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EFFECTS OF TGF-β_1 ON CELLULAR PROLIFERATION ANDEXPRESSION OF TYPE Ⅲ COLLAGEN BY CULTURED RATRENAL INTERSTITIAL FIBROBLASTS
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作者 姚建 王伟铭 +2 位作者 石蓉 楼鼎 董德长 《Medical Bulletin of Shanghai Jiaotong University》 CAS 1999年第1期39-41,50,共4页
Objective To investigate the effects of TGF- β1 on proliferation and type N collagen mRNAexpression of rat renal interstitial libroblasts in vitro for elucidating the role of fibroblasts in renal interstitialfibrosis... Objective To investigate the effects of TGF- β1 on proliferation and type N collagen mRNAexpression of rat renal interstitial libroblasts in vitro for elucidating the role of fibroblasts in renal interstitialfibrosis. Methods The cells were cultured in media containing various concentrations of TGF- β1. Theproliferation and the type Ⅲ collagen mRNA expression of the cells were assayed with MTT method andRT- PCR respectively. Results TGF- β1, has a stimulating proliferation effect with dose- dependence and aincreasing expression of type Ⅲ collagen mRNA with both dose- and time- dependence to the renal fibroblasts. Conclusion It is suggested that TGF- β, is involved in proliferation of renal fibroblasts and their type Ⅲcollagen mRNA expression, and may play an important role in renal interstitial fibrosis. 展开更多
关键词 TGF- β1 TYPE COLLAGEN mRNA renal interstitial FIBROBLAST cellularproliferation
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EFFECTS OF TGF-β_1 ON THE EXPRESSION OF PLASMINOGEN ACTIVATOR INHIBITOR TYPE 1 IN CULTURED HUMAN RENAL INTERSTITIAL FIBROBLASTS
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作者 王伟铭 姚建 +3 位作者 石蓉 周同 陈楠 董德长 《Medical Bulletin of Shanghai Jiaotong University》 CAS 2000年第2期77-79,共3页
Objective To investigate the effects of transforming growth factor-β1 (TGF-β1 ) on the expression of plasminogen activator inhibitor type 1 (PAI-1 ) mRNA in renal interstitial fibrosis in vitro. Methods Human renal ... Objective To investigate the effects of transforming growth factor-β1 (TGF-β1 ) on the expression of plasminogen activator inhibitor type 1 (PAI-1 ) mRNA in renal interstitial fibrosis in vitro. Methods Human renal interstitial fibroblasts were isolated and cultured in vitro. The cells wers stimulated by TGF-β1 with different concentration (0 to 10ng/ml ) at different time (0 to 48h). The expression of PAI-1 mRNA was assayed by RT-PCR. Results TGF-β1, had dose-dependent and time-dependent effects on the expression of PAI-1 mRNA in renal interstitial fibroblasts. Conclusion TGF-β1 may partic- ipate in renal fibrosis with inducing the expression of PAI-1 mRNA in renal fibroblasts and affecting the synthesis and degradation of extracellular matrix (ECM). 展开更多
关键词 transforming growth factor-β1 renal interstitial fibroblasts plasminogen activator inhibitor type 1
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促红细胞生成素对牦牛肾间质成纤维细胞凋亡因子表达的影响
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作者 卢增华 崔燕 +6 位作者 余四九 白雪峰 卢鸿琴 何俊峰 卢凯 翟国亮 祁正满 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3460-3471,共12页
旨在探讨促红细胞生成素(EPO)对牦牛肾间质成纤维细胞(RIFs)中凋亡因子的影响。本研究首先分别采集3头4岁龄的健康牦牛和黄牛的肾脏组织,采用免疫组织化学方法和Western blot检测牦牛和黄牛肾脏中EPO的准确分布及其表达量。同时对牦牛R... 旨在探讨促红细胞生成素(EPO)对牦牛肾间质成纤维细胞(RIFs)中凋亡因子的影响。本研究首先分别采集3头4岁龄的健康牦牛和黄牛的肾脏组织,采用免疫组织化学方法和Western blot检测牦牛和黄牛肾脏中EPO的准确分布及其表达量。同时对牦牛RIFs进行原代培养鉴定,并对其进行不同药物处理来调控RIFs中EPO表达水平,检测EPO对凋亡相关基因Bax,Bcl-2,PCNA在mRNA和蛋白表达水平的影响。免疫组化学检测结果显示,EPO在牦牛和黄牛肾脏中集合管上皮细胞、肾小管上皮细胞和小管周间质成纤维样细胞中均呈阳性表达。qRT-PCR和Western blot结果显示,EPO在牦牛肾脏中的表达量显著高于黄牛(P<0.001)。随后对生成EPO的RIFs进行原代培养并调控EPO的表达,结果表明:激活组显著升高RIFs中Bcl-2和PCNA的表达,降低Bax的表达(P<0.001)。EPO抑制组显著降低RIFs中Bcl-2、PCNA的表达,上调Bax的表达(P<0.001)。综上表明,EPO在牦牛和黄牛肾脏中集合管上皮细胞、肾小管上皮细胞和小管周间质成纤维样细胞中均呈阳性表达,牦牛肾脏中的EPO高表达能够促进RIFs中Bcl-2和PCNA的表达,并降低Bax的表达,说明EPO可以在牦牛肾脏中起到抗凋亡的作用。 展开更多
关键词 (EPO) (RIFs)
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miR-23b-3p调控肾间质成纤维细胞成骨样分化参与Randall斑形成的机制研究 被引量:1
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作者 雷波 邱明星 刘健男 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第12期2064-2072,共9页
目的探究miR-23b-3p对肾间质成纤维(hRIFs)细胞成骨样分化和Randall斑形成的影响及其可能机制。方法采用qRT-PCR技术检测草酸钙(CaOx)结石患者Randall斑组织(RP)和接受肾切除术的肾肿瘤患者正常乳头状组织(nRP)的miR-23b-3p和肌细胞特... 目的探究miR-23b-3p对肾间质成纤维(hRIFs)细胞成骨样分化和Randall斑形成的影响及其可能机制。方法采用qRT-PCR技术检测草酸钙(CaOx)结石患者Randall斑组织(RP)和接受肾切除术的肾肿瘤患者正常乳头状组织(nRP)的miR-23b-3p和肌细胞特异性增强子因子2C(MEF2C)、成骨标志物人骨钙蛋白(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(Runx2)的mRNA表达水平;体外分离、培养hRIFs细胞,将miR-23b-3p过表达质粒pSi-miR-23b-3p及空载质粒pSi-NC和MEF2C慢病毒过表达质粒Lv-MEF2C及空载质粒Lv-NC转染至hRIFs细胞中,并诱导细胞成骨分化14 d;ELISA法检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性;茜素红染色观察各组细胞矿化结节形成情况;qRT-PCR检测细胞中miR-23b-3p和MEF2C、OCN、OPN、Runx2 mRNA表达水平;Western blot检测细胞中MEF2C蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-23b-3p与MEF2C的靶向关系。结果①与nRP组比较,RP组中miR-23b-3p低表达,而MEF2C、OCN、OPN和Runx2 mRNA高表达;②hRIFs成骨诱导14 d后,细胞中ALP活性升高,矿化结节形成能力增强,miR-23b-3p表达水平降低,而MEF2C、OCN、OPN和Runx2 mRNA表达水平及MEF2C蛋白表达水平升高;③miR-23b-3p过表达降低成骨诱导后hRIFs细胞中ALP活性,抑制细胞矿化结节形成能力,下调细胞中OCN、OPN、Runx2 mRNA表达水平;④MEF2C过表达可逆转miR-23b-3p过表达对hRIFs细胞成骨分化的抑制作用;⑤MEF2C是miR-23b-3p下游靶基因。结论miR-23b-3p在RP组织及hRIFs细胞成骨样分化过程中低表达,上调miR-23b-3p可抑制hRIFs细胞的成骨样分化,其作用机制可能与靶向沉默MEF2C有关。 展开更多
关键词 miR-23b-3p 2C Randall
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低氧下牦牛、黑白花牛肾间质成纤维细胞PDK1、Smad2、Caspase3等因子表达差异研究 被引量:2
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作者 姚一凡 张伊阳 +5 位作者 董仕慧 李睿 张兰 周熳琳 乔自林 杨琨 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1335-1343,共9页
为了比较低氧条件下不同海拔牛种肾间质成纤维细胞(RIFs)内PDK1、Smad2、Caspase3等因子的表达差异及细胞增殖差异,并进一步探究牦牛肾脏的高原低氧适应性特点,本研究采用牦牛和黑白花牛RIFs作为研究对象,低氧(1%O2)处理后,通过实时荧... 为了比较低氧条件下不同海拔牛种肾间质成纤维细胞(RIFs)内PDK1、Smad2、Caspase3等因子的表达差异及细胞增殖差异,并进一步探究牦牛肾脏的高原低氧适应性特点,本研究采用牦牛和黑白花牛RIFs作为研究对象,低氧(1%O2)处理后,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(WB)法检测细胞内PDK1等因子表达差异。波形蛋白(Vimentin)免疫组化染色鉴定结果显示,两种牛的原代RIFs纯度较高,可用于后续试验。低氧处理后,两种牛的RIFs内PDK1、Smad2及Caspase3的mRNA和蛋白表达均存在不同程度上调,且种属间存在显著差异(P<0.05),牦牛HIF-1α、PDK1、Smad2及Caspase3等基因表达量于24 h达到峰值,之后下调,而黑白花牛基因则随时间呈递增趋势,且牦牛RIFs低氧下增殖能力低于黑白花牛。综上所述,低氧诱导的相关转录因子表达存在差异,两种牛RIFs的增殖能力存在差异,这可能是导致低氧下黑白花牛肾纤维化程度的加深,从而产生肾源性高原疾病的原因之一。本研究为比较不同海拔牛种肾脏的低氧适应性研究提供了基础数据,为探索牦牛肾脏高原低氧适应机制提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词
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柴胡皂苷D对人肾小管上皮细胞转分化的影响及机制
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作者 王珍 胡浩强 刘国辉 《中南医学科学杂志》 CAS 2023年第6期863-867,893,共6页
目的探讨柴胡皂苷D(SSD)对人肾小管上皮细胞转分化的影响及其作用机制。方法将人肾小管上皮细胞HK-2细胞分为对照组、空白溶剂对照组、肾间质纤维化(RIF)组(5μg/L TGF-β1)、阳性对照组(5μg/L TGF-β1+10μmol/L贝那普利)、SSD组(5μg... 目的探讨柴胡皂苷D(SSD)对人肾小管上皮细胞转分化的影响及其作用机制。方法将人肾小管上皮细胞HK-2细胞分为对照组、空白溶剂对照组、肾间质纤维化(RIF)组(5μg/L TGF-β1)、阳性对照组(5μg/L TGF-β1+10μmol/L贝那普利)、SSD组(5μg/L TGF-β1+10.00μmol/L SSD)、SSD+DKK-1组(5μg/L TGF-β1+10.00μmol/L SSD+100μg/L DKK-1)。光学显微镜观察各组细胞形态变化,免疫荧光检测细胞E-钙黏素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,Western blotting检测细胞基质金属蛋白酶(MMP)-7、Snail、E-cadherin、α-SMA、β-catenin蛋白表达,qRT-PCR检测细胞胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)相对表达量。结果对照组、空白溶剂对照组细胞有序、紧密排列,RIF组细胞呈现出长梭形且细胞排列分散;阳性对照组、SSD组和SSD+DKK-1组中长梭形细胞较RIF组减少且细胞分散程度降低。RIF组E-cadherin荧光斑低于对照组(P<0.05),α-SMA荧光斑和MMP-7、Snail、E-cadherin、α-SMA、β-catenin蛋白表达、CollagenⅠ基因相对表达量高于对照组(P<0.05)。阳性对照组、SSD组E-cadherin荧光斑和蛋白表达高于RIF组(P<0.05),α-SMA荧光斑和MMP-7、Snail、α-SMA、β-catenin蛋白表达、CollagenⅠ基因相对表达量低于RIF组(P<0.05)。SSD+DKK-1组E-cadherin荧光斑和蛋白表达高于SSD组(P<0.05),α-SMA荧光斑和MMP-7、Snail、α-SMA、β-catenin蛋白表达、CollagenⅠ基因相对表达量低于SSD组(P<0.05)。结论SSD可抑制人肾小管上皮细胞转分化,可能与抑制Wnt/β-catenin途径活化有关。 展开更多
关键词 D Wnt/β-catenin
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Effects of Biejia Ruangan Tablet(复方鳖甲软肝片)-Containing Serum on Matrix Metalloproteinase-9 and Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1 Expression in Cultured Renal Interstitial Fibroblasts 被引量:6
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作者 周瑾 陈香美 +3 位作者 刘述文 付博 洪权 王书娟 《Chinese Journal of Integrative Medicine》 SCIE CAS CSCD 2015年第2期152-156,共5页
Objective: To investigate the effects of Biejia Ruangan Tablet (复方鳖甲软肝片, BRT)- containing serum on the expression of matrix metalloproteinase (MMP-9) and tissue inhibitor of metalloproteinase (TIMP-1) in... Objective: To investigate the effects of Biejia Ruangan Tablet (复方鳖甲软肝片, BRT)- containing serum on the expression of matrix metalloproteinase (MMP-9) and tissue inhibitor of metalloproteinase (TIMP-1) in cultured renal interstitial fibroblasts. Methods: Different BRT-containing sera were prepared by gastric gavages to rats with the high-dose (7 g/kg), mid-dose (3.5 g/kg), and low-dose (1.75 g/kg) BRT respectively. The expression of extracellular matrix in NRK-49F cells was induced by treatment with human transforming growth factor-β1 (recombined human TGF-β 1), and BRT-containing serum. Western blotting and Northern blotting were used to measure type I and III procollagen, MMP-9, and TIMP-1. Results: The high dose BRT-containing serum could decrease the type Ⅰ and Ⅲ procollagen gene expression which boosted by TGF- 13 1, at the same time cut down TIMP-1 protein and gene expression which increased by TGF- β1 (P〈0.05). Treatment of cells with recombined human TGF-β 1 had no significant effect on MMP-9 expression and BRT- containing serum also had no effect on MMP-9 expression. Conclusions: High dose BRT has anti-fibrosis effects in NRK-49F cells, as indicated by its inhibition of type Ⅰ and Ⅲ procollagen and TIMP-1 expression. 展开更多
关键词 renal interstitial fibroblasts Biejia Ruangan Tablet type and procollagen matrix metalloproteinase -9 tissue inhibitor of metalloproteinase -1
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血管紧张素II对人肾成纤维细胞增殖的影响 被引量:3
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作者 王俭勤 韦洮 于仲元 《中国血液净化》 2004年第2期94-96,共3页
目的 观察血管紧张素 (AgII)对培养的人肾间质成纤维细胞 (HRIF )增殖的影响。方法 分离培养的HRIF经鉴定后 ,利用3 H -TDR掺入法 ,流式细胞仪及免疫组织化学技术观察了AgII对HRIFDNA合成、细胞周期的影响。结果 ①AgII 10 -10 M至 1... 目的 观察血管紧张素 (AgII)对培养的人肾间质成纤维细胞 (HRIF )增殖的影响。方法 分离培养的HRIF经鉴定后 ,利用3 H -TDR掺入法 ,流式细胞仪及免疫组织化学技术观察了AgII对HRIFDNA合成、细胞周期的影响。结果 ①AgII 10 -10 M至 10 -6M均增加了HRIF3 H -TDR掺入率 ,第 1、3天呈剂量依赖关系(γ1=0 .70 9,P <0 .0 10 ;γ3 =0 .80 6 ,P <0 .0 10 )。②AgII(10 -8M至 10 -5M)明显促进了HRIFG1期向S期转化 (P<0 .0 1)。结论 AgII能够直接诱导HRIF细胞的增殖。 展开更多
关键词 Ag HRJF
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丹参对狼疮性肾炎成纤维细胞增殖、凋亡及c-myc蛋白表达的影响 被引量:22
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作者 张国强 叶任高 +2 位作者 孔庆瑜 李幼姬 关伟明 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第8期473-475,共3页
观察丹参对人肾间质成纤维细胞生物学行为的影响。方法:用狼疮性肾炎(LN)患者肾活检组织培养分离的成纤维细胞,观察丹参对人肾成纤维细胞3H-TdR掺入率的影响,并用流式细胞仪检测了细胞凋亡及c-myc蛋白表达情况。结果... 观察丹参对人肾间质成纤维细胞生物学行为的影响。方法:用狼疮性肾炎(LN)患者肾活检组织培养分离的成纤维细胞,观察丹参对人肾成纤维细胞3H-TdR掺入率的影响,并用流式细胞仪检测了细胞凋亡及c-myc蛋白表达情况。结果:丹参对人肾成纤维细胞增殖有抑制作用,并通过使c-myc蛋白高水平表达而诱导细胞凋亡。结论:患者长期使用大剂量丹参治疗,可能对LN的间质纤维化病变有一定疗效,从而防止或减少疤痕的形成,延缓尿毒症的发生。 展开更多
关键词 C-MYC
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三七总甙对人肾成纤维细胞的影响 被引量:104
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作者 韦颖 樊均明 潘丽萍 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期47-49,共3页
目的 :研究三七总甙 (PNS)对人肾成纤维细胞 (KFB)增殖、分泌I型胶原、表达整合素 β1的影响。方法 :体外培养KFB ,分别采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法、ELISA法、流式细胞仪检测PNS对KFB增殖、分泌Ⅰ型胶原及表达整合素β1的影响。结果 :... 目的 :研究三七总甙 (PNS)对人肾成纤维细胞 (KFB)增殖、分泌I型胶原、表达整合素 β1的影响。方法 :体外培养KFB ,分别采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法、ELISA法、流式细胞仪检测PNS对KFB增殖、分泌Ⅰ型胶原及表达整合素β1的影响。结果 :PNS在最佳浓度范围和作用时间内可明显抑制KFB细胞增殖及分泌Ⅰ型胶原 (与空白对照组比较 ,P <0 0 5 ) ,同时显著降低了KFB上整合素β1的表达 (与空白对照组比较 ,P <0 0 5 )。结论 :PNS可成为防治肾间质纤维化的有效药物。 展开更多
关键词 Β1
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参地补肾胶囊含药血清对高糖诱导转分化HK-2细胞ZO-1、α-SMA表达的影响 被引量:4
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作者 李淑菊 詹晓丹 +1 位作者 田锋 班瑾政 《中国中医药科技》 CAS 2018年第6期797-800,共4页
目的:通过观察参地补肾胶囊含药血清对高糖诱导转分化的人肾小管上皮(HK-2)细胞ZO-1(紧密连接蛋白)、α-SMA(α平滑肌肌动蛋白)表达的影响,从分子生物学水平探讨参地补肾胶囊干预肾小管上皮细胞转分化的机制。方法:制备空白及参地补肾... 目的:通过观察参地补肾胶囊含药血清对高糖诱导转分化的人肾小管上皮(HK-2)细胞ZO-1(紧密连接蛋白)、α-SMA(α平滑肌肌动蛋白)表达的影响,从分子生物学水平探讨参地补肾胶囊干预肾小管上皮细胞转分化的机制。方法:制备空白及参地补肾胶囊、贝那普利含药血清,以高糖诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)作为观察对象,实验分为正常对照组、高糖模型组、参地补肾胶囊组和贝那普利组,各组HK-2细胞培养48 h,采用Western Blot方法检测ZO-1、α-SMA蛋白的表达情况,Real-time PCR技术检测ZO-1mRNA的表达情况。结果:与高糖模型组比较,贝那普利组、参地补肾胶囊组HK-2细胞ZO-1表达量增加(P <0. 05),参地补肾胶囊组ZO-1表达较贝那普利组增强(P <0. 05);贝那普利组及参地补肾胶囊组HK-2细胞a-SMA表达均低于高糖模型组(P <0. 05),参地补肾胶囊组aSMA表达低于贝那普利组(P <0. 05);参地补肾胶囊组ZO-1mRNA表达增加(P <0. 05),高于贝那普利组(P <0. 05)。结论:参地补肾胶囊可能是通过调节细胞ZO-1、α-SMA的表达抑制肾小管上皮细胞向肌成纤维细胞的转分化。 展开更多
关键词 α-
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CPT1A对糖尿病肾病肾间质纤维化的保护作用
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作者 熊莉 赵景宏 +2 位作者 何婷 肖堂利 刘赤 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期810-816,共7页
目的探讨肉碱棕榈酰转移酶1A(palmitoyl-transferase 1A,CPT1A)在糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)肾间质纤维化中的作用。方法16只4周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为(n=8):对照组(Ctrl组,给予普通饲料喂养)和DKD组[通过高脂饮食联... 目的探讨肉碱棕榈酰转移酶1A(palmitoyl-transferase 1A,CPT1A)在糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)肾间质纤维化中的作用。方法16只4周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为(n=8):对照组(Ctrl组,给予普通饲料喂养)和DKD组[通过高脂饮食联合链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)制备DKD模型]。每4周收集小鼠24 h尿液,检测空腹血糖和体质量。建模16周(小鼠20周龄)后取材并检测2组小鼠血肌酐水平、尿蛋白/尿肌酐比值,PAS和Masson染色观察肾小球病理改变和肾间质纤维化程度,免疫组化染色、Western blot观察CPT1A及纤维化标志物的表达。体外培养人近端肾小管上皮细胞(proximal tubular cell line,HK-2)后分3组:正常对照(Ctrl)组、30 mmol/L高糖(high glucose,HG)组、30 mmol/L甘露醇(mannitol,M)组,孵育48 h后观察CPT1A、纤维化标志物的表达。CPT1A过表达质粒转染HK-2细胞后再予以30 mmol/L高糖处理,观察各组细胞形态和纤维化标志物的表达。结果与Ctrl组小鼠相比,DKD组小鼠肾小球体积增大、系膜基质增多和出现肾间质纤维化,同时血肌酐、尿蛋白/尿肌酐比值显著升高(P<0.05),肾组织CPT1A表达明显降低,而纤维化标志物表达显著升高。体外实验中:高糖导致HK-2细胞失去原有形态、呈长梭形改变,CPT1A表达降低和纤维化标志物表达升高,并与渗透压改变无关。而CPT1A过表达能抑制高糖诱导的HK-2细胞形态改变和纤维化标志物高表达。结论上调CPT1A表达可能对糖尿病肾病肾间质纤维化具有潜在的抑制作用。 展开更多
关键词 1A 尿
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罗格列酮对环孢素A作用下大鼠肾脏成纤维细胞转化生长因子-β1和层黏连蛋白表达的影响
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作者 刘章锁 程根阳 +3 位作者 李海剑 刘书真 李继昌 刘钟明 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第6期1048-1051,共4页
目的:观察罗格列酮(RGZ)对环孢素A作用下大鼠肾脏成纤维细胞(NRK)转化生长因子-β1(TGF-β1)和层黏连蛋白(FN)表达的影响,探讨罗格列酮对环孢素A肾毒性的改善作用及其机制。方法:体外培养NRK细胞,在无血清DMEM低糖培养基同步化24h后,随... 目的:观察罗格列酮(RGZ)对环孢素A作用下大鼠肾脏成纤维细胞(NRK)转化生长因子-β1(TGF-β1)和层黏连蛋白(FN)表达的影响,探讨罗格列酮对环孢素A肾毒性的改善作用及其机制。方法:体外培养NRK细胞,在无血清DMEM低糖培养基同步化24h后,随机分为7组:正常对照组,CsA0.25mg/L组,CsA0.5mg/L组,CsA1.0mg/L组,CsA2.0mg/L组,CsA1.0mg/L加RGZ10μmol/L组,CsA1.0mg/L加RGZ15μmol/L组,继续培养24h后,收集细胞,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组细胞中TGF-β1mRNA表达,用蛋白印迹(Western blotting)方法检测FN蛋白的表达。结果:不同质量浓度的CsA均可促进TGF-β1 mRNA和FN蛋白表达(P<0.05),罗格列酮能显著下调CsA引起的TGF-β1 mRNA和FN蛋白的高表达。结论:罗格列酮可通过下调CsA引起的TGF-β1和FN的高表达,抑制CsA导致的肾脏成纤维细胞外基质的蓄积。 展开更多
关键词 A -Β1
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转化生长因子-β1和碱性成纤维生长因子与儿童原发性肾小球疾病的相关性研究 被引量:11
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作者 邵晓珊 靳蓉 +2 位作者 蒋新辉 李宇红 仝铁 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期788-791,共4页
目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)和碱性成纤维生长因子(bFGF)蛋白在儿童肾小球疾病中的表达及其与儿童原发性肾小球疾病的相关性。方法采用免疫组化方法(Envision二步法)检测微小病变(MCNS)10例、系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)25例、... 目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)和碱性成纤维生长因子(bFGF)蛋白在儿童肾小球疾病中的表达及其与儿童原发性肾小球疾病的相关性。方法采用免疫组化方法(Envision二步法)检测微小病变(MCNS)10例、系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)25例、局灶节段硬化(FSGS)8例、膜性肾病(MN)7例,观察TGF-β1、bFGF蛋白在儿童肾小球疾病的表达情况。结果在不同肾小球疾病患儿肾小球上皮细胞及肾小管间质细胞均有不同程度的TGF-β1和bFGF蛋白的阳性表达,与正常肾组织比较差异有统计学意义(P<0.001)。小管间质TGF-β1和bFGF的蛋白表达明显高于肾小球内表达,差异有统计学意义(P<0.05)。随肾小管间质损伤和炎症细胞浸润程度及纤维化程度加重,TGF-β1和bFGF蛋白表达明显增加(P<0.05)。TGF-β1、bFGF的表达以FSGS最强,其次依次为MN、MsPGN、MCNS。同步观察发现TGF-β1与bFGF肾内表达在阳性染色强度及分布上基本一致,二者之间存在显著正相关。肾小球疾病肾组织TGF-β1、bFGF表达水平与尿RBP、24h尿蛋白定量显著相关(P<0.05)。结论TGF-β1与bFGF在肾组织内的共同表达,提示二者对肾小球疾病的进展可能有协同作用。其过度共表达参与了肾小球疾病的进展,主要参与肾小管-间质的损害。因此,阻断TGF-β1和bFGF信号传导,可能会延缓肾小球硬化的进展。 展开更多
关键词 -Β1
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PPAR-γ通过活化PTEN抑制肾间质成纤维细胞MMP2的活化 被引量:6
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作者 卢家美 刘丹 +4 位作者 张苏梅 杨艳艳 吕治安 韩锦 付荣国 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期386-391,共6页
目的探讨激活的PPAR-γ是否通过活化PTEN抑制血小板源性生长因子(PDGF)刺激的肾间质成纤维细胞MMP2活化,从而介导肾间质纤维化的发生。方法以原代分离培养的小鼠肾间质成纤维细胞为研究对象,以肾间质纤维化的主要刺激因子PDGF-AA刺激细... 目的探讨激活的PPAR-γ是否通过活化PTEN抑制血小板源性生长因子(PDGF)刺激的肾间质成纤维细胞MMP2活化,从而介导肾间质纤维化的发生。方法以原代分离培养的小鼠肾间质成纤维细胞为研究对象,以肾间质纤维化的主要刺激因子PDGF-AA刺激细胞。于PDGF-AA刺激细胞前,分别予以罗格列酮激活PPAR-γ,PI3K、PTEN、PPAR-γ特异性抑制剂LY294002、bpV(Pic)、GW9662预处理细胞,检测AKT、PTEN、PPAR-γ、MMP2的活化水平。结果成功分离并培养小鼠肾间质成纤维细胞,并证实PDGF-AA可剂量依赖性激活MMP2,而对MMP9、TIMPs无影响。特异性抑制PI3K/AKT信号通路或激活PPAR-γ显著抑制PDGF-AA刺激的AKT、MMP2活性;抑制PTEN可逆转PPAR-γ激活对PDGF-AA诱导的AKT磷酸化及MMP2活性的影响。结论 PI3K/AKT信号通路特异性介导PDGF-AA诱导的肾间质成纤维细胞MMP2的活化;激活的PPAR-γ通过活化PTEN抑制PI3K/AKT信号通路进而抑制MMP2活化。 展开更多
关键词 -2 -Γ
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1-(3-氟苯基)-5-甲基-2-(1H)吡啶酮对鼠肾成纤维细胞的影响 被引量:5
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作者 陶立坚 张军 +2 位作者 胡高云 陈卓 龚娟 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期139-141,共3页
目的 :探讨 1 (3 氟苯基 ) 5 甲基 2 (1H)吡啶酮对鼠肾纤维化的治疗作用。方法 :采用MTT法和ELISA法分别检测 1 (3 氟苯基 ) 5 甲基 2 (1H)吡啶酮和pirfenidone对鼠肾成纤维细胞 (BHK 2 1 )增殖和分泌纤维结合蛋白 (Fn)表达... 目的 :探讨 1 (3 氟苯基 ) 5 甲基 2 (1H)吡啶酮对鼠肾纤维化的治疗作用。方法 :采用MTT法和ELISA法分别检测 1 (3 氟苯基 ) 5 甲基 2 (1H)吡啶酮和pirfenidone对鼠肾成纤维细胞 (BHK 2 1 )增殖和分泌纤维结合蛋白 (Fn)表达的影响。结果 :1 (3 氟苯基 ) 5 甲基 2 (1H)吡啶酮作用于鼠肾成纤维细胞 4 8h后能明显抑制细胞增殖及分泌Fn ,1 0 0 0 μg/ml的 1 (3 氟苯基 ) 5 甲基 2 (1H)吡啶酮作用于BHK 2 1后 2 4h即可明显抑制BHK 2 1细胞增殖。结论 :1 (3 氟苯基 ) 5 甲基 2 (1H)吡啶酮可明显抑制鼠肾成纤维细胞增殖 。 展开更多
关键词
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TGF-β1对肾间质成纤维细胞Ⅲ型胶原表达的影响 被引量:5
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作者 王伟铭 姚建 +1 位作者 石蓉 董德长 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第1期29-31,共3页
目的通过观察TGF β1对肾间质成纤维细胞的增殖及Ⅲ型胶原mRNA表达的影响 ,探讨肾间质成纤维细胞在肾纤维化过程中的作用。方法应用大鼠肾间质成纤维细胞体外培养 ,以MTT比色法和RT PCR法 ,观察TGF β1对肾间质成纤维细胞的增殖作用和... 目的通过观察TGF β1对肾间质成纤维细胞的增殖及Ⅲ型胶原mRNA表达的影响 ,探讨肾间质成纤维细胞在肾纤维化过程中的作用。方法应用大鼠肾间质成纤维细胞体外培养 ,以MTT比色法和RT PCR法 ,观察TGF β1对肾间质成纤维细胞的增殖作用和对Ⅲ型胶原mRNA表达的影响。结果TGF β1可促进肾间质成纤维细胞的增殖 ,且与TGF β1的质量浓度呈正相关 ;TGF β1可刺激肾间质成纤细胞Ⅲ型胶原mRNA的表达 ,并呈剂量和时间依赖效应。结论TGF β1与肾间质成纤维细胞的相互作用 ,在肾间质纤维化中可能起重要的作用。 展开更多
关键词 TGF-Β1
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肾衰泻浊丸对肾间质纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号转导通路的影响 被引量:11
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作者 刘娜 张佩青 +1 位作者 王丽彦 吕波 《中医药学报》 CAS 2010年第4期22-25,共4页
目的:通过实验研究观察肾衰泻浊丸对腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠的TGF-β1/Smads信号转导通路的影响,探讨肾衰泻浊丸抗肾间质纤维化的机理。方法:采用腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠模型,观察治疗后实验大鼠肾间质纤维化情况;采用免疫组织化学... 目的:通过实验研究观察肾衰泻浊丸对腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠的TGF-β1/Smads信号转导通路的影响,探讨肾衰泻浊丸抗肾间质纤维化的机理。方法:采用腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠模型,观察治疗后实验大鼠肾间质纤维化情况;采用免疫组织化学法分别检测肾组织中的TGF-β1、Smad2/3蛋白的表达,采用Western Blot法检测肾组织内的Smad2/3蛋白的表达,采用半定量RT-PCR检测肾组织内的TGF-β1mRNA的表达水平。结果:肾衰泻浊丸能够减少肾间质纤维化面积;能够降低肾间质纤维化大鼠肾组织中TGF-β1,Smad2/3蛋白的表达,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);能够下调肾组织中TGF-β1mRNA的表达,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:肾衰泻浊丸可能是通过降低Smad2/3、TGF-β1的蛋白表达,从而抑制了TGF-β1信号向细胞核内转导的通路,这可能是其延缓肾间质纤维化进展的机制之一。 展开更多
关键词 TGF-Β1 SMAD
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来氟米特抑制结缔组织生长因子诱导的肾间质成纤维细胞增殖和胶原合成的研究 被引量:7
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作者 王玉柱 周春华 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第13期1545-1548,共4页
目的探讨来氟米特(LEF)对人肾间质成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法在体外培养的人肾间质成纤维细胞中,加入不同浓度来氟米特活性代谢产物A771726和重组人结缔组织生长因子(rhCT-GF),MTT法测定两者单独及同时干预下细胞增殖情况;EL... 目的探讨来氟米特(LEF)对人肾间质成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法在体外培养的人肾间质成纤维细胞中,加入不同浓度来氟米特活性代谢产物A771726和重组人结缔组织生长因子(rhCT-GF),MTT法测定两者单独及同时干预下细胞增殖情况;ELISA法测定细胞合成I、IV型胶原的含量。结果经不同浓度的rhCTGF刺激,成纤维细胞增殖和细胞合呈I型、IV型胶原均成剂量依赖性增加(P<0.01);而来氟米特作用细胞后,细胞增殖及胶原合成均呈剂量依赖性减少(P<0.01);在来氟米特与结缔组织生长因子(CTGF)共同作用下,细胞的增殖和胶原的合成较单用同剂量的CTGF时减少(P<0.05)。结论rhCTGF能够促进人肾间质成纤维细胞的增殖及I、IV型胶原合成;来氟米特则抑制细胞的增殖及细胞合成I、IV型胶原;来氟米特对rhCTGF诱导的胶原合成增加有一定的拮抗作用。 展开更多
关键词
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蛋白酶体抑制剂对肾间质成纤维细胞凋亡和增殖的影响 被引量:5
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作者 朱冰冰 靳远萌 +2 位作者 章慧娣 王伟铭 陈楠 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 2007年第5期441-446,共6页
目的:探讨泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)及其在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导下的细胞凋亡和增殖情况,并初步探索其机制。方法:采用5ng/ml的TGF-β1作用于NRK-49F,不同浓度(0~5μM)的蛋白酶体... 目的:探讨泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)及其在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导下的细胞凋亡和增殖情况,并初步探索其机制。方法:采用5ng/ml的TGF-β1作用于NRK-49F,不同浓度(0~5μM)的蛋白酶体抑制剂MG-132预处理NRK-49F细胞,应用MTT法检测其增殖情况,LDH法检测细胞毒性,应用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态学变化,Westernblot检测p-IKβ1IKB蛋白的变化。结果:TGF-Bl(5ng/m1)能促进NRK-49F的增殖(0.661±0.04猫0.495±0.06),MG-132(O.25—5μM)呈剂量依赖型抑制这种效应;MG-132(0.1—5μM)对NRK-49F有一定的细胞毒性作用,在0.5μM时达高峰;TGF-β1单独不能促使NRK-49F的凋亡[(3.8±0.4)%摊(4.7±1.6)%],但加用MG.132(0.1—2.5μM)干预后呈剂量依赖关系促进细胞凋亡,MG-132单独也有促进细胞凋亡作用;MG-132(0~1斗M)作用于TGF-β1诱导的NRK-49F后,其S期比例呈剂量依赖关系显著减少,G1期细胞比例增加;Hoechst33258染色显示MG.132(0.5μM)+TGF-β1组及MG-132组细胞核均出现核固缩、核碎裂、凋亡小体等凋亡特异形态学改变;Westernblot结果显示,TGF-β1及MG-132(2.5μM)+TGF-β1均能以时间依赖方式诱导p-IKB、IKB蛋白表达增加,且MG-132能上调TGF-β1诱导下的p-Iκβ, IκB蛋白表达。结论:泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对正常及病理状态下的NRK-49F都有促凋亡作用,并可能通过G1期阻滞过程来抑制其增殖作用。其机制可能与MG-132阻断IKB蛋白的泛素化降解有关。 展开更多
关键词 Β IκB
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