weaver基因对CAD细胞生物学功能的影响

目的 :评估weaver基因对神经细胞生长发育、蛋白质表达和生命力的影响。方法 :将一类酪氨酸脱氢酶阳性的神经细胞 (一种中枢神经源细胞 ) ,又称CAD (Cath .a -differentiated ,是Cath .a细胞的一种突变型 ,Cath .a是一种转基因大鼠的肿瘤细胞 )细胞 ,引入由DNA编码的野生型和突变型离子通道。采用DNA克隆、免疫组化、Westernblot等技术进行检测。用不同浓度 (0 2 5mg/L ,0 5mg/L ,1 0mg/L)的Girk2cDNA(对照组 )和wvGirk2cDNA(实验组 )质粒转染CAD细胞后 ,观察两组基因对转染CAD细胞的数目、蛋白质合成、神经突生长等指标的影响 ;并且观察MK80 1和Kir2 3对wvGirk2的抑制作用。结果 :发现高浓度wvGirk2转染的CAD细胞存活数目减少到约6 0 %的单纯Girk2转染细胞数目 ;低浓度wvGirk2没有引起细胞死亡但是减少转染基因的蛋白质产物 ,且神经轴突生长也受wvGirk2影响 ;MK80 1和Kir2 3对wvGirk2有抑制作用。结论 :wvGirk2基因在weaver动物中有一种特殊功能 ,可阻断wvGirk2通道防止细胞死亡。