PHA-LAK/IL-2疗法的应用与评价——60例实体瘤患者临床试验分析

取健康“O”型供血者的PBMC经PHA预刺激后制成PHA-LAK,其表型以CD3^+、CD8^+为主,IL-2R表达水平、增殖能力、体外存活时间及细胞毒活性等均明显优于常规LAK。用该PHA-LAK(PHA预刺激的LAK细胞)与rIL-2(TGP-3,日本,武田)治疗60例实体瘤患者(肾癌24例,肝癌、恶性淋巴瘤、结肠癌各5例,肺癌12例,其它恶性肿瘤9例)。Ⅰ、Ⅱ期临床试验结果表明,本PHA-LAK/IL-2疗法毒副作用甚轻或无,对肾癌、肝癌、恶性淋巴瘤的近期疗效较好,从而为肿瘤的继承性细胞免疫治疗开拓了新路。

原发性肝癌肝动脉化疗栓塞合并LAK/IL-2灌注治疗的临床Ⅲ期观察

评价肝动脉化疗栓塞合并ＬＡＫ／ＩＬ┐２灌注治疗原发性肝癌的初步疗效。方法不能切除的肝癌患者经肝动脉化疗栓塞后灌注自体ＬＡＫ细胞及ＩＬ┐２，并与单独行肝动脉化疗栓塞的不能切除肝癌患者比较其肿瘤大小，生活质量的变化及毒副反应。结果经肝动脉化疗栓塞合并ＬＡＫ／ＩＬ┐２灌注治疗的２２例肝癌有效率（ＣＲ＋ＰＲ）为１３．６％，包括１例完全缓解和２例部分缓解，而单独化疗栓塞对照组１７例中仅１例显示部分缓解（有效率５．９％）。化疗栓塞＋ＬＡＫ／ＩＬ┐２治疗组与单独化疗栓塞对照组中ＭＲ、ＳＤ、ＰＤ分别为５、１２、１例和１、１１、４例。治疗组中大多数病人生活质量改善或稳定，而对照组中生活质量则无提高。两组病人的毒副反应均较轻而短暂。结论经肝动脉化疗栓塞合并ＬＡＫ／ＩＬ┐２灌注治疗原发性肝癌疗效较优于单独肝动脉化疗栓塞治疗。

转基因细胞SPC-A-1/IL-2的致突变性研究

目的：观察转基因细胞ＳＰＣ－Ａ－１／ＩＬ－２的致突变作用，为转基因肿瘤细胞作为瘤苗进行临床应用的安全性检测提供依据。方法：在人ＩＬ－２的ｃＤＮＡ与逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ重组并完成ＰＡ３１７／ｐＬＩＬ－２ＳＮ包装体系的基础上，将ＩＬ－２基因导入人肺腺癌胸膜转移细胞系ＳＰＣ－Ａ－１中并得到ＩＬ－２基因的稳定表达，然后通过遗传毒理学实验技术对转基因细胞ＳＰＣ－Ａ－１／ＩＬ－２的ＤＮＡ及培养上清液进行体内和体外的致突变性实验研究。结果：转基因细胞ＳＰＣ－Ａ－１／ＩＬ－２的ＤＮＡ及培养上清液均未显出致突变作用。结论：转基因细胞ＳＰＣ－Ａ－１／ＩＬ－２作为瘤苗应用可初步视为是安全可靠的。

CD_(25)/IL-2Ra在人肝组织毛细胆管上的表达

目的观察CD25/IL-2Ra在人肝毛细胆管上的表达,以利于肝毛细胆管分布、形态的观察。方法引用免疫组化方法观察CD25/IL-2Ra分子在人肝毛细胆管上的表达,并设立阳性对照(扁桃体)和CD4、CD8之间的片间对照。通过免疫荧光法观察CD25/IL-2Ra在肝毛细胆管上的表达,结果与免疫组化相一致。通过阻断试验进一步确认肝毛细胆管上CD25/IL-2Ra分子表达的特异性。通过与国际公认的CEA(多克隆抗体)作对照,进一步确认CD25/IL-2Ra是一种优良的肝毛细胆管标记物。结果常规免疫组化方法DAB显色CD25/IL-2Ra标记的毛细胆管显棕黄色条索状结构,显示结果比国际公认的CEA更佳,免疫荧光呈索状绿色荧光表达,阻断试验进一步确认肝毛细胆管上CD25/IL-2Ra分子的存在。结论免疫组化、免疫荧光法检测CD25/IL-2Ra表达来观察肝脏毛细胆管的分布、形态等,具有明确的特异性。

异体LAK/IL-2对晚期肝癌与其它晚期癌症的疗效比较

异体ＬＡＫ／ＩＬ－２对晚期肝癌与其它晚期癌症的疗效比较徐亚利姜敏傅颖君（江西医学院临床药理基地，南昌３３０００６）ＬＡＫ／ＩＬ－２疗法具有广泛杀伤肿瘤细胞的作用，是常用的抗肿瘤手段之一。近年来，多数ＬＡＫ细胞治疗采用自体血。我们自１９９６年９月至１９...

内窥镜下注射LAK/IL-2治疗消化道肿瘤的护理体会

本文报道内窥镜下局部注射LAK/IL-2治疗消化道恶性肿瘤9例,CR1例,PR5例,MR1例,NR2例。所有癌灶表面糜烂,污垢均明显改善,病人食欲增加,吞咽困难减轻。

IL-2/IL-2R系统介导靶向杀伤高表达IL-2R恶性血液病的新策略

鉴于恶性血液病细胞异常高地表达IL-2R这一事实,近年来研究者们提出了利用IL-2R与IL-2R的特异性结合来导向传递重组IL-2毒素融合蛋白以达到特异性杀伤高表达IL-2R恶性血液病细胞的新策略,它标志着肿瘤导向杀伤研究的最新进展之一.本文对近年来国际上利用IL-2/IL-2R系统介导重组IL-2-毒素融合蛋白选择性杀伤恶性血液病细胞以及对正常造血影响的某些进展加以概述.

肝动脉灌注LAK/IL-2及化疗药物治疗晚期肝癌

目的 观察经皮肝动脉插管化疗药物灌注、栓塞术联合 LAK/IL -2灌注治疗中晚期肝癌的疗效、T淋巴细胞改变及副反应。方法 96例经确诊的中晚期肝癌 ,随机分为动脉化疗栓塞联合 LAK/IL -2观察组及单纯介入化疗栓塞组各 48例。两组均采用经皮穿刺肝动脉插管灌注化疗药物及栓塞。化疗药物 5 -FU 10 0 0 mg+卡铂 3 0 0 mg+表阿霉素 3 0 mg或丝裂霉素 10～ 2 0 mg,栓塞剂为碘化油和明胶海绵 ,介入治疗 3～ 4周 1次 ,2次为 1疗程。观察组在栓塞后沿导管灌注同种异体 LAK细胞 1× 10 9/10 0 ml及 IL-2 40万U,2次介入间隔观察每周 3次静滴 1× 10 9/10 0 ml LAK细胞及每日肌注 IL-2 10万 U。结果 观察组总有效率 ( CR+PR)为 7.2 9%( 3 5 /48) ,对照组总有效率 ( CR+PR)为 5 8.3 % ( 2 8/48) ,两组比较相差有显著差性 ( P<0 .0 5 )。观察组 T淋巴细胞治疗前后变化有统计学意义 ( P<0 .0 1) ,而对照组无统计学意义。结论 同种异体 LAK细胞联合化疗及栓塞治疗中晚期肝癌较单纯介入化疗栓塞疗效明显提高 。

LAK/IL-2疗法临床应用研究近况

ＬＡＫ／ＩＬ－２疗法临床应用研究近况广西柳州市工人医院李桂生（柳州５４５００５）体内参与抗癌的细胞包括ＣＴＬ细胞、ＮＫ、ＮＣ、Ｋ细胞、ＬＡＫ细胞、巨噬细胞。ＬＡＫ细胞是研究较多也是主要的抗癌细胞。本文就其目前的临床研究应用情况作一简要回顾及展望。１Ｌ...

体液免疫中IL-2/IL-2R整合CD4+T细胞信号形成Tfh

总结了参与Th细胞各种亚型分化的主要信号途径,并对IL-2/IL-2R信号影响Th亚型分化的分子机制进行了深入探讨.IL-2/IL-2R信号可能作为一种调节分子可以整合CD4+T细胞在免疫应答中的多种信号,从而将T细胞打造成一种更为成熟的形式,然后迁移至B淋巴滤泡和生发中心处辅助B细胞产生抗体和形成记忆B细胞.据此,推测这种成熟形式的Th就是Tfh,并提出了Tfh细胞产生及功能发挥的新模型,以正确认识Tfh在体液免疫中的关键作用.

分泌型rhGM-CSF/IL-2融合蛋白表达载体的构建

目的 将GM-CSF基因与IL-2基因通过一中间接头G-G-G-S-G-G-S-G连接到一起,并在E.coli中分泌表达具有更高GM-CSF和IL-2生物活性的融合蛋白分子。方法 在引物设计中,通过选择密码子,在Linker的中前部设计了一个BamHI酶切位点,GM-CSF的下游引物和IL-2的上游引物均起始于该位点。然后通过PCR、酶切、连接等一系列分子克隆的方法,构建融合蛋白的克隆及表达载体。结果 经EcoRI/SaII双酶切鉴定,克隆载体pUC19GM-CSF/L/IL-2及表达载体pBVGMCSF/L/IL-2中均插入了正确的外源片段。结论 克隆及表达载体的成功构建,为进一步表达融合蛋白及活性研究打下了基础。

脐血LAK/IL-2治疗不同恶性肿瘤的免疫指标变化及其意义

观察了20例肿瘤患者应用脐血LAK/IL-2疗法前后其免疫指标的改善,包括血清可溶性白介素-2受体、NK细胞活性、肿瘤坏死因子。治疗结果显示:白介素-2受体减少、TNF水平降低、NK活性升高,提示脐血LAK/IL-2治疗可改善肿瘤患者机体免疫功能。

肿瘤负荷对CIK/IL-2临床疗效的影响

目的:自从1993年SchmidtWolf建立细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)制备方法以来,CIK/IL-2在净化骨髓和治疗血液病方面取得较多经验,但缺乏CIK/IL-2治疗实体瘤的临床资料。本文总结应用CIK/IL-2治疗41例实体瘤的临床经验,分析肿瘤负荷对该疗法临床疗效的影响。方法:选择无临床病灶的高危复发患者和存在明显临床病灶的晚期实体瘤患者,分离外周血单个核细胞,制备CIK。CIK联合IL-2静脉输注患者。结果:高危复发组中,姑息性治疗9例,根治性治疗14例,中位随访时间13个月。接受CIK/IL-2治疗后姑息性治疗者复发6例,根治性治疗者复发3例,复发率分别为66.7%和21.4%(P<0.05)。此外,CIK/IL-2治疗常规治疗失败的晚期实体瘤患者18例,4例稳定。结论:CIK/IL-2的临床疗效受肿瘤负荷制约,接受CIK/IL-2辅助治疗前应联合其它治疗方法尽量降低肿瘤负荷。

HG-1/IL-2基因修饰瘤苗治疗晚期胃癌的初步临床研究(附8例报告)

目的 :评估同种异型 (HLA A2 +)IL 2基因工程化人胃癌细胞瘤苗 (HG 1/IL 2 )治疗晚期胃癌的毒副作用及临床安全性。方法 :应用基因工程技术 ,以逆转录病毒载体介导将人IL 2cDNA转导入人胃癌细胞株MKN 45 ,经10 0Gy60Co照射灭活后 ,制备成基因工程化胃癌细胞瘤苗 (HG 1/IL 2 )。 2 0 0 1年 4月～ 2 0 0 1年 7月 ,对 8例晚期胃癌病人施行HG 1/IL 2瘤苗治疗。以 5次接种为一疗程 ,接种时间分别在第 1、8、15、2 9和第 5 8天 ,每次于一侧腹股沟和对侧腋部皮下多点注射 1× 10 7个细胞。每次接种后严格观察毒副反应 ,并在治疗开始前一周和治疗结束后进行临床评估 ,同时进行凝血功能、血液生化学、肿瘤标记物及相关免疫指标检测。结果 :除 1例在第 3次接种后 ,因高热和全身性荨麻疹而终止试验外 ,余均顺利完成治疗。接种后低热和注射局部红肿、酸胀感是最常见的反应。治疗前后未观察到病人血液学、凝血功能、肝肾功能、血清标志物等指标的明显异常。部分病人治疗后血清转铁蛋白、IgG、IgA、IgM、IL 2等体液免疫指标和CD3 、CD4 、CD8等细胞免疫指标有一定程度升高。结论 :在密切观察的前提下 ,HG 1/IL

组胺联合LAK/IL-2疗法治疗转移性黑色素瘤

目的 :研究组胺对C5 7BL/ 6小鼠脾源性LAK细胞体内杀伤活性的调控作用及可能的机理。方法 :以B16恶性黑色素瘤肺转移的C5 7BL/ 6小鼠作为治疗对象 ,比较LAK/IL 2 /组胺疗法与LAK/IL 2疗法导致的近期疗效和远期疗效之间的差异。结果 :组胺可明显增强LAK/IL 2疗法的体内抗肿瘤转移活性 ,产生明显的肿瘤消退 ,近期疗效优于LAK/IL 2疗法 ;组胺与单纯LAK/IL 2治疗相比 ,LAK/IL 2 /组胺疗法显著提高了荷B16恶性黑色素瘤小鼠的生存时间和生存率 ,具有较好的远期疗效 ;组胺的这一协同效应可被H2 受体拮抗剂雷尼替丁完全阻断 ,H2 受体激动剂dimaprit则可模拟这一效应。结论 :用组胺和LAK/IL 2联合应用在C5 7BL/ 6小鼠体内具有较强的协同效应 ,对B16恶性黑色素瘤细胞的杀伤效果明显优于传统的LAK/IL 2疗法 ;组胺的这一效应是通过体内单核巨噬细胞上的组胺H2 受体介导的。

日本血吸虫抗独特型抗体NP30重链6×CDR3/IL-2融合基因构建及表达

目的:构建日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30重链可变区6×CDR3基因/IL-2融合基因,以观察其对动物的抗血吸虫感染保护作用。方法:通过PCR方法体外扩增NP30 6×V_HCDR3和IL-2基因,经测序后先后重组入原核表达质粒pET-28a(+)相应的位点上,将构建正确的6×V_HCDR3/IL-2-pET-28a(+)表达质粒转化E.coli BL21,IPTG诱导表达。结果:构建的6×V_HCDR3/IL-2融合基因中,6×V_HCDR3和IL-2序列均正确,融合基因经IPTG诱导表达重组蛋白,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析分子质量约为30ku,表达量约占菌体总蛋白的20％。结论:成功构建并原核表达了NP30 6×V_HCDR3/IL-2融合基因。

LAK细胞/IL-2联合放射免疫治疗晚期肿瘤的临床研究

观察了72例接受不同方法治疗的晚期消化道恶性肿瘤患者愈后及γ显像情况,患者随机分为3组,第一组21例单独应用131I标记的抗结肠癌单克隆抗体CL3(简称131I-CL3)局部多点注射治疗;第二组33例接受LAK细胞/IL-2静脉注射治疗;第三组18例接受LAK细胞/IL-2联合131I-CL3肿瘤局部多点注射治疗。发现:(1)LAK细胞/IL-2和131I-CL3联合应用组,肿瘤局部核素标记抗体浓聚大于131I-CL3组。(2)联合应用LAK细胞/IL-2及131I-CL3治疗组的有效率(CR+PR,50%)明显高于131I-CL3治疗组(238%)及LAK细胞/IL-2治疗组(121%)。说明LAK细胞/IL-2联合应用后可增强放免显像及放免治疗的效果。

LAK/IL-2治疗24例晚期肝癌的疗效分析

为了研究异体ＬＡＫ／ＩＬ２治疗的最佳方案，将２４例晚期肝癌分为３个不同疗程的治疗组，结果显示反复多次ＬＡＫ／ＩＬ２治疗组效果优于单次治疗组及对照组。

以LAK/IL-2为主的肿瘤过继免疫治疗在国内的应用

以ＬＡＫ／ＩＬ┐２为主的肿瘤过继免疫治疗在国内的应用李殿俊１刘旭１张春艳１张树强２作者单位：１．哈医大肿瘤研究所（哈尔滨１５００４０）２．大庆市第五医院肿瘤过继免疫治疗（Ａｄｏｐｔｉｖｅｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）是指将具有杀伤活性的免疫效应细胞如Ｌ...