养殖大黄鱼“白鳃病”一种新病毒病原的初步研究

运用组织病理学、电镜观察及PCR扩增等方法对近年来网箱养殖大黄鱼暴发的"白鳃病"进行了研究,以探讨引起养殖大黄鱼"白鳃"关联病毒的致病机理。临床解剖观察显示:患"白鳃病"的鱼表现出极度的贫血症状、鳃丝苍白色、血液稀薄且血细胞数显著减少;内脏组织病理观察结果显示:鱼的肝、脾、肾脏内脏组织发生严重的病理变化,组织内红细胞发生明显的退行性变化,同时鱼体的红细胞数量显著减少;采用针对真鲷虹彩病毒(red sea bream iridoviral virus,RSIV)的引物对病鱼内脏组织核酸样本进行PCR检测,结果显示,患"白鳃病"病鱼样本RSIV核酸呈阴性;组织超薄切片电镜观察结果显示:在患"白鳃病"病鱼脾脏和肾脏组织细胞的胞质中可见直径约40~45 nm的病毒粒子。由此初步判断,浙江地区网箱养殖大黄鱼的"白鳃病"不是由RSIV导致,而与一种直径为45~50 nm的病毒有直接关联,本研究为大黄鱼疾病的诊断与防治提供了参考依据。

养殖大黄鱼一种黏孢子虫病的组织病理学及检测方法初探

运用组织病理切片、电镜观察及PCR扩增等方法对2017年在舟山采集到的临床表现"白鳃"症状的发病大黄鱼(Larimichthyscrocea)开展了病原学及快速检测方法的初步研究。组织病理观察显示,患病鱼的肝、脾、肾等内脏组织发生严重的病理变化,尤其是组织内红细胞发生明显的退行性变化,同时血液中红细胞数量显著减少。在病鱼组织的电镜超薄切片中可观察到直径约300～600 nm的孢子虫样结构。提取病鱼内脏组织总基因组DNA样本,采用1对针对寄生原虫的通用引物进行SSUrDNA的PCR扩增,最终获得大小为1471bp的特异性条带,经测序比对发现,该条带与GenBank中1种黏孢子虫Sinuolinea sp.的序列同源性最高,达89%。根据获得的SSU rDNA序列,建立了适用于该病临床检测的巢式PCR方法,最小灵敏度可达0.5 pg。研究表明,引起此次网箱养殖大黄鱼"白鳃"症状并导致鱼类大量死亡的是一类寄生性黏孢子虫。

短盖巨脂鲤鳃、伪鳃和鳔胚后发育学研究

本文应用切片和显微技术,对短盖巨脂鲤鳃、伪鳃和鳔的胚后发育的组织形态学进行了研究.短盖巨脂鲤鳃的胚后发育可分为三个阶段:第一阶段(0～1日龄),原基期,鳃原基形成但未分化.第二阶段(2～10日龄),鳃结构发育、分化.第三阶段(11日龄之后),鳃的生长完善期.伪鳃由口腔壁分化出来,胚后发育分为三个阶段:第一阶段(0～2日龄),原基形成期.第二阶段(3～7日龄),发育分化期.第三阶段(8～21日龄),结构完善期.鳔的胚后发育可分成四个阶段:第一阶段(0～1日龄),原基形成期.第二阶段(2～5日龄),结构分化期.第三阶段(6～11日龄),充气期.第四阶段(13 天以后),完善与生长期.

正常与患白鳃病大黄鱼的血细胞比较研究

比较了正常与患白鳃病大黄鱼血细胞类型、大小、数量和形态变化等指标的差异。正常大黄鱼的血细胞可分为红细胞、小淋巴细胞、大淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及血栓细胞7种类型,红细胞数为(2.44±0.22)×106个/mm3,白细胞数为(9.89±1.51)×104个/mm3,小淋巴细胞、大淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及血栓细胞在白细胞中所占的比例分别为(27.51±9.59)%、(7.03±5.24)%、(4.40±3.99)%、(19.27±15.34)%、(2.87±2.20)%和(38.91±11.56)%,血红蛋白含量为(6.68±1.38)g/100mL。患白鳃病大黄鱼的红细胞数及血红蛋白含量显著降低(P<0.01),小淋巴细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和血栓细胞所占比例明显减少(P<0.01),而大淋巴细胞和单核细胞所占比例明显增加(P<0.01)。

褐篮子鱼鳃寄生多唇虫病的病原鉴定及其病理观察

2019年10—11月,福建省海水鱼类苗种繁育科研中试基地池塘养殖的褐篮子鱼(Siganus fuscessens)暴发以鳃苍白为主要症状的马氏多唇虫病。濒死病鱼体表外观完好,缓游或浮于水面,有时间歇性快速游动,最后身体失衡死亡。临床解剖显示:病鱼鳃丝发白,镜检可见鳃丝上有大量寄生虫,鳃、肝、心脏、脾、肾和肌肉呈现出贫血状态。组织病理观察发现:病鱼的鳃、肝、心脏、脾、肾脏等组织器官均发生病理变化,组织器官内几乎无血红细胞。经形态学观察,虫体呈近纺锤形披针状,具有2排微杯型吸铗的高度特化后吸器,交接器为圆锥形几丁质管结构。基于虫体形态特征和28S rDNA序列分析,结果显示病原虫体为马氏多唇虫相似种(Polylabris cf.mamaevi)。结合该病的流行病学调查、临床解剖、病原形态学观察、28S rDNA序列分析和组织病理观察,确定此次褐篮子鱼暴发的"白鳃病"由马氏多唇虫相似种大量寄生感染引起的。本研究为褐篮子鱼养殖过程中出现的疾病诊断与防治提供了参考依据。