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茯苓酸对小鼠黑色素瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制研究 被引量:1
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作者 赵婷秀 兰钰琪 +2 位作者 金贺 何彦丽 杜标炎 《西部中医药》 2024年第4期28-33,共6页
目的:研究茯苓酸(pachymic acid,PA)对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能机制。方法:采用CCK8法和细胞克隆形成实验检测不同浓度(20、40、80μmol/L)PA对B16细胞增殖的影响;细胞划痕和Transwell小室实验观察PA对B16细... 目的:研究茯苓酸(pachymic acid,PA)对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能机制。方法:采用CCK8法和细胞克隆形成实验检测不同浓度(20、40、80μmol/L)PA对B16细胞增殖的影响;细胞划痕和Transwell小室实验观察PA对B16细胞迁移和侵袭能力的影响;Western Blot法和免疫荧光法检测PA对B16细胞的上皮-间质转化相关蛋白表达的变化。结果:PA可以明显抑制B16细胞增殖,并呈一定的浓度依赖性关系(P<0.01);PA干预24 h后可以显著抑制B16细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01);40μmol/L的PA能上调B16细胞的E-cadherin蛋白表达(P<0.05)并下调Vimentin蛋白的表达(P<0.05);免疫荧光法检测显示40μmol/L的PA可明显降低B16细胞Vimentin蛋白的表达。结论:PA可以抑制B16细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与上调B16细胞的E-cadherin蛋白表达,降低Vimentin蛋白表达,从而抑制B16细胞的上皮-间质转化有关。 展开更多
关键词 茯苓酸 小鼠黑色素瘤 增殖 迁移 侵袭 上皮-间质转化 小鼠 动物实验
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一种蛹虫草萃取物胶囊的免疫功能研究
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作者 张露勇 刘师卜 +2 位作者 朵慧 郑济凡 刘婷 《解放军药学学报》 CAS 2024年第5期460-465,共6页
目的研究蛹虫草萃取物胶囊的免疫功能调节作用。方法SPF级昆明种雌性小鼠共240只,随机分为4个剂量组,开展6个实验。实验组为高、中、低对应1.06、0.35、0.18 g·kg^(-1)剂量,经口给予(相当人体推荐量的30、10、5倍)受试物,溶剂对照... 目的研究蛹虫草萃取物胶囊的免疫功能调节作用。方法SPF级昆明种雌性小鼠共240只,随机分为4个剂量组,开展6个实验。实验组为高、中、低对应1.06、0.35、0.18 g·kg^(-1)剂量,经口给予(相当人体推荐量的30、10、5倍)受试物,溶剂对照组经口给予蒸馏水,依据《保健食品检验与评价技术规范(2003版)》进行免疫功能评价。结果与溶剂对照组比较,迟发型变态反应实验高、中剂量组显著增强(P<0.05);体液免疫血清溶血素测定高、低剂量组显著增强(P<0.05);抗体生成细胞检测中、低剂量组显著增强(P<0.05);单核-巨噬细胞小鼠碳廓清试验高剂量组显著增强(P<0.05)。结论该配方具有免疫功能调节作用,值得深入研究。 展开更多
关键词 蛹虫草 免疫调节 动物实验 小鼠
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白条党参多糖对小鼠肠道黏膜免疫功能的影响
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作者 王炯蓉 张海清 +1 位作者 孙建云 许小红 《西部中医药》 2024年第10期10-14,共5页
目的:探讨白条党参多糖对小鼠肠道黏膜免疫功能的影响及其作用机制。方法:将60只Balb/c小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、模型组及白条党参多糖低剂量组(250 mg/kg)、中剂量组(500 mg/kg)、高剂量组(1000 mg/kg),每组10只。除空白... 目的:探讨白条党参多糖对小鼠肠道黏膜免疫功能的影响及其作用机制。方法:将60只Balb/c小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、模型组及白条党参多糖低剂量组(250 mg/kg)、中剂量组(500 mg/kg)、高剂量组(1000 mg/kg),每组10只。除空白对照组外,其余各组小鼠均腹腔注射环磷酰胺构建免疫抑制模型。造模成功后,空白对照组和模型组灌胃蒸馏水,阳性对照组灌胃四君子汤,白条党参多糖低、中、高剂量组灌胃对应浓度白条党参多糖,均连续干预14天。干预结束后,测定各组小鼠胸腺指数和脾脏指数,计数小肠派氏结(peyer's patches,PPs)数量;免疫组织化学法(immunohis tochemistry,IHC)检测小鼠肠黏膜中CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞亚群及免疫球蛋白A(immunoglobin A,IgA)、白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)、干扰素γ(interferonγ,IFN-γ)阳性细胞表达。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠胸腺指数、脾脏指数、PPs数量及肠黏膜中CD3^(+)、CD4^(+)T细胞合成与肠黏膜IgA、IL-2、IFN-γ表达水平均降低(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组和白条党参多糖低、中剂量组小鼠PPs数量及肠黏膜IgA、IL-2、IFN-γ表达水平和CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞亚群合成均升高(P<0.05);与阳性对照组比较,白条党参多糖低、中剂量组小鼠脾脏指数、IgA、IL-2及CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞亚群合成差异无统计学意义(P>0.05),高剂量组小鼠各指标均降低(P<0.05)。结论:白条党参多糖在一定剂量范围内可增强小鼠肠道黏膜免疫功能,其机制可能与升高小鼠胸腺.脾脏指数及肠黏膜IgA、IL-2、IFN-γ表达水平和CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞亚群合成有关。 展开更多
关键词 肠道黏膜 免疫功能 白条党参多糖 环磷酰胺 动物实验 小鼠
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基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡通路探索小鼠急性肺损伤动态时间模型的建立
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作者 樊懿萱 王心威 +2 位作者 李军梅 易亮 杨志旭 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期423-434,共12页
目的 基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡通路,建立随时间变化的脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠模型,观察不同时间点小鼠肺损伤情况,根据不同时间伤情的变化和焦亡通路相关蛋白的表达,综合筛选出最佳造模时间点,为后续实验奠定动物模型基础。方... 目的 基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡通路,建立随时间变化的脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠模型,观察不同时间点小鼠肺损伤情况,根据不同时间伤情的变化和焦亡通路相关蛋白的表达,综合筛选出最佳造模时间点,为后续实验奠定动物模型基础。方法 54只6~8周龄SPF级雄性BALB/c小鼠,随机分为9组,空白对照组(Con组)和造模时间组(1、3、6、12、18、24、48和72 h组),分别检测体重、肺组织大体、病理观察及半定量评分、肺指数、肺含水量及湿干重比;取肺泡灌洗液检测白细胞计数,TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18及BCA蛋白浓度;使用Western Blot检测肺组织中经典焦亡通路相关NLRP3、pro-Caspase-1、Caspase-1、GSDMD蛋白的表达。结果 根据体重统计,各组均有下降,24及48 h组下降最为明显;通过肺组织大体、病理观察及评分发现,24~72 h肺组织损伤严重,每组与Con组比较均有统计学意义;肺指数、肺含水量及湿干重比在24~72 h明显升高;肺泡灌洗液中白细胞从造模后6 h开始升高,48 h可达峰值,至72 h均维持上升状态;灌洗液中IL-18在24 h开始升高,72 h仍然持续升高;TNF-α、IL-1β、IL-6炎症因子在6 h时均保持最高水平状态,在48 h明显降低;灌洗液中蛋白浓度在24、48及72 h与Con组相比均有明显升高;通过Western Blot检测发现,ALI模型各个时间组焦亡通路蛋白NLRP3、pro-Caspase-1、Caspase-1与GSDMD蛋白表达均有上调,24~72 h组的通路蛋白表达与Con组相比明显增强。结论综合分析不同时间组中各项实验指标、炎症因子及Western Blot中通路蛋白的表达,发现焦亡机制与ALI的发生与进展密切相关,并随时间迁移。从实验结果得知24~48 h肺损伤程度严重,肺损伤相关指标及通路蛋白具有研究意义,可作为造模时间参考。也为后续研究ALI的具体机制及干预靶点提供了模型参考与实验基础。 展开更多
关键词 焦亡 急性肺损伤 小鼠 动态时间模型 动物实验
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雷公藤药蜡对胶原诱导关节炎小鼠模型关节炎症和骨侵蚀的影响
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作者 彭柳莹 冯小可 钱晨 《西部中医药》 2024年第4期8-12,共5页
目的:探讨雷公藤药蜡对胶原诱导的关节炎小鼠(CIA小鼠)模型关节炎症和骨侵蚀的疗效。方法:将24只DBA/1J雄性小鼠随机分为3组,每组8只,分别为正常组、CIA组、雷公藤药蜡CIA组。除正常组外,其余各组采用牛Ⅱ型胶原诱导关节炎小鼠模型;另取... 目的:探讨雷公藤药蜡对胶原诱导的关节炎小鼠(CIA小鼠)模型关节炎症和骨侵蚀的疗效。方法:将24只DBA/1J雄性小鼠随机分为3组,每组8只,分别为正常组、CIA组、雷公藤药蜡CIA组。除正常组外,其余各组采用牛Ⅱ型胶原诱导关节炎小鼠模型;另取DBA/1J雄性小鼠8只行急性皮肤刺激实验。雷公藤药蜡CIA组在第二次造模免疫开始行雷公藤药蜡治疗,观察各组小鼠关节炎肿胀程度、滑膜炎症及局部骨侵蚀情况。结果:皮肤刺激实验表明普通蜡疗及雷公藤药蜡对小鼠皮肤无刺激性;造模期间,CIA组、雷公藤药蜡CIA组逐渐出现关节肿胀,部分小鼠体质量增加不明显甚或稍见下降、近尾根部稍见脱毛、毛色稍暗淡,活动及饮食减少,其中雷公藤药蜡CAI组体质量下降稍小于CIA组,但与正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05);雷公藤药蜡CIA组关节炎评分较CIA组降低(P<0.01);苏木精-伊红染色(HE染色)提示与CIA小鼠踝关节相比,雷公藤药蜡CIA组关节间隙稍见狭窄,关节破坏较CIA组减少,滑膜增生不明显,但关节周围有仍少量炎性细胞浸润。关节组织病理学评分雷公藤药蜡CIA组低于CIA组(P<0.0001)。结论:雷公藤药蜡能够明显减少滑膜组织的增生和炎性细胞的浸润,缓解关节的肿胀程度,减少对骨质的破坏,是一种简单、安全、有效的治疗类风湿关节炎的方法。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 雷公藤 蜡疗 破骨细胞 小鼠 动物实验
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铁死亡相关基因ZFP36可作为糖尿病肾病的诊断标志基因
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作者 危思思 唐小凯 +1 位作者 潘亭玉 雷恩骏 《南昌大学学报(医学版)》 2024年第4期29-34,58,共7页
目的利用机器学习模型筛选出糖尿病肾病(DN)的诊断标志基因。方法从GEO数据库中获取4个与DN相关的转录组数据集,使用R语言对从数据集进行整合,消除批次效应。利用“limma”包筛选出健康对照组和DN组之间的差异表达基因(DEGs)。使用LASS... 目的利用机器学习模型筛选出糖尿病肾病(DN)的诊断标志基因。方法从GEO数据库中获取4个与DN相关的转录组数据集,使用R语言对从数据集进行整合,消除批次效应。利用“limma”包筛选出健康对照组和DN组之间的差异表达基因(DEGs)。使用LASSO回归、随机森林(RF)和支持向量机(SVM)3种机器学习模型分别筛选与DN相关性最显著的特征基因,并利用“Venn”包对不同算法筛选的DEGs与铁死亡相关基因取交集,获得与铁死亡相关的DN诊断标志基因。通过差异分析、ROC曲线分析、体内和体外实验验证诊断标志基因的差异表达和诊断效能。结果共筛选出80个DEGs,机器学习模型筛选的结果和铁死亡相关基因的交集共得出3个诊断标志基因,其中锌指蛋白36(ZFP36)在训练组和验证组中都存在表达差异,且曲线下面积(AUC)>0.7。小鼠DN模型免疫组织化学和细胞蛋白免疫印迹的实验结果均表明,ZFP36在DN组中表达量显著降低(P<0.05)。结论ZFP36对DN具有良好的诊断效能,有望成为与铁死亡相关的DN诊断标志物及治疗靶点。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 锌指蛋白36(ZFP36) 诊断标志物 铁死亡 动物 实验 小鼠
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消脂化纤汤联合骨髓间充质干细胞移植对实验性非酒精性脂肪性肝炎肝硬化小鼠的干预作用及机制
7
作者 杨芳丽 王钰涵 +6 位作者 姚凝 王昕 夏艳青 韩金孝 左小宁 秦英 王馨 《河北中医》 2024年第11期1843-1848,1853,共7页
目的观察消脂化纤汤联合骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)移植对实验性非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝硬化小鼠的干预作用及其可能机制。方法将40只健康SPF级C57BL/6小鼠随机分出8只作为空白组,其余32只小鼠采用蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)饮食联合10%... 目的观察消脂化纤汤联合骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)移植对实验性非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝硬化小鼠的干预作用及其可能机制。方法将40只健康SPF级C57BL/6小鼠随机分出8只作为空白组,其余32只小鼠采用蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)饮食联合10%四氯化碳(CCl4)腹腔注射诱导NASH肝硬化模型。造模成功后随机分为模型组、中药组、干细胞组、联合组,每组8只。其中中药组予消脂化纤汤灌胃,干细胞组行尾静脉注射BM-MSCs移植1次,联合组予消脂化纤汤灌胃的同时,行尾静脉注射BM-MSCs移植1次,空白组和模型组则不予任何干预。干预4周后取材,检测肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)],酶联免疫吸附法测定肝组织维A酸相关孤儿受体γt(RORγt)、白细胞介素23(IL-23)、IL-21、IL-17含量,酶联免疫吸附法测定血清及肝组织肝细胞生长因子(HGF)含量,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定肝脏淋巴细胞RORγt、IL-23、IL-21、IL-17 mRNA表达水平。结果(1)与空白组比较,模型组血清ALT、AST含量均升高,ALB含量降低(P<0.01),与模型组比较,不同干预组各指标均有不同程度改善,以联合组变化最显著(P<0.01)。(2)肝组织IL-23、IL-21、RORγt、IL-17水平比较:与模型组比较,各干预组小鼠肝组织各指标均降低,联合组优于各单纯干预组(P<0.01)。(3)RT-PCR结果显示:与模型组比较,各干预组小鼠肝脏淋巴细胞RORγt、IL-23、IL-21、IL-17 mRNA表达降低,联合组优于各单纯干预组(P<0.05)。(4)各组小鼠血清和肝组织HGF表达水平比较:联合组优于中药组与干细胞组(P<0.01)。结论消脂化纤汤联合BM-MSCs移植可抑制肝脏过度炎症反应,从而促进肝脏细胞再生,其作用机制可能与调节辅助性T细胞17(Th17)免疫学功能相关。 展开更多
关键词 肝硬化 非酒精性脂肪性肝炎 动物模型 小鼠 骨髓间充质干细胞 Th17细胞 动物实验 中药药理实验
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人参皂苷Rg3减轻帕金森病小鼠神经系统氧化应激损伤的作用机制
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作者 杨倩 王灿 《西部中医药》 2024年第9期25-29,共5页
目的:探究人参皂苷Rg3减轻帕金森病(Parkinson′s disease,PD)小鼠神经系统氧化应激损伤的作用机制。方法:将60只C57BL/6小鼠分为对照组、PD组、低剂量干预组和高剂量干预组,每组15只。通过腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-me... 目的:探究人参皂苷Rg3减轻帕金森病(Parkinson′s disease,PD)小鼠神经系统氧化应激损伤的作用机制。方法:将60只C57BL/6小鼠分为对照组、PD组、低剂量干预组和高剂量干预组,每组15只。通过腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy1-4-phenvl-1,2,3,6-tetrahvdropvridine,MPTP)构建PD小鼠模型,建模前3天,低、高剂量干预组小鼠分别腹腔注射3、12 mg/kg人参皂苷Rg3,造模后继续干预28天,对照组和PD组腹腔注射等量生理盐水。各组小鼠腹腔注射第4、8、12天时进行爬杆实验和旋转实验评估运动能力;末次腹腔注射完成后,断颈处死小鼠取脑组织制成冰冻切片,免疫组化分析黑质纹状体中酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)表达水平;酶联免疫吸附法测定黑质纹状体中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)水平;Western blot方法检测黑质纹状体中TH、核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)、醌氧化还原酶1(quinoneoxidoreductase 1,NQO1)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,PD组小鼠爬杆时间延长、旋转停留时间缩短、MDA水平升高,TH阳性率、SOD、GSH-PX活性、TH、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与PD组比较,低、高剂量干预组小鼠爬杆时间缩短,旋转停留时间延长,MDA水平降低,TH阳性率、SOD、GSH-PX活性、TH、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg3可能通过激活黑质纹状体中Nrf2/HO-1/NQO1通路,减轻PD小鼠神经系统氧化应激损伤,而改善其病理状态。 展开更多
关键词 帕金森病 黑质纹状体 氧化应激损伤 人参皂苷RG3 小鼠 动物实验
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花青素调控CD147/MMP-9通路改善哮喘模型小鼠气道炎症的作用研究
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作者 韩勃 左俊丽 乔廉洁 《国际医药卫生导报》 2024年第22期3828-3833,共6页
目的探讨花青素(ACN)调控细胞外基质金属蛋白酶诱导剂(CD147)/基质金属蛋白酶-9(MMP-9)通路改善哮喘模型小鼠气道炎症的作用。方法采用7~8周龄雄性Balb/c小鼠,体重(20±5)g构建哮喘模型,将其分为卵清蛋白(OVA)组(模型组)、L-ACN组、... 目的探讨花青素(ACN)调控细胞外基质金属蛋白酶诱导剂(CD147)/基质金属蛋白酶-9(MMP-9)通路改善哮喘模型小鼠气道炎症的作用。方法采用7~8周龄雄性Balb/c小鼠,体重(20±5)g构建哮喘模型,将其分为卵清蛋白(OVA)组(模型组)、L-ACN组、M-ACN组、H-ACN组[激发免疫前1 h分别灌胃75、150、300 mg(/kg·d)ACN]、ACN+sCD147组[激发免疫前1 h灌胃300 mg(/kg·d)ACN+腹腔注射22 mg/kg可溶性CD147(sCD147)],每组10只。另从饲养的小鼠中随机选取10只小鼠作为对照组。测定各组小鼠的气道高反应性(AHR)和支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞;HE染色、PAS染色观察哮喘小鼠肺组织病理改变;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测哮喘小鼠血清中白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13和干扰素(IFN)-γ含量;Western blot检测哮喘小鼠肺组织中CD147、MMP-9蛋白的表达。采用单因素方差分析、SNK-q检验。结果OVA组管壁及肺泡间质出现严重细胞浸润,PAS阳性上皮细胞明显增加,大量杯状细胞增生和黏液分泌增多,AHR、嗜酸性粒细胞(EOS)、巨噬细胞(TAM)、淋巴细胞(Lym)、中性粒细胞(Neu)、IL-4、IL-5、IL-13、CD147、MMP-9蛋白表达均高于对照组,IFN-γ表达低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。L-ACN组、M-ACN组、H-ACN组肺组织炎症减轻,PAS阳性上皮细胞依次减少,黏液分泌减少,AHR、EOS、TAM、Lym、Neu、IL-4、IL-5、IL-13、CD147、MMP-9蛋白表达均低于OVA组,IFN-γ表达均高于OVA组(均P<0.05)。ACN+sCD147组肺组织炎症进一步加重,PAS阳性上皮细胞增加,黏液分泌增加,AHR、EOS、TAM、Lym、Neu、IL-4、IL-5、IL-13、CD147、MMP-9蛋白表达均高于H-ACN组,IFN-γ表达低于H-ACN组(均P<0.05)。结论ACN可以抑制CD147/MMP-9通路,改善哮喘模型小鼠气道炎症。 展开更多
关键词 花青素 细胞外基质金属蛋白酶诱导剂 基质金属蛋白酶-9 哮喘 气道炎症 小鼠 动物实验
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麦冬须根提取物对大鼠和小鼠清咽作用的功效性评价
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作者 向晓雪 李利民 +2 位作者 黄毅 何礼 金虹 《解放军药学学报》 CAS 2023年第3期219-222,共4页
目的探讨麦冬须根提取物对大鼠、小鼠的清咽功效。方法清咽功效研究包括大鼠棉球植入实验、大鼠足趾肿胀实验及小鼠耳肿胀实验。将SD大鼠及ICR小鼠分别按体质量随机分为麦冬须根提取物低、中、高3个剂量组(0.25、0.5、1.5 g·kg^(-... 目的探讨麦冬须根提取物对大鼠、小鼠的清咽功效。方法清咽功效研究包括大鼠棉球植入实验、大鼠足趾肿胀实验及小鼠耳肿胀实验。将SD大鼠及ICR小鼠分别按体质量随机分为麦冬须根提取物低、中、高3个剂量组(0.25、0.5、1.5 g·kg^(-1))、麦冬须根提取物纯化品组(0.5 g·kg^(-1))和空白对照组,连续给药30 d,每天1次。30 d后检测并计算大鼠肉芽肿净重、足趾肿胀率和小鼠耳廓肿胀率。结果与空白对照组比较,SD大鼠各剂量组的棉球肉芽肿净重显著减轻;麦冬须根提取物高剂量组1、2、4 h足趾肿胀率显著减少,麦冬须根提取物中剂量组2 h足趾肿胀率也显著减少,麦冬须根提取物纯化品组1、2、4 h足趾肿胀率也减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,受试物各剂量组耳廓肿胀率虽然低于空白对照组,但差异无统计学意义。结论麦冬须根提取物可能具有清咽作用。 展开更多
关键词 麦冬须根提取物 清咽功能 大鼠 小鼠 动物实验
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SLC5A8基因敲除后皮下种植结肠癌细胞株的负瘤模型小鼠肿瘤微环境中T淋巴细胞亚群占比观察
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作者 刘雅涵 吴育朔 +2 位作者 赵泽满 蔡思源 靳小石 《山东医药》 CAS 2023年第21期50-53,共4页
目的观察SLC5A8基因敲除后皮下种植结肠癌细胞株MC-38的负瘤模型小鼠肿瘤微环境中T淋巴细胞亚群占比变化,为结肠癌基因治疗提供实验依据。方法应用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建SLC5A8基因敲除型C57BL/6小鼠,记为实验组。将普通C57BL/6... 目的观察SLC5A8基因敲除后皮下种植结肠癌细胞株MC-38的负瘤模型小鼠肿瘤微环境中T淋巴细胞亚群占比变化,为结肠癌基因治疗提供实验依据。方法应用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建SLC5A8基因敲除型C57BL/6小鼠,记为实验组。将普通C57BL/6小鼠记为对照组。将两组小鼠皮下种植结肠癌细胞株MC-38细胞悬液制备MC-38负瘤模型,制备成功后完整剥离肿瘤组织,采用流式细胞法测算各组小鼠结肠肿瘤微环境中T淋巴细胞亚群占比。结果实验组小鼠肿瘤微环境中CD3^(+)T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞占比分别为27.730%±2.861%、50.923%±4.823%、10.205%±1.234%,对照组小鼠肿瘤微环境中CD3^(+)T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞占比分别为40.790%±9.940%、58.355%±3.292%、22.950%±1.948%,两组相比,P均<0.05。结论与普通C57BL/6小鼠相比,SLC5A8基因敲除后皮下种植MC-38细胞的负瘤模型小鼠肿瘤微环境中CD3^(+)T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞占比均下降。 展开更多
关键词 T淋巴细胞亚群 肿瘤微环境 SLC5A8基因 基因敲除技术 CRISPR/Cas9基因编辑技术 负瘤小鼠 动物实验
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前列腺素F2α在小鼠月经发生过程中的作用机制 被引量:1
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作者 田聪贵 徐妹 +1 位作者 潘海波 王小敏 《南昌大学学报(医学版)》 2023年第6期15-20,26,共7页
目的 探究子宫内膜中的前列腺素F2α(PGF2α)在月经发生过程中对子宫内膜修复的作用。方法 建立小鼠月经样模型,在黄体酮(P4)植入物移除时(T0)或移除后8 h(T8)或24 h(T24)通过颈椎脱位处死小鼠,并收集子宫。使用免疫组织化学研究哌莫硝... 目的 探究子宫内膜中的前列腺素F2α(PGF2α)在月经发生过程中对子宫内膜修复的作用。方法 建立小鼠月经样模型,在黄体酮(P4)植入物移除时(T0)或移除后8 h(T8)或24 h(T24)通过颈椎脱位处死小鼠,并收集子宫。使用免疫组织化学研究哌莫硝唑和PGF2α蛋白染色的定位。在P4植入物移除前1 d给予小鼠AL-8810处理,以抑制PGF2与其受体的结合。通过组织学分析对小鼠子宫内膜的破裂/修复阶段进行分级,用qPCR检测PGF2α的下游靶标(VEGF、Glut1)和炎症介质(CXCL1、TNF-α)表达。通过体外细胞培养实验观察来自PGF2α沉默的人内皮细胞条件培养基对人脐带血管内皮细胞(HUVEC)分支形成的影响。结果 T8时,月经样模型小鼠子宫内膜组织中哌莫硝唑染色和PGF2α染色百分比较T0时显著增加(P<0.05),并且T24时哌莫硝唑染色和PGF2α染色百分比较T8时显著减少(P<0.05)。T24时,溶剂对照组子宫内膜修复明显,而AL-8810组与T8时相比差异无统计学意义(P>0.05)。与溶剂对照组相比,AL-8810组小鼠的子宫内膜中VEGF mRNA和Glut1 mRNA在T8时显著降低(P<0.001),并且CXCL1 mRNA和TNF-α mRNA在T24时显著降低(P<0.01)。向HUVEC细胞中添加在缺氧条件下生长的转染sh-PGF2α的上皮细胞条件培养基,其分支数目显著减少(P<0.01)。结论 缺氧和PGF2α在生理性子宫内膜修复中发挥重要作用,促进PGF2α生成可作为月经失调的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 前列腺素F2Α 月经 子宫内膜 缺氧 动物 实验 小鼠
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青蒿琥酯对香烟烟雾诱导气道上皮屏障损伤的防护作用及机制
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作者 宋韵 王斌 《中国药业》 CAS 2023年第20期73-77,共5页
目的探讨青蒿琥酯(ART)对气道上皮屏障损伤的防护作用及其机制。方法细胞实验,将人支气管上皮细胞(HBEC)分为对照组(A组,常规培养),香烟烟雾提取物(CSE)组(B组,2.5%CSE处理24 h),ART低、中、高剂量组(C1组、C2组、C3组,1,10,100μmol/L,... 目的探讨青蒿琥酯(ART)对气道上皮屏障损伤的防护作用及其机制。方法细胞实验,将人支气管上皮细胞(HBEC)分为对照组(A组,常规培养),香烟烟雾提取物(CSE)组(B组,2.5%CSE处理24 h),ART低、中、高剂量组(C1组、C2组、C3组,1,10,100μmol/L,予2.5%CSE刺激前1 h加入ART共孵育),制备上清液,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平,采用流式细胞术检测细胞凋亡水平,通过测定跨上皮细胞电阻(TEER)考察上皮屏障完整性,采用免疫印迹法检测细胞间连接蛋白ZO-1、E-cadherin、表皮生长因子受体(EGFR)的表达水平。动物实验,将25只BALB/c小鼠随机分为对照组(a组,等体积生理盐水),香烟烟雾(CS)组(b组,等体积生理盐水),ART低、中、高剂量组(c_(1)组、c_(2)组、c_(3)组,25,50,100 mg/kg)。使小鼠持续暴露于CS环境(每天2次,每次1 h,持续8周),以建立气道上皮屏障损伤小鼠模型。各组小鼠每日首次CS刺激前1 h腹腔注射相应药物或生理盐水。采用免疫组化染色观察肺组织中细胞连接蛋白ZO-1,E-cadherin和EGFR的表达情况。结果与B组比较,C_(2),C_(3)组细胞TNF-α和IL-6水平显著降低(P<0.05),C_(1),C_(2),C_(3)组细胞凋亡率显著降低(P<0.05),C_(2),C_(3)组细胞TEER值显著升高(P<0.05),ZO-1和E-cadherin蛋白表达水平显著升高,EGFR表达水平显著降低(P<0.05)。与b组比较,c_(3)组小鼠肺组织结构明显改善,ZO-1和E-cadherin蛋白表达水平显著升高,EGFR表达水平显著降低。结论ART能抑制CSE诱导的气道炎性反应和上皮细胞凋亡,改善气道上皮屏障损伤。其作用机制可能与抑制EGFR表达有关。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 香烟烟雾 气道上皮屏障 表皮生长因子受体 小鼠 细胞实验 动物实验
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输注贮存红细胞在炎症条件下对巨噬细胞调节作用的动物实验
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作者 张艳春 晋晶 吴涛 《中国输血杂志》 CAS 2023年第8期676-680,共5页
目的探讨炎症条件的动物输注贮存红细胞对巨噬细胞(BMDMs)的调节作用以及贮存红细胞输注与细菌感染引发炎症反应的关系。方法将6~8周龄成年雄性C57BL/6小鼠[(18~22)g/只]40只随机均分为实验组和实验对照组(对照组),均通过动物尾静脉注... 目的探讨炎症条件的动物输注贮存红细胞对巨噬细胞(BMDMs)的调节作用以及贮存红细胞输注与细菌感染引发炎症反应的关系。方法将6~8周龄成年雄性C57BL/6小鼠[(18~22)g/只]40只随机均分为实验组和实验对照组(对照组),均通过动物尾静脉注射铜绿假单胞菌200μL/只,并使用吸入式麻醉剂异氟烷(1%~3%)麻醉后,通过小鼠眼后静脉丛,实验组输注鼠源贮存悬浮红细胞(>14 d)400μL/只、对照组每只输注等量新鲜悬浮红细胞(贮存<24 h);于输注后2、4、8 h脱就猝死各结束2组小鼠生命5只,摘取鼠肝,体外培养铜绿假单胞菌感染(200μL/只)小鼠的股骨、胫骨骨髓来源的BMDMs,流式细胞术检测BMDMs中分化簇86(CD86)、分化簇197(CD197)[巨噬细胞1型(M1)基因特异性标志物]、分化簇209(CD209)[巨噬细胞2型(M2)基因特异性标记]表达水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测小鼠肝脏F4/80、M1、M2基因表达水平,并使用SPSS17.0统计学软件分析数据。结果实验组与对照组BMDMs中CD86和CD197的表达(%)分别为8688±1.01 vs 79.24±2.65、38.59±3.73 vs 25.95±0.86(P<0.05),CD209(%)为23.88±2.23 vs 21.91±3.58(P>0.05)。输注红细胞后2、4 h,小鼠肝F4/80基因表达水平实验组和对照组分别为1.83±0.11 vs 0.75±0.06、0.46±0.06 vs 0.33±0.06(P<0.05),8 h后分别为0.33±0.03 vs 0.35±0.05(P>0.05);输注红细胞2、4、8 h,小鼠肝M1基因中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因表达水平实验组和对照组分别为3.44±0.20 vs 2.46±0.08、9.25±0.55 vs 2.67±0.12、2.80±0.08 vs 2.39±0.01,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分别为1.69±0.22 vs 1.13±0.03、1.44±0.24 vs 0.96±0.09、1.31±0.05 vs 0.96±0.06,单核细胞趋化蛋白1(MCP1)分别为4.96±0.08 vs 4.28±0.27、4.63±0.04 vs 2.07±0.09、2.28±0.19 vs 1.33±0.03(P<0.05);M2基因中精氨酸1(Arg1)基因表达水平实验组和对照组分别为0.81±0.21 vs 0.82±0.18、0.66±0.11 vs 0.58±0.09、0.39±0.17 vs 0.37±0.15,甘露糖受体C型2(Mrc2)分别为0.99±0.91 vs 0.97±0.08、0.98±0.12 vs 1.02±0.11、0.59±0.19 vs 0.57±0.08,重组蛋白163(CD163)分别为1.75±0.20 vs 1.69±0.18、0.22±0.02 vs 0.21±0.01、0.04±0.01 vs 0.03±0.01(P>0.05)。结论实验小鼠输注贮存红细胞明显促进其肝脏组织巨噬细胞朝向M1表型的极化。 展开更多
关键词 贮存红细胞 新鲜红细胞 红细胞输注 炎症 巨噬细胞 肝组织 小鼠 动物实验
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过表达CTRP9抑制ApoE基因敲除小鼠肝脏脂肪病变
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作者 李向宇 艾乐乐 +5 位作者 刘玉琪 梁国朵 相奥琪 陈晓畅 余琦 关华 《南昌大学学报(医学版)》 2023年第2期1-7,共7页
目的研究C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)对高脂血症模型载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠肝脏脂肪病变形成的影响及机制。方法将30只8周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为对照组与观察组,每组15只,对照组小鼠给予尾静脉注射腺病毒空载... 目的研究C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)对高脂血症模型载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠肝脏脂肪病变形成的影响及机制。方法将30只8周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为对照组与观察组,每组15只,对照组小鼠给予尾静脉注射腺病毒空载绿色荧光蛋白(Ad-GFP),观察组小鼠给予尾静脉注射腺病毒载CTRP9(Ad-CTRP9),高脂高胆固醇饮食(HF/HC)饲喂12周后,采集尾静脉血,处死小鼠收集肝脏组织。采用HE、油红O染色观察CTRP9对ApoE^(-/-)小鼠肝脏脂肪病变形成的影响;采用real time PCR检测CTRP9及脂质合成、炎症相关和线粒体氧化磷酸化相关基因的表达水平;采用western blotting技术检测肝脏组织中CTRP9蛋白表达水平。结果与对照组相比,过表达CTRP9小鼠(观察组)体重和血脂水平差异无统计学意义(P>0.05),CTRP9基因和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),肝脏脂肪病变显著减少(P<0.05),肝脏组织中甘油三酯和总胆固醇水平显著下降(P<0.05),脂质合成(FAS、SCD1、SREBP1c)以及炎症相关基因(MCP-1、MIP1α和IL-1β)表达水平显著下调(P<0.01或P<0.001),而脂质代谢(PPARα、PPARγ、LXRα和LXRβ)及线粒体氧化磷酸化相关基因(CPT1、CPT2、COX4、Cytoc、Acadl和Acadm)表达水平显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论过表达CTRP9能够抑制肝脏组织中脂肪生成以及炎症反应,同时促进肝细胞脂肪酸氧化磷酸化和能量代谢,增加线粒体能量消耗,从而降低肝脏组织中脂质蓄积。 展开更多
关键词 C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白9 肝脏 氧化磷酸化 脂质代谢 载脂蛋白E基因敲除 动物 实验 小鼠
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微小RNA 30c增加有氧运动训练小鼠心室顺应性的研究 被引量:7
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作者 贾明学 张国海 +3 位作者 李艳 董国忠 桑国强 杨宏兴 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2013年第9期70-76,共7页
目的:探讨有氧运动训练对小鼠心脏形态结构、功能及心室肌微小RNAs(micro RNAs,miRNAs)的影响,研究关健miRNA在心脏对运动适应过程中的调节作用。方法:KM雄性小鼠随机分为安静对照组和8周有氧运动训练组,每组各10只。有氧运动训练组小... 目的:探讨有氧运动训练对小鼠心脏形态结构、功能及心室肌微小RNAs(micro RNAs,miRNAs)的影响,研究关健miRNA在心脏对运动适应过程中的调节作用。方法:KM雄性小鼠随机分为安静对照组和8周有氧运动训练组,每组各10只。有氧运动训练组小鼠进行为期8周的无负重有氧训练,每周训练5天,前5周,每天早上固定时间运动1次,后3周每天在早上和晚上固定时间分别运动1次;第1周每次运动时间为30min,随后每周增加10min直至90min。有氧运动训练完成后,首先使用超声心动图检测全部小鼠心脏各项形态学和功能学指标,随后将小鼠颈椎脱位猝死取心肌组织,使用基因芯片扫描两组差异表达的miRNAs,使用实时定量PCR技术验证miRNA-1,-133a,-29和-30c4个关键差异表达的miRNA,同时使用荧光定量PCR和酶联免疫吸附技术检测小鼠心肌组织结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因和蛋白的表达。结果:有氧运动训练明显提高了小鼠心室内径、心壁厚度和功能学指标Ratio E/A,提示运动诱导小鼠心脏生理性肥大,增加了心室顺应性;与安静对照组相比,8周有氧运动训练后小鼠心肌组织中miRNA-1和-133a显著下降(P<0.05),而miRNA-29和-30c则显著升高(P<0.05);同时有氧运动训练组小鼠心肌组织中CTGF基因和蛋白的表达低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);进一步研究发现,有氧运动训练组小鼠心肌组织中miRNA-30c表达量与CTGF蛋白表达量呈负相关(相关系数r=-0.818,P=0.004)。结论:有氧运动训练通过增加心室肌组织中miRNA-30c的表达量,抑制心肌组织中CTGF的表达和浓度,从而提高运动引起心脏生理性肥大过程中心室顺应性,有利于心脏功能的正常有效发挥。 展开更多
关键词 有氧运动 心脏 心室顺应性 微小RNA 动物实验
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氧化苦参碱对病毒性心肌炎小鼠的作用研究 被引量:9
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作者 史艳平 汪琼 +2 位作者 李丹 豆玉凤 李小青 《陕西中医》 2018年第1期14-16,共3页
目的:观察氧化苦参碱对病毒性心肌炎(EMCV)小鼠的作用。方法:60只4周龄Balb/c小鼠完全随机分为空白、对照组及高、低OMT剂量组(n=15),空白组予以腹腔接种病毒原培养液,余组腹腔接种CVB3制成病毒性心肌炎模型,7d后予以高、低剂量组给于OM... 目的:观察氧化苦参碱对病毒性心肌炎(EMCV)小鼠的作用。方法:60只4周龄Balb/c小鼠完全随机分为空白、对照组及高、低OMT剂量组(n=15),空白组予以腹腔接种病毒原培养液,余组腹腔接种CVB3制成病毒性心肌炎模型,7d后予以高、低剂量组给于OMT灌胃10d,期间观察小鼠的生存率,并留取心脏组织,观察病理改变。结果:氧化苦参碱治疗使小鼠的17d生存率明显改善(P<0.05);小鼠心脏/体重比值显著改善(P<0.05);小鼠左心室坏死和炎症细胞浸润面积明显减少(P<0.05)。结论:氧化苦参碱具有明显的减轻心肌炎症和损伤的作用。 展开更多
关键词 心肌炎 氧化苦参碱 动物实验 小鼠
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附子酸性多糖提高免疫低下小鼠免疫功能的实验研究 被引量:37
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作者 苗智慧 刘京生 +4 位作者 王燕凌 董兰凤 韩彩芝 韩艳青 郑晓莉 《河北中医》 2007年第12期1130-1132,共3页
目的观察附子酸性多糖对环磷酰胺所致免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法采用植物化学方法得到附子酸性多糖,以灌胃和腹腔注射2种方式给药,观察免疫低下小鼠的胸腺、脾脏指数,腹腔巨噬细胞吞噬功能,血清溶血素,淋巴细胞转化率,自然杀伤... 目的观察附子酸性多糖对环磷酰胺所致免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法采用植物化学方法得到附子酸性多糖,以灌胃和腹腔注射2种方式给药,观察免疫低下小鼠的胸腺、脾脏指数,腹腔巨噬细胞吞噬功能,血清溶血素,淋巴细胞转化率,自然杀伤细胞活性以及外周血白细胞计数等多项指标,与对照组比较评价附子酸性多糖对免疫低下小鼠细胞和体液免疫功能的影响。结果附子酸性多糖可显著提高正常小鼠和免疫低下小鼠的脾脏和胸腺指数,提高小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬功能和抗体产生能力,促进淋巴细胞增殖,增强自然杀伤细胞活性,并且可以显著提高白细胞数量(P<0.05或P<0.01)。腹腔注射较灌胃给药的效果更为明显(P<0.01)。结论附子酸性多糖可以显著提高免疫低下小鼠体液免疫和细胞免疫功能,并可减轻由于环磷酰胺引起的白细胞降低,具有减轻化疗药的毒副作用。且不同给药途径可影响其疗效。附子酸性多糖具有广阔的开发应用前景。 展开更多
关键词 动物 实验 附子 免疫系统 药物作用 溶血素类 小鼠
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黄芪多糖对TA2小鼠乳腺癌MA-891移植瘤生长及HSP70表达的影响 被引量:51
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作者 谷俊朝 余微波 +2 位作者 王宇 张忠涛 屈翔 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第20期1534-1537,共4页
目的:在复制津白二号小鼠乳腺癌模型的基础上,应用黄芪多糖干预,观测肿瘤生长免疫情况、热休克蛋白(heat-shockprotein,HSP)、血管内皮生长因子(vascularendotheli-algrowthfactor,VEGF)及凋亡相关蛋白Bcl-2的表达情况,探讨热休克蛋白... 目的:在复制津白二号小鼠乳腺癌模型的基础上,应用黄芪多糖干预,观测肿瘤生长免疫情况、热休克蛋白(heat-shockprotein,HSP)、血管内皮生长因子(vascularendotheli-algrowthfactor,VEGF)及凋亡相关蛋白Bcl-2的表达情况,探讨热休克蛋白在乳腺肿瘤病理生理机制中的作用,了解黄芪多糖对乳腺肿瘤生物学行为的影响,从分子生物学水平探索其作用机制。方法:将对数生长期的乳腺癌细胞MA891接种于TA2小鼠皮下,模型建立后随机分为两组,每组10只,生理盐水组(A组)和黄芪多糖组(B组),黄芪多糖组小鼠自接种后第2天,给予成人用量6倍的黄芪多糖粉针剂溶于生理盐水中皮下注射(200mg/kg),而生理盐水组则给予同等量的生理盐水皮下注射,连续治疗23d活杀,MTT法检测小鼠淋巴细胞活性,对比肿瘤瘤质量变化,免疫组化法检测HSP70、VEGF和Bcl-2表达。结果:治疗组小鼠瘤质量有所减轻(抑瘤率为13·56%),但两组相比差异无统计学意义(3·32±1·96vs2·87±1·65,P>0·05),而治疗组淋巴细胞活性显著提高(吸光度OD570值分别为1·941±0·025vs1·985±0·023,P<0·05),肿瘤组织HSP70、VEGF和Bcl-2表达均有显著降低(光密度分别为0·28±0·37vs0·21±0·22,P<0·05;0·31±0·41vs0·23±0·15,P<0·05;0·26±0·11vs0·22±0·16,P<0·05)。结论:黄芪多糖提高了荷瘤小鼠淋巴细胞免疫活性,并抑制了肿瘤血管生成及细胞凋亡相关因子的表达,体现出一定的抑瘤作用,而热休克蛋白70亦参与了乳腺肿瘤的病理生理过程,并与肿瘤血管生成和细胞凋亡存在密切的关系。 展开更多
关键词 黄芪/药理学 多糖类/药理学 乳腺肿瘤 乳房肿瘤 实验性 细胞系 热休克蛋白质70 肿瘤模型 动物 小鼠
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微量水杨酸钠对小鼠抗疲劳作用的量效关系分析 被引量:6
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作者 安玉香 夏书红 +1 位作者 刘金海 王岸新 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2007年第1期72-75,84,共5页
目的:研究微量水杨酸钠对小鼠的抗疲劳作用及其量效关系。方法:将54只昆明种雄性小鼠随机分为6个组,对照组(腹腔注射等体积生理盐水)、实验Ⅰ组(按10mg/kg腹腔注射水杨酸钠)、实验Ⅱ组(按20mg/kg腹腔注射水杨酸钠)、实验Ⅲ组(按30mg/kg... 目的:研究微量水杨酸钠对小鼠的抗疲劳作用及其量效关系。方法:将54只昆明种雄性小鼠随机分为6个组,对照组(腹腔注射等体积生理盐水)、实验Ⅰ组(按10mg/kg腹腔注射水杨酸钠)、实验Ⅱ组(按20mg/kg腹腔注射水杨酸钠)、实验Ⅲ组(按30mg/kg腹腔注射水杨酸钠)、实验Ⅳ组(按40mg/kg腹腔注射水杨酸钠)和实验Ⅴ组(按50mg/kg腹腔注射水杨酸钠),每组9只。记录给药后120min每只小鼠的负重游泳时间,仔细观察小鼠一般游泳状态的变化,测定游泳前、后血中乳酸含量。结果:用药剂量在10mg/kg^40mg/kg之间,水杨酸钠可明显延长负重游泳时间、提高游泳速度、减小乳酸堆积(P<0.01),存在剂量效应关系,当用药剂量增至50mg/kg时,药物效应开始下降,只能延长负重游泳时间(P<0.01)、轻度减小乳酸堆积(P<0.05),不能提高游泳速度。结论:微量水杨酸钠对小鼠运动性疲劳有明显的干预作用,水杨酸钠抗疲劳作用的阈剂量为10mg/kg,最大效应剂量为40mg/kg。 展开更多
关键词 水杨酸钠 抗疲劳 剂量 动物实验
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