Simultaneous Determination of 2″-O-rhamnosyl Vitexin and Vitexin in Chinese Hawthorn Leaf and Its Extract by RP-HPLC

Aim To establish an RP-HPLC method for simultaneous determination of 2＂-O-rhamnosyl vitexin and vitexin in Chinese hawthorn leaf and its extract. Methods Chromatography was carfled out on Kromasil C18 column （250 mm × 4.6 mm, 5 μm）, using THF-CH3CN-H2O-H3PO4 （30 ： 5： 125 ： 0. 1） as the mobile phase at a flow rate of 1.0 mL·min^-1. The UV detection wavelength was 270 nm. Results The linear range of 2＂-O-rhamnosyl vitexin and vitexin were 0. 106 4 μg - 2. 1280 μg （ r =0. 999 1 ） and 0. 139 2μg - 2. 784 0 μg （ r =0. 999 3 ）, respectively. The average recoveries of 2＂-O-rhamnosyl vitexin and vitexin in Chinese hawthorn leaf were 99.2% （ RSD = 2.80%, n = 6） and 100.6% （ RSD = 2.84%, n = 6）, respectively. Conclusion This method is reproducible, simple, precise, and rapid for simultaneous determination of 2＂-O-rhamnosyl vitexin and vitexin in Chinese hawthorn leaf and its extract, thereby providinge the basis for quality specification of Chinese hawthorn leaf and its extract.

表面活性剂对山楂叶总黄酮中牡荆素-2″-O-鼠李糖苷的肠道吸收促进作用

目的:考察非离子表面活性剂对山楂叶总黄酮中主要活性成分牡荆素-2″-O-鼠李糖苷在大鼠肠道的吸收促进作用。方法:配制含表面活性剂聚山梨酯-80(吐温-80)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(RH40)和泊洛沙姆(F68)的山楂叶总黄酮溶液,分别在大鼠肠道上段(十二指肠和空肠)和下段(回肠和结肠)循环灌流,采用HPLC法测定溶液中牡荆素-2″-O-鼠李糖苷的浓度,计算吸收率。结果:加入3种表面活性剂后,牡荆素-2″-O-鼠李糖苷在大鼠肠内的吸收均显著增加(P<0.05),比不加表面活性剂时提高50%以上。且随表面活性剂的浓度从0.01%提高到0.1%,牡荆素-2″-O-鼠李糖苷在大鼠肠道上段和下段的吸收均显著增加。在表面活性剂的浓度较低(0.01%)时,吐温-80对药物的吸收促进作用强于RH40和F68。结论:表面活性剂吐温-80,RH40和F68均可促进山楂叶总黄酮中牡荆素-2″-O-鼠李糖在大鼠肠道上段和下段的吸收。

牡荆素-2'-O-鼠李糖苷对大鼠急性心肌缺血的药效研究

目的对牡荆素-2'-O-鼠李糖苷进行'大鼠急性心肌缺血'药效研究,阐明牡荆素-2'-O-鼠李糖苷的药效作用特点。方法将大鼠随机分为空白对照组、模型组、丹参滴丸组(85 mg/kg)、低剂量组(20 mg/kg)、中剂量组(40 mg/kg)、高剂量组(80 mg/kg)。以上各组灌胃1次/d,连续15 d,最后3 d灌胃后1 h采用腹腔(ip)注射盐酸异丙肾上腺素(Iso)(5 mg/kg)诱导大鼠实验性心肌缺血,末次注射Iso 6 h后,用10%水合氯醛麻醉,腹主动脉取血。测定血清心肌酶,即肌酸酶同工酶(CK-MB)、羟丁酸脱氢酶(HBDH)、乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果与空白组比较,模型组CK-MB、LDH和HBDH含量均显著升高(P<0.05);与模型组比较,牡荆素-2'-O-鼠李糖苷组CK-MB,LDH,HBDH含量均显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);与丹参滴丸组比较,牡荆素-2'-O-鼠李糖苷组CK-MB,LDH,HBDH含量差异无统计学意义。结论牡荆素-2'-O-鼠李糖苷能明显改善急性心肌缺血大鼠的血清心肌酶损伤程度,降低CK-MB,LDH,HBDH的含量,对异丙肾上腺素所致大鼠急性心肌缺血损伤具有显著的保护作用。

牡荆素-2''-O-鼠李糖苷滴丸制备工艺及质量标准研究

目的：确立牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷滴丸的最佳成型工艺并建立牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷滴丸的质量标准。方法：采用正交试验设计，以丸重差异、溶散时限、外观质量为评价指标，对滴丸成型的工艺进行优选。采用高效液相色谱法对滴丸中牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷进行含量测定。结果：最佳工艺条件为：PEG6000：PEG4000=1：1为基质．滴制温度90℃，液体石蜡为冷却剂，温度为-5～0℃，滴距为4cm，滴速50滴·min-1。牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷在2．0～20μg·mL。范围的内有良好线性，平均回收率为97．33％，RSD为0．93％。结论：制备工艺简单、合理，含量测定准确、重复性好，为牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷滴丸新药开发提供科学依据。

HPLC同时测定山楂叶提取物中的5种主要成分

目的同时测定山楂叶提取物中2″-O-牡荆素葡萄糖苷（Glv）、2″-O-牡荆素鼠李糖苷（Rhv）、芦丁（Rut）、牡荆素（Vit）和金丝桃苷（Hps）的含量。方法采用HPLC法,色谱柱为DiamonsilTMC18柱（200 mm×4.6 mm,5μm）,流动相A为甲醇,B为乙腈-四氢呋喃（1：19）,C为0.5%冰醋酸,梯度洗脱。0-15 min,流动相A由1%-21%,B由19%-21%;15-17 min,A由21%-65%,B保持5%;17-20 min,A由65%-1%,B由5%-19%;流速1.0 ml·min^-1;检测波长360 nm;柱温30℃。结果Glv、Rhv、Rut、Vit、Hps的平均加样回收率分别为99.72%、100.27%、99.48%、99.31%和100.83%,其RSD分别为1.26%、1.69%、1.61%、1.70%和1.31%（n=6）。结论所建方法简便、快速、准确、可靠,可用于山楂叶提取物的质量控制。

高效液相色谱法同时测定楠竹叶提取物中的4种黄酮

采用高效液相色谱法同时测定楠竹叶提取物中的4种主要黄酮成分:荭草苷、牡荆苷、牡荆苷-4′-O-葡萄糖苷、牡荆苷-2′-O-鼠李糖苷。通过实验,得到了同时测定4种主要黄酮成分的最佳条件。采用Kromasil-C18(5μm,4.6 mm×250 mm,Akzol Nobel,Sweden)进行测定,最佳检测条件为:以四氢呋喃:乙腈:甲醇:0.5%醋酸水溶液=10.3:1:0.7:88为色谱流动相等度洗脱;检测波长360 nm;柱温25℃,流速:1.0 mL·min^(-1)。荭草苷、牡荆苷、牡荆苷-4′-O-葡萄糖苷和牡荆苷-2′-O-鼠李糖苷的平均回收率分别为98.5%、98.1%、99.1%和98.7%,相对标准偏差分别为0.8%、0.7%、0.8%和0.6%(n=5)。该方法分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高、重复性好,可用于楠竹叶成分的检测分析。

长瓣金莲花茎叶化学成分的研究

从长瓣金莲花(Trollius macropetalus Fr.Schmidt)的干燥茎叶中分离到五个单体,经理化常数测定和光谱分析,确定化合物Ⅰ为牡荆素-2″-O-β-D-吡喃木糖甙(vitexin-2″-O-β-D-pyranxyloside),Ⅱ为荭草素-2″-O-β-D-吡喃木糖甙(orientin-2″-O-β-D-pyranxyloside),Ⅲ为牡荆甙(vitexin),Ⅳ为荭草甙(orientin)Ⅴ为3-甲氧基-4-羟基-5-(3′-甲基-2′-)西烯基甲酸(3-methoxy-4-hydroxyl-5-(3′-methyl-2′-)butylenyl benzoic acid)。其中Ⅰ和Ⅱ系首次从金莲花属植物中获得。Ⅴ为新化合物,命名为原金莲酸(proglobeflowery acid)。

山楂叶不同采收期多种有效成分含量的比较

目的探索山楂叶最佳采收期。方法 HPLC条件:金丝桃苷检测采用Shim-pack C18(150mm×4.6mm,5μm);乙腈-甲醇-四氢呋喃-5 mL·L^(-1)醋酸溶液(1∶1∶19.4∶78.6)为流动相,检测波长为363nm。牡荆素鼠李糖苷检测采用Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm);四氢呋喃-甲醇-乙腈-乙酸-水(38∶3∶3∶4∶152)为流动相;检测波长为330nm。总黄酮检测利用可见分光光度法,以芦丁对照品为对照,NaNO2-Al(NO3)3-NaOH体系作显色剂,在500nm波长处测定总黄酮含量。结果金丝桃苷进样量在0.080 5~0.402 4μg范围内,质量浓度与峰面积线性关系良好(r=0.999 3);牡荆素鼠李糖苷进样量在0.418~2.090μg范围内,质量浓度与峰面积线性关系良好(r=0.999 1)。结论 5月采收的山楂叶中牡荆素鼠李糖苷含量最高;8~11月采收的山楂叶中金丝桃苷及总黄酮的含量较高。

高效液相色谱梯度洗脱法同时测定调气丸中6个主要成分含量

目的建立调气丸中和厚朴酚、厚朴酚、牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素和金丝桃苷含量的测定方法。方法采用Venusil MP C_(18)色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈—1.0%冰醋酸溶液,梯度洗脱,流速:0.9 mL/min,柱温30℃。结果和厚朴酚、厚朴酚、牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素和金丝桃苷分别在2.97～59.40、4.26～85.20、3.59～71.80、20.68～413.60、2.66～53.20、1.84～36.80 mg/L范围内线性关系良好;平均回收率分别为97.95%(RSD=0.98%)、98.27%(RSD=1.26%)、 98.19%(RSD=1.15%)、99.96%(RSD=0.68%)、 97.88%(RSD=1.68%)、96.93%(RSD=1.24%);精密度和重复性良好;供试品溶液在室温条件下12 h内稳定。结论该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可同时用于调气丸中6种主要成分的含量测定。

麻竹叶黄酮类成分研究

从麻竹(Dendrocalamuslatiflorus)叶中分离得到四个黄酮类化合物。经性质和光谱(UV,IR,MS,1HNMR,13CNMR等)法鉴定其结构,分别为牡荆苷(Ⅰ),芦丁(Ⅱ),山奈酚-3-O-β-D-芸香糖苷(Ⅱ-Ⅰ),山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖基(1-2)-α-L-鼠李糖苷(Ⅳ)。四种化合物均为首次从该植物中得到。

木菠萝叶中水溶性黄酮苷的分离、鉴定和测定

目的分离、鉴定木菠萝Artocarpus heterophyllus Lam.叶中的水溶性黄酮苷,并采用HPLC法测定其含有量。方法木菠萝叶极性部位浸膏通过大孔树脂、凝胶和制备液相色谱等方法进行分离纯化,波谱数据鉴定所得化合物的结构。分析采用Thermo Syncronis C（18）色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;检测波长338 nm;流动相乙腈-0.1%磷酸（19∶81）;体积流量1 m L/min;柱温30℃。结果从该植物中首次分离鉴定出一种水溶性黄酮苷—牡荆素木糖苷,在0.537 7～10.754 0μg范围内线性关系良好（r=0.999 4）,平均回收率为96.24%（RSD=0.91%）。在4月份,其含有量最低（0.605 5 mg/g）,12月份最高（3.591 2 mg/g）,在成熟叶、嫩叶、黄色落叶中的含有量分别为1.743 1、0.324 5、4.034 5 mg/g。结论牡荆素木糖苷主要存在于木菠萝黄色落叶中。

金莲花多苷片中四种黄酮类化合物的含量测定

目的测定金莲花多苷片中四种黄酮类成分的含量。方法采用高效液相色谱法,以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为室温,在360nm波长处,同时测定金莲花中四种黄酮类成分的含量。结果荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、牡荆苷及槲皮素进样量分别在0.1976~1.9760μg、0.1010~1.0100μg、0.0604~0.6040μg、0.0608~0.6080μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.17%、98.09%、99.15%、98.54%,RSD分别为1.05%、0.90%、0.54%。0.73%。结论本方法简单准确,重复性良好,适用于金莲花多苷片的含量测定。

HPLC法同时测定山楂叶提取物中4种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定山楂叶提取物中牡荆素-2″-O-鼠李糖苷、金丝桃苷、槲皮素、山奈酚的含量。方法色谱柱为DIAMONSIL C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-体积分数为0.5%乙酸水溶液,梯度洗脱[0～15 min,φ(甲醇)=40%～65%;15～20 min,φ(甲醇)=65%～100%;20～40 min,φ(甲醇)=100%];流速为1.0 mL.min-1;波长为365 nm。结果牡荆素-2″-O-鼠李糖苷、金丝桃苷、槲皮素、山奈酚的线性关系良好,其质量浓度分别在14.0～112 mg.L-1、3.50～28.0 mg.L-1、6.25～50.0 mg.L-1、0.550～4.40 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系。平均回收率分别为101.3%、98.6%、107.0%、98.1%,RSD分别为1.1%、2.2%、2.6%、2.1%(n=5)。结论该法简便、可行,重现性好,结果准确,可作为山楂叶提取物的含量测定方法,为其质量控制提供参考依据。

牡荆素减轻小鼠溃疡性结肠炎的药效作用及机制研究

目的探讨牡荆素对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的药效作用及机制。方法将C57BL/6小鼠随机分成3组(n=10):正常对照组、模型组(4%DSS)和牡荆素组(4%DSS+牡荆素,50 mg·kg-1)。除正常对照组外,其他组小鼠饮用水中加入4%DSS造模,造模同时牡荆素灌胃给药,每天1次,并每天称重和观察血便等症状,直到实验结束。于造模7 d处死小鼠,截取结肠做HE染色并进行组织损伤和炎性细胞浸润评分;ELISA方法检测小鼠结肠黏膜髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性;反转录荧光定量PCR方法检测小鼠结肠组织肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素6(interleukin-6,IL-6)及环氧合酶-2(cyclooxygenase 2,COX-2)mRNA的表达水平。结果与正常对照组相比,模型组小鼠体重明显减轻,组织病理评分增高,同时结肠匀浆MPO水平明显升高,结肠组织TNF-α、IL-6和COX-2表达升高。与模型组比较,牡荆素组小鼠上述指标明显改善。结论牡荆素能有效减轻小鼠实验性溃疡性结肠炎,缓解炎症反应,其机制可能与抑制中性粒细胞浸润和减少炎症因子释放有关。

HPLC测定脑得生固体分散体胶囊中山楂黄酮类成分的含量

目的：建立脑得生固体分散体胶囊中山楂黄酮类成分（牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、金丝桃苷）的含量测定方法。方法：色谱柱Hyspersil ODS-2（5μm,250 mm×4.6 mm）,柱温25℃,流动相乙腈-甲醇-四氢呋喃-0.04%磷酸水（1∶1∶19.4∶78.6）,流速0.9 mL·min-1,检测波长370 nm。结果：牡荆素鼠李糖苷在0.167 21.003 2μg（r=0.999 9）范围,牡荆素在0.124 80.748 8μg（r=0.999 9）范围,金丝桃苷在0.276 01.656 0μg（r=0.999 9）范围均呈良好的线性关系;平均回收率分别为97.27%,99.12%,99.09%;RSD分别为1.57%,2.15%,2.71%。结论：所建立方法简便、准确、重复性好,可用于控制该制剂的质量。

金莲花中5个黄酮类化合物的大鼠体内代谢研究

目的:研究金莲花中5个黄酮类化合物的体内代谢产物。方法:将荭草素、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、牡荆素、2″-O-(2-甲基丁酰基)牡荆素、异槲皮素分别以静脉注射的方式给予大鼠,给药10 min后取血,利用高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)对血浆中的代谢产物进行分析。结果:大鼠体内共检测到20个代谢产物,其中5个来源于荭草素、2个来源于荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、3个来源于牡荆素、5个来源于2″-O-(2-甲基丁酰基)牡荆素、5个来源于异槲皮素。通过准分子离子峰及二级碎片推测20个代谢产物的结构及5个原型化合物的代谢规律。结论:5个黄酮类成分均可以通过氧化、甲基化、硫酸酯结合、葡萄糖醛酸结合等Ⅰ相及Ⅱ相代谢过程代谢为相应的产物。

基于多种内参物的一测多评法测定金莲清热颗粒中6种成分含量

目的建立基于多种内参物的一测多评法测定金莲清热颗粒中芒果苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、藜芦酸、牡荆苷和哈巴俄苷6个成分的含量。方法以Agilent Eclipse Plus C_(18)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相(梯度洗脱),流速为1mL/min,柱温为30℃,检测波长为270 nm。分别以荭草苷、牡荆苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷为内参物,采用一测多评法建立另外5个待测成分与内参物的相对校正因子,然后计算21批金莲清热颗粒样品中6个成分的含量,并与外标法测定结果进行比较。结果一测多评法测得21批金莲清热颗粒样品中芒果苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、藜芦酸、牡荆苷和哈巴俄苷的含量范围分别为0.234~0.516、1.804~2.270、2.143~2.606、0.190~0.223、0.594~0.782、0.080~0.152 mg/g,外标法测定结果分别为0.235~0.523、1.798~2.265、2.137~2.599、0.190~0.224、0.597~0.786、0.077~0.151 mg/g,2种方法所测结果的差异百分比不大于4.00%。结论建立了基于多种内参物同时测定金莲清热颗粒中6种成分含量的一测多评法,该方法与外标法所得结果无明显差异,可用于金莲清热颗粒的质量控制。

金莲花口服液高效液相色谱指纹图谱建立及指标成分含量测定

目的 建立金莲花口服液的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱和多成分定量方法。方法 以荭草苷峰为参照,建立18批金莲花口服液的HPLC指纹图谱,确定共有峰,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)评价相似度。采用HPLC法,测定荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、牡荆苷、槲皮素的含量。结果 18批样品有22个共有峰,相似度均不低于0.988;指认2号峰为荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷,4号峰为荭草苷,8号峰为牡荆苷,17号峰为槲皮素。18批样品中,荭草素-2’’-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、牡荆苷、槲皮素的含量分别为(2.54±0.22)mg/mL、(3.12±0.37)mg/mL、(0.79±0.06)mg/mL、(0.28±0.04)mg/mL。结论 所建立的HPLC指纹图谱和多成分定量方法快速简便,可用于金莲花口服液的质量控制。

山楂叶提取物微丸制备及其含量测定方法研究

采用挤出滚圆法制备山楂叶提取物微丸,建立测定微丸提取物中牡荆素-2-O-鼠李糖苷含量的方法,评价微丸的溶出情况。采用固定微丸的制备工艺,以粉体学为评价指标,优化载药量、水溶性载体材料、润湿剂种类及用量等微丸的处方,采用高效液相法测定山楂叶提取物中牡荆素-2-O-鼠李糖苷的含量。微丸处方为山楂叶提取物∶微晶纤维素∶乳糖∶润湿剂(60%乙醇)质量比为10∶12∶3∶8;色谱条件:流动相四氢呋喃-乙酸-水-甲醇-乙腈(38∶4∶152∶3∶3),检测波长:330 mm,流速为1.0 mL/min,在蒸馏水中30 min时牡荆素-2-O-鼠李糖苷的溶出量达95.2%。所得山楂叶提取物微丸质量好,牡荆素-2-O-鼠李糖苷的含量测定方法实用性强。

基于HPLC多指标成分含量测定结合化学计量学的小儿康颗粒质量评价

目的建立HPLC多指标成分定量测定与化学计量学相结合的小儿康颗粒质量评价方法。方法以Waters SunFire C 18(250 mm×4.6 mm,5μm)为液相色谱柱,柱温30℃;流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,体积流量:1.0 ml/min;检测波长分别为340 nm(牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷和金丝桃苷)、230 nm(氧化芍药苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷)和203 nm(太子参环肽B);采用SPSS 26.0统计软件聚类分析、主成分分析等对不同厂家生产的小儿康颗粒进行质量评价。结果牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、氧化芍药苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、太子参环肽B分别在2.18~54.50、15.89~397.25、2.72~68.00、1.39~34.75、12.68~317.00、0.96~24.00、0.79~19.75μg/ml范围内线性关系良好(r≥0.9992);平均加样回收率分别为98.67%、100.11%、97.96%、97.68%、99.64%、96.86%、96.92%,RSD分别为1.48%、0.64%、1.27%、1.32%、0.91%、1.13%和0.87%;12批小儿康颗粒样品聚为3类,主成分分析结果显示,主成分1~3是影响小儿康颗粒质量评价的主要因子。结论该方法操作简便、重复性好,可用于小儿康颗粒的质量控制和综合评价。