低磷条件下VD_3对大鼠小肠NaPi-Ⅱb mRNA表达及磷吸收的调控

【目的】本试验旨在研究低磷条件下VD3对磷吸收的调节作用。【方法】选择40只断奶后大白鼠(雄),随机分为0.2%(低磷组)和0.6%(正常磷组)两磷(总磷)水平组,每组5个重复,每重复4只大白鼠,试验期7d。试验前6d,每组每只大白鼠肌注VD3代谢抗干忧药物EHDP(二磷酸盐);宰前的12h,每组2只老鼠以600ng/kg.wt剂量注射VD3,为试验组;另2只不注射,为对照组。第7天早晨屠宰、取样。测定血清和骨组织中钙磷及小肠NaPi-Ⅱb载体蛋白mRNA表达量和磷的吸收等指标。【结果】(1)低磷水平对照组骨钙、骨磷分别比正常磷水平低3.33倍(P<0.01)和3.03倍(P<0.01)。两磷水平试验组VD3含量比对照组高3.08倍和2.32倍,差异极显著;(2)0.2%磷水平小肠各段和肾脏Na+/PiⅡb mRNA表达量试验组皆极显著高于对照组;(3)两磷水平试验组4个部位磷的吸收皆显著或极显著高于对照组,0.2%磷水平试验组较对照组磷吸收4个部位分别提高:51.76%、62.68%、57.79%、47.37%。0.6%磷水平组分别提高18.19%、39.22%、54.72%、39.83%。【结论】(1)低磷情况下,VD3是调节磷吸收的一个重要因素,补充VD3可提高NaPi-Ⅱb转运蛋白mRNA的表达和磷的吸收;(2)VD3对磷吸收的提高作用随着磷水平的增加而减弱。

绝经前期妇女血清PINP、ICTP和25-OH-VitD_3水平的变化及其与BMD的相关性分析

目的:观察绝经前期妇女血清PINP、ICTP和25-OH-VitD3水平的变化,分析其与骨密度(BMD)的相关性。方法:采用双能X线吸收法(DEXA)对67例绝经前期健康女性进行第(1～4)腰椎(L1-4)、左、右髋部(股骨近段+股骨颈)的BMD测定,并根据BMD测定结果分为BMD正常组和BMD降低组。用放射免疫分析(RIA)测定血清Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PINP)、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ICTP)和25-羟维生素D3(25-OH-VitD3),分析与各部位BMD的相关性。结果:①19例出现BMD降低(28.4%),两组间腰椎及左、右髋部BMD差异显著(P<0.01);②BMD减低组的PINP和ICTP[分别为(56.9±18.2)μg/L和(3.78±0.83)μg/L]高于BMD正常组[分别为(43.8±15.1)μg/L和(3.45±0.98)μg/L],其中PINP差异显著(P<0.05),25-OH-VitD3水平两组间无显著性差异[分别为(25.6±7.8)ng/ml和(27.4±9.2)ng/ml,P>0.05];③PINP与L1-4、左股骨近段、左股骨颈的BMD呈正相关(r=0.274～0.402,P<0.05),ICTP及25-OH-VitD3与BMD无明显相关性(r=-0.226～0.083,P>0.05),PINP与25-OH-VitD3呈一定程度的正相关(r=0.395,P<0.05)。结论:绝经前期妇女有骨转换增高趋势,BMD检查联合骨转换标志物测定有利于识别绝经前期高风险发生骨质疏松的妇女,以指导OP预防性治疗。

维生素D_3在动物生产中的研究与应用

维生素D3(vitaminD3,VD3)又名胆钙化醇(cholecalciferol),是畜禽重要的必需维生素之一。本文就VD3促进动物体钙、磷的吸收,提高免疫机能和繁殖性能,以及改善畜禽肌肉嫩度等方面做一综述。

维生素D_3抑制角质形成细胞MCP-1的表达

目的 观察维生素D3 对角质形成细胞单核细胞化学吸引蛋白质 1(monocytechemoattractantprotein 1,MCP 1)的表达影响 ,探讨其在治疗银屑病中的作用机制。方法 培养角质形成细胞株HACAT ,并用不同浓度的维生素D3 处理 2 4h ,通过酶联免疫吸附 (ELISA)法检测上清液中MCP 1的表达 ;通过RT PCR法进一步检测细胞中MCP 1mRNA的水平。结果 经过浓度为 7.8× 10 -12 mol/L～ 6.2 5× 10 -11mol/L的维生素D3 处理过的角质形成细胞株HA CAT ,其分泌至上清中的MCP 1水平明显受到抑制 ,细胞中MCP 1mRNA的水平低于正常对照组。结论 维生素D3 在治疗银屑病过程中很有可能是通过抑制了角质形成细胞中MCP 1的表达 ,从而减弱了银屑病患者角质形成细胞趋化单核细胞及巨噬细胞的能力 ,阻止了银屑病皮损局部的炎症反应。

维生素D_3对幼年类风湿性关节炎患儿的γ干扰素与白细胞介素4反应的研究

目的:了解维生素D3辅助治疗幼年类风湿性关节炎(JRA)前后外周血单个核细胞(PBMC)体外诱生γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)水平。方法分别采集维生素D3治疗前后静脉血,分离PBMC,用含20％小牛血、植物血凝素的RPMI-1640培养液,37℃、5％CO2孵箱中培养后,运用BA-ELISA检测INF-γ和IL-4水平。结果:维生素D3治疗4-8w后IFN-γ诱生水平明显降低(P<0.05),而IL-4诱生水平略有增加,IFN-γ／IL-4比值接近正常水平。结论:维生素D3辅助治疗JRA可以使Th1细胞产生IFN-γ受到抑制,Th1／Th2应答失调得到矫正。

HPLC法测定多维片中痕量维生素D3的含量

建立了运用HPLC法对痕量VD3进行含量测定的分析方法。实验中采用菲罗门硅胶(silica)柱,以异丙醇:正己烷(0.5:99.5)为流动相,流速:2ml/min,紫外检测波长:264nm,柱温:30℃。实验表明:VD3在0.1μg/ml～0.8μg/ml范围内,其色谱峰面积与质量浓度呈良好线性关系,r=0.9999(n=5),平均回收率为99.04%,进样精密度为1.26%。本法操作简便、快速,准确,适用于痕量成分的含量测定。

1,25(OH)_2D_3和ATRA对HO8910生长的协同抑制作用

目的:通过单独或联合使用1,25-二羟维生素D3[1,25-dihydroxy vitaminD3,1,25(OH)2D3]和全反式维甲酸(all trans rinoic acid,ATRA),研究其对人卵巢癌细胞HO8910生长、细胞周期和细胞凋亡的影响,以及维生素D受体(vitamin D recept VDR)及维甲酸α受体受体(retinoic acid receptorα,RARα)mRNA的表达变化,探讨其作用的分子机制。方法:选用人卵巢癌细株HO8910在体外进行培养,培养时分别添加1,25(OH)2D3、ATRA或二者联合,采用MTT比色法测定细胞生长抑制率,流式细胞术(flow cytometry,FCM)进行细胞周期和细胞凋亡分析,用RT-PCR检测VDR及RARαmRNA的表达。结果:结果是单独或联合使用1,25-二羟维生素D3和全反式维甲酸诱导后,HO8910细胞生长均受到不同程度的抑制(P<0.05),并呈时间依赖关系;能够引起细胞周期时相的改变,G1细胞增多(P<0.05);能够诱导细胞产生细胞凋亡(P<0.05);能够上调VDR及RARαmRNA的表达(P<0.05),进而抑卵巢癌细胞增殖,其中以联合用药组最为显著。结论:说明1,25-二羟维生素D3和全反式维甲酸能抑制人卵巢癌细胞株HO8910生长;诱导细胞周期发生G1期阻滞,同时产生细胞凋亡作用;通过上调VDR及RARαmRNA的表达,从而抑制癌细胞增当1,25-二羟维生素D3与全反式维甲酸联合用药时,能够对HO8910细胞生长产生协同抑制作用。

高效液相色谱法同时测定儿童血清中视黄醇、25-OH-维生素D_3和α-生育酚浓度

目的:建立能同时测定儿童血清中视黄醇、25-OH-维生素D3和α-生育酚的高效液相色谱(high performance liquid chro-matography,HPLC)法。方法:以无水乙醇沉淀蛋白质后,血清中的脂溶性维生素用正己烷提取,吹氮气浓缩后用HPLC测定。结果:视黄醇、25-OH-维生素D3和α-生育酚的线性范围分别为0.015-500μg/mL、0.012-500μg/mL和0.1-500μg/mL;检出限分别为0.015μg/mL、0.012μg/mL和0.1μg/mL;相对标准偏差分别为0.98%、2.09%和4.63%。三种脂溶性维生素各个浓度的提取回收率均大于80%,方法回收率均大于90%。结论:本法简便快速,适于血清样品中视黄醇、25-OH-维生素D3和α-生育酚三种脂溶性维生素的同时测定。

血清25-羟维生素D3、降钙素原及D-二聚体与社区获得性肺炎患者肺炎相关指数评分的研究

目的探讨血清25-羟维生素D3[25-(OH)D3]、降钙素原(proealcitonin.PCT)及D -二聚体(D-dimer, D-D)对社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia, CAP)患者肺炎相关指数(PSI)评分的评估价值。方法选取2016年9月-2017年12月杭州师范大学附属医院收治的CAP患者132例,根据PSI评分分为高危组(PSI评分> 130分,31例)、中危组(90分<PSI评分≤130分,62例)和低危组(PSI评分≤90分,39例)。随机选取同期健康体检者132例作为对照组。入院24 h内检测血清25-(OH)D3、PCT及D-D水平,分析其与CAP患者PSI评分的相关性。结果CAP患者血清PCT及D-D水平明显高于对照组(P<0.05),25-(OH)D3明显低于对照组(P<0.05);高危组、中危组与轻危组患者相比,PCT及D-D水平较高,25 -(OH)D,较低。Pearson相关分析显示PCT及D-I)与CAP患者PSI评分呈正相关(r值分别为 0.673、0.512.P <0.05),25-(OH)D3 与 CAP 患者 PS1 评分呈负相关(r =- 0.419.P <0.05) 0结论血清25 -(OH)D3>PCT及D-D水平与CAP患者PS1评分具有较强相关性,对评估CAP患者病情严重程度具有重要意义。