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A Study of the Technique of Western Blot for Diagnosis of Lyme Disease caused by Borrelia afzelii in China 被引量:8
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作者 LIU Zhi Yun HAO Qin +4 位作者 HOU Xue Xia JIANG Yi GENG Zhen WU Yi Mou WAN Kang Lin 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2013年第3期190-200,共11页
Objective To study the technique of Western blot for the diagnosis of Lyme disease caused by Borrelia afzelii in China and to establish the standard criteria by operational procedure. Methods FP1, which is the represe... Objective To study the technique of Western blot for the diagnosis of Lyme disease caused by Borrelia afzelii in China and to establish the standard criteria by operational procedure. Methods FP1, which is the representative strain of B. afzelii in China, was analyzed by SDS-PAGE, electro transfer and irnmunoblotting assays. The molecular weights of the protein bands of FP1 were analyzed by Gel-Pro analysis software. In a study using 451 serum samples (159 patients with Lyme disease and 292 controls), all observed bands were recorded. The accuracy of the WB as a diagnostic test was established by using the ROC curve and Youden index. Results Criteria for a positive diagnosis of Lyme disease were established as at least one band of P83/100, P58, P39, OspB, OspA, P30, P28, OspC, P17, and P14 in the IgG test and at least one band of P83/100, P58, P39, OspA, P30, P28, OspC, P17, and P41 in the IgM test. For IgG criteria, the sensitivity, specificity and Youden index were 69.8%, 98.3%, and 0.681, respectively; for IgM criteria, the sensitivity, specificity and Youden index were 47%, 94.2%, and 0.412, respectively. 展开更多
关键词 Lyme disease western blot Diagnostic method Borrelia afzelii
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2021—2023年贵港市HIV-1感染者的流行特征和检测结果分析
2
作者 韦文翠 郑萍佐 +3 位作者 邵玉兰 甘健燕 张婧萱 黄运轩 《中国医药科学》 2024年第14期126-129,166,共5页
目的分析2021—2023年贵港市人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)抗体阳性者的免疫蛋白印迹试验(WB)带型特征,探讨免疫状况及相关指标在获得性免疫缺陷综合征(AIDS)发展中的作用。方法对2021—2023年1719份经贵港市AIDS确证实验室确证为HIV-1抗... 目的分析2021—2023年贵港市人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)抗体阳性者的免疫蛋白印迹试验(WB)带型特征,探讨免疫状况及相关指标在获得性免疫缺陷综合征(AIDS)发展中的作用。方法对2021—2023年1719份经贵港市AIDS确证实验室确证为HIV-1抗体阳性且在治疗前开展了CD4^(+)T淋巴细胞检测的样本,用SPSS 25.0分析人口学特征和实验室相关检测结果。结果1719例HIV-1抗体阳性以男性、40岁以上、已婚、农民、文化程度较低、医疗机构临床筛查为主;CD4^(+)T淋巴细胞计数与年龄呈负相关,与WB条带数呈正相关(P<0.05)。带型p55、p39、p17检出阳性率在不同免疫程度和病程间差异有统计学意义(P<0.05)。结论农民仍然是贵港市AIDS宣教、检测工作的重点人群,p55、p39和p17可作为疾病发展和免疫情况的一个潜在判别依据。 展开更多
关键词 HIV-1抗体确证阳性 免疫蛋白印迹法 条带 免疫情况
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改良腹主动脉缩窄法建立心肌肥厚模型
3
作者 郝永明 郭磊 +3 位作者 周程辉 裴汉军 李莉 赵哲 《解剖学报》 CAS CSCD 2024年第1期120-124,共5页
目的通过不同方法缩窄大鼠腹主动脉,比较构建心肌肥厚模型,探讨改良腹主动脉缩窄法(AAC)较传统AAC的优势。方法实验大鼠45只,分3组,每组15只。假手术组,在左肾上方分离腹主动脉,不做处理;传统组,经腹正中线切口缩窄腹主动脉直径至0.70 ... 目的通过不同方法缩窄大鼠腹主动脉,比较构建心肌肥厚模型,探讨改良腹主动脉缩窄法(AAC)较传统AAC的优势。方法实验大鼠45只,分3组,每组15只。假手术组,在左肾上方分离腹主动脉,不做处理;传统组,经腹正中线切口缩窄腹主动脉直径至0.70 mm,持续4周;改良组,在左肾上方缩窄腹主动脉直径至0.45 mm,持续1周。术后测量大鼠收缩末期室间隔厚度(IVSs)、收缩末期左室后壁厚度(LVPWs)。取心脏标本测量心脏指数(HW/BW)及左心室指数(LVW/BW);经HE染色、Masson染色的病理切片,测量心肌细胞横截面积、心肌胶原面积及心肌胶原面积分数。Western blotting检测脑钠肽(BNP)表达水平。结果相比假手术组,改良组和传统组大鼠IVSs、LVPWs、心脏指数、左心室指数、心肌细胞横截面积、心肌胶原面积、心肌胶原面积分数和BNP表达水平差异均显著(P<0.05)。在改良组和传统组组间,这些指标差异无统计学意义。结论与传统方法相比,改良腹主动脉缩窄法用时短,稳定,模型均一,易复制,心肌肥厚相关指标水平表型相似,可作为建立压力负荷性心肌肥厚模型更为理想的术式。 展开更多
关键词 心肌肥厚 改良腹主动脉缩窄法 超声心动图 免疫印迹法 大鼠
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白消安对仔猪睾丸曲精小管内增殖分化相关蛋白表达与定位的影响
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作者 任高雅 范小瑞 +2 位作者 张警文 张欣荣 贺俊平 《山西农业科学》 2023年第9期1107-1114,共8页
为了研究白消安对仔猪睾丸曲精小管内增殖分化相关蛋白PCNA、PLZF和GATA4表达与定位的影响,试验选取体外培养仔猪曲精小管为研究对象,分为对照组和试验组,其中试验组各添加5 mg/kg白消安,分别培养1、2、3 d,离心获取曲精小管,采用HE染... 为了研究白消安对仔猪睾丸曲精小管内增殖分化相关蛋白PCNA、PLZF和GATA4表达与定位的影响,试验选取体外培养仔猪曲精小管为研究对象,分为对照组和试验组,其中试验组各添加5 mg/kg白消安,分别培养1、2、3 d,离心获取曲精小管,采用HE染色检测形态变化,采用免疫组化、qRT-PCR和Western blot法分别检测PCNA、PLZF和GATA4表达和定位的变化。HE染色结果显示,各试验组曲精小管内均含有支持细胞和生殖细胞;免疫组织化学结果显示,各试验组的PCNA蛋白定位于生殖细胞和支持细胞的细胞核,白消安作用可导致PCNA染色变深,表达量升高。各试验组GATA4蛋白定位于支持细胞的细胞核,且与对照组相比无明显差异;各试验组的PLZF蛋白定位于生殖细胞的细胞核,与对照组相比,白消安作用2 d时PLZF染色无显著差异,白消安作用1、3 d时PLZF染色变深,表达量升高。qRT-PCR和Western Blot结果显示,与对照组相比,试验组PCNA和GATA4 mRNA及其蛋白表达量均显著升高;白消安作用2 d的PLZF mRNA和蛋白表达量差异不显著,白消安作用1、3 d的PLZF mRN以及蛋白表达量均显著升高。综上所述,PCNA、PLZF和GATA4均表达于体外培养仔猪曲精小管,白消安作用可导致PCNA、PLZF和GATA4在曲精小管内表达水平改变,提示白消安通过影响增殖分化相关蛋白的表达导致猪睾丸精子发生受损。 展开更多
关键词 白消安 仔猪睾丸曲精小管 western blot PCNA GATA4 PLZF
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HIF-1α纳米抗体的制备及其抑制黑素瘤生长的作用
5
作者 李佳敏 贾琼 +3 位作者 秦蓉芬 迟志端 王富明 范瑞文 《山西农业科学》 2023年第12期1435-1441,共7页
缺氧诱导因子1α(Hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)参与低氧微环境相关疾病的发生等过程,具有控制肿瘤生长和发展的功能。黑色素瘤是一种发生于人和动物恶性程度较高的肿瘤。为探明HIF-1α纳米抗体对黑色素瘤的影响,研究利用前期... 缺氧诱导因子1α(Hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)参与低氧微环境相关疾病的发生等过程,具有控制肿瘤生长和发展的功能。黑色素瘤是一种发生于人和动物恶性程度较高的肿瘤。为探明HIF-1α纳米抗体对黑色素瘤的影响,研究利用前期保存的羊驼源黑色素瘤细胞噬菌体文库筛选HIF-1α纳米抗体,经原核表达与纯化后,通过Western Blot和免疫组织化学验证HIF-1α纳米抗体与抗原的结合性;分别通过CCK-8法、划痕试验以及Western Blot法检测其对B16黑素瘤细胞的增殖和迁移能力及其相关分子表达的影响。结果表明,经表达和纯化获得的HIF-1α纳米抗体分子质量约为16 ku,没有跨膜结构,具有亲水性。通过Western Blot和免疫组织化学验证了其具有良好的抗原结合性。在增殖试验和划痕试验中,与对照组相比,HIF-1α纳米抗体抑制了B16细胞的增殖和迁移,下调了靶基因VEGF的表达,并使细胞增殖和迁移相关蛋白Ras、ERK、RAC和RAF的表达量下调。预测HIF-1α纳米抗体进入B16细胞内,与抗原结合,通过下游靶基因VEGF下调RAs、ERK、RAC、RAF的表达,从而对细胞增殖和迁移起抑制作用,可作为黑色素瘤治疗的新靶点。 展开更多
关键词 HIF-1Α 纳米抗体 B16细胞 western blot CCK-8法 细胞增殖 细胞迁移
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基于过程优化探索蛋白印迹技术的实验教学设计
6
作者 葛家祥 尚佳琪 +3 位作者 刘江 邓仕婧 林牒 杨琳 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2023年第1期223-228,共6页
为了提高蛋白印迹实验的成功率及缩短蛋白印迹实验的周期,探索符合实验教学的过程方案,以蛋白印迹法实验操作为模板,以β-actin(48 kDa)为目的蛋白,以GAPDH(36 kDa)为标准蛋白,通过改变实验条件,计算β-actin与GAPDH显影后灰度值的比值... 为了提高蛋白印迹实验的成功率及缩短蛋白印迹实验的周期,探索符合实验教学的过程方案,以蛋白印迹法实验操作为模板,以β-actin(48 kDa)为目的蛋白,以GAPDH(36 kDa)为标准蛋白,通过改变实验条件,计算β-actin与GAPDH显影后灰度值的比值,进行实验过程的优化。并对优化前后实验过程中在制胶、加样、电泳、转膜、封闭以及孵育等环节的成功率、离散度、所用时间等方面进行比较。结果表明,优化后的免疫印迹法能有效地提高成功率、降低离散度、缩短实验时间,β-actin与GAPDH显影后灰度值比值更接近1,达到实验教学的要求。 展开更多
关键词 蛋白印迹 过程优化 方法改进 实验教学
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不同程度间歇性低氧大鼠海马区磷酸化JNK的表达及其意义 被引量:7
7
作者 赵雅宁 王红阳 +3 位作者 郭霞 李琳 韩晓庆 张盼盼 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1135-1140,I0013,共7页
目的:探讨不同程度间歇性低氧大鼠海马区磷酸化JNK表达水平变化,阐明低氧大鼠认知功能障碍的发生机制。方法:96只雄性SD大鼠随机分成对照组和轻、中、重度间歇低氧组,每组24只。对照组大鼠暴露于空气中,不同程度间歇低氧组大鼠分别暴露... 目的:探讨不同程度间歇性低氧大鼠海马区磷酸化JNK表达水平变化,阐明低氧大鼠认知功能障碍的发生机制。方法:96只雄性SD大鼠随机分成对照组和轻、中、重度间歇低氧组,每组24只。对照组大鼠暴露于空气中,不同程度间歇低氧组大鼠分别暴露于不同低氧条件(100、75和50mL.L-1,暴露时间每天8h,持续8周)。采用Western blotting和免疫组织化学法检测大鼠海马区磷酸化JNK蛋白表达水平;采用原位缺口末端标记(TUNEL)法检测各组大鼠凋亡细胞数量;采用Morris水迷宫法检测各组大鼠学习记忆功能。结果:与对照组比较,随低氧时间的延长,轻、中、重度间歇性低氧组大鼠海马区磷酸化JNK阳性细胞数和JNK蛋白表达水平均增加(P<0.05),TUNEL阳性细胞增多(P<0.05);水迷宫法检测,轻、中、重度间歇性低氧组大鼠逃避潜伏期时间延长和穿台次数减少(P<0.05)。与轻、中度间歇性低氧组比较,在重度间歇性低氧组TUNEL阳性细胞数增多,JNK蛋白表达水平和大鼠逃避潜伏期延长,穿台次数减少(P<0.05);轻、中度间歇性低氧组磷酸化JNK表达水平和TUNEL阳性细胞6周时达高峰,8周时降低,但组间各时间点比较差异无统计学意义(P>0.05);重度间歇性低氧组磷酸化JNK表达水平和TUNEL阳性细胞8周时达高峰,组间各时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:不同程度间歇性低氧可导致大鼠认知功能损伤,其机制与激活大鼠海马区JNK、调控神经细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 有丝分裂原活化蛋白激酶 细胞凋亡 免疫组织化学 免疫印迹法 大鼠 SD 间歇性低氧
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红参中精氨酸双糖苷对小鼠的抗疲劳作用 被引量:13
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作者 黄宝亮 丁传波 +4 位作者 王佳奇 郑毅男 刘文丛 张晶 徐晓华 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期897-902,共6页
目的:观察小鼠强迫性游泳诱发的疲劳现象,探讨红参中非皂苷类物质——精氨酸双糖苷(AFG)对小鼠的抗疲劳作用及其初步机制。方法:从红参中分离出AFG提取物,将80只ICR小鼠分为空白对照组,低、中和高剂量(100、200和400mg·kg^(-1))AFG... 目的:观察小鼠强迫性游泳诱发的疲劳现象,探讨红参中非皂苷类物质——精氨酸双糖苷(AFG)对小鼠的抗疲劳作用及其初步机制。方法:从红参中分离出AFG提取物,将80只ICR小鼠分为空白对照组,低、中和高剂量(100、200和400mg·kg^(-1))AFG组,每组20只,连续灌胃给药28d后对小鼠进行强迫性游泳实验,检测各组小鼠体质量,脏器指数,强迫性游泳时间,乳酸(LD)、尿素氮(BUN)、肝糖原(Gly)水平及腓肠肌中PGC-1α基因表达水平。结果:与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠的体质量和脏器指数差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠强迫性游泳时间、Gly水平和PGC-1αmRNA基因表达水平均明显增加(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性;与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠血清中的LD和BUN水平明显降低(P<0.01)。结论:AFG对小鼠有抗疲劳作用,其机制可能与能量代谢有关。 展开更多
关键词 红参 精氨酸双糖苷 力竭性游泳 实时荧光定量聚合酶链反应 免疫印迹法
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电针对非酒精性脂肪肝大鼠血清RBP4水平的影响及其脂质调节作用机制 被引量:7
9
作者 蒋娟 黄学宽 +4 位作者 曾志华 骆言 张超男 万磊 王玲 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期602-606,共5页
目的:探讨电针对高脂高胆固醇造模的非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的脂质调节作用,阐明血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平以及肝 X受体α(LXR-α)和肝脏固醇调节元件结合蛋白-1 c (SREBP-1 c)表达的调节作用机制。方法:44只雌性 S... 目的:探讨电针对高脂高胆固醇造模的非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的脂质调节作用,阐明血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平以及肝 X受体α(LXR-α)和肝脏固醇调节元件结合蛋白-1 c (SREBP-1 c)表达的调节作用机制。方法:44只雌性 SD大鼠适应性喂养7 d,随机分为正常组、模型组、东宝肝泰组和电针组,每组11只。正常组大鼠用标准饲料喂养,其余各组大鼠用高脂高胆固醇饲料喂养。8周后电针组针刺“肝俞”、“脾俞”和“膈俞”进行治疗,电压9 V,电流强度1~3 mA,频率为1.5~2.0 Hz,疏密波,留针15 min,每天1次,连续28 d。检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血清游离脂肪酸(FFA)和肝组织匀浆甘油三酯(TC)、总胆固醇(TG)的变化,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清 RBP4水平,采用 Western blotting法检测大鼠肝组织中 LXR-α和SREBP-1 c蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠的 FBG、FFA、肝组织匀浆中 TC和 TG以及血清 RBP4水平升高(P<0.01), LXR-α和 SREBP-1 c蛋白表达水平也升高(P<0.01);与模型组比较,电针组和东宝肝泰组大鼠 FBG、FFA、肝组织匀浆TC和TG水平下降(P<0.05或P<0.01),血清 RBP4水平下降(P<0.01), LXR-α和 SREBP-1 c蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:电针“肝俞”、“脾俞”、“膈俞”能降低 NAFLD大鼠血清 RBP4水平,调节脂质代谢,改善脂质沉积,对 NAFLD有明显的治疗作用,其机制可能与抑制肝组织中 LXR-α和 SREBP-1 c蛋白表达上调有关。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪肝 电针 视黄醇结合蛋白4 蛋白免疫印迹法 肝X受体Α 固醇调节元件结合蛋白-1C
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鼻咽癌患者放疗前后血清EB病毒特异性DNA酶抗体的变化 被引量:3
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作者 李泽卿 王秋萍 +3 位作者 田勇泉 肖健云 赵素萍 陶正德 《医学研究生学报》 CAS 2001年第5期406-408,共3页
目的:了解鼻咽癌(NPC)患者放疗前后血清EB病毒特异性DNA酶(EBV-DNase)抗体的变化,以评估其预后. 方法:用Western Blot及放射免疫法检测24例NPC患者放疗前后血清EBV-DNase抗体,并用免疫酶法测定血清EB病毒壳抗原IgA(EBVCA-IgA). 结果... 目的:了解鼻咽癌(NPC)患者放疗前后血清EB病毒特异性DNA酶(EBV-DNase)抗体的变化,以评估其预后. 方法:用Western Blot及放射免疫法检测24例NPC患者放疗前后血清EBV-DNase抗体,并用免疫酶法测定血清EB病毒壳抗原IgA(EBVCA-IgA). 结果:①用Western Blot检测NPC患者放疗前后血清EBV-DNaes抗体,放疗前抗体阳性率87.50%(21/24),放疗后为29.16%(7/24),差异显著(P<0.01);②放免法测得两组血清抗酶率(AER)平均值分别为74.02%、31.75%,二者有显著差异(P<0.05);③放疗后的血清EBVCA-IgA平均几何滴度(GMT)为1∶23.4,较放疗前明显降低(P<0.05). 结论:PNC放疗后血清EBV-DNase抗体水平有明显下降,比EBVCA-IgA检测更加准确地反映了病情变化.提示血清EBV-DNase抗体检测对评估NPC预后、疗效监测可能有帮助. 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 EB病毒特异性DNA酶 westernblot 放疗
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乙酰肝素酶和整合素α5β1蛋白在葡萄胎组织中的表达及其临床意义 被引量:3
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作者 王闯 于淑莉 +2 位作者 李桃 呂蓉蓉 齐洁敏 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1361-1366,I0020,共7页
目的:观察乙酰肝素酶(HPA)蛋白和整合素α5β1蛋白在人良、恶性葡萄胎组织中的表达情况,阐明其在良、恶性葡萄胎发生发展中的作用。方法:选择人正常胎盘绒毛组织50例(正常胎盘绒毛组)、良性葡萄胎组织40例(良性葡萄胎组)和恶性葡萄胎组... 目的:观察乙酰肝素酶(HPA)蛋白和整合素α5β1蛋白在人良、恶性葡萄胎组织中的表达情况,阐明其在良、恶性葡萄胎发生发展中的作用。方法:选择人正常胎盘绒毛组织50例(正常胎盘绒毛组)、良性葡萄胎组织40例(良性葡萄胎组)和恶性葡萄胎组织17例(恶性葡萄胎组)。采用免疫组织化学SP法检测各组组织中HPA和整合素α5β1蛋白的阳性表达率和阳性表达强度,Western blotting法分别检测各组组织中HPA和整合素α5β1蛋白表达水平,Spearman等级相关分析法分析良、恶性葡萄胎组织中HPA蛋白和整合素α5β1蛋白表达的相关性。结果:良性葡萄胎组和恶性葡萄胎组组织中HPA和整合素α5β1蛋白阳性表达率、阳性表达强度和表达水平高于正常胎盘绒毛组(P<0.05);恶性葡萄胎组组织中HPA和整合素α5β1蛋白阳性表达率、阳性表达强度和表达水平高于良性葡萄胎组(P<0.05)。在良、恶性葡萄胎组织中HPA蛋白与整合素α5β1蛋白的表达均呈正相关关系(r=0.506,P<0.05;r=0.555,P<0.05)。结论:联合检测HPA和整合素α5β1蛋白的表达可成为良性葡萄胎和恶性葡萄胎鉴别诊断的预测指标。 展开更多
关键词 葡萄胎 免疫组织化学 western blotting法 乙酰肝素酶 整合素Α5Β1
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屋尘螨变应原制剂质量标准的研究 被引量:4
12
作者 石继春 王春娥 +3 位作者 王珊珊 李茂光 王琨 叶强 《中国药事》 CAS 2014年第6期622-625,共4页
目的对屋尘螨变应原制剂质量标准进行修订研究。方法除原注册标准的检测项目外,增加了以ImmunoCAP方法检测氢氧化铝吸附的螨变应原注射液制品的总生物学活性和游离过敏原生物活性测定,以Western-Blot法对其主要成分进行检测。结果10... 目的对屋尘螨变应原制剂质量标准进行修订研究。方法除原注册标准的检测项目外,增加了以ImmunoCAP方法检测氢氧化铝吸附的螨变应原注射液制品的总生物学活性和游离过敏原生物活性测定,以Western-Blot法对其主要成分进行检测。结果10批制品的总特异性IgE测定的均值为20.58kUa·L-1,总过敏原对血清库抑制率均值为67.70%,批间变异系数为1.48%;游离特异性IgE测定的均值为58.24kUa·L-1,游离过敏原对血清库抑制率均值为9.0%,批间变异系数为35.49%。Western Blot结果显示各批制品均与内参有相同的图谱,并在25kD、14kD具有明显的条带。结论新增的的质控方法和质量标准可用于螨变应原注射液产品的常规检定,可以作为考察制品批间一致性的指标。 展开更多
关键词 螨变应原注射液 质量控制 标准修订 总生物学活性 游离过敏原生物活性 全自动体外免 疫检测方法 免疫印迹方法
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金地鼠颊囊癌变过程中p65蛋白的表达研究 被引量:2
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作者 莫珩 高文信 +1 位作者 王莉 冯小东 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期165-167,共3页
目的探讨核转录因子-κB家族成员中的一个重要亚基p6 5在DMBA诱导的金地鼠颊囊鳞状细胞癌发生过程中的表达及意义。方法建立金地鼠颊囊癌变的动物模型。采用Westernblot法检测12组配对金地鼠正常颊粘膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和... 目的探讨核转录因子-κB家族成员中的一个重要亚基p6 5在DMBA诱导的金地鼠颊囊鳞状细胞癌发生过程中的表达及意义。方法建立金地鼠颊囊癌变的动物模型。采用Westernblot法检测12组配对金地鼠正常颊粘膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和鳞状细胞癌组织所提取的核蛋白中p6 5的表达差异。结果在正常颊粘膜和上皮单纯增生组织中未见明显的p6 5表达,且两者相比无显著性差异(P >0 .0 5 )。随着上皮异常增生的出现,p6 5表达增强,较正常组和单纯增生组均有显著性差异(P <0 .0 1)。在鳞状细胞癌组织中,p6 5的表达进一步增强,与正常组和异常增生组相比均有显著性差异(P <0 .0 1)。结论p6 5在金地鼠颊囊鳞状细胞癌发生、发展过程中被激活。P6 5在金地鼠颊囊癌变过程中的表达异常,尤其是在上皮异常增生阶段的表达水平上调,可能是口腔粘膜上皮癌变过程中的一个早期事件。 展开更多
关键词 地鼠 表达水平 癌变过程 颊囊癌 正常 上皮异常增生 鳞状细胞癌 表达差异 核蛋白 粘膜
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大鼠脑组织中P-糖蛋白的免疫印迹检测方法 被引量:2
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作者 王冰 潘彦舒 +2 位作者 华茜 侯金才 李澎涛 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第3期329-331,共3页
目的:确定蛋白免疫印迹检测大鼠脑组织中P-糖蛋白的最佳实验条件。方法:将成年雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组。模型组分八个时间点,采用反复夹闭颈总动脉辅以硝普钠降压的方法制备脑缺血再灌注模型。正常组直接断头取脑分别进... 目的:确定蛋白免疫印迹检测大鼠脑组织中P-糖蛋白的最佳实验条件。方法:将成年雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组。模型组分八个时间点,采用反复夹闭颈总动脉辅以硝普钠降压的方法制备脑缺血再灌注模型。正常组直接断头取脑分别进行组织匀浆和提取微血管,而模型组断头取脑均提取微血管,利用蛋白免疫印迹检测大鼠脑内P-糖蛋白的表达水平。结果:最佳实验条件是:提取微血管,用裂解液C冰上裂解30min,然后40000g离心30min留上清,蛋白定量后在5*上样缓冲液中25℃处理30min。而模型组各时间点P-糖蛋白的表达量随时间的延长逐渐增多。结论:利用提取脑微血管的方法在上述实验条件下进行P-糖蛋白的检测方便、可行,明显优于脑组织匀浆;并且在脑缺血再灌注这种病理状态下脑组织内P-糖蛋白的表达呈现一定的时序特征。 展开更多
关键词 P-糖蛋白 蛋白免疫印迹 检测方法 脑缺血再灌注 微血管
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抗核糖体抗体阳性判断标准的探讨 被引量:1
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作者 彭晓东 王兰兰 +2 位作者 武永康 张瑞薇 刘瑾 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期638-640,共3页
目的 :分析针对分子量为 38kD和 或 15 16 5kD多肽抗原的抗核糖体抗体 (anti ribosomalantibodies)与SLE的关系 ,探讨抗核糖体抗体的阳性判断标准及其在SLE中的检出情况。方法 :收集病人血清 2 6 2例 ,包括SLE115例、RA5 7例、硬皮病 ... 目的 :分析针对分子量为 38kD和 或 15 16 5kD多肽抗原的抗核糖体抗体 (anti ribosomalantibodies)与SLE的关系 ,探讨抗核糖体抗体的阳性判断标准及其在SLE中的检出情况。方法 :收集病人血清 2 6 2例 ,包括SLE115例、RA5 7例、硬皮病 2 0例、MCTD39例及其他免疫性疾病 31例 ,用免疫印迹法 (Western blot)检测其抗ENA抗体谱。结果 :分别以同时出现 38kD和 16 5 15kD蛋白条带以及出现 38kD蛋白条带为判断抗核糖体抗体阳性的标准 ,则该抗体对诊断SLE的敏感性和特异性结果分别为 2 8 7% (33 115 )、96 6 % (14 2 14 7)及 17 4 % (2 0 115 )、97 3% (14 3 14 7) ,两者比较敏感性有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,特异性无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;仅 38kD分子阳性的 14例样本中 ,SLE占大多数 ,显著多于其它疾病 (71 4 %比 2 8 6 % ,P <0 0 5 ) ;38kD分子阳性同时伴抗Sm抗体阳性者多于抗Sm抗体阴性者 ,但无显著性差异 (6 4 3%比 35 7% ,P >0 0 5 )。结论 :抗核糖体抗体 38kD分子与SLE密切相关 ,而与抗Sm抗体相关性不强。以 38kD为主要抗原多肽判断抗核糖体抗体 ,不仅可以提高该抗体的阳性检出率 ,同时也不会降低其对SLE诊断的特异性 ,该判断方法值得推广应用。 展开更多
关键词 抗核糖体抗体 阳性判断标准 免疫印迹法 SLE
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两种方法检测幽门螺旋杆菌抗体及其分型的比较 被引量:6
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作者 杨燕 单万水 +2 位作者 韩红星 李小勇 罗莎莎 《中国医药科学》 2013年第9期122-123,131,共3页
目的为考核南京大渊生物技术工程有限责任公司生产的蛋白芯片法检测幽门螺杆菌(Hp)抗体及其分型试剂的敏感性和特异性,从而判断其在临床诊断中的应用价值。方法临床上采用经SFDA注册的深圳市伯劳特生物制品有限公司的幽门螺杆菌抗体分... 目的为考核南京大渊生物技术工程有限责任公司生产的蛋白芯片法检测幽门螺杆菌(Hp)抗体及其分型试剂的敏感性和特异性,从而判断其在临床诊断中的应用价值。方法临床上采用经SFDA注册的深圳市伯劳特生物制品有限公司的幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒(免疫印迹法)检测幽门螺杆菌抗体及其分型(分为CagA、VacA和Urease),共检测血清476份,检测结果与对比试剂不同的标本用第三方经SFDA认证的试剂进行复核,对于Urease不符合的病例,采用北京康美天鸿生物科技有限公司的幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试剂盒(胶体金法)进行检测,对于CagA和VacA不一致的标本,则采用上海研域生物科技有限公司提供的ELISA试剂盒进行检测。结果南京大渊生物技术工程有限责任公司生产的蛋白芯片法检测幽门螺杆菌抗体及其分型试剂CagA阳性符合率94.5%,阴性符合率96.5%,总符合率95.8%(P>0.05);Urease阳性符合率95.1%,阴性符合率92.7%,总符合率95.4%(P>0.05);VacA阳性符合率91.6%,阴性符合率97.1%,总符合率95.2%(P>0.05);两种方法结果经统计学检验差异无统计学意义。结论经以上结果的分析,本次临床试验的有效病例476例,大渊Hp分型检测试剂盒(蛋白芯片法)与伯劳特幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒(免疫印迹法)的一致率均在90%以上,产品质量达到临床使用要求。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌抗体 分型 蛋白芯片法 免疫印迹法
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黄芪(粗)多糖对麻黄素损伤小鼠肾组织结构和抗氧化物酶活性及Caspase-3蛋白表达的影响 被引量:14
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作者 魏娉婷 李重阳 +2 位作者 俞诗源 孟茹 袁静 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期564-571,共8页
目的探讨黄芪(粗)多糖(APS)对麻黄素致损伤小鼠肾组织结构和抗氧化物酶活性的影响。方法 72只昆明小鼠分为空白对照组、实验对照组和黄芪(粗)多糖1、2组。实验对照组和黄芪(粗)多糖1、2组连续腹腔注射0.2 ml浓度为4.0g/L麻黄素溶液,黄芪... 目的探讨黄芪(粗)多糖(APS)对麻黄素致损伤小鼠肾组织结构和抗氧化物酶活性的影响。方法 72只昆明小鼠分为空白对照组、实验对照组和黄芪(粗)多糖1、2组。实验对照组和黄芪(粗)多糖1、2组连续腹腔注射0.2 ml浓度为4.0g/L麻黄素溶液,黄芪(粗)多糖1、2组在腹腔注射麻黄素溶液1 h后,分别灌胃0.3 ml(12.5 g/L、25g/L)APS溶液,空白对照组注射和灌胃等量的生理盐水。用比色法测定小鼠血浆尿素氮(BUN)及肌酐(Cr)含量、肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的变化,用显微镜观察小鼠肾组织结构的变化,用免疫组织化学法及Western blotting法检测肾组织Caspase-3蛋白表达的变化。结果实验对照组小鼠血浆BUN及Cr含量高于空白对照组,肾组织SOD活性低于空白对照组,MDA含量高于空白对照组(P<0.05或P<0.01),肾小球严重肿胀,肾小囊腔狭窄,肾小管上皮细胞有不同程度肿胀、坏死,肾组织Caspase-3蛋白表达高于空白对照组(P<0.05或P<0.01)。与实验对照组相比,APS组小鼠血浆BUN及Cr含量降低,肾组织SOD活性升高,MDA含量降低(P<0.05或P<0.01),肾小球肿胀显著减轻,肾小囊腔明显可见,肾小管肿胀明显减轻,Caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论 APS能提高小鼠肾功能及肾组织细胞的抗氧化酶活性,能降低肾组织Caspase-3蛋白的表达,可有效减轻麻黄素对小鼠肾组织的损伤,对麻黄素致损伤小鼠有明显的保护效应。 展开更多
关键词 黄芪(粗)多糖 麻黄素 肾功能 组织结构 超氧化物歧化酶 比色法 免疫印迹法 小鼠
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ELISA、胶体硒和免疫印迹试验检测HIV抗体结果分析 被引量:6
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作者 张洪花 史晓燕 +2 位作者 赵国有 汪照国 张西江 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2006年第5期338-340,共3页
目的复检和确认初筛HIV抗体阳性血清,并对比分析试验结果。方法对初筛阳性血清,用胶体硒和ELISA试验复检,任一复检试验阳性的血清再用western blot(WB)试验确认。结果224份初筛阳性血清经复检84份阳性,WB确认61份HIV-1抗体阳性,不确定10... 目的复检和确认初筛HIV抗体阳性血清,并对比分析试验结果。方法对初筛阳性血清,用胶体硒和ELISA试验复检,任一复检试验阳性的血清再用western blot(WB)试验确认。结果224份初筛阳性血清经复检84份阳性,WB确认61份HIV-1抗体阳性,不确定10份,阴性13份。以WB结果为标准,ELISA、胶体硒法的阳性符合率分别为84.72%和82.43%。ELISA的敏感性为100%,特异性为96.84%,胶体硒法的敏感性为100%,特异性为95.03%。阳性、不确定和阴性组血清ELISA平均S/CO分别为20.550,2.244和1.434。ELISA和胶体硒法复检同时阳性,在阳性组、不确定组、阴性组分别为100%(61/61),10%(1/10)和0(0/13)。结论胶体硒和ELISA复检可排除大部分初筛假阳性,但两种复检试验均存在一定的假阳性。3种试验的不符情况仅出现在HIV抗体阴性和不确定组,确定HIV感染依赖于WB确认试验。 展开更多
关键词 HIV抗体 ELISA 胶体硒法 免疫印迹
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乙酰泽泻醇降低胆固醇分子机制研究 被引量:7
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作者 徐飞 陆彩 +3 位作者 吴启南 于慧 陈军 谷巍 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期737-745,共9页
目的从分子水平探讨乙酰泽泻醇降低胆固醇(TC)的作用机理。方法利用试剂盒法测定了调脂中药泽泻主要有效成分23-乙酰泽泻醇B和24-乙酰泽泻醇A对高脂小鼠TC的影响,利用试剂盒法、Western blotting技术结合分子模拟技术研究两者对TC代谢... 目的从分子水平探讨乙酰泽泻醇降低胆固醇(TC)的作用机理。方法利用试剂盒法测定了调脂中药泽泻主要有效成分23-乙酰泽泻醇B和24-乙酰泽泻醇A对高脂小鼠TC的影响,利用试剂盒法、Western blotting技术结合分子模拟技术研究两者对TC代谢关键酶3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-Co A)还原酶作用的分子机理。结果乙酰泽泻醇能显著降低高脂小鼠TC(P<0.01,P<0.05),23-乙酰泽泻醇B作用强度高于24-乙酰泽泻醇A(P<0.05),同时在体内、体外均可剂量依赖性下调HMG-Co A还原酶活性(P<0.01),且23-乙酰泽泻醇B对该酶作用强于24-乙酰泽泻醇A(P<0.05)。两者均未显著下调HMG-Co A还原酶的蛋白表达(P>0.05)。两者与HMG-Co A还原酶结合的关键氨基酸残基可能为Lys691、Asp767、Asn658。结论乙酰泽泻醇降低TC的机制可能是其原型药物通过抑制HMG-Co A还原酶活性来达到,且可能是通过直接竞争性与HMG-Co A还原酶结合抑制其作用,乙酰泽泻醇的舵手基团为其侧链,侧链与母环折叠结合弱,打开结合强。 展开更多
关键词 乙酰泽泻醇 HMG-COA还原酶 试剂盒法 western PLOTTING 分子模拟
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急性暴露尼古丁对未成年大鼠脑内神经元Caspase-3表达及凋亡的影响 被引量:4
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作者 李曼 翟秀岩 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期504-508,共5页
目的研究急性暴露尼古丁(nicotine)对未成年大鼠脑内神经细胞凋亡的影响。方法用免疫组织化学法和Westernblotting法检测急性暴露尼古丁的未成年模型大鼠脑内Caspase-3的表达;用原位末端标记法(TUNEL法)检测凋亡细胞。结果免疫组织化学... 目的研究急性暴露尼古丁(nicotine)对未成年大鼠脑内神经细胞凋亡的影响。方法用免疫组织化学法和Westernblotting法检测急性暴露尼古丁的未成年模型大鼠脑内Caspase-3的表达;用原位末端标记法(TUNEL法)检测凋亡细胞。结果免疫组织化学法检测到大脑皮层、海马齿状回、CA2区和CA3区的Caspase-3表达在实验组明显增高。蛋白质免疫印迹法(Westernblotting)检测到大脑皮层和海马Caspase-3原型及活性片段的表达在实验组明显增高。TUNEL法检测到大脑皮层和海马齿状回的阳性细胞在实验组明显增多。结论急性暴露尼古丁激活未成年大鼠脑内大脑皮层和海马内神经细胞Caspase-3,促进大脑皮层和海马齿状回的神经元凋亡。 展开更多
关键词 Caspase-3 凋亡 尼古丁 海马 免疫组织化学 免疫印迹法 原位末端标记法 大鼠
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