食品中大肠杆菌O157的PCR检测与wzy基因的测序分析

大肠杆菌O157:H7和O157:H-是重要食品致病菌。从食品中分离得到一株O157:H7菌株EC5。将该菌株PCR扩增wzy基因全长并克隆测序。结果表明,wzy基因序列与大肠杆菌O157:H7标准株EDL933有100%同源性。从NCBIGenBank数据库下载O157菌株wzy基因序列,针对保守序列设计引物并扩增O157菌株和非O157菌株。PCR结果表明,wzy基因特异性强,可作为检测O157菌株的标志基因。本研究为开发大肠杆菌O157的分子检测技术提供新的研究思路。

影响WZY卧式振动离心机脱水效果的因素分析

介绍了WZY卧式振动离心机的工作原理,重点分析了生产实践中影响WZY卧式振动离心机脱水效果的几个主要因素,指出优化设计离心机结构、选择适宜的参数、合理调节入料和振幅的大小能够有效地提高离心机的脱水效果。

WZY-1型钻参仪的研究与应用

分析了目前钻参仪未能普遍推广应用的原因。介绍了WZY - 1型钻参仪的总体构成、测试参数。

WZY型微波治疗仪与LEEP刀治疗宫颈糜烂的临床疗效观察

目的通过观察微波治疗和LEEP治疗宫颈糜烂的临床疗效,寻求一种治疗宫颈糜烂的更好的方法。方法选取来我院门诊就诊的患者100例,随机分为2组(微波组和LEEP组),每组各50例,分别进行微波治疗和LEEP治疗,分析其治疗效果。结果单纯性宫颈糜烂,微波手术治疗总有效率为100%,LEEP治疗总有效率为100%;颗粒性宫颈糜烂:微波治疗总有效率为76.5%,LEEP治疗总有效率为90%;乳头状宫颈糜烂:微波治疗总有效率为71.4%,LEEP治疗总有效率为100%。结论单纯性宫颈糜烂两种治疗方式效果均好,对颗粒型和乳头状宫颈糜烂LEEP治疗效果优于微波。

基于振动测试分析系统的WZY卧式振动离心机数据采集

简述了大型振动设备振动测试及模态分析系统的组成和设备安装,详细分析了对WZY卧式振动离心机进行数据采集时的测点布置和参数设置,并总结出了数据采集过程中的注意事项。

小麦WZY2基因RNA干扰表达载体的构建及遗传转化

【目的】利用基因枪将WZY2基因RNA干扰表达载体pAHC-WZY2-Ri导入"郑引1号"小麦,获得WZY2基因表达缺失型小麦,为深入分析WZY2基因功能奠定基础。【方法】以植物表达载体pAHC25为基础,构建含有反向重复序列的RNA干扰表达载体pAHC-WZY2-Ri,利用基因枪将其转入"郑引1号"小麦幼胚愈伤组织中,经过筛选、PCR检测得到阳性植株。【结果】从转化的1 500个愈伤组织中获得27株再生植株。利用PCR对再生植株进行检测,获得阳性植株3株,转化率为0.2%。【结论】构建了WZY2基因的RNA干扰表达载体,成功地将WZY2基因RNA干扰表达载体导入"郑引1号"小麦,获得阳性植株。

荚膜聚合酶Wzy对猪链球菌Chz型致病力的影响

[目的]本文旨在研究荚膜聚合酶Wzy对猪链球菌Chz型致病力的影响。[方法]通过基因组可视化软件(ACT)和比较基因组学方法,探究猪链球菌荚膜(CPS)基因簇的遗传多样性;构建cpsB及wzy基因缺失株,利用透射电子显微镜(TEM)研究Wzy与荚膜合成的关系;采用细胞试验及动物试验等验证荚膜聚合酶Wzy对细菌致病力的影响。[结果]与野生株相比,wzy基因缺失株荚膜样物质减少并展现出更强的生物被膜形成能力。细胞试验显示,缺失株具有更强的小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)黏附能力和侵袭能力,但对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)的吞噬作用更敏感。BALB/c小鼠攻毒试验结果表明,缺失株的致病力显著减弱,在小鼠体内的定殖和扩散能力也明显下降。[结论]荚膜聚合酶Wzy降低猪链球菌的致病力。

猪链球菌wzy基因与血清型别的相关性分析

目的分析wzy基因序列与血清分型相关性,评价基于wzy基因的基因组水平血清分型的可行性。方法建立了33个已知血清型(1～31,33与1/2型)及21种新型cps型别(NCL1～20与Chz型)的wzy基因的氨基酸序列数据库,用来检索公开发表的767个有传统血清分型结果的基因组序列,以确定它们的分子血清型别,并与其用传统血清分型结果进行比对。结果 767个基因组中,有765个基因组含有1种且仅含有1种数据库中的wzy基因,剩余的2个基因组携带数据库中没有的wzy基因,本研究中将其cps型别命名为NCL21。94.13%(722/767)基因组的分子血清型别与其传统血清分型结果一致。在二者结果有差异的基因组中,其cps基因簇的核苷酸序列与其传统血清分型结果相应的血清型标准菌株cps序列有明显的差异。结论基因组水平检测血清型特异性的wzy基因的分型策略,显著优于传统的血清分型方法。

检测食品中大肠杆菌O157的多重荧光PCR方法的建立

针对大肠杆菌O157的志贺毒素编码基因stx1、stx2和O157血清型的标志基因wzy的保守序列,设计特异性的引物和探针,反复优化反应体系和条件,建立了一种新的多重荧光PCR检验方法。结果显示,该方法灵敏度高,stx1、stx2的扩增效率分别为96.4%和94.6%,实际样品检测时stx1、stx2的最低检出限分别为4.2×102cfu/mL和4.2×103cfu/mL。该方法特异性强,扩增结果与各参考菌株基因型一致,能良好的区分出O157菌株和非O157型大肠杆菌。该方法能用于食品样品的检测和流行病学分离株的快速鉴定。

鉴定7种新型猪链球菌荚膜多糖基因型多重PCR方法的建立(英文)

目的建立针对发现的7种新型别荚膜多糖基因簇(cps)的多重PCR(multiplex PCR)鉴定方法。方法选择wzy作为靶基因,先以单重PCR筛选每对引物的扩增效率与特异性,再将筛选出的各对引物组建多重PCR,验证其特异性及敏感性后,用其检测91株血清学不可分型的猪链球菌分离株。结果所建立的多重PCR体系的敏感性为每个反应最低可检测到100pg DNA。在检测的91株菌中,71株可用本研究建立的多重PCR法鉴定,属于新的cps型别。结论成功建立了特异的可鉴定7种新发现cps型别的多重PCR方法,并且成功应用此法鉴定了大部分血清学不可分型的猪链球菌分离菌株。

多重PCR法检测食品中大肠杆菌O157

以大肠杆菌O157的stx1、stx2、wzy基因为靶基因,建立了一种新的多重PCR检测方法。PCR扩增结果与各参考菌株基因型一致。PCR结果表明,wzy基因特异性强,可作为检测O157菌株的标志基因,且为开发大肠杆菌O157的分子检测技术提供新的研究思路。

食品中产志贺毒素大肠杆菌的多重PCR检测

针对产志贺毒素大肠杆菌的stx2、wzy、hlyA的保守序列,设计特异性的引物,建立一种新的多重PCR检验方法。结果显示,该方法特异性强,扩增结果与各参考菌株基因型一致,并能良好的区分出O157菌株和非O157型产志贺毒素大肠杆菌。该方法能用于食品样品的检测和流行病学分离株的快速鉴定。

细菌多糖的生物合成机制

近些年来,细菌多糖因其重要的医学价值和工业用途引起了人们的广泛关注。随着细菌基因组的不断测序,众多与细菌多糖合成相关的基因簇被发现。不同多糖合成基因簇的比对分析结果表明,尽管自然界中多糖的结构复杂多变,但是它们的合成机制却是相对单一的。本文就当前国际国内不同细菌多糖的合成机制,以及多糖合成途径中相关糖基转移酶和聚合酶的研究进展进行了论述。