分析原因可能是余震分布使得地表变化处于不稳定状态。通过与已有研究文献的比较和对该区域断层构造的分析,推测此次长宁地震发震断层由反演出的断层滑动引起,滑动面上缘接近地表,主震引起的次级断层活动触发短期内强余震频发。