养殖大黄鱼“白鳃病”一种新病毒病原的初步研究

运用组织病理学、电镜观察及PCR扩增等方法对近年来网箱养殖大黄鱼暴发的"白鳃病"进行了研究,以探讨引起养殖大黄鱼"白鳃"关联病毒的致病机理。临床解剖观察显示:患"白鳃病"的鱼表现出极度的贫血症状、鳃丝苍白色、血液稀薄且血细胞数显著减少;内脏组织病理观察结果显示:鱼的肝、脾、肾脏内脏组织发生严重的病理变化,组织内红细胞发生明显的退行性变化,同时鱼体的红细胞数量显著减少;采用针对真鲷虹彩病毒(red sea bream iridoviral virus,RSIV)的引物对病鱼内脏组织核酸样本进行PCR检测,结果显示,患"白鳃病"病鱼样本RSIV核酸呈阴性;组织超薄切片电镜观察结果显示:在患"白鳃病"病鱼脾脏和肾脏组织细胞的胞质中可见直径约40~45 nm的病毒粒子。由此初步判断,浙江地区网箱养殖大黄鱼的"白鳃病"不是由RSIV导致,而与一种直径为45~50 nm的病毒有直接关联,本研究为大黄鱼疾病的诊断与防治提供了参考依据。

养殖大黄鱼一种黏孢子虫病的组织病理学及检测方法初探

运用组织病理切片、电镜观察及PCR扩增等方法对2017年在舟山采集到的临床表现"白鳃"症状的发病大黄鱼(Larimichthyscrocea)开展了病原学及快速检测方法的初步研究。组织病理观察显示,患病鱼的肝、脾、肾等内脏组织发生严重的病理变化,尤其是组织内红细胞发生明显的退行性变化,同时血液中红细胞数量显著减少。在病鱼组织的电镜超薄切片中可观察到直径约300～600 nm的孢子虫样结构。提取病鱼内脏组织总基因组DNA样本,采用1对针对寄生原虫的通用引物进行SSUrDNA的PCR扩增,最终获得大小为1471bp的特异性条带,经测序比对发现,该条带与GenBank中1种黏孢子虫Sinuolinea sp.的序列同源性最高,达89%。根据获得的SSU rDNA序列,建立了适用于该病临床检测的巢式PCR方法,最小灵敏度可达0.5 pg。研究表明,引起此次网箱养殖大黄鱼"白鳃"症状并导致鱼类大量死亡的是一类寄生性黏孢子虫。

短盖巨脂鲤鳃、伪鳃和鳔胚后发育学研究

本文应用切片和显微技术,对短盖巨脂鲤鳃、伪鳃和鳔的胚后发育的组织形态学进行了研究.短盖巨脂鲤鳃的胚后发育可分为三个阶段:第一阶段(0～1日龄),原基期,鳃原基形成但未分化.第二阶段(2～10日龄),鳃结构发育、分化.第三阶段(11日龄之后),鳃的生长完善期.伪鳃由口腔壁分化出来,胚后发育分为三个阶段:第一阶段(0～2日龄),原基形成期.第二阶段(3～7日龄),发育分化期.第三阶段(8～21日龄),结构完善期.鳔的胚后发育可分成四个阶段:第一阶段(0～1日龄),原基形成期.第二阶段(2～5日龄),结构分化期.第三阶段(6～11日龄),充气期.第四阶段(13 天以后),完善与生长期.

正常与患白鳃病大黄鱼的血细胞比较研究

比较了正常与患白鳃病大黄鱼血细胞类型、大小、数量和形态变化等指标的差异。正常大黄鱼的血细胞可分为红细胞、小淋巴细胞、大淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及血栓细胞7种类型,红细胞数为(2.44±0.22)×106个/mm3,白细胞数为(9.89±1.51)×104个/mm3,小淋巴细胞、大淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及血栓细胞在白细胞中所占的比例分别为(27.51±9.59)%、(7.03±5.24)%、(4.40±3.99)%、(19.27±15.34)%、(2.87±2.20)%和(38.91±11.56)%,血红蛋白含量为(6.68±1.38)g/100mL。患白鳃病大黄鱼的红细胞数及血红蛋白含量显著降低(P<0.01),小淋巴细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和血栓细胞所占比例明显减少(P<0.01),而大淋巴细胞和单核细胞所占比例明显增加(P<0.01)。