麻疹病毒L4株血凝素基因的克隆与表达及免疫原性

从部分减毒的麻疹病毒Ｌ４株感染的Ｖｅｒｏ细胞中提取ｍＲＮＡ、进行逆转录及ＰＣＲ扩增。克隆到了长１．９ｋｂ的４个血凝素基因克隆。ＤＮＡ序列分析发现，Ｌ４株的血凝素基因有４个碱基与Ｅｄｍｏｎｓｔｏｎ株不一致，造成３个氨基酸差异。这４个克隆在重组痘苗中表达后，３个克隆的表达产物均表现出良好的血凝活性、助融合活性（Ｆｕｓｉｏｎｈｅｌｐｅｒ）和较强的免疫原性。表达血凝素分子量分别为未糖化的６８ｋＤ以及糖化的７９ｋＤ分子，免疫的兔血清显示出较高的ＥＬＩＳＡ（１：８００）～１：３２００）、ＨＩ（１：１６０－：１：１２８０）、ＨＬＩ（１：１６０～１：６４０）及ＮＴ（１：１００～１：４８６）滴度。麻疹病毒ＬＡ株的血凝素基因的克隆为麻疹重组疫苗的研究提供了重要材料。

麻疹病毒融合蛋白(F)和血凝素(HA)在痘苗病毒中的表达

将麻疹病毒F和HA基因插入到痘苗病毒中,分别处于痘苗启动子P7.5与P11控制下,获得重组病毒vLmF和vCmH。用抗F多肽抗体和HA单抗进行ELISA检测,结果表明,两株重组病毒均能表达相应的麻疹蛋白。蛋白印迹显示重组病毒表达产物在分子大小,蛋白切割和糖化方面与麻疹病毒糖蛋白一致。两株重组病毒分别免疫家兔都能产生较高滴度的麻疹抗体,这些抗体具有中和作用和血溶抑制作用。此外,vCmH产生的抗体还具有血凝抑制作用。