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Interactive Effects of Zinc and Zilpaterol Hydrochloride on Bovine <i>β</i>-Adrenergic Receptors
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作者 J. E. Hergenreder T. L. Harris +3 位作者 J. O. Baggerman A. D. Hosford M. Branine B. J. Johnson 《Open Journal of Animal Sciences》 2020年第3期402-413,共12页
The objective of this study was to determine if the addition of zinc (Zn) in combination with zilpaterol HCL (ZH) affected the interaction of ZH with the beta2-adrenergic receptor (<span style="white-space:now... The objective of this study was to determine if the addition of zinc (Zn) in combination with zilpaterol HCL (ZH) affected the interaction of ZH with the beta2-adrenergic receptor (<span style="white-space:nowrap;"><i></i></span><i>β<span style="white-space:nowrap;"></span></i>-AR) by altering cAMP production, gene expression, and protein abundance in cultured skeletal muscle cells. Cultures of muscle bovine satellite cells were established and treated at 120 h with: 1) 0 μM Zn/zilpaterol hydrochloride (ZH;<strong>CON</strong>);2) 0 μM Zn/10 μM ZH (<strong>ZH</strong>);3) 1 μM Zn from Zn chloride/0 μM ZH (<strong>Zn</strong>);4) 1 μM Zn from Zn chloride/10 μM ZH (<strong>ZN/ZH</strong>) in differentiation media for an additional 0, 6, 24, 48 and 96 h. Protein and mRNA were isolated and quantified at 24 and 96 h, and cAMP was measured at 0, 6, 24, 48 and 96 h. At 0, 24, 48 and 96 h, no differences (<i><span style="white-space:normal;">P</span></i> > 0.05) were detected in cAMP production. At 6 h, Zn cells had the greatest concentration of cAMP (<span style="white-space:nowrap;"><i></i></span><i>P<span style="white-space:nowrap;"></span></i> < 0.05) compared to ZH treatments. No differences (<i><span style="white-space:normal;">P</span></i> > 0.05) were detected in mRNA abundance at 24 h. At 96 h, 0 μM Zn/10 μM ZH cells had an increased abundance of myosin heavy chain (MHC)-I mRNA (<i><span style="white-space:normal;">P</span></i> < 0.05) compared to CON. Furthermore, ZH had a greater abundance of MHC-IIX mRNA (<i><span style="white-space:normal;">P</span></i> < 0.05) and a tendency for a greater abundance of IGF-1 mRNA (<span style="white-space:normal;"><i></i></span><i><span style="white-space:normal;">P</span><span style="white-space:normal;"></span></i> < 0.15) compared to CON and ZN/ZH. No differences (<i><span style="white-space:normal;">P</span></i> > 0.05) were detected in the protein abundance of <i><span style="white-space:normal;">β</span></i>1AR and the <i><span style="white-space:normal;">β</span></i>2AR. These results indicated Zn and ZH in combination did not have an additive effect on<em> β</em>2-AR function as indicated by cAMP concentrations. 展开更多
关键词 β-Adrenergic Receptor zilpaterol Hydrochloride ZINC
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液相色谱串联四极杆质谱检测猪肝猪肉中的齐帕特罗、马布特罗、班布特罗、马贲特罗 被引量:4
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作者 聂建荣 朱铭立 +2 位作者 连槿 洪振涛 邓香连 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期257-259,268,共4页
建立了以液相色谱串联四极杆质谱(HPLC-MS/MS)检测猪肝猪肉中齐帕特罗、马布特罗、班布特罗、马贲特罗的分析方法。样品经MCX柱净化浓缩后,用C18液相色谱柱分离,通过电喷雾(ESI)离子源电离,多反应监测(MRM)作定性和定量分析。在0.25~50... 建立了以液相色谱串联四极杆质谱(HPLC-MS/MS)检测猪肝猪肉中齐帕特罗、马布特罗、班布特罗、马贲特罗的分析方法。样品经MCX柱净化浓缩后,用C18液相色谱柱分离,通过电喷雾(ESI)离子源电离,多反应监测(MRM)作定性和定量分析。在0.25~50μg/L的范围内线性良好(r>0.999)。在0.5、4.0、10μg/kg添加水平下,回收率为70.5%~91.9%,相对标准偏差为3.7%~7.4%。方法检测限(S/N=5)可达0.5μg/kg。 展开更多
关键词 HPLC—MS/MS 检测 齐帕特罗 马布特罗 班布特罗 马贲特罗
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齐帕特罗人工抗原合成及其多克隆抗体制备 被引量:4
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作者 郭东光 陈明艳 +14 位作者 冯春花 王丰 卞爽丽 李文明 王凯露 吕薇薇 郑文珺 陈子怡 孙国鹏 李雪华 田金河 李鹏 朱艳平 岳锋 王选年 《动物医学进展》 北大核心 2022年第5期6-12,共7页
为制备齐帕特罗(ZIL)完全抗原,获得抗ZIL多克隆抗体(pAb),将ZIL与4-溴丁酸乙酯反应后,采用EDC/NHS方法使ZIL-丁酸盐中间体与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)进行偶联,分别用紫外全波长扫描(UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行... 为制备齐帕特罗(ZIL)完全抗原,获得抗ZIL多克隆抗体(pAb),将ZIL与4-溴丁酸乙酯反应后,采用EDC/NHS方法使ZIL-丁酸盐中间体与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)进行偶联,分别用紫外全波长扫描(UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定后,通过免疫新西兰大白兔获得抗ZIL多抗血清,并对抗体效价、半数抑制浓度(IC_(50))和特异性进行鉴定。HPLC-MS检测结果显示,改造后的主产物分子质量为348.21 u,约占整个反应体系产物的92.23%,与ZIL-丁酸盐分子质量完全相符;SDS-PAGE电泳结果显示,BSA/OVA在电泳中的迁移速率明显大于偶联产物;UV结果显示,相比载体蛋白,偶联产物ZIL-BSA/OVA的特征吸收峰均发生了明显变化;ELISA效价检测结果表明,ZIL多抗血清效价在1∶6400以上,通过建立标准曲线测得IC_(50)分别为0.38 ng/mL和1.13 ng/mL,并且与沙丁胺醇(SAL)、特布他林(TBL)、溴布特罗(BRO)、西马特罗(CIM)、克仑特罗(CLB)、盐酸多巴胺(DH)、莱克多巴胺(RAC)、达氟沙星(DAN)、泰乐菌素(TYL)均不存在任何交叉反应。成功制备了ZIL完全抗原ZIL-BSA/OVA,获得了一种高灵敏度和高特异性的抗ZIL pAb,为后续建立ZIL免疫学快速检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 齐帕特罗 新型瘦肉精 半抗原 完全抗原 多克隆抗体
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液相色谱-质谱联用分析饲料中新型的β_2-肾上腺素能激动剂——齐帕特罗 被引量:4
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作者 曹莹 李丹妮 +1 位作者 黄士新 蒋音 《中国兽药杂志》 2006年第7期22-25,共4页
建立了饲料中齐帕特罗的液相色谱-质谱联用(LC—MS)检测方法。液相色谱条件为:WatersAntantisTMC8色谱柱(150mm×2.1mm,3μm);柱温30℃;流动相为乙腈-0.2%甲酸(8:92,V/V);流速0.2mL/min;进样量20μL。质谱条件... 建立了饲料中齐帕特罗的液相色谱-质谱联用(LC—MS)检测方法。液相色谱条件为:WatersAntantisTMC8色谱柱(150mm×2.1mm,3μm);柱温30℃;流动相为乙腈-0.2%甲酸(8:92,V/V);流速0.2mL/min;进样量20μL。质谱条件为:电喷雾离子源(ESI^+),选择离子监测质荷比(m/z)为262、244、202、185带正电荷的准分子离子和碎片离子。齐帕特罗的线性范围为0.01—4μg/mL,最低定量检测限0.01μg/g,回收率为(90±10)%。 展开更多
关键词 液相色谱-质谱 饲料 β2-肾上腺素能激动剂 齐帕特罗
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齐帕特罗残留检测酶联免疫吸附试验方法的建立及优化 被引量:1
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作者 郭东光 邱骏峰 +9 位作者 张凯波 陈明艳 卞爽丽 李文明 崔龙威 孙国鹏 李鹏 朱艳平 岳锋 王选年 《动物医学进展》 北大核心 2023年第12期46-53,共8页
为建立检测齐帕特罗(ZIL)残留物的间接竞争酶联免疫吸附试验(ic-ELISA),以获得的抗ZIL兔多抗血清为基础,以制备的完全抗原为包被源,通过优化反应条件,建立了检测ZIL残留物的ic-ELISA检测方法。结果表明,兔血清最佳稀释比例为1∶6000,抗... 为建立检测齐帕特罗(ZIL)残留物的间接竞争酶联免疫吸附试验(ic-ELISA),以获得的抗ZIL兔多抗血清为基础,以制备的完全抗原为包被源,通过优化反应条件,建立了检测ZIL残留物的ic-ELISA检测方法。结果表明,兔血清最佳稀释比例为1∶6000,抗原最佳包被浓度为2μg/mL,半数抑制浓度(IC 50)为0.317 ng/mL,线性检测范围(IC 20~IC 80)为0.136~1.181 ng/mL,最低检测限(LOD,IC 10)为0.081 ng/mL。经优化后,检测体系最佳pH为7.4,盐浓度≤0.4 mol/L,甲醇、乙醇、丙酮和和DMSO的含量≤5%,乙腈含量≤10%,且检测基质中牛尿液浓度≤15%时能够获得较高的检测灵敏度,并且该检测方法具有良好的稳定性和特异性,批内和批间重复试验样品添加回收率分别为101%~112%和101%~120%,变异系数均低于10%,检测结果与HPLC-MS检测结果的相关系数为R 2=0.9906。该检测方法检测速度快、灵敏度强、准确性高、重复性好、检出限低,适用于ZIL残留的高通量检测和现场快速筛查。 展开更多
关键词 齐帕特罗 瘦肉精 间接竞争ELISA 免疫学快速检测
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表面增强拉曼法快速检测猪肉中齐帕特罗残留 被引量:3
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作者 董祥辉 杨方威 +2 位作者 于航 姚卫蓉 谢云飞 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2022年第9期2843-2847,共5页
齐帕特罗是一种β_(2)-受体激动剂,也就是俗称的“瘦肉精”,经常被不法商家用于牲畜养殖,目前也没有相关国家标准对其残留限量作出规定。该兽药进入牲畜体内以后可以改变某些营养素的代谢方式,促进牲畜肌肉的生长,对牲畜体内的脂肪进行... 齐帕特罗是一种β_(2)-受体激动剂,也就是俗称的“瘦肉精”,经常被不法商家用于牲畜养殖,目前也没有相关国家标准对其残留限量作出规定。该兽药进入牲畜体内以后可以改变某些营养素的代谢方式,促进牲畜肌肉的生长,对牲畜体内的脂肪进行快速的消耗和转化,从而提高牲畜的瘦肉率。目前对该药物的检测方法主要是液相色谱串联质谱法,该方法具有成本高昂、操作繁琐、耗时较长等缺点,表面增强拉曼光谱法具有灵敏度高、检测速度快等优势,近年来被广泛应用于食品中有毒有害物的检测。为了实现猪肉中齐帕特罗的快速检测,建立了一种猪肉中齐帕特罗残留的表面增强拉曼光谱快速检测方法。通过优化比较一系列实验结果,确定样品与金胶的最佳体积比为1∶2以及最优混匀检测时间为3 min;通过对多种萃取溶剂的比较最终确定使用乙酸乙酯为提取剂;通过密度泛函理论中B3LYP/6-311+G(d)基组对齐帕特罗的理论光谱进行计算,确定齐帕特罗的SERS特征峰并进行振动归属,以1116,1447和1573 cm^(-1)处的特征峰作为齐帕特罗的定量特征峰,其中1116 cm^(-1)是苯环面内变形振动,1447 cm^(-1)是C—H键面外摇摆振动,1573 cm^(-1)是苯环C—H键伸缩振动;在最佳实验条件下,建立了齐帕特罗标准溶液特征峰SERS信号与浓度对数的标准曲线,线性方程R^(2)值均在0.9以上;对不同加标浓度的实际样品进行检测,得到平均回收率为90.39%~101.24%,RSD值为7.90%~8.94%。该法方便快速、稳定性好,无需对样品进行复杂的预处理即可实现对猪肉中齐帕特罗残留的快速准确测定,可为齐帕特罗的检测以及相关标准的制定提供一种新的思路。 展开更多
关键词 齐帕特罗 表面增强拉曼 快速检测
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齐帕特罗检测方法研究进展 被引量:1
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作者 陈明艳 卞爽丽 +9 位作者 计浩然 李文明 王丰 孙国鹏 朱艳平 岳锋 李雪华 李鹏 郭东光 王选年 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第21期29-34,40,共7页
齐帕特罗(zilpaterol,ZIL)是β2肾上腺素受体(β2-adrenergic receptors,β2AR)激动剂的一种,被动物食用后,可以明显增加动物的胴体瘦肉率,提高生长速率,减少饲料消耗。经美国、加拿大、巴西、哥伦比亚等15个国家批准用于牛的饲料添加剂... 齐帕特罗(zilpaterol,ZIL)是β2肾上腺素受体(β2-adrenergic receptors,β2AR)激动剂的一种,被动物食用后,可以明显增加动物的胴体瘦肉率,提高生长速率,减少饲料消耗。经美国、加拿大、巴西、哥伦比亚等15个国家批准用于牛的饲料添加剂,给全世界食品安全带来严重威胁。目前,食品安全检测技术较低是影响我国食品安全现状的重要原因。因此,建立有效、快速、简便、高灵敏度的食品污染物检测方法是当务之急。文章综述了当前针对ZIL残留检测方法研究进展的同时,结合ZIL生物学效应及其残留特性等,指出目前关于ZIL残留检测存在的问题及在检测方面的未来发展方向,旨在为进一步建立高灵敏度的快速检测方法提供科学依据,同时为进一步丰富我国食品安全检测技术体系,提高我国食品安全检测水平和检测速度提供理论基础。 展开更多
关键词 食品安全 齐帕特罗 瘦肉精 检测方法 残留
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动物源性食品中齐帕特罗一步法ELISA试剂盒的研制 被引量:3
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作者 董李学 葛怀礼 +5 位作者 郑百芹 李爱军 张建民 蒙君丽 苗建民 李亮 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第3期242-247,共6页
本研究依据直接竞争ELISA原理建立了齐帕特罗一步法ELISA试剂盒。以齐帕特罗与载体蛋白偶联物作为免疫原免疫新西兰大白兔制得齐帕特罗多克隆抗体,棋盘包被法确定其最佳抗体包被浓度、酶标抗原工作浓度、包被条件、反应时间、底物显色... 本研究依据直接竞争ELISA原理建立了齐帕特罗一步法ELISA试剂盒。以齐帕特罗与载体蛋白偶联物作为免疫原免疫新西兰大白兔制得齐帕特罗多克隆抗体,棋盘包被法确定其最佳抗体包被浓度、酶标抗原工作浓度、包被条件、反应时间、底物显色时间等,并对试剂盒的各项技术指标进行确认。结果表明,成功组装了齐帕特罗一步法ELISA试剂盒,并建立了尿液、饲料、奶粉和奶汁,以及组织等样品的前处理方法,检测限均远低于1μg/kg。该试剂盒线性检测范围为0.15~10ng/mL,IC50浮动范围0.43~0.79ng/mL,样品板内、批内、批间的变异系数均小于15%,平均回收率在70%~110%之间,与其同类药物的交叉反应率均小于0.1%。提示,本试验研制的试剂盒重复性、特异性、稳定性等各项指标均符合技术要求,可用于动物源性食品中齐帕特罗药物残留的检测。 展开更多
关键词 动物源性食品 ELISA 齐帕特罗
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HPLC-MS/MS法测定猪肉中齐帕特罗残留量及不确定度评定 被引量:4
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作者 陈小妹 高云慨 +4 位作者 肖璇 陈春泉 周凌聿 符金玉 尹青春 《广东化工》 CAS 2023年第8期181-183,159,共4页
采用HPLC-MS/MS方法测定猪肉中齐帕特罗残留量,并进行不确定度评定分析。根据检验标准,构建数学模型,分析猪肉中齐帕特罗残留量测定过程引入的不确定度来源,通过计算合成不确定度,得到齐帕特罗残留量测定扩展不确定度。经测定猪肉中齐... 采用HPLC-MS/MS方法测定猪肉中齐帕特罗残留量,并进行不确定度评定分析。根据检验标准,构建数学模型,分析猪肉中齐帕特罗残留量测定过程引入的不确定度来源,通过计算合成不确定度,得到齐帕特罗残留量测定扩展不确定度。经测定猪肉中齐帕特罗残留量为1.270μg/kg时,其扩展不确定度为U=0.24μg/kg。不确定度评定的结果显示此方法测量误差较小,测定结果可信度高;引入的测量不确定度来源主要来自标准曲线拟合、标准溶液的配制、样品重复性和方法的回收,在实际检测应用中需加强控制。 展开更多
关键词 高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS/MS) 齐帕特罗 不确定度 评定
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