基于NFAT5介导的EMT研究益糖康改善高血糖对肾脏早期损伤的作用机制

目的探讨活化T细胞核因子5(nuclear factor of activated T cells 5,NFAT5)对高糖诱导人肾小管上皮HK-2细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响以及益糖康改善高血糖对肾脏早期损伤的作用机制。方法SD雄性大鼠20只,随机分成生理盐水组和益糖康组,每组10只。生理盐水组给予1 mL/100 g生理盐水灌胃,益糖康组给予2.10 g/100 g益糖康煎剂灌胃,连续5 d,腹主动脉取血,离心分离上清。通过高糖诱导HK-2细胞构建早期糖尿病肾病体外模型,并加入相应的药物进行干预。分别采用qRT-PCR和Western blot实验检测转染NC-siRNA(NC-siRNA组)/NFAT5-siRNA(NFAT5-siRNA组)或生理盐水含药血清处理(NS组)/益糖康含药血清处理(YTK组)以及益糖康含药血清处理同时转染GV492-Empty(YTK+GV492-Empty组)/GV492-NFAT5(YTK+GV492-NFAT5组)细胞中NFAT5、E-cadherin以及Vimentin mRNA和蛋白表达水平的改变。再分别采用划痕和Transwell实验检测各组细胞迁移力和侵袭力的改变。结果转染NFAT5-siRNA能够明显抑制NFAT5 mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.05)的表达;与NC-siRNA组相比较,NFAT5-siRNA组细胞中E-cadherin mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.01)的表达水平显著升高,Vimentin mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.01)的表达水平显著降低,细胞的迁移力(P<0.05)和侵袭力(P<0.01)均明显减弱。与NS组相比较,YTK组细胞中NFAT5 mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.05)的表达水平明显降低。转染GV492-NFAT5能够明显促进NFAT5 mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.01)的表达;与YTK+GV492-Empty组相比较,YTK+GV492-NFAT5组细胞中E-cadherin mRNA(P<0.01)和蛋白(P<0.01)的表达水平显著降低,Vimentin mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.01)的表达水平显著升高,细胞的迁移力(P<0.05)和侵袭力(P<0.05)均明显增强。结论在高糖环境下,NFAT5会促进人肾小管上皮细胞发生EMT;益糖康能够通过下调NFAT5表达抑制肾小管上皮细胞发生EMT从而改善高血糖对肾脏的早期损伤。

糖肾地黄汤通过调控lncRNA-ARAP1/miR-25-3p/SGLT2轴延缓糖尿病肾病进展的机制研究

目的 探究糖肾地黄汤通过调控lncRNA-ARAP1/miR-25-3p/SGLT2轴延缓糖尿病肾病进展的机制。方法 用小鼠单侧肾切除+腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)诱导糖尿病肾病(Diabetic nephropathy, DN)模型,选择糖尿病肾病小鼠模型组共45只小鼠,雌性CBA/J 30只,雄性DBA/2 15只,另选正常健康小鼠10只作为正常对照组。将造模的糖尿病肾病小鼠分为模型组、糖肾地黄汤高剂量组(TSDHDHD组)、糖肾地黄汤中剂量组(TSDHDMD组)、糖肾地黄汤低剂量组(TSDHDLD组),每组10只。HE染色检测小鼠的病理学变化,应用全自动生化分析仪对所获得小鼠血清空腹血糖(Fasting blood glucose, FBG),甘油三酯(Triglyceride, TG),胆固醇(Cholesterol, TC)水平,RT-PCR法分析ARAP1、miR-25-3p、SGLT2、Bax/Bcl-2mRNA的表达,免疫印迹法(Westernblot, Wb)分析ARAP1、miR-25-3p、SGLT2、Bax/Bcl-2的蛋白表达。采用SPSS 23.0统计软件。结果 对照组中细胞排列致密整齐、完整,存在少量脂肪细胞(P>0.05);与对照组比较,模型组细胞结构较为散乱,且由稀疏变细,近端脂肪细胞数目增多,差异存在统计学意义(P<0.05);相比模型组,各剂量组糖肾地黄汤脂肪细胞数目下降,比较存在统计学差异(P<0.05)。与对照组相比,模型组、不同剂量糖肾地黄汤组油红O染色镜下IOD表达明显升高(P<0.05);与模型组相比,不同剂量糖肾地黄汤组油红O染色镜下IOD表达降低(P<0.05);与中、低剂量糖肾地黄汤组相比,高剂量糖肾地黄汤组油红O染色镜下IOD表达降低(P<0.05)。治疗前与对照组相比,模型组、不同剂量糖肾地黄汤组模型组FBG水平升高(P<0.05),模型组与不同剂量糖肾地黄汤组相比无统计学差异(P>0.05);与治疗前相比,治疗12周后不同剂量糖肾地黄汤组模型组FBG水平均降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组、不同剂量糖肾地黄汤组TG、TC水平明显升高(P<0.05);与模型组相比,不同剂量糖肾地黄汤组TG、TC水平降低(P<0.05);与中、低剂量糖肾地黄汤组相比,高剂量糖肾地黄汤组TG、TC水平降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组、不同剂量糖肾地黄汤组ARAP1、miR-25-3p、SGLT2mRNA水平明显升高,Bax/Bcl-2mRNA水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,不同剂量糖肾地黄汤组ARAP1、miR-25-3p、SGLT2mRNA水平降低,Bax/Bcl-2mRNA水平明显升高(P<0.05);与中、低剂量糖肾地黄汤组相比,高剂量糖肾地黄汤组ARAP1、miR-25-3p、SGLT2mRNA水平降低,Bax/Bcl-2mRNA水平明显升高(P<0.05)。与对照组相比,模型组、不同剂量糖肾地黄汤组ARAP1、miR-25-3p、SGLT2蛋白表达明显升高,Bax/Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组相比,不同剂量糖肾地黄汤组ARAP1、miR-25-3p、SGLT2水平降低,Bax/Bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.05);与中、低剂量糖肾地黄汤组相比,高剂量糖肾地黄汤组ARAP1、miR-25-3p、SGLT2蛋白表达降低,Bax/Bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论 糖肾地黄汤可能通过调节lncRNA-ARAP1/miR-25-3p/SGLT2轴,从而达到延缓糖尿病肾病进展的目的。

中药复方益糖康增强足细胞自噬改善糖尿病肾脏疾病的机制研究

目的观察中药复方益糖康(YTK)对糖尿病肾脏疾病(DKD)大鼠足细胞自噬的影响,探讨YTK改善DKD的作用机制。方法96只8周龄健康Wistar大鼠使用随机数字表法分为空白对照组、模型对照组、YTK高剂量(40 g·kg^(-1))组、YTK中剂量(20 g·kg^(-1))组、YTK低剂量(10 g·kg^(-1))组,西药对照(20 mg·kg^(-1))组(氯沙坦片),使用高脂饲料喂养联合腹腔单次注射链脲佐菌素建立DKD模型,成功建立模型的86只DKD大鼠分别给药干预8周后取材。采用快速血糖仪测定各组大鼠空腹血糖(FPG),手工法测定各组大鼠血清中尿素氮(BUN)、血白蛋白(ALB)、血肌酐(Scr)、血尿酸(UA)、血清总蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。苏木精伊红(HE)染色观察大鼠肾脏组织病理形态。Western blotting法检测足细胞自噬相关蛋白(LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、p62、ATG5、Beclin1)表达。结果与空白对照组相比,模型对照组大鼠肾脏组织可见细胞排列不规则,结构紊乱,炎症细胞聚集;FBG、BUN、TG、CHO、LDL-C、Scr、UA、TP水平均明显升高,ALB、HDL-C水平明显下降(P<0.01),肾组织LC3-Ⅰ、p62、Beclin1蛋白表达增多,LC3-Ⅱ、ATG5蛋白表达减少(P<0.01);与模型对照组相比,YTK各剂量组和西药对照组大鼠肾脏病理损伤明显缓解,炎症浸润明显减轻。FBG、BUN、TG、CHO、LDL-C、Scr、UA、TP水平均明显下降,ALB、HDL-C水平明显升高(P<0.01),肾组织LC3-Ⅰ、p62、Beclin1蛋白表达减少,LC3-Ⅱ、ATG5蛋白表达增多(P<0.01)。结论YTK能够有效改善DKD大鼠肾脏损伤,其可能是通过下调LC3-Ⅰ、p62、Beclin1蛋白表达,增多LC3-Ⅱ、ATG5蛋白表达来调节DKD自噬水平发挥对肾脏的保护作用。

基于“诸转反戾,水液浑浊,皆属于热”理论探讨复方益糖康调控糖尿病肾病“炎症因子”研究进展

糖尿病是对生命健康具有不良影响的代谢障碍性疾病,糖尿病肾病是糖尿病最为常见的并发症之一,炎症因子是发生糖尿病肾病的重要病理基础,“诸转反戾,水液浑浊,皆属于热”理论是《素问·至真要大论篇》中“病机十九条”之一,该文以此理论为基础,探讨炎症因子对糖尿病肾病的病理演变作用。“湿热内伤,脾肾失司,精微不固”为发病之本,诸多炎症因子作用于机体导致“阴火炽盛,壮火内生”是糖尿病肾病形成的关键。复方益糖康具有健脾清热、养阴益气、活血化瘀功效,方中各药物的有效成分都具有保护肾脏、防止肾损伤的作用,方中药物组合使用能够通过抑制JAK2/STAT3、NF-κB、MAPK等信号通路,降低肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)等炎症因子的水平,对糖尿病肾病起到良好的治疗作用。

中药复方益糖康对db/db小鼠小肠肠道屏障损伤的修复作用及机制探讨

目的观察中药复方益糖康对db/db小鼠小肠炎症的抑制作用及小肠黏膜损伤的修复作用并探讨其作用机制。方法将24只db/db小鼠随机分为模型组(db/db组)、益糖康组(YTK组)以及阳性药(选用利拉鲁肽Liraglutide)对照组(Liraglutide组),另选择8只C57BL/6J小鼠为对照组(Con组)。YTK组小鼠予以益糖康煎剂灌胃30 g·kg^(-1)·d^(-1),Liraglutide组每日腹腔注射利拉鲁肽200μg·kg^(-1)·d^(-1),Con组和db/db组给予等量蒸馏水灌胃,给药时间共计5周。药物处理5周后,对小鼠禁食12 h,取小鼠尾尖血进行血糖检测,之后进行动物取材和组织分离。用ELISA检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达;免疫荧光法检测Occludin、F4/80、CD86、CD206表达;Western blot检测法检测小肠Occludin、ZO-1、TNF-α蛋白表达。结果与Con组相比,db/db组小鼠血糖明显升高(P<0.05),与db/db组相比,Liraglutide组与YTK组血糖明显下降(P<0.05)。与db/db组相比,Liraglutide组与YTK组Occludin和ZO-1表达较明显增强(P<0.05);Western blot结果显示Occludin蛋白表达与免疫荧光趋势一致(P<0.05);与Con组相比,db/db组小鼠血清炎症因子IL-6与IL-1β均明显升高(P<0.05),Liraglutide组与YTK组较db/db组明显下降(P<0.05);与Con组比较,db/db小鼠小肠黏膜及黏膜下层IL-1β、IL-6表达量明显增强(P<0.05),而Liraglutide组与YTK组呈中度表达,较db/db组明显减弱(P<0.05)。western blot结果显示,TNF-α表达与免疫荧光趋势一致;Liraglutide组与YTK组F4/80的表达较db/db组明显减弱(P<0.05);CD86和CD206在Con组小鼠小肠表达较弱;在db/db组表达明显增强(P<0.05),其中CD86表达更为显著,而Liraglutide组与YTK组明显改善(P<0.05)。结论中药复方益糖康可以下调F4/80、CD86和CD206等巨噬细胞相关蛋白的表达,缓解小肠巨噬细胞聚集和活化,下调小肠IL-Iβ、IL-6和TNF-α等炎症因子,上调肠通道蛋白Occludin和ZO-1表达,修复db/db小鼠小肠黏膜损伤。

基于AMPK/mTOR信号通路探讨中药复方益糖康对db/db小鼠血脑屏障通透性及紧密连接蛋白的影响

目的基于AMPK/mTOR信号通路,探讨中药复方益糖康对db/db小鼠血脑屏障通透性的影响及对紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的调控作用。方法24只db/db小鼠随机分为模型组(db/db组)、利拉鲁肽组(LIRA组)以及益糖康组(YTK组),每组8只。另取8只db/m小鼠作为正常对照组(db/m组)。YTK组予以益糖康煎剂30 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,LIRA组每日腹腔注射利拉鲁肽200μg·kg^(-1)·d^(-1),db/m组和db/db组给予等量蒸馏水灌胃。实验期间,对小鼠空腹血糖和体质量进行观察。给药6周后,通过Morris水迷宫任务和旷场实验对小鼠进行行为学检测;随后对小鼠进行处死取材,采用Elisa检测小鼠血脂相关指标,EB法观察小鼠血脑屏障通透性,Western blot法检测小鼠脑组织中AMPK/mTOR信号通路、紧密连接蛋白Occludin、ZO-1蛋白的表达情况。结果与db/m组比较,db/db组空腹血糖、血脂、体质量明显升高(P<0.05),逃避潜伏期和摸索距离显著增加,穿越次数和目标象限活动时间则明显减少,血脑屏障通透性明显增加(P<0.05),脑组织中AMPK、mTOR、Occludin、ZO-1蛋白的表达显著降低(P<0.05);与db/db组比较,YTK组小鼠血糖、血脂、体质量明显升高显著降低(P<0.05),逃避潜伏期和摸索距离显著下降,穿越次数和目标象限活动时间则明显增加,血脑屏障通透性明显降低,脑组织中AMPK、mTOR、Occludin、ZO-1蛋白的表达显著降低显著上调(P<0.05)。结论益糖康可能通过AMPK/mTOR信号通路,改善糖脂代谢情况,同时上调Occludin、ZO-1蛋白表达,从而保护BBB功能完整性,最终改善db/db小鼠认知功能障碍。

参芪降糖片联合胰岛素治疗脾肾两虚型早期糖尿病肾病的临床研究

目的探讨参芪降糖片联合胰岛素治疗脾肾两虚型早期糖尿病肾病的临床研究。方法选择2020年9月—2021年12月96例确诊为脾肾两虚型糖尿病肾病3期患者作为研究对象,采用随机数字法平均分为观察组与对照组两组:对照组给予胰岛素治疗方案,观察组在对照组基础上辅以参芪降糖片治疗。比较两组治疗前后中医证候评分差异,比较治疗4周后血糖控制情况、肾功能及实验室指标。结果观察组总有效率91.67%(44/48)明显高于对照组74.00%(35/48),差异比较有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG)、餐后2 h血糖(2 hours postprandial blood glucose,2 h PG)及糖化血红蛋白(Glycated hemoglobin,HbAlc)均较治疗前有明显降低(P<0.05);治疗后观察组FBG、2h PG及HbA1c均较对照组降低更明显(P<0.05)。治疗后两组患者尿微量白蛋白(Microalbumin,m-ALB)、尿白蛋白排泄率(Urinary albumin excretion rates,UAER)、β2微球蛋白(β2 Microglobulin,β2-MG)及半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cysteine protease inhibitor C,Cys-C)均较治疗前降低(P<0.05);治疗4周后观察组尿mAlb、UAER、β2-MG及Cys-C均低于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管紧张素转化酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)及胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)均较治疗前降低(P<0.05);治疗4周后观察组VEGF、ACE及IGF-1均低于对照组(P<0.05)。结论参芪降糖片联合胰岛素治疗脾肾两虚型早期糖尿病肾病可以更好控制血糖,改善症状,且延缓或逆转肾损伤效果更明显。

祝氏降糖对药方对社区慢性阻塞性肺疾病合并糖尿病患者血糖水平及呼吸功能的影响

目的观察祝氏降糖对药方对社区慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并糖尿病患者血糖水平及呼吸功能影响。方法研究纳入社区收治的114例慢性阻塞性肺疾病合并糖尿病患者(2022年3月—2023年2月收治)作为本次研究对象,以随机数字表法将患者分为观察组与对照组,各组57例,对照组患者给予社区常规疗法,观察组患者在社区常规疗法治疗基础上给予患者祝氏降糖对药方治疗,各组数据观察:治疗前后患者空腹血糖(FPG)及餐后2h血糖(2 h PG)、糖化血红蛋白(HbA1c)指标变化,用力肺活量(FVC)及一秒用力呼气容积(FEV_(1))、FEV_(1)/FVC等呼吸功能指标、6 min步行距离变化及慢性阻塞性肺疾病评估测试(CAT)评分变化、改良英国医学研究委员会呼吸困难指数(mMRC)变化、患者治疗前后生活质量(SF-36)评分变化、治疗满意率。结果治疗前,各组患者FPG、2 h PG、HbA1c、FVC、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、6 min步行距离、CAT及mMRC评分、SF-36评分比较,P>0.05,治疗后各组患者FPG、2 h PG、HbA1c、FVC、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、6 min步行距离、CAT及mMRC评分、SF-36评分等指标均改善,观察组患者治疗后FPG、2 h PG、HbA1c、FVC、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、6 min步行距离、CAT及mMRC评分、SF-36评分等指标优于对照组,P<0.05;观察组患者治疗满意率(98.25%)均高于对照组患者(85.96%),P<0.05。结论祝氏降糖对药方有助于稳定COPD合并糖尿病患者病情,患者血糖水平降低,呼吸功能改善,生活质量提升,患者较为认可与满意,值得应用。

糖肾康治疗2型糖尿病肾病的临床疗效及对脂质代谢紊乱状态的调节作用

目的探讨糖肾康治疗2型糖尿病肾病的临床疗效及对脂质代谢紊乱状态的调节作用。方法选择2018年8月—2020年8月医院收治的2型糖尿病肾病患者106例,依据随机对照法将患者分为观察组和对照组,每组63例。对照组给予西药常规治疗,在饮食调节、运动、生活方式干预等治疗基础上,皮下注射胰岛素以降糖,口服贝那普利以降压,口服他汀类药物调脂。观察组在对照组治疗的基础上,口服糖肾康治疗。两组均治疗8周。比较两组治疗疗效,治疗前后中医证候积分,比较两组治疗前后血糖指标(FPG、2hPG和HbA1c)、肾功能相关指标(SCr、BUN、UAER和Uβ2-MG)、脂代谢指标(TG、TC、LDL-C和HDL-C)。结果观察组治疗总有效率为87.30%(55/63)高于对照组治疗总有效率的73.02%(46/63)(P<0.05);观察组治疗后神疲乏力、腰膝酸软、发脱齿摇、肢体麻木、耳聋耳鸣和面色晦暗等中医证候积分低于对照组(P<0.05);观察组治疗后FPG、2hPG和HbA1c水平低于对照组(P<0.05);观察组治疗后SCr、BUN、UAER和Uβ2-MG低于对照组(P<0.05);观察组治疗后脂代谢指标TG、TC、LDL-C高于对照组,HDL-C水平高于对照组(P<0.05)。结论糖肾康结合西药常规治疗2型糖尿病肾病疗效确切,可有效的降低肾虚血瘀证患者的中医证候积分,改善患者的糖代谢、脂代谢指标,保护肾脏功能,延缓病情进展,提高治疗效果,值得进一步研究探讨。

降糖安对正常动物糖耐量及血糖的影响

目的:研究降糖安对正常动物糖耐量及血糖的影响。方法:通过葡萄糖氧化酶法测定降糖安对外源性葡萄糖耐量及正常血糖含量的影响。结果:降糖安能显著降低外源性葡萄糖引起的大鼠、小鼠血糖值升高;对正常大鼠血糖有降低作用,对家兔的血糖无明显影响。结论:降糖安有显著的降低动物外源高血糖、增强葡萄糖耐量作用;对正常动物血糖的影响存在种属差异。

益糖康对高糖诱导人肾小管上皮HK-2细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究

目的探讨中药复方"益糖康"对高糖状态下人肾小管上皮HK-2细胞增殖和凋亡的影响,并探讨了其潜在的作用机制。方法体外培养人肾小管上皮HK-2细胞,分为正常对照组(NG组,葡萄糖含量5.6 mmol/L)、高糖组(HG组,葡萄糖含量30 mmol/L)、高糖+生理盐水组(HG+NS组,葡萄糖含量30 mmol/L,生理盐水含药血清干预)以及高糖+"益糖康"组(HG+YTK组,葡萄糖含量30 mmol/L,"益糖康"含药血清干预)。高糖预处理24 h后,加入"益糖康"含药血清进行干预,再分别采用CCK-8法、流式细胞术及Real-time RT PCR法检测各组细胞的增殖力、凋亡率以及Caspase-3和Caspase-7 mRNA表达水平的改变。结果与NG组相比,HG组细胞的增殖力在24 h和48 h均明显降低;高糖处理48 h后,细胞的凋亡率显著上升[(4.77±3.29)%vs(51.53±3.56)%(P<0.01)];细胞中Caspase-3(P<0.05)和Caspase-7(P<0.01)mRNA的表达水平显著上调。相比较于HG+NS组,HG+YTK组细胞的增殖力在24 h和48 h均明显升高;细胞的凋亡率显著降低[(44.07±1.45)%vs(26.97±7.90)%(P<0.01)];细胞中Caspase-3和Caspase-7 mRNA的表达水平显著下调(P<0.05)。结论 "益糖康"干预能够有效逆转高糖刺激对人肾小管上皮HK-2细胞增殖力、凋亡率以及凋亡特征基因表达的影响。

铁筷子多糖诱导小鼠S_(180)细胞凋亡的实验研究

目的 :观察铁筷子多糖 (HFPS)诱导小鼠S180 细胞凋亡的作用。方法 :MTT比色法检测HFPS对小鼠原代腹水型S180肉瘤细胞的生长抑制效应 ,应用光镜、激光共聚焦显微镜、DNA凝胶电泳和流式细胞术研究HFPS诱导S180 细胞凋亡的作用。结果 :MTT检测结果显示HFPS可以有效抑制S180 细胞生长 ,作用呈时间和剂量依赖性。光镜、激光共聚焦显微镜观察凋亡细胞的形态学变化 ,表现为核固缩、碎裂、染色质边集、凋亡小体形成等。DNA凝胶电泳可见以 180bp倍数裂解的DNA梯形电泳带出现 ,同时随药物浓度的升高 ,细胞周期S期比例下降 ,G0 /G1期比例上升 ,PI增殖指数下降。结论 :铁筷子多糖可诱导S180 肿瘤细胞凋亡。

基于PI3K/Akt/FoxO1信号通路研究中药益糖康对2型糖尿病大鼠糖脂代谢异常的影响

目的通过观察中药益糖康对2型糖尿病(T2DM)大鼠血糖、血脂水平,以及肝脏中PI3K/Akt/FoxO1信号通路相关蛋白和肝脏糖异生关键酶磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶(PEPCK)、葡萄糖6-磷酸酶(G6Pase)蛋白表达情况的影响,探究中药益糖康调节T2DM大鼠糖脂代谢异常的机制。方法从60只Wistar大鼠中随机选取8只入组正常组,其余大鼠均腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,采用随机数字表法随机分为模型组、益糖康组及二甲双胍组。益糖康组及二甲双胍组分别选用益糖康及二甲双胍进行灌胃,正常组及模型组选用生理盐水进行灌胃。连续给药6周后观察4组大鼠血糖、血脂、肝脏组织形态及肝脏组织中PI3K/Akt/FoxO1信号通路蛋白及糖异生关键酶PEPCK、G6Pase蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组T2DM大鼠的空腹血糖(FBG)、胰岛素水平(FINS)、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平明显增高(均P<0.05);p-Akt/Akt、p-FoxO1/FoxO1的蛋白表达比例显著降低,p-PI3K/PI3K蛋白表达比例增加,PEPCK和G6Pase蛋白表达水平升高(均P<0.05);与模型组比较,益糖康组和二甲双胍组T2DM大鼠FBG、FINS、HbA1c、TC、TG水平均显著降低(均P<0.05),p-Akt/Akt、p-FoxO1/FoxO1表达比例显著提高,p-PI3K/PI3K表达比例降低,PEPCK和G6Pase蛋白表达水平降低(均P<0.05)。结论益糖康能够调控PI3K/Akt/FoxO1信号通路,上调p-PI3K、p-Akt蛋白表达水平,下调FoxO1、PEPCK和G6Pase的蛋白表达水平,抑制T2DM大鼠肝脏糖异生,从而改善T2DM大鼠糖脂代谢异常。

基于分子对接技术、分子动力学模拟中药复方益糖康防治糖尿病肾病作用机制研究

目的通过生信分析、分子对接及分子动力学技术探讨中药复方益糖康(YTK)防治糖尿病肾病的作用机制。方法通过网站、数据库及文献检索获取YTK的有效成分及糖尿病肾病疾病靶点,经筛选后进行生信分析。结合生信分析结果及CTD数据库选择5个重要蛋白受体,分别与YTK符合筛选标准的有效成分通过Auto Dock Vina软件进行分子对接,将分子对接结果中结合能较强且具有继续研究意义的构象应用分子动力学技术进行进一步分析。结果槲皮素、黄芩素、山柰酚、丹参酮II等22个化合物可能是YTK防治糖尿病肾病的重要活性成分,涉及氧化应激反应、调节活性氧代谢、炎症反应等多个生物过程及AGE-RAGE、TNF、PI3K-Akt、VEGF、p53、mTOR等多个信号通路;重要蛋白受体为PTGS1、PTGS2、NCOA2、HSP90AA1、RXRA,研究上述重要蛋白受体对精准阐释糖尿病肾病的发病与防治有重要的意义。YTK筛选的活性成分与受体结合能平均值为-8.16 kcaL·moL^(-1),超过96.36%的结合能低于-5.6 kcaL·moL^(-1),证实了其防治DN效果良好。baicalein-HSP90AA1、quercetin-PTGS2作为有继续研究意义的构象进一步进行分子动力学模拟,结果均可以稳定地结合,为范德华势能和静电作用、氢键作用共同作用的结果。结论研究揭示了YTK防治糖尿病肾病的潜在分子机制,为后续研究提供理论依据及参考。

糖尿病性冠心病中医病机分析及组方构想

本文在流行病学调查文献基础上,综合历代有关消渴(糖尿病)及胸痹(冠心病)的文献研究发现,消渴病机有转化为胸痹的规律,两病之间存在共同的病机特点;其基本病机以气阴两虚为本,瘀血阻滞、痰湿内停为标,其中阴虚与气虚互为因果,而瘀血、痰湿既是气阴两虚的病理产物,又是消渴导致胸痹的中心环节。故确立滋阴益气、活血祛瘀、化痰通痹的标本兼治法则,拟订降糖舒心方用于治疗糖尿病合并冠心病的防治。

益糖康调控2型糖尿病大鼠脂肪组织TLR4/MyD88/NF-κB通路实验研究

目的观察益糖康对2型糖尿病大鼠脂肪组织TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响,探讨益糖康对2型糖尿病的抗炎作用机制。方法将SPF级SD大鼠按照随机数字表法随机分为正常对照组(不做处理),模型组(蒸馏水,5 mL/kg),益糖康组(益糖康汤剂,5 g/kg)和二甲双胍组(150 mg/kg),每组10只。所有大鼠给药途径均为经口灌胃,每日1次,连续4周。干预4周后,称量各组大鼠的体质量,快速血糖仪测定各组大鼠空腹血糖(FPG),手工法测定各组大鼠血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,称量白色脂肪(WAT)和棕色脂肪(BAT)总质量,并计算脂肪指数。酶联免疫吸附法检测肠黏膜组织中脂多糖(LPS)含量,脂肪组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,Western-blot法检测脂肪组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,其余3组大鼠的体质量,FPG、TG、TC、LDL-C、WAT、TNF-α含量,TLR4、MyD88、NF-κB表达水平均显著升高(P<0.01);HDL-C、BAT的水平均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,益糖康组大鼠体质量显著升高(P<0.01),二甲双胍组没有显著差异(P>0.05),益糖康组和二甲双胍组大鼠FPG、TG、TC、LDL-C、WAT、TNF-α含量以及脂肪组织中TLR4、MyD88、NF-κB表达水平均显著降低(P<0.01),HDL-C、BAT的水平显著升高(P<0.01)。益糖康组大鼠体质量显著高于二甲双胍组(P<0.01)外,其余指标益糖康组和二甲双胍组之间比较均没有显著差异(P>0.05)。结论益糖康可能通过降低肠黏膜中LPS的含量进而抑制脂肪组织中TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的过度活化,发挥抗炎作用,最终实现调控糖脂代谢的作用。

杞黄降糖胶囊对二甲双胍控制不佳2型糖尿病疗效和安全性一项240例多中心、随机、双盲、安慰剂对照临床研究

目的 观察中成药杞黄降糖胶囊对二甲双胍单药控制不佳的2型糖尿病患者的临床疗效和安全性。方法 按照随机、双盲、安慰剂对照方法,纳入全国14家医院240例二甲双胍控制不佳的糖尿病患者,随机分别为试验组和对照组(各120例),在原治疗基础上分别加用杞黄降糖胶囊和模拟剂。干预12周后评估疗效,观察降糖效果[糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin, HbA1c)、空腹血糖(fasting blood sugar, FPG)、餐后2 h血糖(two-hour postprandial blood glucose, 2 h PPG)]、中医气阴两虚证候和临床症状评分,并评估安全性。结果 最终共完成205例(试验组97例、对照组108例),12周后试验组HbA1c降低了0.28%±0.60%,空腹血糖下降0.14±1.56 mmol/L;而对照组HbA1c则增高了0.03%±0.62%,空腹血糖上升(0.83±1.58) mmol/L;两组有明显差别(P<0.01)。试验组口苦咽干,手足心热等症状及气阴两虚兼热证候明显改善(P<0.05),未见严重不良反应。结论 对单纯二甲双胍疗效不佳的患者,加用杞黄降糖胶囊安全有效,可协同控糖,改善患者症状。

糖障明对糖尿病大鼠晶状体水溶性蛋白质的影响

目的 探讨糖障明对糖尿病性白内障的治疗作用及其机制。方法 以链脲佐菌素造成糖尿病动物模型 ,用凝胶过滤法测定晶状体组织中水溶性蛋白的相对百分含量。结果 与正常对照组相比 ,阴性对照组糖尿病大鼠晶状体组织中α晶状体蛋白相对百分比含量显著升高 ,β和γ晶状体蛋白相对百分比含量显著下降 (P <0 0 1 )。糖障明中药治疗组糖尿病大鼠晶状体组织中α晶状体蛋白相对升高和 β及γ晶状体蛋白相对减少的程度均明显低于阴性对照组和降糖灵对照组 (P <0 0 5 ,0 0 1 )。结论 糖障明具有减轻糖尿病大鼠晶状体蛋白异常代谢的作用 。

通脉降糖保肾胶囊对糖尿病大鼠降糖保肾作用研究

目的:研究通脉降糖保肾胶囊对实验性糖尿病大鼠的作用。方法:采用链脲佐菌素和四氧嘧啶制备糖尿病大鼠模型,观察通脉降糖保肾胶囊对其血糖、尿素氮、肌酐、肾小球形态以及对血小板聚集的影响。结果:通脉降糖保肾胶囊能明显降低糖尿病大鼠的血糖,亦降低链脲佐菌素所致糖尿病大鼠胆固醇、尿素氮、肌酐,对ADP诱导的大鼠血小板聚集有明显的抑制作用。结论:通脉降糖保肾胶囊通过降低血糖、调节脂质代谢紊乱、改善肾小球结构和功能等多方面发挥降糖保肾、治疗糖尿病的作用。

降糖保肾方对早期糖尿病大鼠肾脏氧化应激与超微结构的影响

目的探讨早期糖尿病大鼠肾脏氧化应激与超微结构的变化及中药方剂降糖保肾方对其影响。方法用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,将实验动物分为正常对照组(C组)、糖尿病组(D组)和中药组(Z组),5周末检测三组大鼠血糖(BG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、肌酐清除率(CCr)、肾重/体重(S/T)、尿白蛋白排泄率(UAER)等指标的变化以及肾皮质总超氧化物歧化酶(TSOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性、丙二醛(MDA)的水平;利用透射电子显微镜观察肾脏足细胞超微结构。结果Z组与C组间各指标无显著性差异;D组与Z组或C组比较,BG、HbA1c、TC、TG、S/T明显升高;BUN、SCr水平无显著性差异,但CCr显著下降;抗氧化酶中,TSOD、CAT活性明显下降,MDA水平明显升高;UAER增高,足细胞部分足突融合。结论早期糖尿病大鼠肾脏即存在氧化应激反应及肾小球滤过屏障足细胞的损害,降糖保肾方能显著改善早期糖尿病大鼠肾脏的氧化应激状态及超微结构变化。