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The application of nucleic acid testing (NAT) in blood screening in Shanghai
1
《中国输血杂志》 CAS CSCD 2001年第S1期282-284,共3页
关键词 acid nat in blood screening in Shanghai The application of nucleic acid testing
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Current testing strategies for hepatitis C virus infection in blood donors and the way forward 被引量:9
2
作者 Neelam Marwaha Suchet Sachdev 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2014年第11期2948-2954,共7页
Screening tests for blood donations are based upon sensitivity, cost-effectiveness and their suitability for high-throughput testing. Enzyme immunoassay (EIAs) for hepatitis C virus (HCV) antibodies were the initial s... Screening tests for blood donations are based upon sensitivity, cost-effectiveness and their suitability for high-throughput testing. Enzyme immunoassay (EIAs) for hepatitis C virus (HCV) antibodies were the initial screening tests introduced. The &#x0201d;first generation&#x0201c; antibody EIAs detected seroconversion after unduly long infectious window period. Improved HCV antibody assays still had an infectious window period around 66 d. HCV core antigen EIAs shortened the window period considerably, but high costs did not lead to widespread acceptance. A fourth-generation HCV antigen and antibody assay (combination EIA) is more convenient as two infectious markers of HCV are detected in the same assay. Molecular testing for HCV-RNA utilizing nucleic acid amplification technology (NAT) is the most sensitive assay and shortens the window period to only 4 d. Implementation of NAT in many developed countries around the world has resulted in dramatic reductions in transfusion transmissible HCV and relative risk is now &#x0003c; 1 per million donations. However, HCV serology still continues to be retained as some donations are serology positive but NAT negative. In resource constrained countries HCV screening is highly variable, depending upon infrastructure, trained manpower and financial resource. Rapid tests which do not require instrumentation and are simple to perform are used in many small and remotely located blood centres. The sensitivity as compared to EIAs is less and wherever feasible HCV antibody EIAs are most frequently used screening assays. Efforts have been made to implement combined antigen-antibody assays and even NAT in some of these countries. 展开更多
关键词 Hepatitis C virus Screening tests Blood donors Immunoassays nucleic acid testing
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A brief review of novel nucleic acid test biosensors and their application prospects for salmonids viral diseases detection 被引量:2
3
作者 Xiaofei Liu Songyin Qiu +5 位作者 Haiping Fang Lin Mei Hongli Jing Chunyan Feng Shaoqiang Wu Xiangmei Lin 《Journal of Semiconductors》 EI CAS CSCD 2023年第2期49-56,共8页
Viral diseases represent one of the major threats for salmonids aquaculture.Early detection and identification of viral pathogens is the main prerequisite prior to undertaking effective prevention and control measures... Viral diseases represent one of the major threats for salmonids aquaculture.Early detection and identification of viral pathogens is the main prerequisite prior to undertaking effective prevention and control measures.Rapid,sensitive,efficient and portable detection method is highly essential for fish viral diseases detection.Biosensor strategies are highly prevalent and fulfill the expanding demands of on-site detection with fast response,cost-effectiveness,high sensitivity,and selectivity.With the development of material science,the nucleic acid biosensors fabricated by semiconductor have shown great potential in rapid and early detection or screening for diseases at salmonids fisheries.This paper reviews the current detection development of salmonids viral diseases.The present limitations and challenges of salmonids virus diseases surveillance and early detection are presented.Novel nucleic acid semiconductor biosensors are briefly reviewed.The perspective and potential application of biosensors in the on-site detection of salmonids diseases are discussed. 展开更多
关键词 salmonids virus DETECTION nucleic acid test biosensors SEMICONDUCTOR
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超速离心浓缩对提高血液NAT筛查不确定标本鉴别率的临床研究 被引量:26
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作者 姚凤兰 任芙蓉 +2 位作者 王卓妍 龚晓燕 宋美兰 《北京医学》 CAS 2009年第11期687-690,共4页
目的探讨超速离心浓缩(简称超浓缩)血液标本中的病毒对提高三联检核酸筛查阳性、病毒含量低不能常规鉴别标本的可鉴别率。方法30份Roche COBAS s201核酸扩增检测系统筛选出的COBAS TaqScreen MPX HIV、HCV、HBV三项联检核酸阳性,但COBAS... 目的探讨超速离心浓缩(简称超浓缩)血液标本中的病毒对提高三联检核酸筛查阳性、病毒含量低不能常规鉴别标本的可鉴别率。方法30份Roche COBAS s201核酸扩增检测系统筛选出的COBAS TaqScreen MPX HIV、HCV、HBV三项联检核酸阳性,但COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HIV、HCV及HBV定量试剂原倍鉴别结果均阴性的标本,进行4℃、24600g超速离心1h,浓缩富集病毒后,使用Roche公司的COBASAmpliPrep/COBASTaq-ManHIV、HCV及HBV定量试剂盒进行HIV、HCV及HBV鉴别试验,鉴别阳性的标本,超浓缩处理后用Novartis(原Chiron)公司的PROCLEIX ULTRIO试剂进行相应病毒的鉴别试验加以确证。结果30份RocheMPX核酸筛查阳性、鉴别阴性的标本,经4~10倍超浓缩处理后有23份标本被鉴别为HBV阳性,可鉴别率为76.7%。结论超浓缩处理可解决绝大部分核酸检测三联检阳性但鉴别未果的标本的病毒鉴别问题。 展开更多
关键词 离心浓缩 乙型肝炎病毒(HBV) 血液核酸检测 鉴别
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石家庄地区2012-2014年献血人群NAT检测情况分析 被引量:7
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作者 李莉华 韩卫 +3 位作者 何路军 韩雪峰 张静 王素玲 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期683-685,共3页
目的为进一步提高血液安全性,降低输血感染风险,分析在石家庄地区献血者中开展血液传染病毒核酸检测(NAT)的必要性和可行性。方法应用浩源核酸检测系统,对经ALT及两遍HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV、梅毒螺旋体ELISA检测结果均呈非反应性的287... 目的为进一步提高血液安全性,降低输血感染风险,分析在石家庄地区献血者中开展血液传染病毒核酸检测(NAT)的必要性和可行性。方法应用浩源核酸检测系统,对经ALT及两遍HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV、梅毒螺旋体ELISA检测结果均呈非反应性的287 728份标本,进行HBV DNA、HCV RNA和HIV-1 RNA-3项联合NAT筛查,初筛采用8人份混样法,对检出某项有反应性的混样池进行单人份拆分检测。结果 ELISA检测非反应性的287728份标本,共检测42 472个混样池,检出209个HBV DNA反应性混样池,混样池阳性率为4.92‰;拆分结果为84例HBV DNA阳性,检测阳性率为0.29‰,所有标本中无HCV RNA和HIV-1 RNA的检出。结论核酸检测可缩短血液病毒的检测"窗口期"并有效降低隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)的发生几率,进一步提高血液安全性。 展开更多
关键词 核酸扩增技术(nat) 血液筛查 检测系统
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Evidence-based consensus on the diagnosis, prevention and management of hepatitis C virus disease 被引量:9
6
作者 Mahrukh Akbar Shaheen Muhammad Idrees 《World Journal of Hepatology》 CAS 2015年第3期616-627,共12页
Hepatitis C virus(HCV) is a potent human pathogen and is one of the main causes of chronic hepatitis round the world. The present review describes the evidencebased consensus on the diagnosis, prevention and managemen... Hepatitis C virus(HCV) is a potent human pathogen and is one of the main causes of chronic hepatitis round the world. The present review describes the evidencebased consensus on the diagnosis, prevention and management of HCV disease. Various techniques, for the detection of anti-HCV immunoglobulin G immunoassays, detection of HCV RNA by identifying virus-specific molecules nucleic acid testings, recognition of core antigen for diagnosis of HCV, quantitative antigenassay, have been used to detect HCV RNA and core antigen. Advanced technologies such as nanoparticlebased diagnostic assays, loop-mediated isothermal amplification and aptamers and Ortho trak-C assay have also come to the front that provides best detection results with greater ease and specificity for detection of HCV. It is of immense importance to prevent this infection especially among the sexual partners, injecting drug users, mother-to-infant transmission of HCV, household contact, healthcare workers and people who get tattoos and piercing on their skin. Management of this infection is intended to eradicate it out of the body of patients. Management includes examining the treatment(efficacy and protection), assessment of hepatic condition before commencing therapy, controlling the parameters upon which dual and triple therapies work, monitoring the body after treatment and adjusting the co-factors. Examining the treatment in some special groups of people(HIV/HCV co-infected, hemodialysis patients, renal transplanted patients). 展开更多
关键词 Hepatitis C virus Enzyme IMMUNOASSAY nucleic acid testing Loop-mediated ISOTHERMAL amplification Sustained viral response TELAPREVIR BOCEPREVIR Liver TRANSPLANT
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Recombinase polymerase amplification as a promising tool in hepatitis C virus diagnosis 被引量:14
7
作者 Hosam Zaghloul Mahmoud El-shahat 《World Journal of Hepatology》 CAS 2014年第12期916-922,共7页
Hepatitis C virus(HCV)infection represents a significant health problem and represents a heavy load on some countries like Egypt in which about 20%of the total population are infected.Initial infection is usually asym... Hepatitis C virus(HCV)infection represents a significant health problem and represents a heavy load on some countries like Egypt in which about 20%of the total population are infected.Initial infection is usually asymptomatic and result in chronic hepatitis that give rise to complications including cirrhosis and hepatocellular carcinoma.The management of HCV infection should not only be focus on therapy,but also to screen carrier individuals in order to prevent transmission.In the present,molecular detection and quantification of HCV genome by real time polymerase chain reaction(PCR)represent the gold standard in HCV diagnosis and plays a crucial role in the management of therapeutic regimens.However,real time PCR is a complicated approach and of limited distribution.On the other hand,isothermal DNA amplification techniques have been developed and offer molecular diagnosis of infectious dieses at point-of-care.In this review we discuss recombinase polymerase amplification technique and illustrate its diagnostic value over both PCR and other isothermal amplification techniques. 展开更多
关键词 Hepatitis C virus nucleic acid testing Polymerase chain reaction POINT-OF-CARE Recombinase polymerase amplification
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Hepatitis C virus:Virology,diagnosis and treatment 被引量:3
8
作者 Hui-Chun Li Shih-Yen Lo 《World Journal of Hepatology》 CAS 2015年第10期1377-1389,共13页
More than twenty years of study has provided a better understanding of hepatitis C virus(HCV) life cycle,including the general properties of viral RNA and proteins. This effort facilitates the development of sensitive... More than twenty years of study has provided a better understanding of hepatitis C virus(HCV) life cycle,including the general properties of viral RNA and proteins. This effort facilitates the development of sensitive diagnostic tools and effective antiviraltreatments. At present,serologic screening test is recommended to perform on individuals in the high risk groups and nucleic acid tests are recommended to confirm the active HCV infections. Quantization and genotyping of HCV RNAs are important to determine the optimal duration of anti-viral therapy and predict the likelihood of response. In the early 2000 s,pegylated interferon plus ribavirin became the standard antiHCV treatment. However,this therapy is not ideal. To 2014,boceprevir,telaprevir,simeprevir,sofosbuvir and Harvoni are approved by Food and Drug Administration for the treat of HCV infections. It is likely that the new all-oral,interferon-free,pan-genotyping anti-HCV therapy will be available within the next few years. Majority of HCV infections will be cured by these antiviral treatments. However,not all patients are expected to be cured due to viral resistance and the high cost of antiviral treatments. Thus,an efficient prophylactic vaccine will be the next challenge in the fight against HCV infection. 展开更多
关键词 Hepatitis C virus Diagnosis Treatment HEPATOCELLULAR carcinoma nucleic acid test Enzymeimmunoassay INTERFERON Direct ACTING ANTIVIRALS Hosttargetedagents Sofosbuvir
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NAT技术对献血人群HBV核酸单阳标本的检测结果分析 被引量:2
9
作者 吴昕 李承彬 何帆 《临床医学研究与实践》 2022年第29期113-117,共5页
目的 分析金华地区无偿献血者乙型肝炎病毒(HBV)核酸单阳标本检测结果,探究核酸扩增检测(NAT)技术在血液筛查中的应用价值。方法 收集2019年9月至2021年5月金华市中心血站初筛合格献血者血液标本102 641例,选择酶联免疫吸附试验(ELISA)... 目的 分析金华地区无偿献血者乙型肝炎病毒(HBV)核酸单阳标本检测结果,探究核酸扩增检测(NAT)技术在血液筛查中的应用价值。方法 收集2019年9月至2021年5月金华市中心血站初筛合格献血者血液标本102 641例,选择酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝表面抗原(HBsAg)(-)、NAT检测HBsAg(+)的标本,进行时间分辨免疫荧光法(TRFIA)定量检测乙肝两对半和实时荧光PCR技术定量检测HBV DNA。结果 纳入的102 641例血液标本中,经ELISA检测HBsAg(-)、丙型肝炎病毒(HCV)(-)、人类免疫缺陷病毒(HIV)(-)、梅毒螺旋体(TP)(-)标本共101 943例,经NAT检测HBV核酸单阳标本148例,占0.15%。148例HBV核酸单阳标本经乙肝两对半定量检测和HBV DNA鉴别检测,有12例(8.11%)检出HBsAg(+)[HBsAg≥0.05 IU/mL,滴度为(0.103±0.057)IU/mL],HBV DNA鉴别检测结果均呈反应性;136例(91.89%)检出HBsAg(-)(HBsAg<0.05 IU/mL),其中64例(43.24%)经HBV DNA鉴别检测结果呈反应性,72例(48.65%)经HBV DNA鉴别检测结果无反应性。148例HBV核酸单阳标本中,有135例(91.22%)检出乙肝核心抗体(HBcAb)(+)。根据血清学结果可将148例标本分为12种模式,HBV血清学模式5、10 HBV DNA鉴别检测非反应性标本与反应性标本的占比比较,差异具有统计学意义(P=0.003、0.007),其余HBV血清学模式HBV DNA鉴别检测非反应性标本与反应性标本的占比无明显差异(P>0.05)。HBV DNA鉴别检测出非反应性乙肝表面抗体(HBsAb)(+)标本33例(45.83%),高于反应性的21例(27.63%),差异具有统计学意义(χ2=5.286,P=0.021)。HBV DNA鉴别检测非反应性HBsAb(-)+HBcAb(+)标本33例(45.83%),低于反应性的52例(68.42%),差异具有统计学意义(χ2=7.716,P=0.005)。64例HBsAg(-)/HBV DNA(+)标本的HBV DNA滴度为(1.302±0.082)IU/mL。HBV DNA滴度<200 IU/mL的标本占95.31%(61/64),HBV DNA滴度<20 IU/mL的标本占48.44%(31/64)。结论 NAT技术有效降低了HBV窗口期感染和隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)的漏检率。NAT技术联合ELISA血清学检测能有效降低HBV经血传播风险,保障血液安全。 展开更多
关键词 核酸扩增检测技术 乙型肝炎病毒 酶联免疫吸附试验 时间分辨免疫荧光法
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天津地区无偿献血者HIV ELISA、NAT筛查结果及确证结果相关性分析 被引量:2
10
作者 王全慧 谢月娜 潘彤 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第A01期42-45,共4页
目的了解天津地区无偿献血人群人类免疫缺陷病毒(HIV)感染情况,并探讨ELISA检测结果及S/CO值、NAT筛查结果与确证结果相关性。方法分析本实验室2016年9月1日至2017年8月31日献血者血液HIV筛查及确证数据。结果研究期间157130例无偿献血... 目的了解天津地区无偿献血人群人类免疫缺陷病毒(HIV)感染情况,并探讨ELISA检测结果及S/CO值、NAT筛查结果与确证结果相关性。方法分析本实验室2016年9月1日至2017年8月31日献血者血液HIV筛查及确证数据。结果研究期间157130例无偿献血者中292例筛查反应性,其中59例酶联免疫试验(ELISA)双试剂反应性,52例确证阳性(88%);其中56例核酸检测(NAT)反应性(含窗口期标本1例),确证阳性53例(94.6%);55例ELISA双试剂与NAT同时反应性,确证阳性52例(94.5%),不确定3例(5.5%)。59例ELISA双试剂反应性标本中,万泰S/CO大于10确证阳性率98%;伯乐S/CO大于6确证阳性率100%;索林S/CO在1~6区间确证阳性率33%,S/CO在6~10之间确证阳性率91%,S/CO大于10确证阳性率(100%)。结论ELISA双试剂反应性、核酸反应性和确证阳性存在着极大的符合关系,且较高的S/CO值预示HIV确证阳性的可能性越大。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒(HIV) 核酸检测(nat) 确证结果 窗口期
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电化学免疫发光分析法联合核酸检测定量法在ELISA HBsAg-/NAT+血液样本中的应用价值 被引量:4
11
作者 史小武 文关良 杨小勇 《临床医学研究与实践》 2021年第11期125-127,共3页
目的分析电化学免疫发光法(ECLIA)联合核酸检测(NAT)定量法在ELISA HBsAg-/NAT+血液样本检测中的应用价值。方法选择血站采集的无偿献血者血液样本22843例,酶联免疫吸附法(ELISA)检测为乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阴性的血液样本行NAT检测... 目的分析电化学免疫发光法(ECLIA)联合核酸检测(NAT)定量法在ELISA HBsAg-/NAT+血液样本检测中的应用价值。方法选择血站采集的无偿献血者血液样本22843例,酶联免疫吸附法(ELISA)检测为乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阴性的血液样本行NAT检测,先行混合检测,后行拆分检测。选取拆分检测为初检ELISA HBsAg-/NAT+的血液样本行NAT定量检测,NAT定量检测为阳性的血液样本进一步行ECLIA联合NAT定量检测。结果经ELISA检测,22843例血液样本中HBsAg阳性65例,HBsAg阴性22778例。将ELISA检测为HBsAg阴性的22778血液样本进一步行NAT检测,经混合检测,27个混样池为阳性;经拆分检测,29例血液样本呈HBV-DNA阳性。对29例初检ELISA HBsAg-/NAT+血液样本进一步行NAT定量检测,阳性率为65.52%(19/29),其中5例HBV-DNA病毒载量≥20 IU/mL,14例HBV-DNA病毒载量<20 IU/mL。19例ELISA HBsAg-/NAT+血液样本经ECLIA检测,HbsAg、HBeAg全阴,HBsAb阳性3例(15.79%),HBeAb阳性7例(36.84%),HBcAb阳性15例(78.95%),血清模式为全阴5例(26.32%),单纯HBcAb阳性7例(36.84%)。19例ELISA HBsAg-/NAT+血液样本经ECLIA联合NAT定量检测,4例处于窗口期,15例处于隐匿性感染期。结论血站血液样本初检中存在一定的漏检现象,NAT检测可在大量ELISA阴性样本中快速筛检出HBV-DNA阳性标本,ECLIA联合NAT定量检测可帮助献血者明确自身HBV感染状态,值得临床应用和推广。 展开更多
关键词 献血 乙型肝炎病毒 电化学免疫发光法 核酸检测 酶联免疫吸附法
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HBV、HCV、HIV血筛多中心研究免疫学灰区的核酸检测分析与临床特征研究 被引量:1
12
作者 胡俊华 韩剑峰 +11 位作者 王鹏 夏荣 刘凤华 杨江存 桂嵘 刘娟 秦莉 杜春红 李喜莹 吕先萍 殷鹏 宫济武 《临床输血与检验》 CAS 2024年第5期675-679,共5页
目的分析化学发光灰区标本的临床特征及核酸检测对化学发光灰区标本结果判断的指导性意义。方法收集2021年7月—12月全国不同地区的5家综合医院入院患者术前/输血前血源性传播疾病样本检测结果,对化学发光灰区检测结果的标本进行核酸检... 目的分析化学发光灰区标本的临床特征及核酸检测对化学发光灰区标本结果判断的指导性意义。方法收集2021年7月—12月全国不同地区的5家综合医院入院患者术前/输血前血源性传播疾病样本检测结果,对化学发光灰区检测结果的标本进行核酸检测结果及临床特征分析。结果5723例样本中总计检出HBV免疫灰区样本28例(占比0.49%),HCV灰区样本20例(占比0.35%)。经核酸检测验证,28例HBV灰区样本中,15例HBV样本核酸检测为阳性(占比53.5%),其HBcAb也均为阳性;13例HBV样本核酸检测为阴性(占比46.5%),其中HBcAb阳性4例。HBV与HCV免疫检测灰区在临床各个科室均有发现,出现HBV灰区样本最多的前三科室为骨科、妇科、泌尿科,灰区样本核酸验证假阳性最多的临床科室为妇科与骨科。HCV灰区样本最多的前三科室为泌尿、肾内、外科,且均为假阳性。HBV灰区样本患者临床诊断结果有35.7%(10/28)为肿瘤类疾病,HCV灰区样本患者临床诊断结果有40%(8/20)为肿瘤类疾病。结论化学发光法容易造成假阳性结果,应注意复检验证,且设置灰区并非必要。灰区样本可见于多个临床科室,具有一定的临床分布特征。核酸检测可以提高检测灵敏度并且更大限度保证结果的准确性,能够验证免疫检测灰区。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒 人类免疫缺陷病毒 化学发光免疫检测 灰区 核酸检测
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核酸单反应性质量控制多规则的建立
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作者 谢君谋 蓝岚茵 +4 位作者 杜荣松 黄爱琼 刘旭映 廖芬芳 王淏 《中国输血杂志》 CAS 2024年第8期908-913,共6页
目的探讨建立1个基于Poisson分布的监控核酸筛查实验室污染情况的质控机制。方法收集2022—2023年基立福Panther核酸检测系统的核酸单反应性率和鉴别试验反应性率相关数据,采用Poisson分布概率法计算每日核酸检测单反应性的概率,利用单... 目的探讨建立1个基于Poisson分布的监控核酸筛查实验室污染情况的质控机制。方法收集2022—2023年基立福Panther核酸检测系统的核酸单反应性率和鉴别试验反应性率相关数据,采用Poisson分布概率法计算每日核酸检测单反应性的概率,利用单反应性率和鉴别反应性率及ROC曲线分析法进一步验证该质控模型的灵敏度和特异性,并提出相应的多规则化的质控策略。结果仅以P=0.05为失控限,Poisson分布概率质控模型判定P<0.05的失控点为40个,结合鉴别反应性率进行人工验证后发现失控点为20个,其判定失控的灵敏度为60.0%,特异性为95.6%,失控点较多,结合鉴别反应性率和运用多规则化质控方法进行质量监控后,2022—2023年核酸检测单反应性警告点为18个,失控点为2个。结论基于Poisson分布概率的多规则核酸单反应性监控机制,更适用于核酸实验室监测预警实验室污染,有利于提升核酸实验室管理能力和检测质量。 展开更多
关键词 POISSON分布 核酸检测 实验室污染
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海南地区输血传播疾病病毒核酸检测窗口期残余风险评估
14
作者 韩慧 张用丽 谢月华 《中国输血杂志》 CAS 2024年第10期1147-1151,共5页
目的分析11年来海南地区无偿献血人群核酸检测(NAT)结果、评估HBV、HCV和HIV的NAT检测后残余风险。方法收集本中心2012年1月-2022年12月的无偿献血者NAT检测结果数据,利用新发感染率-窗口期残余风险模型对献血者进行HBV、HCV和HIV窗口... 目的分析11年来海南地区无偿献血人群核酸检测(NAT)结果、评估HBV、HCV和HIV的NAT检测后残余风险。方法收集本中心2012年1月-2022年12月的无偿献血者NAT检测结果数据,利用新发感染率-窗口期残余风险模型对献血者进行HBV、HCV和HIV窗口期残余风险评估。结果2012年1月-2022年12月,海南地区无偿献血者捐献的血液中,来自初次献血者的占比45.02%(522684/1161042)、重复献血者(含固定献血者)占54.98%(638358/1161042),固定献血者占30.48%(354227/1162042);NAT总阳性率为0.19%(2151/1161042);NAT检测后HBV窗口期残余风险为62.54/百万,HCV残余风险为0.431/百万,HIV残余风险为0.791/百万。结论海南地区无偿献血者开展NAT检测明显降低HCV残余风险,输血传播HBV、HCV、HIV的窗口期残余风险处于较低的水平。 展开更多
关键词 核酸检测 输血传播疾病病毒 残余风险 无偿献血者 海南
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人类免疫缺陷病毒抗体初筛阳性确证结果分析及化学发光法检测抗体吸光度值/临界值灰区范围的合理性探究
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作者 李小琼 王雅 +2 位作者 董琳婕 张一帆 罗瑶 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第21期48-52,共5页
目的分析人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体初筛阳性确证结果及化学发光法检测抗体吸光度值/临界值(S/CO值)灰区范围的合理性。方法收集184例HIV抗体筛查阳性标本。采用免疫印迹法(WB)及病毒核酸测定法进行确证,观察确证结果及条带分布。采用... 目的分析人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体初筛阳性确证结果及化学发光法检测抗体吸光度值/临界值(S/CO值)灰区范围的合理性。方法收集184例HIV抗体筛查阳性标本。采用免疫印迹法(WB)及病毒核酸测定法进行确证,观察确证结果及条带分布。采用受试者工作特征(ROC)曲线预测最佳临界值,分析HIV抗体S/CO值灰区设置的合理性。结果184例HIV抗体筛查阳性标本中,经化学发光法初筛153例(83.15%),经胶体金法初筛31例(16.85%)。男性(57.07%)、年龄在40岁以上(75.00%)的HIV抗体初筛阳性病例占比高于女性及其他年龄段病例。WB补充试验发现,共101例(54.89%)病例确证为HIV-1抗体阳性,56例(30.43%)病例确证为HIV-1抗体阴性,27例(14.67%)病例为HIV-1抗体不确定。27例中,1例经核酸检测为阳性(化学发光法初筛抗体S/CO值:5.60),其余26例为阴性。化学发光法、胶体金法与WB补充试验的阳性符合率分别为65.36%、3.23%,差异有统计学意义(χ^(2)=40.191,P<0.05)。27例HIV-1抗体不确定病例经核酸检测载量发现,1例病例WB带型为P24+gp160,核酸检测该病例为阳性。不确定样本带型分布中,P24出现率最高(74.07%),其后依次是P66(11.11%)、gp160(7.41%)和P17(3.70%)、gp41(3.70%)。ROC曲线预测HIV抗体S/CO最佳临界值为5.15,曲线下面积(AUC)为0.904,敏感度与特异度分别为83.30%、76.40%,95%CI为0.861~0.948。HIV抗体初筛阳性病例的WB检测带型与确证结果之间具有较好相关性(P<0.05),其中P24带型与确证结果之间的相关性最高(r=0.910)。结论HIV抗体初筛阳性病例中存在一定的假阳性,采用WB实验能进行有效排查。此外,基于本实验检测平台设置化学发光法检测HIV抗体S/CO值灰区范围为1.00~5.15,其具有较高的敏感度。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 化学发光法 免疫印迹法 灰区设置 核酸检测
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基于HBV感染的确认探讨核酸检测反应性献血者的归队策略
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作者 邓雪莲 臧亮 +4 位作者 刘笑春 孙鹏 王颖颖 Daniel Ca ndotti 周俊 《临床输血与检验》 CAS 2024年第5期667-674,共8页
目的基于血液筛查核酸检测反应性献血者的HBV感染的确认,探讨核酸检测反应性献血者的归队策略。方法联合应用自建的高灵敏度核酸检测体系、血液核酸筛查等多种核酸检测(NAT)方法,并结合血清学检测、献血者随访,对核酸检测反应性(NAT-yie... 目的基于血液筛查核酸检测反应性献血者的HBV感染的确认,探讨核酸检测反应性献血者的归队策略。方法联合应用自建的高灵敏度核酸检测体系、血液核酸筛查等多种核酸检测(NAT)方法,并结合血清学检测、献血者随访,对核酸检测反应性(NAT-yield)献血者中的HBV感染进行确认和感染状态识别。依据确认的HBV感染血浆样本,比较不同确认方法、确认指标或指标组合对HBV感染确认的效果。结果2010年11月—2021年2月,在血液筛查检出的876位NAT-yield献血者中共确认HBV感染者511人(OBI 451人,急性早期HBV感染者27人,不能确认感染者33人,无感染者30人,不能确认HBV感染者335人)。采用单检系统对混检系统检出的HBV感染血浆进行复测的检出率为96.6%,明显高于混检系统对单检系统检出的HBV DNA反应性(HBV DNA R)组和鉴别试验无反应性(NDR)组的复测检出率(76.4%和55.7%)(P<0.05)。NDR样本在模式2(ID×5+鉴别×2)下复测检出率(65.2%)高于模式1(ID×2+鉴别×1)(39.2%)(P<0.05);2种单检复测模式下的HBV DNA R样本复测检出率无明显差异(P>0.05),但均明显高于NDR样本(P<0.05)。回溯OBI献血者既往NAT数据,有46%经历多次NAT检测而未能检出。有59.1%OBI献血者随访检不出HBV DNA。OBI献血者中抗-HBc+占比为90.2%,单独抗-HBc+为49.2%,远高于不能确认感染组(P<0.05);HBeAg、抗-HBe和抗-HBc IgM在OBI和不能确认感染组中的比例极低且无差异(P>0.05)。结论近60%的NAT-yield献血者可以确认HBV感染。为保证献血者归队的安全性,需要更高灵敏度的HBV DNA确证技术提高HBV感染的确认率。抗-HBc是NAT-yield献血者OBI风险排查和归队评估最重要的血清学指标。 展开更多
关键词 核酸检测 献血者归队 HBV感染 确证 随访
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血液核酸筛查系统在不同检测筛查模式下的乙肝检测结果分析及评价 被引量:1
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作者 胡一钦 黄纪红 +3 位作者 王敏 丰芳君 刘晋辉 董杰 《中国输血杂志》 CAS 2024年第9期1030-1035,共6页
目的通过分析罗氏Cobas s 201的血液核酸检测(NAT)结果评估其对HBV的检测效果。方法将检测结果根据酶联免疫吸附试验(ELISA)和NAT混合检测(MP)、NAT单样本检测(ID)以及重复NAT单样本检测(rID)分组,分为ELISA+/NAT(ID)+、ELISA+/NAT(rID)... 目的通过分析罗氏Cobas s 201的血液核酸检测(NAT)结果评估其对HBV的检测效果。方法将检测结果根据酶联免疫吸附试验(ELISA)和NAT混合检测(MP)、NAT单样本检测(ID)以及重复NAT单样本检测(rID)分组,分为ELISA+/NAT(ID)+、ELISA+/NAT(rID)+、ELISA-/NAT(ID)+、ELISA-/NAT(rID)+4组进行统计分析,探讨重复NAT对反应性结果的检出是否存在差异,对于不同ELISA结果的NAT反应性标本的循环阈值(cycle threshold,Ct)与核酸检出率的关联性。再通过补充试验,包括其他方法学的NAT系统和化学发光血清学标志物检测,进一步分析献血者的真实感染情况。结果766293份献血者标本中共有1691组HBV NAT(MP)+,其中1418组(83.86%)检出反应性结果(1418份HBV NAT+,7090份NAT-),仍有273组(16.14%)经重复检测仍未检出[共计1638份NAT-,Ct(MP):39.49±3.62]。HBV NAT+中,881份(62.13%)ELISA+/NAT(ID)+,19份(1.34%)ELISA+/NAT(rID)+,451份(31.81%)ELISA-/NAT(ID)+,67份(4.72%)ELISA-/NAT(rID)+。对于不同ELISA结果的标本,重复NAT对HBV的检出存在差异(P<0.05)。各组间Ct(ID)值仅ELISA+/NAT(rID)+和ELISA-/NAT(ID)+、ELISA+/NAT(rID)+和ELISA-/NAT(rID)+2组比较无差异(P>0.05),其余各组间两两比较,均有差异(P<0.05)。对228份ELISA-/NAT(MP)+(ID)-进行补充试验,有56份(24.56%)经化学发光检测HBsAg+和7份(3.07%)经其他NAT系统检出反应性。剩余221份(96.93%)NAT-标本中,53份(23.98%)HBsAg+的献血者可能存在慢性感染,40份(18.10%)抗-HBe+和(或)抗-HBc+的献血者可能存在既往感染,其余128份(57.92%)均无反应性的献血者为NAT(MP)假反应性,且各组间抗-HBs含量差异较大(P<0.05)。结论重复NAT对不同反应性类别或不同血清学结果的献血者标本存在差异性检出,尤其在一定区间范围内,对于ELISA-标本进行重复NAT可明显提高检出率。Ct值可辅助评估NAT系统的稳定性和准确性。对于ELISA-/NAT(MP)+(ID)-献血者,结合其他高灵敏度的检测手段可降低病毒残余风险,保障临床用血安全。 展开更多
关键词 血液筛查 核酸检测 血液安全
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乙型脑炎病毒核酸检测试剂国家参考品的研制
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作者 夏德菊 周海卫 +1 位作者 刘东来 许四宏 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第5期796-799,803,共5页
目的建立乙型脑炎病毒核酸检测试剂国家参考品,确定其质量标准。方法通过对24份病原体培养物的复核、确证,全基因组测序及基因分型,组成乙型脑炎病毒核酸检测试剂国家参考品,经多家实验室的协助标定,确定参考品的质量标准,并对参考品进... 目的建立乙型脑炎病毒核酸检测试剂国家参考品,确定其质量标准。方法通过对24份病原体培养物的复核、确证,全基因组测序及基因分型,组成乙型脑炎病毒核酸检测试剂国家参考品,经多家实验室的协助标定,确定参考品的质量标准,并对参考品进行均匀性及稳定性评估。结果乙型脑炎病毒核酸检测试剂国家参考品由10份阴性、14份阳性、1份最低检出限和1份精密度样品组成。质量标准为10份阴性参考品应均检出阴性;14份阳性参考品应至少检出13份阳性;精密度考品重复检测10次,要求均为乙型脑炎病毒阳性,且其检测值的CV应不大于5.0%;最低检出限参考品要求1∶102倍稀释及以上浓度时应为乙型脑炎病毒阳性。参考品的均匀性及稳定性均符合要求。结论该参考品可用作乙型脑炎病毒核酸检测试剂的质量控制及评价。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 核酸检测试剂 基因分型 国家参考品
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酶联免疫吸附法与核酸检测技术在血站血液标本乙肝病毒筛查中的应用 被引量:2
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作者 饶晓安 李丽娟 《中国医药指南》 2024年第11期69-71,共3页
目的探究酶联免疫吸附法(ELISA)与核酸检测(NAT)技术在血站血液标准乙肝病毒(HBV)筛查中的应用。方法选取2022年1月—2022年12月血站采集的血液标本12282份作为研究对象,所有标本均接受ELISA、NAT检测,以电化学免疫发光法(ECLIA)检测结... 目的探究酶联免疫吸附法(ELISA)与核酸检测(NAT)技术在血站血液标准乙肝病毒(HBV)筛查中的应用。方法选取2022年1月—2022年12月血站采集的血液标本12282份作为研究对象,所有标本均接受ELISA、NAT检测,以电化学免疫发光法(ECLIA)检测结果作为金标准,对两种检测方法的检测结果做一致性分析,并比较两种检测方法的窗口期、准确度、灵敏度、特异度2、阳性率、漏诊率差异,比较不同HBV感染状态患者HBV-DNA阳性率差异。结果ELISA检测HBV的窗口期高于NAT(P<0.05),准确度、灵敏度低于NAT,漏诊率高于NAT(均P<0.05);ELISA、NAT检测HBV的特异度、阳性检出率比较,无明显差异(均P>0.05);大三阳的HBV-DNA阳性率均高于小二阳、小三阳(均P<0.05);小二阳、小三阳两者的HBV-DNA阳性率比较,无差异(P>0.05)。结论ELISA与NAT均可良好应用于HBV检测,且NAT具备更高的准确度、灵敏度和更低的漏诊率,可良好反映HBV的传染性,是ELISA的有效补充。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附分析 核酸检测 乙型肝炎病毒 血清标本
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植物RNA作为载体RNA在病毒核酸提取过程中的保护效果研究
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作者 江嘉琦 李江峰 +3 位作者 彭运平 胡霏 何小维 王羽 《检验医学与临床》 CAS 2024年第13期1875-1879,1884,共6页
目的探究植物RNA作为载体RNA在病毒核酸提取过程中对目标核酸的保护效果。方法分别提取绿萝、水稻、竹子3种常见植物中的RNA作为载体RNA,同时以商业试剂Takara载体RNA为对照,提取甲型流感病毒(Flu A)、乙型流感病毒(Flu B)、呼吸道合胞... 目的探究植物RNA作为载体RNA在病毒核酸提取过程中对目标核酸的保护效果。方法分别提取绿萝、水稻、竹子3种常见植物中的RNA作为载体RNA,同时以商业试剂Takara载体RNA为对照,提取甲型流感病毒(Flu A)、乙型流感病毒(Flu B)、呼吸道合胞病毒A型(RSV A)核酸,并利用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)定量分析提取得到的病毒核酸浓度,以评估植物RNA在核酸提取中对病毒核酸的保护效果。结果经琼脂糖凝胶电泳检测,所提取植物RNA的28S rRNA、18S rRNA条带清晰明亮,无弥散现象,所得RNA具有良好的完整性。且经验证,植物RNA对病毒核酸扩增无干扰。裂解液中分别加入0、1000、3000、5000、7000、9000 ng绿萝RNA进行Flu A RNA提取时,提取物经RT-qPCR扩增后的Ct值分别为35.06±0.14、33.01±0.42、32.45±0.33、31.95±0.34、31.74±0.28、31.92±0.24,使用Takara载体RNA提取核酸的Ct值为31.96±0.34。Ct值随着绿萝RNA添加量增加而降低,当添加量≥5000 ng时,Ct值接近使用Takara载体RNA的提取组,继续提高绿萝RNA用量,Ct值趋于稳定,且与使用TaKaRa载体RNA的Ct值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。添加5000 ng绿萝RNA与添加0 ng绿萝RNA相比,Ct值相差3.11,根据浓度差等于2ΔCt计算可知添加5000 ng绿萝RNA提取得到的Flu A核酸浓度比不添加载体RNA高了8.63倍。进一步研究发现,添加绿萝RNA、水稻RNA、竹子RNA及Takara载体RNA,提取得到的Flu A、Flu B和RSV A核酸经RT-qPCR扩增后得到的Ct值与不添加载体RNA比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。绿萝RNA作为载体RNA在提取Flu A、Flu B、RSV A混合病毒核酸时,对比无载体RNA的对照组,分别降低了2.61、2.90、1.45个Ct值,即添加了绿萝RNA后提取Flu A、FluB、RSV A所得的核酸浓度分别提高了6.11、7.46、2.73倍。且添加了水稻RNA和竹子RNA提取混合病毒核酸所得的核酸浓度也分别至少提高了2.63倍和2.60倍。结论在病毒核酸提取过程中植物RNA具有保护病毒核酸的作用,可以提高提取得到的目的病毒RNA浓度,可用作病毒核酸提取时的载体RNA,为核酸提取中的载体RNA选择提供更多来源。 展开更多
关键词 植物RNA 载体RNA 病毒检测 病毒RNA提取 核酸保护
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