Different Solid-state Fermentation technology of Functional Red yeast rice has an effect on the morphological change of MonacolinK

Different technical conditions in the process of solid-state fermentation of red yeast rice has a certain impact on the production of acid-form and lactone form Monacolin K.When cultured in the loose rice medium,the acid form Monacolin K accounts for 50%-60%;while the acid form Monacolin K accounts for 80%-90%cultured in the consolidated rice medium.And we also found that the proportion of the acid form and lactone form Monacolin K will decrease with the increase of fermentation time.

金耳类酵母型菌株分离与高产胞外多糖培养基优化

为获得纯金耳多糖,采用担孢子弹射法分离获得金耳类酵母型菌株(EF145),通过ITS序列测定对分离的菌株进行鉴定,测定金耳多糖的抗氧化性,通过正交试验优化高产胞外多糖培养基配方。结果显示:EF145菌株的菌体呈卵圆形,大小约为(2.5~4.0)μm×(2.0~4.0)μm,出芽增殖;菌落乳白色、表面凸起、光滑、湿润;其ITS序列与金耳子实体小条带一致,经Blast比对确定该菌株为金耳(Tremella aurantialba);该菌株多糖的羟自由基清除率为57.67%,超氧阴离子清除率为51.73%,DPPH自由基清除率为17.43%。EF145菌株培养的最佳碳源、氮源和无机盐分别是蔗糖、酒石酸铵和磷酸二氮钾,EF-145菌株产胞外多糖最佳培养基配方为蔗糖40 g·L^(-1)、酒石酸铵7.5 g·L^(-1)、磷酸二氢钾4 g·L^(-1)、土豆浸粉3 g·L^(-1)、维生素B 10.2 g·L^(-1)。

伊曲康唑联合特比萘芬治疗孢子丝菌病疗效及其对病原真菌体外抗菌活性研究

目的初步探讨伊曲康唑和特比萘芬联合治疗孢子丝菌病的疗效,评价两药体外联合对申克孢子丝菌菌丝相和酵母相的抗菌活性。方法口服伊曲康唑200 mg/d和特比萘芬250 mg/d治疗孢子丝菌病;体外联合药敏试验采用棋盘微量稀释法,计算分数抑菌浓度(FIC)指数判定两药相互作用具有协同、拮抗或无关作用。结果伊曲康唑和特比萘芬联合成功治愈3例经伊曲康唑治疗无效的孢子丝菌病患者。两药体外联合对申克孢子丝菌菌丝相具有75%的协同作用,对酵母相为70%(P=0.50)。结论初步研究显示伊曲康唑和特比萘芬联合治疗孢子丝菌病有效安全,体外联合药敏试验显示两药具有较高的协同作用。

白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因PCR-RFLP比较分析

目的通过对白念珠菌菌丝相与酵母相ERGIl基因限制性片段长度多态性分析，比较两相细胞在DNA水平的差异。方法分别抽提来自同一亲本、对氟康唑敏感性不同的白念珠菌（CA-1，CA-2，CA-4，CA-6，CA-7，CA-9，CA-11，CA-13～CA-17）菌丝相与酵母相基因组DNA，根据ERG11基因序列设计一对引物，对其进行PCR扩增（包括部分上游和下游非编码区），扩增产物分别用AccⅠ和MunⅠ消化、琼脂糖凝胶电泳后观察。结果各株白念珠菌菌丝相与酵母相均能扩增出约1734bp大小的目的片段，CA-7，CA-14，CA．16和CA-17株两相细胞ERG11基因RFLP图谱存在差异，其余受试菌株未见差异。结论从DNA全貌来看，白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因存在差异。

伊曲康唑联合卡泊芬净或特比萘芬对球形孢子丝菌体外抑菌作用的研究

目的探讨伊曲康唑联合卡泊芬净或特比萘芬时对球形孢子丝菌酵母相和菌丝相的体外抑菌作用。方法参照标准的微量液基稀释法及棋盘微量稀释法对33株球形孢子丝菌行药敏试验,结果使用抑菌浓度指数(FICI)判定"协同""不相关"和"拮抗"。结果伊曲康唑与卡泊芬净联合对球形孢子丝菌酵母相菌株的协同率为93.94%(31/33),与特比萘芬联合的协同率为60.61%(20/33);伊曲康唑与卡泊芬净或特比萘芬联合对菌丝相菌株协同率分别为96.97%(32/33)、84.5%(28/33)。对所有受试菌株均未观察到上述药物的拮抗作用。结论体外联合药敏试验结果显示伊曲康唑与卡泊芬净或特比萘芬联合有较好的协同作用。

SELDI技术对马尔尼菲青霉菌酵母相和霉菌相蛋白质组表达差异的分析

目的比较马尔尼菲青霉菌酵母相和霉菌相蛋白质组表达差异。方法应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术(SELDI)检测马尔尼菲青霉菌酵母相和霉菌相的蛋白质谱。用PBSIIC型蛋白质芯片阅读机读取数据并进行分析。结果在WCX2芯片上共捕获75个蛋白峰,其中10个蛋白质在酵母相高表达,3个蛋白质在霉菌相高表达。相对分子质量为2900和3151蛋白质仅在酵母相表达,13151和13285蛋白质仅在霉菌相表达。结论SELDI技术可以检测出马尔尼菲青霉菌霉菌相和酵母相表达的小分子蛋白质差异。

EFG1和HGC1基因在白念珠菌菌丝相和酵母相的表达差异

目的比较白念珠菌双形态性的两个调控基因,即增强菌丝生长基因(Enhanced Filamentous Growth,EFG1)和菌丝G1细胞周期蛋白基因(hyphal G protein cycle1,HGC1)在菌丝相和酵母相中的表达情况,寻找调控菌丝表达的关键基因。方法分别提取白念珠菌菌丝相和酵母相的RNA,行半定量RT-PCR检测,比较EFG1和HGC1两个基因的RNA表达差异。结果EFG1在菌丝相和酵母相都有表达,差异无显著性意义,而HGC1在菌丝相有表达,在酵母相无表达。结论HGC1为菌丝特异基因。

白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因部分序列的比较研究

目的 通过对白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因部分序列的比较,探讨两相在DNA水平的差异。方法 对5株分离自同一HIV阳性患者的白念珠菌分别进行菌丝相与酵母相培养后,抽提基因组DNA,PCR扩增ERG11基因(包括部分上游和下游非编码区),用下游引物对部分ERG11基因进行测序。结果CA-7菌丝相与酵母相ERG11基因序列存在差异,分别位于第1547,1587和1617位点。结论 白念球菌菌丝相与酵母相在DNA水平存在差异,在进行白念珠菌的病原真菌学研究中菌丝相为适宜的研究对象。

白念珠菌酵母相与菌丝相对5种抗真菌药物的敏感性比较

目的比较白念珠菌酵母相与菌丝相对常用抗真菌药物的敏感性的差异,为病原真菌学研究及临床用药提供理论指导。方法应用法国生物-梅里埃ATB FUNGUS 3药敏试剂盒对临床分离的220株白念珠菌进行抗真菌药物的敏感性测定。结果 220株白念珠菌酵母相与菌丝相对两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、5-氟胞嘧啶5种常用的抗真菌药物的敏感率分别为97.27%与97.73%,81.82%与85.00%,87.27%与90.46%,92.72%与95.00%,96.82%与97.27%。氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑对白念珠菌酵母相MIC值明显高于菌丝相,差异有显著性(P<0.05),两性霉素对白念珠菌酵母相和菌丝相MIC值差异不显著(P>0.05)。受试菌株两相细胞对5种抗真菌药物敏感度总体一致性为85.46%(188/220),有32株菌株酵母相表现为耐药及中介,但菌丝相却为中介与敏感。结论白念珠菌酵母相和菌丝相对5种抗真菌药物的敏感性存在差异,抗真菌药物对菌丝相的抗菌活性强于酵母相。

纳塔生产中污染真菌的分离与控制

纳塔生产中真菌污染现象最普遍、危害最严重.从纳塔工厂的受污染发酵液、原料椰子水及环境中分离到58株酵母、17株霉菌.研究显示,产膜醭酵母,如假丝酵母(Candida spp.)、毕赤酵母(Pichia spp.)是引起污染的主要真菌,它们主要来源于大量带菌的原料椰子水,由于椰子水的不恰当处理而散布到环境中.向发酵液中添加2～3g/L脱氢醋酸钠或1.5～2g/L尼泊金丁酯,可以较好地抑制产膜醭酵母而不影响木醋杆菌的生长和纳塔的合成.

氟康唑对白念珠菌菌丝相与酵母相体外药物敏感性差异比较

目的:以同一亲本来源的7株白念珠菌为对象,研究氟康唑对其菌丝相与酵母相抗菌活性的差异。方法:参照NCCLS M27-A方案,测定氟康唑对7株白念珠菌菌丝相与酵母相的MIC值,并比较其差异。结果:白念珠菌菌丝相与酵母相对氟康唑的敏感性不同,对菌丝相的MIC值低于酵母相。结论:氟康唑对白念珠菌菌丝相的抗菌活性强于酵母相。

双酶水解紫贻贝制备酵母调味料研究

利用复合蛋白酶、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶对紫贻贝进行双酶水解,水解效果比较后选择使用复合蛋白酶和复合风味蛋白酶作为复合水解酶,同时采用产酯酵母发酵技术制备调味料,通过电位滴定法测定单菌株和多菌株发酵对双酶水解贻贝肉产总酯的影响。结果表明:产酯酵母1274在双酶水解后,接种量为5%,发酵温度28℃,发酵时间72h时总酯含量为0.65%,相同条件下,产酯酵母1274和1202多菌株发酵时总酯含量为0.78%,经产酯酵母发酵后的调味料,酯香味浓郁,给予产品以发酵特有的风味。

烟草甲体内共生菌的初步研究

烟草甲Lasioderma serricorne(Fabricius)体内有类似酵母的胞内共生物YLS,其对烟草甲有重要的营养和解毒作用.该文对YLS的细胞和菌落形态进行了观察,并通过菌落测定、液体培养和细胞质量测定等方法,以探明YLS的最适生长温度.结果表明:28～35℃比较适宜YLS的生长,35℃为最佳生长温度,而36～48 h是研究YLS的最佳时间.

蜂胶-银离子复合纳米乳剂的研制及其杀菌活性评价

复合纳米消毒乳剂是以蜂胶和银离子为主要抗菌成分，为了解其理化性能、杀菌效果及安全性，采用悬液定量杀菌试验和动物实验及仪器分析方法进行了实验室研究。结果，该复合纳米消毒乳剂含蜂胶20g／L，总黄酮含量为5．61g／L，银离子含量为50μg/L。透射电镜观察可见复合乳剂中颗粒直径在30～100nm，分布均匀。以含体积分数6．25％的复合纳米消毒乳剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌作用1min，杀灭率达到100％；以含体积分数12．5％该消毒乳液对白色念珠菌作用5min，杀灭率亦达100％。该纳米消毒乳液小鼠急性经口毒性LD50〉5000mg／kg，属实际无毒；该乳剂原液对家兔皮肤、眼结膜和阴道粘膜刺激指数均为0，属于无刺激性。结论，复合纳米消毒乳剂具有良好的杀灭细菌繁殖体和酵母菌的作用，动物试验结果属于无毒类物质、对皮肤粘膜无刺激。

不同组合益生菌对育成期水貂生长性能和消化代谢规律的影响

本试验旨在研究不同组合益生菌对育成期水貂生长性能和营养物质消化率及氮平衡的影响。选择96只60日龄、健康状况良好的水貂,随机分为4组,每组24只,公、母各半。对照组饲喂基础日粮,试验1、2、3组分别在基础日粮中添加0.06g地衣芽孢杆菌+0.06g枯草芽孢杆菌、6g安琪酵母+12mL乳酸菌、0.06g地衣芽孢杆菌+0.06g枯草芽孢杆菌+6g安琪酵母+12mL乳酸菌。在水貂育成期内进行饲养与消化代谢试验,分析不同组合益生菌对水貂平均日采食量、平均日增重、料重比、粗蛋白质和粗脂肪的消化率及沉积氮、蛋白质生物学价值和净蛋白质利用率的影响。结果表明,与对照组相比,试验1组公貂的干物质消化率和试验2组公貂的脂肪消化率显著下降(P<0.05),但不同组水貂的生长性能和氮平衡及母貂的营养物质消化率未受到益生菌的影响(P>0.05)。提示,日粮中添加益生菌不会显著改善育成期水貂的生长性能、营养物质消化率及氮平衡,故在水貂健康的前提下,无需在育成貂日粮中添加益生菌。

呼吸内科酵母样真菌分离率与治疗用药之间量化关系的初步研究

目的:了解临床药物的使用强度和酵母菌分离率之间的量化关系,提高抗感染治疗的效果。方法:监测2007年1月—2009年12月每季度我院呼吸内科病区酵母菌样真菌分离率,以及该病区抗菌药物和可能对患者免疫力造成负面影响的药物(包括抗肿瘤药物和糖皮质激素类药物)每季度消耗的数据,并将其换算成国际上相关研究所共同采用的使用强度指标:每100住院人天所消耗的DDD数量(DDD/100人天),然后进行相关分析。结果:2007—2009年各类感染的病原菌中酵母样真菌占首位,酵母样真菌分离率在2008年第一季度形成高峰,而后逐渐回落,始终在8%上下波动。在统计的药物中抗菌药物使用强度最高;单一品种抗菌药物使用强度最大的前三位为莫西沙星、头孢呋欣和头孢哌酮/舒巴坦。酵母样真菌分离率与抗菌药物中的头孢哌酮/舒巴坦钠、替考拉宁及抗结核药物中的利福平和吡嗪酰胺的使用量呈负相关(r=-0.600,-0.621,-0.405,-0.435,P<0.05),与抗肿瘤药物顺铂的使用量呈正相关(r=0.644,P<0.05)。结论:一些药物使用强度的变化可能对酵母样真菌分离率的影响较大,如果有针对性地调整这几类药物的使用强度有可能降低酵母样真菌的临床分离率。

白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因部分序列比较研究

目的通过对白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因部分序列的比较,探讨两相细胞在DNA水平的差异。方法分别抽提7株来自同一亲本且对氟康唑敏感性不同的白念珠菌菌丝相与酵母相基因组DNA,根据ERG11基因编码序列设计一对引物,对ERG11基因第948位点至第1 254位点307bp的碱基序列进行PCR扩增,以PCR产物直接测序比较两相在该片段碱基序列上的差异。结果7株白念珠菌菌丝相与酵母相在该片段的碱基序列无差异。结论白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因的第948位点至第1 254位点序列无差异。

一种隐形眼镜护理液杀灭微生物效果的试验观察

一种隐形眼镜护理液主要杀菌成分为聚六亚甲基胍。采用悬液定量杀菌试验对该护理液杀灭细菌繁殖体和酵母菌的效果进行了实验室观察,以便了解其消毒效果。结果,以该护理液原液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌作用3 h,杀灭率均达到100%;对白色念珠菌作用6 h,杀灭率为97.60%。体积分数10%小牛血清对其杀菌效果无明显影响。用该护理液原液浸泡隐形眼镜新镜片6 h,对镜片上金黄色葡萄球菌平均消除率为99.92%,对白色念珠菌平均消除率为99.45%。结论,该护理液原液对细菌繁殖体和酵母菌具有很好的杀灭效果,性能稳定。

pH精制区带逆流色谱分离制备红曲中的酸式莫那可林K

建立了pH精制区带逆流色谱分离制备红曲中功能成分酸式莫那可林K的新方法。首先用体积分数95%乙醇提取红曲中的莫纳可林K,然后经过碱化处理使内酯式莫那可林K转化为酸式,最后采用溶剂系统V（石油醚）：V（乙酸乙酯）：V（甲醇）：V（水）=5：5：4：6,上相添加HCl（10mmol/L）作为固定相,下相添加氨水（10mmol/L）为流动相进行pH精制区带逆流色谱分离。分离所得的酸式莫那可林K经HPLC检测纯度,并用UV,ESI-MS和~1H-NMR鉴定其化学结构。从2.0g粗提物一次分离得到纯度为93.4%的酸式莫那可林K147mg。

白桦开花抑制因子BpFLC与BpSVP蛋白互作的结构域筛选与互作验证

为深入研究白桦开花抑制因子FLC与SVP的相互作用的分子机理。从重组质粒pGBKT7-BpFLC、pGBKT7-BpSVP分别克隆出6个BpFLC截短体（BpFLC1～6）和6个BpSVP截短体（BpSVP1～6），分别编码MI、MIK、K、IKC、KC和C域。在酵母Y2HGold菌中，分别共转诱饵质粒pGBKT7-BpFLC1～6×pGADT7-BpSVP及pGBKT7-BpFLC×pGADT7-BpSVP1～6。酵母转化子Y2HGold[pGBKT7-BpFLC2～5×pGADT7-BpSVP]，可在选择性固体培养基TDO、QTO／A上生长，并在QDO／A／X上长出蓝色菌落，表明BpSVP能与截短体蛋白BpFLC2～5异源结合。此外酵母Y2HGold[pGBKT7-BpFLC×pGADT7-BpSVP2～5]也能同时激活报告基因AUR1-C、HIS3、ADE2、MEL1。进一步研究发现：Y2HGold[pGBKT7-BpFLC3×pGADT7-BpSVP3]存在相互作用，表明BpFLC的K域与BpSVP的K域能够异源结合，是介导BpFLC与BpVP蛋白互作的关键结构域。