1个北方汉族家族性免疫球蛋白A肾病的家系分析和致病基因诊断

目的研究1个家族性免疫球蛋白A(IgA)肾病的家系,并分析其致病基因。方法调查1个家族性IgA肾病的家系,收集该家系成员的外周血提取基因组DNA,通过全外显子组测序寻找致病基因。结果该家系共有5代26名成员,其中有12名成员临床表现为肾脏受累,6名成员临床表现为蛋白尿,3名成员临床表现为镜下血尿,3名成员肾脏病理活检诊断为系膜增生性IgA肾病。家系先证者基因组DNA行全外显子组测序发现INF2基因c.653G>A(p.R218Q)突变。结论此家系存在家族性IgA肾病,全外显子组测序发现INF2基因c.653G>A(p.R218Q)突变,该突变为致病突变。

人源抗H7N9血凝素中和抗体IgG的制备及鉴定

目的 :将从全人源Fab噬菌体抗体库筛选获得的抗H7N9血凝素Fab抗体基因进行基因工程改造,以表达全分子抗H7N9血凝素中和抗体Ig G,并验证其对H7N9型禽流感病毒的中和活性。方法:用H7N9型禽流感病毒血凝素筛选全人源Fab噬菌体抗体库,构建全分子Ig G抗体重、轻链表达载体,共转染293 Free Style(293F)细胞,表达并纯化Ig G抗体。应用ELISA及Western blot实验检测抗体免疫学活性,微量中和实验及鸡胚预防保护实验检测其中和活性,血凝抑制试验判断其结合血凝素亚基。结果:成功筛选出1株全人源抗H7N9血凝素Fab抗体基因并构建Ig G真核表达载体。获得的全分子Ig G抗体重、轻链序列正确,并可特异性结合H7N9血凝素。微量中和实验证明其对H7N9型禽流感病毒有良好中和活性,中和滴度为15.6μg/m L。鸡胚预防保护实验显示抗体用量为200μg时可达100%保护率。血凝抑制试验表明其结合血凝素HA2亚基。结论:制备的重组全人源全分子抗H7N9血凝素Ig G抗体可特异性识别H7N9型禽流感病毒血凝素,对H7N9型禽流病毒有显著的中和作用,为进一步研发用于禽流感防治的抗体药物奠定基础。

死后血浆和溶血样本中IgE的稳定性

目的探究死后血浆和溶血样本中免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)经过不同保存条件及冻融处理后的稳定性。方法选取39例死后48h内非冷冻尸体的心血样本,其中20例取血浆样本,19例取全血制成溶血样本。将样本置于-20℃、4℃、25℃条件下保存28d及-80℃条件下保存1年以探究IgE在不同保存条件下的稳定性。利用5次反复冻融处理样本探究死后血浆及溶血样本IgE的冻融稳定性。应用电化学发光法检测处理前后血浆和溶血样本中IgE的浓度。结果血浆样本中IgE在-20℃、4℃、25℃3种保存条件下的降解率接近,28d后降解率均值在15%左右,相同条件下溶血样本中IgE降解速度快于血浆(P<0.05),并且在25℃条件下降解率高于另外两种(P<0.05)。血浆样本于-80℃冷冻保存1年后的浓度与冷冻前相比差异无统计学意义(P>0.05),而溶血样本在-80℃冷冻保存1年后浓度有所降低(P<0.05)。死后血浆和溶血样本在反复冻融5次后检测结果与冻融前相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论死后血浆及溶血样本中IgE具有良好的冻融稳定性。IgE在死后血浆样本中的稳定性优于溶血样本,因此在实际案例中建议及早分离血浆保存待测。

抗大肠杆菌免疫卵黄球蛋白对大鼠放射性肠炎的防护作用

目的 观察抗大肠杆菌卵黄免疫球蛋白 (IgY)对大鼠放射性肠炎的防护作用。方法 将 30只大鼠随机分为正常对照组 (A组 )、照射对照组 (B组 )和IgY保护组 (C组 )。大鼠全腹照射10 0 0cGy。C组自照射前 1d开始灌服IgY。 4d后处死大鼠 ,观察肠道细菌移位情况、血中内毒素水平及小肠粘膜病理形态学改变。结果 A组无细菌移位 ,B组细菌移位最为明显 (96 7% ) ,C组细菌移位 (13 3% )远不及B组明显 ;A组内毒素含量极低 (0 0 0 1EU ml) ,B组内毒素含量明显升高 (0 82 9EU ml) ,C组内毒素含量 (0 2 4 9EU ml)明显低于B组 ;A组肠粘膜正常 ,B组肠粘膜绒毛水肿 ,炎性细胞浸润 ,部分上皮细胞脱落 ,C组绒毛轻度水肿 ,未见明显细胞脱落。结论 全腹照射能明显损伤小肠粘膜 ,引起细菌移位和内毒素血症 ,抗大肠杆菌IgY能明显减轻射线对小肠粘膜的损伤。

高原地区不同民族的口腔唾液研究

本文对居住海拔3700M175例藏族和2480M210例土族2261M217例汉族居民的口腔全唾液的pH值、免疫球蛋白、补体三项指标的含量测定进而对比三地无龋病牙周病者与龋病、牙周病患者pH、免疫球蛋白、补体含量的高低与发病的关系。结果表明三项指标的总体含量水平泽库高于互助、西宁，提示藏族的免疫防御功能比土族、汉族增强。其中分泌性免疫球蛋白A（SIgA）的水平，藏族低于土族、汉族；三地龋病、牙周病者的SIgA水平低于三地各自的无龋病、牙周病者的SIgA水平。研究表明SIgA的减少是龋病、牙周病发病率低的原因。