新型温度敏感性自组装胶束P(NiPAAm-co-DMAA)-co-P(L-Ala)的合成和性能

通过原子转移自由基聚合(ATRP)合成了一种带有活性—NH2基团的温度敏感性亲水型共聚物P(NiPAAm-co-DMAA),并将其作为引发剂,合成了P(NiPAAm-co-DMAA)-co-P(L-Ala),其分子量分布(PDI)在1.3左右.聚合物通过自组装形成纳米胶束.透射电镜(TEM)结果表明,胶束大小200～300nm,具有明显的核壳结构.共聚物的最低临界溶解温度(LCST)为45.5℃.温度低于LCST时,聚合物溶解形成胶束;高于LCST时,胶束解离,聚合物不溶.聚合物对温度的响应是快速而可逆的.

HPLC法测定仔猪小肠刷状缘膜囊孵育体系中的二肽含量

用高效液相色谱法测定了经仔猪小肠刷状缘膜囊水解后的甘 - L-脯、L-亮 -甘和 β-丙 -组共 3种二肽的剩余含量。分别以水 -三氟乙酸 (质量浓度分别为 0 .1 % ,0 .0 8%和 0 .1 % ,p H值分别为 2 .2 0 ,2 .30和 2 .2 0 )和乙腈 -三氟乙酸 (三氟乙酸质量浓度 0 .1 % )为流动相 ,经 Phenomennex ODS分析柱 (2 50 mm× 4.60 mm,5μm,C1 8)分离 ,在 2 0 0～ 40 0 nm处检测。结果表明 ,3种二肽在 0～ 30 0 μg.m L-1之间 ,其峰面积 (X)对质量浓度 (Y,μg.m L-1 )回归得方程分别为 Y=0 .0 0 0 1 X- 5.6945,(R2 =0 .9946) ;Y=0 .0 0 0 4 X- 1 .41 6 7,(R2 =0 .9999) ;Y=0 .1 842 X- 7.365 4,(R2 =0 .9948)。平均回收率依次为 1 0 0 .0 0 % ,1 0 0 .0 1 %和 99.92 % ,保留时间依次为 7.63,8.0 1和 4.1 7min,最大吸收波长依次为 2 0 1 ,2 0 0和 2 80 nm。该方法快速、简便和准确 ,结果稳定 ,重现性好 。

Al-(L-丙氨酸)胰岛素晶体学研究

应用微量过饱和静置法在含柠檬酸钠和氯化钠的晶体生长体系中得到适合X射线衍射分析用的Al—(L—丙氯酸)胰岛素单晶体.晶体属于三方晶系,空间群为R_3,晶体衍射分辨率可达1.8A以上.晶胞参数:a_H=80.89A,b_H=80.89A,c_H=37.64(?),α=β=90°,γ=120°.每个结晶学不对称单位含有两上Al—(L—丙氨酸)胰岛素分子.

氧化显色法测定L－天冬氨酸－β－脱羧酶活力

本文建立了简便准确的比色法用以测定Ｌ－天冬氨酸－β－脱羧酶的活力。即Ｌ－丙氨酸经氧化生成的乙醛能与ρ－羟基联苯形成稳定的紫色化合物，在５７６．８ｎｍ处有最大吸收，以此定量生成的微量Ｌ－丙氨酸．

1．9A分辨率Al－（L－丙氨酸）胰岛素晶体结构研究

使用Ｘ－ＰＬＯＲ及立体化学制约最小二乘精化技术，并结合差值Ｆｏｕｒｉｅｒ图人工分析，测定了１．９ 分辨率Ａｌ修饰丙氨酸胰岛素的晶体结构，晶体空间群为Ｒ３，晶胞参数：ａ＝ｂ＝８０．８９，ｃ＝３７．６４。精化后的结构模型最终偏离因子Ｒ＝０．１８５，同理想键长和键角的均方根偏差分别为０．０１８和３．５°，独立区内二个分子的Ａ链Ｎ端Ａｌ－丙氨酸残基清晰可见。

利用假单胞菌天冬氨酸-β-脱羧酶高效生产L-丙氨酸

通过诱变筛选得到一株具有高活性Ｌ－Ａｓｐ－β－脱羧酶的菌株ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓＮＸ－１，对该株酶形成和酶反应的条件进行了详细研究，该株可以高效地转化Ｌ－Ａｓｐ生成Ｌ－ＡＩａ，转化４～５山每Ｌ培养液可转化Ｌ－Ａｓｐ量高达１４００ｇ左右，生成Ｌ－Ａｌａ浓度高达９０％以上，摩尔转化率近１００％。

环[(-L-Phe^1-D-Ala^2)_n-]自装配的结构特征

运用分子力学和半经验分子轨道AM1方法研究了环 [( -L -Phe1-D -Ala2 ) n- ]和环 [( -L -Phe1-D -MeN -Ala2 ) n- ](n =3～ 6)的结构 ,揭示了这类分子能够进行自装配过程的结构特征 。

2．5分辨率单斜Al－（L－丙氨酸）胰岛素晶体结构研究

空间群为Ｐ２１的Ａ１－（Ｌ－丙氨酸）胰岛素晶胞内，一个不对称单位含有一个六聚体，应用差值Ｆｏｕｒｉｅｒ技术，立体化学制最小二来技术和Ｘ—ＰＬＯＲ程序并辅以电子密度图的人工拟合，解析了分辨率ＡＩ—（Ｌ－丙氨酸）胰岛素（Ａｌ－Ｌ－ＡｌａⅠ）的晶体结构。最终Ｒ因子为２０．６％，与标准键长与键角的均方根偏差分别为和４．１９°，从电子密度图与模型的拟合来看，六聚体中每条Ａ链的Ａｌ位置替换的Ｌ—Ａｌａ清晰可见，每条Ｂ链Ｎ端Ｂ１—Ｂ８伏段都为α螺旋构象，形成了Ｂ１—Ｂ１９的连续α螺旋段。

单斜Al－（L－丙氨酸）胰岛素初步晶体学研究

用微量气相扩散方法在含酚的柠檬酸缓冲体系中，得到了可供Ｘ射线晶体学分析用的Ａｌ－（Ｌ－丙氨酸）胰岛素晶体，晶体衍射能力为２．５Ａ。经Ｘ射线衍射分析确定，该晶体属于单斜晶系，空间群为Ｐ２_１，晶胞参数：ａ＝６１．５Ａ，ｂ＝６２．２Ａ，ｃ＝４８．３Ａ，α＝γ＝９０．０°，β＝１１０．９°。晶胞中每个结晶学不对称单位含有一个Ａｌ－（Ｌ－丙氨酸）胰岛素六聚体。

芦荟酒剂的质量标准研究

通过对芦荟酒剂的物理性状、含醇量、总固体量、有毒物质限量、部分药材的薄层鉴别以及有效成分的含量测定制定了芦荟酒剂的质量标准，实验结果表明，芦荟酒安全无毒，其有效成分芦荟大黄素的含量每毫升不得少于0．0270mg，并对所测方法的稳定性、精密度、重现性、回收率进行考察，认为其标准用于酒剂的质量控制是可行的。

桑树斑叶突变体叶绿素合成特性的初步研究

以新发现的桑树斑状叶色突变体Cty—Sm为材料，分析叶片中3种光合色素与叶绿素合成中间产物δ－氨基酮戊酸、胆色素原含量的变化状况，探讨突变体叶色差异的生理原因及其调控机制。与正常生长的原始材料（对照桑）相比，突变体叶片黄化部分的叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜紊含量均有不同程度的下降，其中叶绿素a的减少最显著，仅为对照桑的5．43％－10．23％，这是导致突变体叶色黄化的直接原因。其次，突变体黄化部分的δ-氨基酮戊酸含量明显升高，而胆色素原含量明显降低，推测其叶绿素a的减少是由于δ-氨基酮戊酸与胆色素原之间合成代谢受阻的缘故。

外源ALA对盐胁迫下豌豆幼苗生理特性的影响

在温室条件下研究外源ALA对盐胁迫下豌豆幼苗生理特性的影响.在100mmol/L NaCl盐胁迫下,研究0.001～1mmol/L ALA对豌豆幼苗生理特性的影响.100mmol/L NaCl盐胁迫导致豌豆幼苗氧化损伤,SOD等保护酶活性升高;0.1 mmol/L ALA处理对盐胁迫下的豌豆幼苗有显著的保护作用,使叶片MDA含量降低25.87%,SOD,POD和CAT活性分别提高28.74%,20.68%和36.83%,幼苗株高、鲜物质量分别提高0.975,0.15倍,从而增强幼苗的抗盐性.0.1mmol/L ALA能缓解盐胁迫下豌豆幼苗的氧化损伤,显著提高SOD等保护酶活性.

叶面喷施ALA对水稻豫粳6号干物质积累及运转的影响

以水稻品种豫粳6号为试验材料,研究了在孕穗期喷施不同浓度(0、10、30、50、70mg/L)的ALA对水稻干物质积累、运转及产量的影响。结果表明,叶面喷施ALA后,能够促进干物质的积累和运转;提高水稻的结实率和粒重;使产量增加0.37%～10.19%,其中以喷施30mg/L的ALA效果较好。

ALA对皖江区域小麦产量和品质的影响

通过在小麦(Triticum aestivum L.)生长期间的不同时期使用不同浓度的新型农作物光合作用促进剂ALA,探讨其对小麦产量和品质的影响。结果表明,ALA在小麦拔节期施用比抽穗扬花期喷施效果相对较好;在同一浓度条件下,ALA在小麦拔节期施用的效果要明显高于抽穗扬花期;在同一时期条件下,ALA高浓度的效果高于低浓度的效果;高浓度ALA在拔节期喷施的增产效果相对较好。

光活环二肽环(L-脯-L-丙)和环(L-脯-L-缬)的合成

以L-脯氨酸、L-丙氨酸和L-缬氨酸为原料,先用苄氧羰基保护L-脯氨酸的N端,再与C端保护的L-丙氨酸甲酯/L-缬氨酸甲酯缩合,得直链肽,再经Pd/C催化氢化脱保护基,以仲丁醇为溶剂回流关环,得到光活纯的环二肽(L-脯-L-丙)/环(L-脯-L-缬)。该方法耗时短、产率较高、不发生消旋,是一种通用的光活含脯氨酸环二肽的合成方法。

DAPT对结肠癌细胞株HT-29增殖及乙醛脱氢酶1、Notch信号通路受体和配体表达的影响

目的观察γ-分泌酶抑制剂(GSIs)DAPT对结肠癌细胞株HT-29增殖及结直肠癌肿瘤干细胞标志物乙醛脱氢酶1(ALDH1)、Notch信号通路受体Notch4、Notch信号通路配体DLL1表达的影响。方法体外培养HT-29细胞,取对数生长期细胞用于实验。分别以0、5、10、20、40、80μmol/L的DAPT作用于HT-29细胞24、48、72 h后,倒置显微镜下观察细胞形态,用MTT比色法检测细胞增殖能力(以OD值表示)。分别以0、20、40μmol/L的DAPT作用于HT-29细胞24 h后,采用RT-PCR法检测细胞中的ALDH1、Notch4、DLL1 mRNA,分别采用Western blotting法和免疫组化法检测ALDH1、Notch4、DLL1蛋白。分析HT-29细胞中ALDH1、Notch4、DLL1 mRNA及蛋白表达的相关性。结果DAPT对HT-29细胞的增殖抑制作用呈一定剂量、时间依赖性,40、80μmol/L浓度组培养48、72 h时细胞增殖能力低于培养24 h时(P均<0.05)。DAPT处理后的细胞形态出现典型凋亡状态改变。20、40μmol/L的DAPT作用后HT-29细胞中ALDH1、Notch4、DLL1 mRNA相对表达量低于0μmol/L组(P均<0.05)。0、20、40μmol/L的DAPT作用后HT-29细胞中ALDH1、Notch4、DLL1蛋白相对表达量依次降低(P均<0.05)。免疫组化染色图像分析结果示,0、20、40μmol/L的DAPT作用后HT-29细胞中ALDH1、Notch4、DLL1蛋白表达OD值依次降低(P均<0.05)。HT-29细胞中ALDH1、DLL1 mRNA表达与Notch4 mRNA表达均呈正相关关系(r分别为0.997、0.998,P均<0.05)。HT-29细胞中ALDH1、DLL1蛋白表达与Notch4蛋白表达均呈正相关关系(r分别为0.998、0.999,P均<0.05)。结论 DAPT作用后,细胞增殖受到抑制,细胞中ALDH1、Notch4、DLL1 mRNA和蛋白表达下调;DAPT对HT-29细胞的增殖抑制作用可能与降低肿瘤干细胞特性、下调Notch信号通路受体与配体表达实现的。

二肽物±(4S)-5-[叔丁基二甲基硅氧-4-二苄氨基-2-甲酰氨基-N-3-羟基-2-(三苯甲烷基)丙基]戊酰胺的合成

以D-丝氨酸为起始原料,经酯化、还原、氧化、缩合、水解等九步反应,合成了非天然氨基酸τ-L-His-D-Ala的关键前体——二肽物±(4S)-5-[(叔丁基二甲基硅氧)-4-(二苄氨基)-2-甲酰氨基-N-3-羟基-2-(三苯甲烷基)丙基]戊酰胺,总收率35.3%,其结构经1H NMR,13C NMR和MS表征。

药物缓释材料聚(乳酸-丙氨酸)的直接法合成与表征

直接以外消旋乳酸(LA)、L-丙氨酸(Ala)为原料[n(LA)∶n(Ala)=9∶1],采用熔融聚合法合成药物缓释材料聚(乳酸-丙氨酸)共聚物[P(LA-co-Ala)],并用特性黏数、FTIR、1HNMR、GPC、DSC、XRD等手段进行系统表征。熔融共聚中采用一次投料并分次预聚,可生成重均相对分子质量(Mw)达3200(分散度Mw/Mn=1.23)的共聚物,相对分子质量可以达到丙交酯开环共聚法的水平。首次报道了P(LA-co-Ala)]药物缓释材料的DSC与XRD表征结果,其与聚外消旋乳酸(PDLLA)相比,共聚物具有较低的Tg、Tm和结晶度。新方法步骤少、操作简便,且成本更加低廉。

N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺及有关物质的高效液相色谱分析

目的考察不同色谱条件下N（2）-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（L-Ala-L-Gln）及其有关物质的色谱行为,建立L-Ala-L-Gln有关物质的高效液相色谱含量测定方法。方法氨基键合硅胶柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液（用磷酸调pH值至4）70：30为流动相;流速为1.0 mL/min;检测波长为215 nm;柱温为40℃。结果L-Ala-L-Gln在10～100μg/mL浓度范围内呈良好线性关系（r=0.999 8）,并且可以同时测定含量和有关物质,重复性试验RSD为0.81%（n=6）。结论此法简单,分离度良好,结果准确,可以用于L-Ala-L-Gln的含量和有关物质的检测。

喷施ALA对紫花苜蓿耐热性的诱导效应

本研究以高温胁迫下的‘德钦’紫花苜蓿(Medicago sativa L.‘Deqin’)为材料,探讨喷施不同浓度的5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,ALA)对其形态指标、相对电导率、叶绿体色素、丙二醛(Malonydialdehyde,MDA)和过氧化物酶(Peroxidase,POD)活性的影响。结果表明:随着喷施ALA浓度的升高,叶片中POD活性、MDA含量和叶片数增长率逐渐降低,分枝数增长率逐渐升高,叶绿体色素含量和生物量增长率先升高后降低,相对电导率先降低后升高,表明喷施适宜浓度的ALA溶液有利于提高紫花苜蓿抗氧化酶活性,增加清除活性氧的能力,进而缓解高温对植物细胞膜的过氧化损伤。此外,适宜浓度的ALA溶液还能保护植物细胞色素,促进植物干物质的积累和生长发育。综合试验结果得出,ALA浓度为30 mg·L^-1时,有利于促进紫花苜蓿的生长,降低相对电导率,差异显著(P<0.05)。