急性冠状动脉综合征患者血清基质金属蛋白酶2水平的检测

目的检测急性冠状动脉综合征患者血清基质金属蛋白酶2的水平,探讨其与不稳定性斑块及临床危险度的内在联系。方法应用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western免疫印迹法分别检测急性冠状动脉综合症患者血清基质金属蛋白酶2的水平。其中不稳定型心绞痛组28例,分属低、中、高危3个亚组,急性心肌梗死组50例,正常对照组50例,稳定型心绞痛组51例。结果对照组、稳定型心绞痛组、不稳定型心绞痛组和急性心肌梗死组基质金属蛋白酶2水平分别为236±33 INT.mm2、224±23 INT.mm2、455±51 INT.mm2和503±45 INT.mm2。急性心肌梗死组和不稳定型心绞痛组分别与稳定型心绞痛组和对照组之间比较,基质金属蛋白酶2水平差异有显著性,对照组与稳定型心绞痛组之间基质金属蛋白酶2水平无统计学差异。4组之间血清基质金属蛋白酶原水平无明显差别。Western免疫印迹法也显示了类似的结果。不稳定型心绞痛低危、中危、高危3个亚组间比较,无论是酶原还是活性酶的水平均未发现显著差别。结论血清基质金属蛋白酶2水平在急性冠状动脉综合征患者中明显升高,提示血清基质金属蛋白酶2增高可作为急性冠状动脉综合症的一个危险信号,但基质金属蛋白酶2与急性冠状动脉综合症危险度并无相关性。

荞麦过氧化物酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对毕节地区栽培荞麦(Fagopyrum Mill)23个收集系的过氧化物酶同工酶进行了研究。结果发现:过氧化物酶同工酶共12条酶带,其中甜荞(F.esculentum)有8条酶带,而苦荞(F.tataricum)有10条。酶谱分析和系统聚类表明:荞麦在种内存在一定的遗传差异,但这种差异明显小于种间差异。

基质金属蛋白酶-2、9在根尖周炎中的表达

目的:探讨基质金属蛋白酶-2、9(MMP-2、9)在根尖周炎发病机制中的作用。方法:采用免疫组化和明胶酶谱法,检测18例根尖肉芽肿、15例根尖囊肿及10例正常根尖组织基质金属蛋白酶-2、9的蛋白表达及酶活性。结果:MMP-2、9在炎症根尖周组织中均有阳性表达,定位于浆细胞、巨噬细胞、成纤维细胞和中性粒细胞。明胶酶谱分析,炎症组MMP-2酶原及活性蛋白表达均高于正常组(P<0.01)。炎症组MMP-9酶原及活性的蛋白表达强阳性。根尖肉芽肿组与根尖囊肿组MMP-2、9的蛋白表达及活性比较,差异无统计学意义。结论:MMP-2、9可能参与根尖周炎的发病过程,并在骨破坏中发挥作用。

耐高温纤维素酶产生菌的筛选鉴定及酶谱分析

采用稀释平板-刚果红染色法从腐木中分离到1株产耐高温纤维素酶的菌株CY15-10。通过形态观察、特征培养及16 S rDNA序列分析,鉴定该菌株为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)。该菌株经摇瓶发酵后测定粗酶液CMC酶活为1.27 U/mL,最适反应温度为55℃,热稳定性较好。经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及酶谱分析表明该菌株向胞外分泌1种纤维素酶组分,酶分子质量约为35 ku。

骨关节炎患者血清中基质金属蛋白酶-2、-9的明胶酶谱分析

为探讨基质金属蛋白酶-2、-9在骨关节炎发病中的作用,应用明胶酶谱分析方法研究其在骨关节炎患者血清中的表达水平。实验对象为27例膝骨关节炎患者,对照组为7例外伤骨折患者。结果发现病例组血清中基质金属蛋白酶-2和-9的表达水平均明显高于对照组(P<0.05)。该结果显示基质金属蛋白酶-2和-9可能在骨关节炎的发病过程中均起着重要的作用。

荞麦淀粉酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对栽培荞麦22份(甜荞和苦荞各11份)发芽种子的淀粉酶同工酶进行了研究。结果发现淀粉酶同工酶酶带共12条。其中甜荞有7条酶带,3条共有带。而苦荞有6条酶带,4条共有带。总的说来,淀粉酶同工酶在发芽荞麦中,种内存在一定的变异,但小于种间差异。

荞麦酯酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对毕节地区栽培荞麦(甜荞和苦荞)24个收集系的酯酶同工酶进行了研究。结果发现:酯酶同工酶酶带共13条,其中甜荞有9条酶带,而苦荞有6条。酶带分析及聚类分析表明:供试荞麦的酯酶同工酶谱在种间和种内均存在一定的差异,但种内差异小于种间差异。

钙离子处理对成肌细胞μ-calpain mRNA和蛋白表达的影响

本试验利用实时定量RT-PCR、酪蛋白底物酶原分析和SDS-PAGE等方法研究不同浓度钙离子对分化的大鼠L6成肌细胞中μ-calpain mRNA蛋白水平表达以及对L6细胞内蛋白的降解程度的影响。研究表明:钙离子处理可以诱导L6进一步分化为肌管,高浓度钙离子(>1000μM)还导致L6死亡率增大;钙离子诱导μ-calpain mRNA和蛋白水平表达增加。钙离子浓度为1000μM时,μ-capain mRNA的表达量为对照组的3倍多,但是当钙离子浓度升至1500μM时表达量却降低。50-100μM钙离子可以使μ-calpain酶活增加两倍,而500-1500μM钙离子增加酶活5-7倍;高浓度钙离子由于提高了μ-capaln的活性,细胞内蛋白的降解代谢增强,在SDS-PAGE凝胶电泳中发现细胞上清液中有明显的蛋白条带出现。

几种荞麦的过氧化物酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对荞麦属(FagopyrumMill)6个种(含大粒组4个种和小粒组2个种)8份荞麦资源的过氧化物酶同工酶进行了研究。结果发现,过氧化物酶同工酶酶带27条,不同物种酶带数4到8条。系统聚类表明:荞麦属两个组(大粒组和小粒组)间遗传差异很大,而且F.megaspartanium在种内存在一定差异,但这种差异明显小于种间差异。

人食管鳞癌组织中活性MMP-2、MMP-9的表达

目的:探讨食管鳞癌组织中活性MMP-2、MMP-9的表达及其与食管鳞癌侵袭转移的关系。方法:采用酶谱分析法检测41例食管鳞癌组织及其相应正常组织中酶原型MMP-2(proMMP2)、酶原型MMP9(proMMP-9)、活性MMP-2和活性MMP9的表达。结果:正常食管组织中可检测到少量proMMP-2、proMMP-9和活性MMP2,但检测不到活性MMP9的表达;以正常组织为1标化鳞癌组织,其proMMP2、proMMP-9、活性MMP-2相对表达量分别为1.51±0.42、2.52±0.75、1.92±0.42,均高于正常组织(P<0.01)。鳞癌组织中可检测到活性MMP9,其表达与淋巴结转移、静脉侵袭及侵袭深度相关(P<0.05或0.01)。结论:活性MMP9的表达与食管鳞癌侵袭转移密切相关,是食管鳞癌侵袭转移的标志。

荞麦子叶期幼叶过氧化物酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对荞麦属(Fagopyrum Mill)的甜荞(F. esculentum)和苦荞(F. tataricum)共19个不同收集系子叶期幼叶的过氧化物酶同工酶进行了研究。结果发现:过氧化物酶同工酶酶带共10条,其中甜荞有5条带,而苦荞为6条。酶带及聚类分析表明:甜荞和苦荞各收集系内的过氧化物酶同工酶酶带数无变化,但在酶带的深浅和宽窄等方面存在一定的差异,暗示甜荞和苦荞不同收集系间遗传变异较小。

新生儿窒息心肌酶谱检测临床分析

目的探讨心肌酶谱在窒息后新生儿心肌损害诊治中的意义。方法对29例窒息新生儿及26例正常新生儿的血清心肌酶谱进行检测分析。结果窒息新生儿心肌酶谱值明显高于对照组。结论新生儿窒息可导致心肌酶谱升高,对心肌有损害。建议早期测定心肌酶对心、脑等脏器的缺氧损伤有极其重要的意义,可以指导临床早期干预,减少并发症。

一株纤维素降解菌的鉴定及其对饲料粗纤维的降解效果

【目的】对本课题组分离的一株纤维素降解菌进行鉴定,优化其产酶条件并检测其对饲料粗纤维的降解效果,以期为该菌在饲料粗纤维降解中的应用提供理论依据。【方法】通过菌株形态特征和16SrDNA序列分析鉴定了实验室分离保存的一株纤维降解菌;研究该菌所产纤维素酶的部分酶学性质和酶谱,并优化其产纤维素酶的条件;利用体外发酵和尼龙袋法测定菌株N3所产粗酶液对3种饲料(麸皮、麦草、燕麦)粗纤维的降解率;利用RB亮蓝脱色试验检测该菌的木质素降解能力。【结果】经鉴定,该菌株为枯草芽孢杆菌,命名为Bacillus subtilis N3;N3菌株不产生漆酶,主要向胞外分泌分子质量70ku以上的纤维素酶组分;N3菌株所产纤维素酶的最适反应温度和pH分别为60℃和5.5;N3菌株以体积比1∶50接种至最适发酵培养基(碳源为麸皮、氮源为蛋白胨,初始pH为5),37℃培养24h时,所产纤维素酶活性最高,可达3.50U/mL;菌株N3所产粗酶液对麸皮的粗纤维降解率最高,对麦草秸秆的粗纤维降解率最低。【结论】分离到的纤维降解菌Bacillus subtilis N3主要分泌分子质量70ku以上、耐热的纤维素酶,对饲料粗纤维具有较强的降解能力。

用酯酶同工酶分析亚洲栽培稻不同生态型的亲缘关系

本文分析了亚洲栽培稻七个生态型62个品种的酯酶同工酶,结果表明:各生态型间已存在不同的酶谱分化,其中 Gundil、Aus、Boro 生态型变化最大;Tjereh、Aman 生态型其次;Bulu 和Upland 生态型变化最小。由于生态型的酶谱间普遍存在差异,因此,没有发现能代表地理生态群或生态型的特定酶谱。根据平均酶带数和 Rf 累积值相似性指数的 t 测定,七个生态型的亲缘关系相似性可分为三群:1.Gundil、Aus、Boro 2.Tjereh、Aman、Bulu 3.Upland.

扁蓿豆遗传多样性的研究

在蛋白质水平上对内蒙古不同生境条件下生长的扁蓿豆的遗传多样性进行了研究。结果表明，内蒙古地区扁蓿豆的蛋白质多样性程度较高；同一种或种下分类单位，由于材料来源不同所表现的基本蛋白图谱与地理分布有关，基本上与草地区划中的地段相吻合，因此在以后进行材料收集时应以地段为单位进行，而在地形单元和植被组合变化较大的地段需要配合地片进行；种子贮藏蛋白在不同的分类单位中表现出较高的同源性，因此可以做为进化标志，而不适用于扁蓿豆的种和品种的鉴定；形态变异与蛋白质的多样性并不相关。所有供试材料种在同一生境下，形态变异幅度较蛋白质大。