低相对分子质量肝素对内毒素诱导的内皮细胞表达vWF:Ag、PAI-1和PS的影响

目的观察低相对分子质量肝素(LMWH)对内毒素(LPS)作用下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达血管性血友病因子相关抗原(vWF：Ag)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)及蛋白 S(PS)的影响。方法常规从脐带分离及培养 HUVEC,取第1～3代 HUVEC 于24孔板进行分组实验。应用酶联免疫吸附法(ELISA)或免疫比浊法测定 HUVEC 上清液中的 vWF：Ag、PAI-1及 PS。结果(1)在 LPS 刺激下,HUVEC 培养上清液中 vWF：Ag 量较对照组增加(由2.0% 增至3.5%),差异有显著性(P＜0.05)。不同浓度 LMWH(20 u/ml、50 u/ml、100 u/ml)均可抑制 LPS 对 HUVEC 表达 vWF：Ag 的影响,与内毒素组比较,差异有显著性(P＜0.05)；(2)在 LPS 刺激下,HUVEC 表达 PAI-1的量增加,与对照组比较,差异有显著性(P＜0.05)。加入不同浓度的 LMWH,可下调 LPS 对 HUVEC 表达 PAI-1的影响。各剂量组与 LPS 组比较,差异均有显著性(P＜0.05)；(3)以1μg/ml LPS 刺激 HUVEC,PS 表达量下降,与对照组比较,差异有显著性(P ＜0.05)。同时加入 LMWH 可上调 LPS 对 HUVEC 表达 PS 的影响,各剂量组与 LPS 组比较,差异有显著性(P＜0.05)。结论 LPS 可上调 HUVEC 表达 vWF：Ag 及 PAI-1,下调 HUVEC 表达 PS。LMWH 能拮抗上述作用。提示：LMWH 对 LPS 诱导的内皮细胞的活化与损伤有保护作用,在重症炎症状态下使用 LMWH 可能有利于器官功能的恢复和预防 DIC。

子痫前期高龄产妇胎盘HIF-1α蛋白与外周血vWF的相关性

目的探究子痫前期高龄产妇胎盘低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白水平与外周血血管性假血友病性因子(vWF)浓度的相关性,为及时有效预防子痫的发生提供实验室依据。方法对30例正常分娩高龄产妇(A组)、35例子痫前期轻度高龄产妇(B组)、41例子痫前期重度高龄产妇(C组)的HIF-1α蛋白水平与外周血vWF浓度进行测定,并分析HIF-1α蛋白水平与vwF浓度的相关性。结果 B组、C组的HIF-1α蛋白水平、vWF浓度显著高于A组,(B组:t_1=13.194,P_1=0.000;t_2=4.856,P_2=0.000。C组:t_1=17.441,P_1=0.000;t_2=9.156,P_2=0.000);C组的HIF-1α蛋白水平、vWF浓度显著高于B组,差异均有统计学意义(t_1=9.681,P_1=0.000;t_2=4.899,P_2=0.000)。Spearman相关性分析显示,vWF浓度与子痫前期的病情程度(r=0.288,P=0.000)、HIF-1α蛋白水平(r=0.410,P=0.000)均呈显著正相关关系。结论子痫前期高龄产妇的胎盘HIF-1α蛋白水平与外周血vWF浓度明显升高,二者可能共同参与子痫前期的发生和发展。

血浆D-二聚体和血管性血友病因子抗原水平与老年非小细胞肺癌分期的相关性分析

目的观察血浆D-二聚体(D-D)和血管性血友病因子抗原(v WF:Ag)的水平与老年非小细胞肺癌分期的相关性。方法选择328例老年非小细胞肺癌患者作为研究对象,检测所有患者D-D和v WF:Ag水平,观察不同分期患者D-D、v WF:Ag水平,D-D、v WF:Ag水平与TNM分期的相关性及D-D、v WF:Ag对中晚期肺癌的诊断价值。结果 D-D和v WF:Ag水平随着分期增加逐渐升高(<0.05)。D-D、v WF:Ag均与分期呈显著正相关(=0.537、0.613,均<0.05)。D-D和v WF:Ag诊断中晚期肺癌的敏感度分别为73.43%和78.37%,特异性分为别为66.12%和74.38%;D-D和v WF:Ag之一阳性作为标准诊断的敏感度为95.17%,特异性为42.98%;D-D和v WF:Ag同时阳性作为标准诊断的敏感度为48.79%,特异性为92.56%。结论 D-D和v WF:Ag与老年非小细胞肺癌分期有显著相关性,可辅助用于肺癌分期的诊断,具有临床推广价值。

大鼠骨髓基质细胞体外诱导分化为内皮细胞实验研究

目的探讨骨髓基质细胞 (BMSC)向内皮细胞分化的可行性。方法无菌条件下获取BMSC ,实验组以 40 0ng/ml重组人粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)为诱导剂 ,进行体外诱导分化 ;对照组用 164 0培养液培养。 8d后进行免疫组化染色进行特异性内皮细胞标志物鉴定。结果分化后的细胞在光镜下具有内皮细胞的形态学特征 ;免疫组化染色证实实验组诱导后的细胞为内皮细胞。结论BMSC在高浓度rhGM CSF作用下 。

糖基化终产物诱导人脐静脉内皮细胞表达间质细胞标志物的观察

目的观察AGE对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)标志物表达的影响。方法在体外培养的HUVEC细胞株中分别加入AGE、牛血清白蛋白(BSA),采用免疫组织化学技术和Western blot检测HUVEC中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和血管性血友病因子(vWF)的表达情况。结果 HUVEC经AGE处理7d后,AGE组α-SMA表达较BSA组增强[(27.04±0.05)vs(20.12±0.02),P<0.01],vWF表达较BSA组降低[(29.66±1.44)vs(55.28±1.77),P<0.01]。结论 AGE可体外诱导HUVEC表面标志物发生改变,该转分化机制可能参与糖尿病血管病变的发生发展。