北海道黄杨下胚轴的离体培养及植株再生

以北海道黄杨(Euonymus japonicus‘Cuzhi’)下胚轴为外植体进行离体培养,以MS和B5为基本培养基,附加不同浓度的细胞分裂素(6-BA,KT)及生长素(NAA,IBA)诱导下胚轴直接再生不定芽。结果表明,不定芽未经过愈伤组织而直接产生于下胚轴的表皮或近表皮等表层细胞;不同的激素浓度和组合以及不同的培养基对不定芽的分化有影响;下胚轴的不同部位不定芽的分化能力差异显著。适宜不定芽分化的最佳培养体系为MS+1.5mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA,最佳外植体为靠近子叶端的下胚轴部分,其分化率最高达63.64%;不定芽增殖培养基为MS+2.0mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA,增殖系数为3～5;1/2MS+1.0mg·L-1IBA+100mg·L-1活性炭适于再生幼苗的生根,生根苗经移栽成活。

根癌农杆菌介导北海道黄杨遗传转化体系的建立

在建立北海道黄杨(Euonymus japonicus ‘CuZhi’)再生体系的基础上,建立其遗传转化体系,以获得转雪花莲外源凝集素(Galanthus nivalis agglutinin,GNA)基因植株。采用根癌农杆菌(Agr-robacterium tumefaciens,LBA4404菌株)介导法,研究影响北海道黄杨遗传转化的若干因素。结果表明,预培养与否、菌液浓度、侵染时间、共培养时间等对转化频率都有一定的影响。在遗传转化过程中,不经预培养,根癌农杆菌浓度OD600=0.6,侵染下胚轴40min,再共培养3d,有利于获得最高遗传转化效率。抗性植株经PCR和DNA-Southern blot检测表明,目的基因已整合到北海道黄杨基因组中。

低温胁迫过程中北海道黄杨叶肉细胞Ca^(2+)的动态变化

用焦锑酸钙沉淀的电镜细胞化学方法,研究露天生长的北海道黄杨低温胁迫过程中叶肉细胞Ca2+的动态变化。结果表明:与夏季的叶肉细胞相比,从11月份到翌年1月期间,Ca2+沉淀颗粒起初主要分布在细胞间隙和液泡,细胞质中有少量的Ca2+沉淀颗粒,大多数叶绿体中的淀粉粒消失,嗜锇颗粒增加;随后逐渐变化为胞间隙和液泡中Ca2+沉淀颗粒减少,而细胞质基质的Ca2+沉淀颗粒显著增加。在此期间叶肉细胞的一些叶绿体膜泡化,出现解体现象;线粒体的数量增加;中央大液泡变成数个小液泡。低温胁迫过程中叶肉细胞Ca2+的浓度和分布的变化与细胞超微结构的变化存在一定的相关性。

北海道黄杨叶片离体培养及其细胞耐盐性

以北海道黄杨叶片为材料进行愈伤组织诱导及细胞增殖培养试验,同时开展不同浓度NaCl胁迫下愈伤组织培养,探讨外源激素对叶片离体培养的影响及其愈伤组织的耐盐性。结果表明,北海道黄杨叶片诱导愈伤组织最适培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.3 g/L,有利于愈伤组织增殖的激素为2,4-D0.5 mg/L;0.2%NaCl胁迫对愈伤组织生长影响较小,NaCl浓度高于0.4%时,随盐浓度升高愈伤组织脯氨酸含量增加,生长量急剧降低。

4℃胁迫过程中大叶黄杨和北海道黄杨叶片抗寒生理生化指标的变化

以大叶黄杨(Euonymus japonicus Thunb.)和北海道黄杨(Euonymus japonicus.cv.‘CuZhi’)的扦插植株为试验材料,测定4℃低温胁迫过程中,叶片抗氧化酶(POD,SOD和CAT)活性以及脯氨酸和丙二醛含量的变化。结果表明,大叶黄杨和北海道黄杨叶片POD活性随低温胁迫时间延长先升后降,并在低温胁迫的第2天达到最高值;在低温胁迫过程中,两种植物叶片SOD活性随低温胁迫时间延长而逐渐升高;在低温胁迫过程中,北海道黄杨叶片CAT活性明显高于大叶黄杨,大叶黄杨叶片MDA含量明显高于北海道黄杨;而且大叶黄杨叶片脯氨酸含量变化明显,北海道黄杨叶片脯氨酸含量较稳定。

金边北海道黄杨再生体系的建立及其快繁初探

[目的]探索金边北海道黄杨再生体系建立的方法和条件。[方法]以MS为基本培养基,配置不同种类和不同浓度激素的培养基,对金边北海道黄杨幼嫩叶片和腋芽进行不定芽诱导培养、增殖培养和生根培养。[结果]MS可作为金边北海道黄杨再生体系的基本培养基。6-BA配合NAA有利于叶片、腋芽愈伤组织和不定芽的诱导,以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L培养基效果最佳,腋芽诱导率高达66.67%。较高浓度的6-BA配合较低浓度的NAA有利于丛生芽的增殖,以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L培养基增殖效果较理想,增殖率高达328.57%。MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖3%或1/4MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖2%可获得最佳生根效果。[结论]该体系的建立为金边北海道黄杨种苗快速繁殖提供参考依据。

北海道黄杨叶片愈伤组织形成及细胞学研究

利用不同浓度的2,4-D对日本北海道黄杨的叶片进行愈伤组织诱导,并从细胞学水平观察组织的生长情况,确定2,4-D最佳浓度。结果表明,2,4-D2.0mg/L的激素水平对日本北海道黄杨的愈伤组织的诱导起关键作用,愈伤组织胚性细胞最多。

北海道黄杨扦插繁育技术

以2～3a生北海道黄杨健壮枝条为试材,采用随机区组设计,研究了不同基质、不同枝条部位、不同浓度生根剂对北海道黄杨扦插生根的影响。结果表明:北海道黄杨采用中上部枝条,用草炭作基质,150mg/L的生根剂处理,生根率最高。

北海道黄杨试管快速繁殖技术研究

以北海道黄杨的茎段为试材 ,研究其再生植株在不同外源激素配比下的适宜培养基。试验结果表明 ,北海道黄杨茎段初代培养的培养基以MS培养基附加BA 1.5mg L、NAA 0 .5mg L较好。第一次继代培养的培养基以MS培养基 (铁盐加倍 )附加BA 1.5mg L、NAA 0 .5mg L较为合适。第二次及往后的继代培养的培养基以MS培养基 (铁盐加倍 )附加BA 1.0mg L、IBA 0 .2mg L较适宜。并且 ,随着继代次数的增加 ,继代苗的分生率提高。生根培养基为 1 2MS(铁盐加倍 ) +NAA 0 .2mg L及 1 2MS(铁盐加倍 )。移栽时 ,以蛭石∶腐叶土 (1∶1)为移栽基质 ,成活率达 10 0 %。

北海道黄杨扦插繁殖的研究

北海道黄杨当年生枝条,用不同外源激素、不同时间和不同浓度处理后插入蛭石中培养。试验结果表明:当年生枝条生根率优于带一段老枝的当年生枝条生根率,扦插 30d后,生根率达 84.71%。IBA和NAA对促进北海道黄杨生根均有一定效果,但生根率IBA高于NAA,使用IBA和NAA进行高浓度短时间处理时,以浓度为 80 0mg/L时效果最好,经IBA处理后的插条,平均根数为 2 5.6 7条,经NAA处理后的插条平均根数为 9.0 1条。使用IBA和NAA进行低浓度长时间处理时,生根效果随激素浓度的升高而增加,IBA以浓度为 16 0mg/L处理 14～ 18h效果最好,平均根数为 4 9.88条;NAA以浓度为 16 0mg/L处理 10～ 14h效果最好,平均根数为 14.33条。

温度对北海道黄杨叶片光系统Ⅱ功能的影响

人工控温对北海道黄杨扦插苗叶片光系统Ⅱ的功能进行研究。结果表明:20～25℃之间是北海道黄杨叶片光系统Ⅱ作用最强的温度范围,低于或高于这一温度范围,北海道黄杨叶片的叶绿素a荧光动力学曲线发生了明显改变:FV/Fm,FV/F0值降低,导致光系统Ⅱ的原初光能转换率和潜在光合活力均受到抑制;荧光光化学猝灭系数(qP)降低,荧光非光化学猝灭系数(qN)提高,抑制了叶绿体把捕获的光能用于光合作用。

CaCl_2对北海道黄杨叶片抗冷生理的影响

为了探索Ca2+对植物抗寒性的影响,了解植物抗寒机理,在低温胁迫前用不同浓度CaCl2溶液浇灌北海道黄杨扦插植株,然后对植株进行4℃低温胁迫。研究不同浓度CaCl2对4℃低温胁迫过程中叶片渗透调节物质,抗氧化酶(SOD、POD和CAT)活性以及丙二醛含量的影响。结果表明,用10mmol/L CaCl2处理北海道黄杨植株,能显著提高低温胁迫过程中叶片脯氨酸和可溶性蛋白含量,改变抗氧化酶活性,降低MDA含量。

钙效应剂对北海道黄杨叶片抗寒生理的影响

为进一步了解钙效应剂对4℃低温胁迫过程中北海道黄杨叶片抗寒生理生化指标的影响,以北海道黄杨扦插植株为材料,在低温胁迫前用水、CaC12、EGTA和LaCl3浇灌植株,然后观察4℃低温胁迫过程中叶片脯氨酸和可溶性蛋白质含量、抗氧化酶(SOD、POD和CAT)活性以及MDA含量的变化。结果表明,与水处理的植株相比,适宜浓度的Ca2+(10mmol/L)能显著提高低温胁迫过程中叶片脯氨酸和可溶性蛋白质含量;在低温胁迫初期可促进SOD、POD和CAT活性的增加,减缓MDA含量的增加;在低温胁迫后期EGTA和LaCl3能抑制叶片脯氨酸和可溶性蛋白质含量的升高,降低叶片抗氧化酶活性,导致MDA含量升高,加剧低温对膜的伤害。

北海道黄杨茎尖组织培养初报

以北海道黄杨的茎尖为材料,探讨了不同培养条件、生长素浓度等因子对建立茎尖再生体系的影响。结果表明:北海道黄杨茎尖诱导最适培养基为6-BA+0.5 mg/L+NAA 0.1mg/L,最适分化培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,且在前10 d采用暗培养,之后采取光照培养。

丝棉木嫁接北海道黄杨试验初报

利用丝棉木嫁接北海道黄杨,改变北海道黄杨在宁夏地区露地越冬易风干、抽干的现状,提高北海道生长量和增强抗寒、抗风干能力。采用同一砧木,嫁接时间不同、接穗采取部位不同,嫁接成活率、新梢生长量、茎粗有明显差异。试验结果表明:利用无分枝的接穗嫁接,成活率及生长量均大于分枝接穗。

寒冷地区常绿树种北海道黄杨

北海道黄杨是一种适应性强、适生范围广、生长较快的常绿阔叶乔化树种。极耐寒,在寒冷地区城乡绿化有明显的优势和广阔的发展前景。 (一)形态特征 叶光亮革质,严冬叶包碧绿,无变色现象。叶卵圆形或长椭圆形,长5～6厘米、宽4～5厘米,叶缘呈浅波状,上反卷,叶芽饱满对生,顶芽粗壮。聚伞花序腋生。

北海道黄杨嫩枝扦插繁殖试验

北海道黄杨是我国新近引种的珍贵园林绿化树种。嫩枝扦插试验表明 ,在科学管理条件下北海道黄杨嫩枝扦插比较容易生根 ,其生根形式以皮部生根为主 ,采用全光照喷雾嫩枝扦插进行快速繁殖是可行的。选用穗条中上部截取插穗 ,采用ABT 2号生根粉慢浸 ,适当多留叶对北海道黄杨扦插生根有很好的促进作用 ,生根率可达90