利用鳕鱼皮蛋白制备热反应型肉香调味基料的研究

以复合酶深度水解鳕鱼皮蛋白为主要原料,通过与半胱氨酸和葡萄糖的美拉德反应制得肉香风味,并通过固相微萃取-气相-质谱联用技术检测鉴定出大量的肉香味物质。为鳕鱼皮蛋白水解物制备肉香调味基料提供理论依据。

狭鳕鱼皮胶原多肽组合物水洗面膜的研制

以狭鳕鱼皮胶原多肽、海藻糖和葡萄籽提取物(或藻蓝蛋白)组合物为主要活性成分,以质量分数分别为2.0%,1.0%和4.6%的羧甲基纤维素、海藻酸钠和聚乙二醇1 500为基质主成分,经溶解、搅拌、混合、均质等工艺制备水洗面膜。微生物挑战实验确定以质量分数为1.0%的市售GL-PLUS为面膜防腐剂。体外保湿抗衰老功效研究确定面膜活性成分的添加量(以质量分数计)为胶原多肽3.7%,海藻糖6.5%,葡萄籽提取物(或藻蓝蛋白)0.12%。耐热、耐寒和离心测试结果表明所得面膜具有良好的稳定性。

芘荧光探针应用于狭鳕鱼皮凝胶形成过程的可行性研究

在狭鳕鱼皮弹性水凝胶的动态形成过程中引入了芘荧光探针。结果表明,在6.67%的鱼皮明胶溶液中,芘单体的荧光强度和I1/I3值均随芘浓度的增大先升高后降低,当芘浓度为40μmol/L时,单体荧光强度达到最大值,而当芘浓度为20～60μmol/L时,I1/I3值均处于较高水平,数值相近;探针的IE/IM值随芘浓度的增大一直升高,当芘浓度为2～40μmol/L时,比值偏低。综合考虑上述三个因素,选用浓度为40μmol/L的芘作为荧光探针应用于狭鳕鱼皮水凝胶的动态形成过程。实验确定芘I1/I3值能够用来表征溶胶中分子间的交联情况,其凝胶时间点为7h;但是IE/IM值则无法表征分子间的交联。这为表征其它鱼皮凝胶的动态形成过程提供了重要基础。

狭鳕鱼皮胶原蛋白肽对大鼠关节炎模型中氧化应激和炎症因子的影响

[目的]建立大鼠关节炎模型,探讨狭鳕鱼皮胶原蛋白肽对大鼠关节炎模型的抗氧化和抗炎机理。[方法]采用切断左侧髌韧带及跟腱法建立大鼠关节炎模型;治疗组给予不同剂量的狭鳕鱼皮胶原蛋白肽灌胃;采用HE染色观察大鼠关节软骨的组织病理学变化;采用酶联免疫法检测大鼠血清中氧化损伤相关指标丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量;采用ELISA法测定大鼠血清炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素-1(IL-1)的含量。[结果]狭鳕鱼皮预防组、狭鳕鱼皮剂量Ⅰ组、狭鳕鱼皮剂量Ⅱ组关节软骨的损伤得到改善,骨关节炎大鼠血清中的MDA、NO的含量明显降低,SOD和T-AOC的活性有所提高,与模型组相比差异极显著(P<0.01)。各剂量狭鳕鱼皮组大鼠血清中TNF-α和IL-1的含量都有所降低。[结论]狭鳕鱼皮胶原蛋白肽可以有效缓解大鼠骨关节炎的症状,其机制可能与调控体内的氧化-抗氧化的平衡体系以及抑制炎症因子的释放有关。

鳕鱼皮胶原蛋白肽的促钙吸收作用

目的探究鳕鱼皮胶原蛋白酶解制得梯级多肽的促钙吸收作用。方法从鳕鱼皮中提取胶原蛋白并酶解制得不同分子量段的胶原多肽,采用低钙饮食建造大鼠缺钙模型,检测大鼠骨钙含量、钙代谢指标和血清钙磷指标,探讨其促钙吸收作用。结果与加钙组相比,各受试物均能提高大鼠骨钙含量;高低剂量的高分子量胶原多肽能显著提高钙吸收率(P<0.05),高低剂量的低中分子量胶原多肽能极显著提高钙吸收率(P<0.01);而高低剂量的中分子量胶原多肽还能显著提高钙储留率(P<0.05),高低剂量的低分子量胶原多肽能极显著提高钙储留率(P<0.01);同时,各受试物也能相应的提高大鼠的血清钙磷含量。结论鳕鱼皮胶原蛋白多肽能明显提高大鼠对钙的吸收率和储留率,分子量越小,其促钙吸收效果越好。

鳕鱼皮明胶的止血活性和机理研究

为了提高水产加工废料的高值化利用,为明胶作为止血产品开发的原料提供依据,研究了明胶的分子量与止血活性之间的关系以及明胶的止血机理。本研究在65℃下采用热水法提取鳕鱼皮明胶,通过SDS-PAGE电泳测定明胶的分子量分布情况。使用100 ku和50 ku的超滤膜对明胶进行超滤处理得到高、中、低三个分子量范围的样品。大鼠断尾止血实验、股动脉止血实验和肝创面止血实验结果表明高分子量组(Mr>100 ku)的出血时间最短,分别为4.54 min、2.30 min和1.91 min。说明提取的鳕鱼皮明胶样品与自然止血组相比具有止血效果,并且随着明胶分子量的上升,出血时间和出血量均下降,且高分子量明胶样品止血效果较好。APTT测定结果表明明胶可以明显缩短APTT时间,主要对内源性凝血途径起作用,并且可以促进血小板的聚集,还可以增加血小板活性因子PF4、P-选择素和TXB2的释放量从而缩短出血时间,起到快速止血的作用。

狭鳕鱼皮胶原多肽对去势大鼠骨微结构影响的研究

目的通过观察狭鳕鱼皮胶原多肽对去势大鼠骨质疏松模型骨微结构的影响,探讨其防治骨质疏松的可行性。方法成年Wistar雌性大鼠60只,体质量(250±10)g,随机分为5组(n=12),分别为正常对照组(A组)、骨质疏松模型组(B组)、骨质疏松模型+狭鳕鱼皮胶原多肽预防组(C组)、骨质疏松模型+狭鳕鱼皮胶原多肽低剂量治疗组(D组)、骨质疏松模型+狭鳕鱼皮胶原多肽高剂量治疗组(E组),每组12只。B、C、D、E组采用摘除双侧卵巢法制备大鼠骨质疏松模型。C组从术前4周开始、D、E组从术后6周开始,每天按照1.0、0.5、1.0 g/kg行狭鳕鱼皮胶原多肽灌胃,连续6周;A、B组于术后同时间点给予等体积生理盐水灌胃。末次给药24 h后,A、B组大鼠摄股骨X线片并测定灰度值;然后颈椎脱臼法处死各组大鼠,取左侧胫骨近端骨组织行HE染色,观察骨组织病理学改变,测量骨小梁数量(trabecular number,TN)、平均骨小梁厚度(mean trabecular plate thickness,MTPT)、平均骨小梁间距(mean trabecular plate spacing,MTPS)、骨小梁体积百分比(trabecular bone volume,TBV)、平均骨皮质厚度(mean bone cortical thickness,MBCT);免疫组织化学染色观测降钙素受体(caltitonin receptor,CTR)及IL-1表达水平。结果 B组大鼠股骨灰度值显著低于A组(t=45.130,P=0.000),表明去势大鼠骨质疏松模型制备成功。组织学观察示,A、C、E组TN、MTPS、TBV、MBCT与B组比较,差异有统计学意义(P<0.05);C组各骨组织形态计量学参数与D、E组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);D组TN、MTPS、TBV、MBCT与A组比较差异有统计学意义(P<0.05);E组仅MTPS与A组比较差异有统计学意义(P<0.05);E组MTPS、TBV、MBCT与D组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学染色观察示,A、C、D、E组CTR、IL-1表达水平较B组降低,C、E组低于D组,差异有统计学意义(P<0.05);其余组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论狭鳕鱼皮胶原多肽能够改善骨质疏松大鼠的骨微结构,其机制可能与抑制骨组织中CTR、IL-1表达有关,但尚未发现其对骨质疏松症有预防作用。