植物中药材总DNA提取方法的比较

随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术已经应用于中药材的鉴别，如何从多种中药材提取到总ＤＮＡ来进行相关性研究是一个关键的课题。从植物中提取基因组ＤＮＡ的方案众多，其中较为流行的方案有三类：（１）用苯酚－氯仿（变性蛋白）作为提取介质。（２）用ＣＴＡＢ（既能裂解细胞壁，又能去除多糖）作为提取介质。（３）用高盐低ｐＨ介质作为提取介质（有效的蛋白沉淀剂）。经过比较，我们认为第（３）套方案快捷、经济，比较适于基层单位应用。

商品西洋参DNA指纹图谱鉴别

运用ＲＡＰＤ 技术对来自不同产地的西洋参样品进行多态性分析。结果显示， 大部分引物能扩增出清晰的ＤＮＡ 指纹图， 西洋参真伪品之间的指纹图谱差别较大， 而各地产西洋参ＤＮＡ 指纹图基本一致。同时，发现个别产地样品的指纹图有不同程度的改变， 考虑有变异可能。

随机扩增多态性DNA最佳模板提取方法的探讨

目的 获得最佳模板提取方法用于随机扩增多态性DNA(RAPD)。方法 对 4种方法 (挑丝法、沉淀法、水清法和裂清法 )提取的模板DNA进行琼脂糖电泳、紫外线扫描及随机扩增多态性DNA ,比较其片段大小、纯度及RAPD指纹图差异。结果 挑丝法和沉淀法均可提取出大于 2 3kb且纯度较高的模板DNA ,二者指纹图完全一致且均有 2～ 4kb的较大片段。水清法和裂清法提取的模板有弥散、碎裂的DNA并纯度较差 ,指纹图上仅有 6 0 0～ 2 0 0 0bp的较小片段。 结论 用挑丝法或沉淀法提取的模板DNA最适于进行RAPD。

西红花的RAPD鉴别研究

西红花主产于欧洲及中亚地区 ,红花主产于我国 ,二者为不同科植物 ,由于外观及功效较为类似 ,故常被混用。采用随机引物对西红花及其伪冒品进行扩增 ,根据DNA指纹图谱的差异 。

RAPD在商品中药鉴别中若干问题的探讨

以各地产西洋参为研究对象，对影响中药材随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）的若干问题进行探讨。研究发现，中药材ＤＮＡ模板的降解程度、纯度、浓度，Ｔａｐ酶的浓度，Ｍｇ２＋浓度以及循环参数等诸多因素皆会不同程度的影响扩增结果，同时推荐一个较为适用的循环参数。

淋球菌的RAPD基因分型研究

目的探索RAPD指纹图谱测量淋球菌临床分离株间的遗传距离,建立淋球菌基因分型方法。方法采用随机扩增多态性DNA技术,应用6组随机引物对待测淋球菌现场分离样本株的基因组DNA进行图谱分析,相似性距阵构建和进化树分析。结果同一地区的淋球菌分离株之间存在相当大的DNA多态性,但有一定亲缘关系。TreeV iew[w in32]统计软件分析结果也支持这一结果。结论RAPD可用于鉴别淋球菌临床分离株流行病学关联,是一种实用而敏感的分子技术,有助于了解菌株来源,菌株间的克隆相关性及抗生素耐药性菌株的传播特点。

应用RAPD技术对我国不同地域红色毛癣菌分离株的遗传多样性研究

目的探讨我国不同地域红色毛癣菌分离株的遗传多样性。方法采用随机扩增DNA多态性(RAPD)方法对来源于我国不同地域(江苏南京,山东济南,广东广州)的32株红色毛癣菌临床分离株进行DNA多态性分析。结果红色毛癣菌种内差异明显,根据遗传相似性分成三大聚类群,与地域差异及取材部位无明显相关性,而与表型具有一定相关性。结论随机扩增DNA多态性方法可用于红色毛癣菌的DNA分型,其DNA带型具有一定的遗传变异性,与菌株表型有一定关系,与地域差异、侵犯部位无明显相关性。

非酿酒酵母菌株区分技术研究进展

随着对葡萄酒酿造过程中非酿酒酵母的不断深入了解,人们对非酿酒酵母在葡萄酒酿造中带来的特征性香气口感越发重视,但对于不同的非酿酒酵母能带来的香气的研究还不够深入,难以区分非酿酒酵母菌株。因此,本文介绍了随机扩增多态性DNA法、傅里叶变换红外吸收光谱法、串联重复t RNA指纹图谱法、扩增片段长度多态性法、微卫星DNA标记法等5种DNA分子标记技术的方法和原理,同时探讨了DNA分子标记技术在国内外非酿酒酵母菌株区分中的应用状况与前景。