基于C-反应蛋白水平探讨不同炎症状态下血清维生素的变化特点

目的:探讨C-反应蛋白(CRP)水平与血清维生素的关系,明确炎症是维生素缺乏的重要诱因。方法:回顾性分析2021年9月至2023年7月天津市第三中心医院营养科诊治551例病人的临床资料,根据CRP化验结果分为:无/轻度炎症组(CRP <10 mg/L)89例、中度炎症组(10 mg/L≤CRP <50 mg/L)148例和重度炎症组(CRP≥50 mg/L)314例,比较三组病人临床特征和血清维生素水平,进一步研究炎症对血清维生素的影响。结果:共纳入551例病人,检测9种水溶性维生素和4种脂溶性维生素,机体CRP水平与血清维生素C、维生素B3、维生素B9、维生素A、25-羟维生素D3、25-羟维生素D呈负相关,相关系数分别为:-0.33、-0.11、-0.16、-0.33、-0.09、-0.12;CRP与血清维生素B6呈正相关,相关系数为0.16。三组炎症亚组分析显示,血清维生素C、维生素B9、维生素A、25-羟维生素D3和25-羟维生素D水平随着炎症程度加重逐步降低(P <0.001);随着炎症加重,血清维生素B3水平仅在重度炎症状态时出现明显下降(P <0.01);血清维生素B2、维生素B5、维生素B6水平,中重度炎症组高于无/轻度炎症组(P <0.001)。维生素B7、维生素B12、维生素E和维生素K水平与CRP无相关性,且三组炎症亚组分析差别无统计学意义(P> 0.05)。结论:部分维生素水平受机体炎症状态影响,临床发现炎症指标异常增高时,尤其应进一步监测血清维生素C、B9、B3、A、D水平,警惕维生素缺乏。

RP-HPLC法测定功能性饮料水溶性维生素含量

目的:建立同时测定功能性饮料中VC、VPP、VB6、VB2和VB1水溶性维生素含量的RP-HPLC方法。方法:色谱条件:色谱柱:LunaC18(2)(200mm×4.60mm,5μm),流动相:0.005mol/L己烷磺酸钠溶液-甲醇-冰醋酸(80:20:0.5,V/V)(pH4.0),流速1.0mL/min,检测波长278nm。结果:VC、VPP、VB6、VB2和VB1的线形范围分别是2.94～43.50、6.00～90.00、1.70～25.50、1.60～24.00、2.30～43.50μg/mL,最低检出限分别为0.001、0.362、0.095、0.328、0.619μg/mL;VC、VPP、VB6平均回收率分别为98.29%、98.38%、98.51%。结论:此方法简单、快捷、准确,可同时测定功能性饮料中的多种水溶性维生素。

高效液相色谱-串联质谱法测定保健食品中10种水溶性维生素

目的建立高效液相色谱-串联质谱法检测保健食品中10种水溶性维生素的分析方法。方法采用高效液相色谱-串联质谱法（high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS）,ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8μm）,以0.1%甲酸水溶液为流动相A,0.1%甲酸的甲醇溶液为流动相B,梯度洗脱。通过分子离子峰、二级碎片、色谱保留时间等信息,对保健食品中10种水溶性维生素进行鉴别和定量测定。结果 10种水溶性维生素实现了同时分离与专属鉴定,维生素B_1在0.01~1μg/mL的浓度范围内线性关系良好（r〉0.995）;维生素C在0.1~50μg/mL的浓度范围内线性关系良好（r〉0.995）;其他8种维生素在0.01~10μg/mL的浓度范围内线性关系良好（r〉0.995）,高、中、低不同浓度的加标回收率在80%~120%之间,精密度在0.3%~3%之间。结论本方法专属性强、灵敏度高,结果准确可靠,可以作为片剂和口服液基质保健食品中检测水溶性维生素的方法参考。

液相色谱-串联质谱法分析10种水溶性维生素

目的:建立水溶性维生素的液相色谱-质谱检测方法。方法:直接用乙腈:水:甲酸(15:85:0.1,v/v/v)为流动相进行反相液相色谱分离,用电喷雾正离子源进行离子化,选择反应监测方式(SRM)对这10种水溶性维生素的母离子及子离子进行监测,三级四极质谱测定。结果:该方法抗干扰能力强,方法重现性好,RSD为0.6%～2.4%,回收率97.9%～104.7%,相关系数0.9967～0.9998,检出限0.1～0.8 ng/L。结论:该方法快速、准确、灵敏,适合测定各种样品中的水溶性维生素。

RP-HPLC法分离测定动物肝脏中多种维生素

建立了一种同时测定4种水溶性维生素的高效液相色谱方法。采用ShimadzuVP-ODS（150mm×4．6mm i．d．，5．0μm）色谱柱，以甲醇-0．05mol／L磷酸氢二钾缓冲溶液梯度洗脱，在波长为267nm处进行检测。维生素C、B1、B6和B2分别在22．3～116．0，2．4～152．5，2．2～340．0，1．7～272．0μg／mL呈良好的线性关系，相对标准偏差为（n=6）1．1％～1．6％，平均回收率在98．6％～102．3％范围以内。可用于同时测定动物肝脏中维生素C、B1、B6和B2。

液相色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中12种水溶性维生素

建立了同时测定婴幼儿配方奶粉中多种维生素、牛磺酸等12种水溶性维生素的液相色谱串联质谱测定法。采用MGⅢ-C18色谱柱,以质量分数为0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相(梯度洗脱),流速为0.25 m L/min,柱温25℃,进样量5μL。方法检出限0.0001~1 mg/kg,高、中、低不同质量分数加标回收率85.0%~95.5%,相对标准偏差为2.9%~9.1%。该法具有样品预处理简单,灵敏度高,分析时间短等优点,适用于婴幼儿配方奶粉中上述12种水溶性维生素的同时测定。

高效液相色谱分离-在线光化学衍生/荧光光谱法测定5种水溶性维生素的研究

建立了高效液相色谱分离-在线光化学衍生/荧光光谱法测定水溶性维生素烟酸(NIA)、烟酰胺(NIC)、B1、B12及B2的新方法。以含有0.018 mol/L三乙胺、0.002 mol/L庚烷磺酸钠的0.05 mol/L磷酸盐缓冲液(A相,pH 5.8)和甲醇(B相)为流动相(85∶15),等度洗脱分离5种水溶性维生素;将自制的程序控制时间/光强光化学反应器接在二极管阵列检测器(DAD)和荧光检测器(FLD)之间,进行光化学衍生。优化了光化学衍生的条件,并用于复合维生素片中水溶性维生素的测定。在优化实验条件下,5种水溶性维生素的线性范围分别为:NIA、NIC为0.1～10.0 mg/L,B1、B12为0.2～20.0 mg/L,B2为0.01～1.0 mg/L,方法的检出限(LOD,3σ)和定量下限(LOQ,10σ)分别为1.5～25.4μg/L和5.0～84.7μg/L,优于传统的高效液相色谱分离/二极管阵列检测方法。方法的相对标准偏差(n=7)不大于7.8%,样品的加标回收率为98%～103%。

α-葡萄糖苷酶抑制剂对2型糖尿病患者水溶性维生素水平的影响

目的研究α-葡萄糖苷酶抑制剂配合胰岛素使用,对2型糖尿病患者机体水溶性维生素水平的影响。方法将73例符合要求的2型糖尿病住院患者随机抽号分为研究组和对照组,研究组37例,对照组36例,两组患者既往均未使用阿卡波糖(拜唐苹),在血糖、并发症及伴随症状方面差异无显著性;住院期间由医院临床营养科统一安排糖尿病饮食,两组饮食差异无显著性。住院期间对照组不使用阿卡波糖,研究组使用阿卡波糖,且均为初始用量50 mg tid,两组间其余用药差异无显著性。分别于住院前和住院第5天检测空腹和餐后2 h静脉血葡萄糖水平,以及血清和尿液中维生素B1、B6、B12、C和叶酸水平。结果两组在空腹血糖变化情况比较差异无显著性,而在餐后2 h血糖变化比较研究组较对照组明显降低(P<0.05)。研究组较对照组在血清维生素B1、B6、B12、C和叶酸水平显著降低(P<0.05),而尿维生素B1、B6、B12、C和叶酸水平变化差异无显著性。结论α-葡萄糖苷酶抑制剂长期使用可能会带来水溶性维生素的缺乏病及相关问题,提示对糖尿病末梢神经病变的原因多重性方面应增加一个考虑方面。

RP-HPLC测定夏橙中Vc含量

建立了一种利用反相高效液相色谱测定橙橘中Vc含量的方法。采用Agilent1100高效液相色谱仪,Zorbaxeclipse XDB C18150.0 mm×4.6 mmi.d色谱柱,以0.05 mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液-甲醇（95∶5）作为流动相,流速1.00 ml/min,于265 nm波长检测。在一定浓度范围内,Vc的峰面积与其浓度呈良好的线性关系（相关系数为0.999 8）,相对标准偏差为0.22%;方法回收率为91.6%-104.1%。

UPLC-MS/MS法测定不同产地何首乌中6种水溶性维生素含量

目的:建立超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱联用技术(UPLC-MS/MS)测定何首乌中水溶性维生素类成分的分析方法。方法:将粉碎后的何首乌样品用超纯水超声提取后,经ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)分离并在动态多反应监测模式(MRM)下检测,得到相应的提取离子流图,以峰面积进行定量。结果:何首乌中6个水溶性维生素的含量差别较大,其中VB4为何首乌中维生素的主要来源,在6个维生素类化合物中的含量最高,达到85.89μg/g;VB6平均含量最低,仅为0.68μg/g。其余4种维生素类成分VB2、VB5、NA和NAM的平均含量均相对较低。结论:该法简单快速,结果准确、可靠,重复性好,为何首乌中水溶性维生素类成分的深入研究以及何首乌保健产品的开发提供了参考依据。

HPLC-PDA法同时测定功能性饮料中9种水溶性维生素

本文研究了用高效液相色谱(HPLC)—二极管阵列检测器(PDA)扫描结合同时测定9种水溶性维生素VB1、VB2、VB6、VB12、叶酸、烟酸、烟酰胺、泛酸钙和VC的方法,扫描波长是190nm～600nm,提取波长分别是210nm和262nm。结果说明测定相关系数R2为0.9997～1.000。平均回收率为81.4%～108%,RSD为0.41～5.46。可应用于市售功能性饮料中水溶性维生素含量的测定。

脂蟾毒配基PLGA-TPGS纳米粒的体外细胞摄取及毒性研究

目的:研究脂蟾毒配基(RBG)乳酸羟基乙酸共聚物-水溶性维生素E(PLGA-TPGS)纳米粒(RPTN)体外被人肝癌Hep G2细胞、小鼠腹水型高淋巴道转移肿瘤HCa-F细胞的摄取情况和对Hep G2细胞的毒性。方法:制备包载RBG和荧光标记物香豆素6的PLGA-TPGS纳米粒(RCPTN),荧光倒置显微镜观察Hep G2、HCa-F细胞对RCPTN的体外摄取情况。将试验分为阴性对照组、空白PLGA-TPGS纳米粒(EPTN)组、5-氟尿嘧啶溶液(FS)组、RBG溶液(RS)组、RBG/PLGA纳米粒(RPN)组、RPTN组,采用水溶性四氮唑(WST-1)法考察不同终质量浓度(1.25、2.5、5、10、20μg/m L)的FS、RS、RPN和RPTN作用24、48、72 h后Hep G2细胞在450 nm波长下的光密度,计算细胞存活率(CV)和半数抑制浓度(IC_(50))。结果:RCPTN分布在Hep G2、HCa-F细胞的细胞核周围。RPN组和RPTN组细胞的CV随RBG浓度增加而减小,随作用时间延长而减小;与FS组比较,RPTN组细胞的CV均减小(P<0.05或P<0.01)。FS、RS、RPN和RPTN作用于Hep G2细胞的IC_(50)随时间的延长而减小,且IC_(50)的大小依次为RS>FS>RPN>RPTN;RPN和RPTN作用48、72 h的IC_(50)明显小于FS与RS(P<0.05或P<0.01)。结论:RPTN可将RBG带入Hep G2、HCa-F细胞内部,其对Hep G2细胞具有抑制作用,且作用强于RPN、RS和FS。

UPLC-MS/MS同时测定配合饲料中6种水溶性维生素的含量

建立了UPLC-MS/MS同时测定配合饲料中6种水溶性维生素（VB1、VB2、VB3、VB6、VB7、VB12）的方法。饲料样品中水溶性维生素用乙酸铵水溶液（p H=4.0）超声提取,吸取上清液过膜后,供UPLC-MS/MS检测。各待测物用Capcell PAK ADME（2.1 mm I.D×150 mm,3 um）色谱柱进行分离,采用50 mmol乙酸铵-甲醇作流动相,梯度洗脱,串联质谱采用电喷雾离子源正模式,在多反应监测（MRM）模式下对6种水溶性维生素进行测定。结果表明,6种维生素在1~20μg/l范围内线性关系良好,相关系数为0.996~0.999。空白加标浓度为10~1 000μg/kg,这6种水溶性维生素的加标回收率为83.5%~106.4%,相对标准偏差（n=6）为3.5%~9.1%,上述饲料中6种维生素的检出限为0.05~1.97μg/kg,定量下限为0.16~6.5μg/kg。方法快速准确、经济实用,符合法规要求,可满足日常检测的需要。

超高压液相色谱-串联质谱法同时测定人乳中的硫胺素、核黄素、烟酰胺、泛酸和吡哆醛

目的建立一种快速、灵敏的同时测定人乳中多种B族维生素的超高压液相色谱-串联质谱法。方法样品经甲醇沉淀蛋白、乙醚去除非极性杂质,UPLC HSS T3色谱柱分离后采用保留时间和多反应离子检测(MRM)定性、定量,同位素内标校正。结果维生素B1(硫胺素)、维生素B2(核黄素)和维生素B6(吡哆醛)的定量下限(LOQ)均为0.2μg/100 g,维生素B3(烟酰胺)和维生素B5(泛酸)的LOQ均为0.3μg/100 g。标准加入法测定所有被测物的高、中、低三个浓度加标水平的回收率在93.1%~101.1%之间,相对标准偏差(RSD)在2.8%~6.2%之间。5种水溶性维生素在各自浓度范围内线性良好,R2均大于0.998。结论本文建立了同时测定人乳中5种B族水溶性维生素的超高压液相色谱-串联质谱法。方法前处理简单、快速,样品需要量少;采用质谱检测器同位素内标一对一校正定量,检测结果准确、灵敏。方法可以为人乳中维生素含量的检测、调查、研究提供技术支持。

UPLC-MS/MS分析运动饮料中水溶性维生素

建立一种超高效液相色谱-串联质谱分析运动饮料中VB1、VB2、VB5、VB6、VB7、VB9、VB12、烟酸、烟酰胺、VC10种水溶性维生素的方法。样品前处理用10%乙醇沉淀提取后,采用Waters Atalantis T3色谱柱(2.1 mm×150 mm,3μm)分离,以0.1%甲酸-10.0%甲醇为流动相的梯度洗脱模式下,10种水溶性维生素在10.0 ng/mL^1 000.0 ng/mL浓度范围内线性良好,相关系数r2为0.999 3~0.999 9,检出限范围为0.10μg/kg^11.5μg/kg,定量限范围为0.35μg/kg^38.0μg/kg,加标回收率为90.3%~99.5%,相对标准偏差(RSD)为2.0%~3.6%。

功能性饮料中9种水溶性维生素的HPLC-MS-MS同步检测技术

建立高效液相色谱-质谱法测定功能性饮料中9种水溶性维生素的定性定量同步检测方法。样品利用Supelco C18(500 mg)固相萃取柱萃取后,采用Agilent plus C18(100 mm×2.1mm,3.5μm)色谱柱进行分离;流动相为0.1%甲酸溶液和乙腈,梯度洗脱,采用电喷雾离子源多反应监测模式进行检测。结果表明,9种水溶性维生素在10~1 000 ng/mL范围内线性关系良好(R2≥0.997),检出限在0.157~0.836μg/L之间。在加标量为0.05、0.1 mg/L和1 mg/L水平下,待测物的平均回收率在80.11%~115.56%之间,测定结果的相对标准偏差小于10%。

液相色谱-质谱法测定运动饮料中9种水溶性维生素

建立液相色谱–质谱法快速测定运动饮料中维生素B_1、维生素B_2、泛酸、维生素B_6、生物素、叶酸、维生素B_(12)、烟酸、烟酰胺9种水溶性维生素的方法。样品用水超声提取后,采用ACQUITY HSS T3液相色谱柱分离,以0.1%甲酸甲醇–0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,采用质谱多反应监测扫描模式的选择性和特异性定量。9种水溶性维生素的质量浓度与色谱峰面积分别在各自范围内具有良好的线性关系,线性相关系数均大于0.999。当称样量为2.00 g,定容体积为50 mL时,方法检出限为0.025 0～0.062 5μg/g,测定下限为0.10～0.25μg/g。样品的加标回收率为90.0%～102.3%,测定结果的相对标准偏差为0.9%～3.2%(n=7)。该方法简便、快速、准确、灵敏,适用于运动饮料中水溶性维生素的测定。

超高效液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中五种水溶性维生素的含量

建立了蜂蜜中维生素B 1、维生素B 2、维生素B 5(泛酸)、维生素B 6(吡哆醇)和维生素B 7(生物素)同时测定的超高效液相色谱-串联质谱的分析方法。样品经20 mmol/L甲酸铵溶液提取,HLB固相萃取柱净化,采用HSS T3色谱柱分离,以甲醇和20 mmol/L甲酸铵为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源正离子模式,多反应监测进行检测,外标法定量。该方法在5~200 ng/mL范围内线性关系良好(R ^(2)>0.99),5种维生素检出限均为20μg/kg,定量限均为50μg/kg。在空白蜂蜜样品中进行50、250、500μg/kg这3个水平的加标回收实验,方法的平均回收率为90.2%~108.8%,精密度小于15%。该方法简便、高效、准确性好、抗干扰能力强,可用于蜂蜜中5种水溶性维生素的同时检测。

超高效液相色谱-同位素稀释质谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中10种水溶性维生素

目的建立超高效液相色谱-同位素稀释质谱法(ultra performance liquid chromatography-isotope dilution mass spectrometry,UPLC-IDMS)同时检测婴幼儿配方奶粉中10种水溶性维生素(维生素B1、维生素B2、烟酸、烟酰胺、吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺、泛酸、生物素、叶酸)的方法。方法样品用水溶解后,加入同位素内标,用1 mol/L盐酸溶液调节pH至1.7,再用1 mol/L NaOH溶液调节pH至4.5,经Agilent ZORBAX SB-AQ C18色谱柱(100 mm×3.0 mm,1.8μm)分离,正离子模式下以0.2%甲酸水溶液和甲醇-乙腈(4:6,V:V)为流动相,负离子模式下以水和甲醇-乙腈(4:6,V:V)为流动相梯度洗脱,采用电喷雾离子源,分别在正、负离子模式下进行多反应监测模式测定,内标法定量。结果10种水溶性维生素在10~5000ng/mL内具有良好的线性关系,相关系数(r^2)大于0.99,加标回收率为85.7%~115.8%,相对标准偏差为1.82%~9.67%。结论该方法简便、快速、灵敏、准确,可满足婴幼儿配方奶粉中水溶性维生素的检测要求。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿配方乳粉中10种水溶性维生素

建立超高效液相色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿配方乳粉中10种水溶性维生素(烟酸、烟酰胺、VB_2、吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺、泛酸、生物素、叶酸和VB_(12))的方法。样品用水溶解后,先用5 mol/L盐酸溶液调节pH值至1.7,再用5 mol/L NaOH溶液调节pH值至4.5,以沉淀蛋白质,然后加入混合同位素内标溶液,经ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm)分离,以10 mmol/L甲酸铵水溶液(含0.1%甲酸)和10 mmol/L甲酸铵甲醇溶液(含0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,电喷雾电离正离子模式下以多反应监测方式检测,除了吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺采用外标法定量外,其他7种维生素采用内标法定量。结果表明:10种水溶性维生素在质量浓度10~5 000 ng/mL具有良好的线性关系,相关系数(R~2)大于0.99,加标回收率为73.9%~106.0%,相对标准偏差为0.9%~8.0%。该方法简便、快速、灵敏、准确,可满足婴幼儿配方乳粉中10种水溶性维生素的检测要求。