微小染色体维持蛋白2基因诱导性敲除宫颈癌HeLa细胞系的建立及对DNA复制的影响

目的利用诱导性CRISPR/Cas9技术建立微小染色体维持蛋白2(MCM2)基因敲除的宫颈癌HeLa细胞系,并探究MCM2对DNA复制及复制压力的影响。方法使用诱导性CRISPR/Cas9系统TLCV2,构建MCM2敲除HeLa细胞系;并分为对照组(Control)、敲除1组(KO1)和敲除2组(KO2)。通过Western blot、EdU掺入实验、实时定量PCR、免疫荧光、CCK-8等实验,分析MCM2敲除对DNA复制和羟基脲诱导复制压力的影响。结果经过诱导后CRISPR/Cas9系统有效地敲除MCM2基因,并影响MCM2-7复合物的稳定。与对照细胞相比,MCM2敲除细胞DNA复制能力显著下降,同时Cyclin A1、Cyclin E1和CDK4的mRNA表达水平降低。在DNA复制压力下,MCM2敲除降低了细胞的存活能力、DNA损伤修复能力,并增加基因组的不稳定性。结论MCM2基因敲除降低正常条件下HeLa细胞的DNA复制能力,并降低复制压力后细胞的存活能力。本研究成功地构建了诱导性MCM2基因敲除HeLa细胞系,为进一步研究MCM2基因在宫颈癌中的作用及其生物学功能奠定了基础。

微小染色体维持蛋白2在乳腺癌组织中的表达及意义

目的:探讨微小染色体维持蛋白2(MCM2p)在乳腺癌的表达及其与临床病理特征的关系,并分析MCM2p与Ki-67的相关性。方法:运用免疫组织化学方法检测乳腺癌组织中MCM2p、Ki-67的表达。结果:在乳腺癌组织中MCM2p、Ki-67的表达均高于正常乳腺组织,且MCM2p的标记指数明显高于Ki-67,两者表达呈正相关。MCM2p的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移、临床病理分期和核分裂指数有非常显著相关性,与患者的年龄、肿瘤大小及组织学类型无显著性关系。结论:MCM2p与乳腺癌临床病理的发展紧密相关,作为病理诊断的参考指标较Ki-67有更强的敏感性。

微小染色体维持蛋白2在鼻咽癌中的免疫组织化学表达及临床意义

目的研究微小染色体维持蛋白2(MCM2)在鼻咽癌中表达以及同鼻咽癌临床分期、颈淋巴结转移、病理类型、远处转移等的关系。方法对62例鼻咽癌标本应用免疫组化法研究、分析MCM2基因的表达情况。结果①有远处转移组的MCM2表达水平明显高于无远处转移组;②MCM2的表达水平与临床分期呈正相关;③MCM2表达在未分化癌组中高于角化性鳞癌组;④MCM2的表达在有无颈淋巴结转移、年龄、性别组间无明显差异。结论 MCM2表达的程度与鼻咽癌的临床分期相关;MCM2的高表达可能是鼻咽癌远处转移的因素之一;MCM2表达的水平可能是鼻咽癌预后评估的重要参考指标。

肠癌组织中微小染色体维持蛋白2的高表达与肠癌肝转移及临床病理特征的关系

目的探究肠癌组织中微小染色体维持蛋白2(MCM2)的高表达与肠癌肝转移及临床病理特征的关系。方法 2009年1月—2014年1月收治大肠癌患者215例,其中肝转移88例为肝转移组,另127例为无肝转移组,同时选择60例健康者为健康对照组。比较3组血浆MCM2水平,以及肝转移组与无肝转移组肠癌组织MCM2表达情况,分析MCM2表达与临床病理特征的关系。结果与健康对照组比较,肠癌肝转移组和无肝转移组MCM2水平均升高(P<0.05),且肝转移组MCM2水平高于无肝转移组(P<0.05);肠癌肝转移组MCM2高表达率为76.1%(67/88),高于肠癌无肝转移组的46.5%(59/127)(P<0.05);MCM2高表达与肠癌TNM分期、分化程度及淋巴转移密切相关(X^2=5.005、4.263、4.388,P<0.05)。结论 MCM2高表达与大肠癌肝转移、TNM分期、分化程度、淋巴转移密切相关。

微小染色体维持蛋白2在妇科恶性肿瘤研究中的进展

微小染色体维持蛋白2(MCM2)是真核细胞DNA复制启动的许可因子。MCM2只在增殖细胞周期中表达,被视为特异性增殖相关因子,能够检测具有增生潜能的细胞和较好地区分正常组织、不典型增生及肿瘤组织。用MCM2作为肿瘤标志物提高了妇科恶性肿瘤的筛查检出率,有助于判定肿瘤预后,MCM2抗体及抑制剂有望成为治疗妇科恶性肿瘤的新靶点。

微型染色体维持蛋白2在大肠肿瘤中的表达及其意义

目的:研究微型染色体维持蛋白(minichromosome maintenance proteins,MCMs)家族中的一成员Mcm2蛋白在大肠肿瘤中的表达情况及其意义.方法:采用免疫组化染色的方法,检测了23例正常大肠黏膜、33例大肠腺瘤及69例大肠癌组织中Mcm2蛋白的表达,并以标记指数(labelling index,LI)量化其表达.结果:在正常大肠黏膜组织中,Mcm2蛋白表达仅局限于腺体基底部的1/3～1/2部分的增生细胞,而在大肠腺瘤组织和癌组织中,Mcm2蛋白在整个上皮包括肠腔表面的细胞也有大量表达,三者LI的中位数(范围)分别为18%(5%～37%)、35%(15%～75%)、66%(41%～90%),三者之间差异有显著性(P＜0.05).Mcm2蛋白表达在大肠癌患者的不同年龄段(≤40岁和>40岁)、性别、肿块大小(≤3 cm 和>3 cm)、病理学类型、Dukes分期之间无显著性差异(P>0.05),但在大肠肿瘤的不同分化程度(大肠癌的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级,大肠腺瘤的轻、中、重度不典型增生)之间有显著性差异(P<0.05),呈逐渐升高趋势.结论:Mcm2蛋白是大肠肿瘤组织的一种可靠标志物, Mcm2的表达可以提示大肠癌的恶性程度高低和腺瘤的恶变可能性,有助于临床判断患者的预后以及选择合适的治疗方法.

微小染色体维持蛋白2在胃癌中的表达及预后意义

目的探讨微小染色体维持蛋白2(MCM2)在胃癌中的表达及预后意义。方法采用免疫组化方法检测MCM2在胃癌、转移淋巴结和正常组织中的表达,分析其表达与临床病理特征及生存率的关系。结果 MCM2在胃癌及转移淋巴结组织中的表达较正常组织中高,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中MCM2表达与患者的年龄、浸润深度和淋巴结转移有显著相关性(P<0.05),与肿瘤大小、肿瘤位置、有无远处转移、UICC分期无显著相关性(P>0.05)。胃癌中MCM2表达阴性患者的预后较MCM2表达阳性患者好(P<0.05)。生存分析显示,MCM2在胃癌中的阳性表达(P<0.05)、肿瘤的浸润深度(P<0.05)及淋巴结转移(P<0.05)是胃癌术后的独立预测因素。结论 MCM2可作为胃癌细胞增殖和预后判断的标志物。

膀胱癌组织及尿脱落细胞组织中微小染色体维持蛋白2的检测

目的探讨膀胱癌组织和尿脱落细胞组织中微小染色体维持蛋白2（rainichromosome maintenanee2 protein，MCM2）的表达及意义。方法采用RT—PCR方法检测25例膀胱癌患者、28例泌尿系良性疾病患者和15例正常对照组尿脱落细胞组织中MCM2的表达；并对膀胱癌组织MCM2的表达进行检测，同时行尿细胞学检查。结果膀胱癌组织标本中MCM2阳性率为96％（24／25），MCM2表达量与分化程度、浸润深度、淋巴结转移、是否复发密切相关（P〈0．05）。膀胱癌患者尿脱落细胞中MCM2阳性率随分化程度和浸润浓度及复发的增加而逐渐增加；且在不同分化程度及不同浸润浓度、是否复发之间的差异也有显著性（P〈0．05）。尿脱落细胞中MCM2检测诊断膀胱癌的灵敏度（96％）、阴性预测值（97．6％）明显高于尿细胞学检查（52％、76．8％），差异有显著性（P〈0．05）0结论MCM2能很好地反映膀胱癌组织中细胞的增殖能力，RT—PCR方法检测膀胱癌组织及尿脱落细胞组织中MCM2表达是一种敏感、特异的膀胱癌诊断方法。

微小染色体维持蛋白2与头颈部肿瘤

微小染色体维持蛋白2(minichromosome maintenance protein 2,MCM2)是微小染色体维持蛋白家族中的成员之一,在人类多种肿瘤组织中表达。MCM2在静止期细胞中不表达,而在突变、增殖的细胞中高度表达,可准确反映细胞的增殖能力,是评价细胞进入增殖期的特异指标,被视为癌前标志物。MCM2的过度表达与各种头颈部肿瘤的发生发展密切相关,有望作为各头颈肿瘤早期筛查和预后评估的临床指标。本文主要阐述MCM2的结构和功能,并对其与头颈部肿瘤的关系进行综述。

p16、微型染色体维持蛋白2、Ki-67在宫颈鳞状上皮内病变的表达与意义

目的检测子宫颈鳞状上皮内病变(SIL)组织中p16、微型染色体维持蛋白2(MCM2)、Ki-67的表达,分析三者阳性表达的关系,为疾病的临床诊断与治疗提供依据。方法回顾性分析吉安市妇幼保健院2017年7月至2019年10月收治的240例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者(CINⅠ级患者130例,CINⅡ~Ⅲ级110例患者)、50例慢性宫颈炎患者及20例宫颈浸润性鳞癌患者的临床资料。采集各患者宫颈活检组织,进行SP法免疫组织化学染色,检测各患者子宫颈病理组织p16、MCM2、Ki-67的表达情况,分析p16、MCM2、Ki-67阳性表达的相关性。结果CINⅠ级、CINⅡ~Ⅲ级、浸润性鳞癌患者病理组织中p16、MCM2、Ki-67阳性表达率均显著高于慢性宫颈炎患者,且CINⅡ~Ⅲ级、浸润性鳞癌患者显著高于CINⅠ级患者;Spearman相关性分析显示,p16与MCM2阳性表达呈正相关关系(r=0.691);p16与Ki-67阳性表达呈正相关(r=0.556);MCM2与Ki-67阳性表达呈正相关(r=0.676)(均P<0.05)。结论在慢性宫颈炎患者、CIN患者及浸润性鳞癌患者宫颈组织中p16、MCM2、Ki-67均异常高表达,且三者阳性表达与疾病严重程度正相关,p16、MCM2、Ki-67三者阳性表达也具有显著正相关性,可将其作为SIL诊断的分子标志物。

微型染色体维持蛋白2、诱生型环氧化酶和p53在肺鳞癌中的表达及意义

目的测定微型染色体维持蛋白2(MCM2)、诱生型环氧化酶(COX-2)及p53在肺鳞癌病理组织和正常肺组织中的表达,探讨该表达与肺鳞癌临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化法测定81例肺鳞癌病理组织和12例正常肺黏膜组织中MCM-2、COX-2及p53表达,对81例术后的患者随访8～60个月。结果81例肺鳞癌中MCM2的表达越高,肿瘤分化程度越低,TNM分期越高(P＜0．001),有淋巴结转移者MCM2的表达高于无淋巴结转移者;但是,COX-2表达越高,肿瘤分化程度越高,TNM分期越低,有淋巴结转移者低于无淋巴结转移者(P=0．042);有淋巴结转移者p53的表达高于无淋巴结转移者(P=0．049);MCM2、COX-2和p53三者两两之间无相关性。单因素生存率分析提示MCM2高表达者的累积生存率明显低于低表达者,COX-2和p53的表达与疾病的预后无关。多因素Cox模型筛选出肿瘤的TNM分期、淋巴结转移状况和MCM2是影响疾病预后的独立因素。结论检测MCM2、COX- 2及p53在肺鳞癌中的表达水平对判断肺鳞癌的恶性程度及预后提供了参考依据。

微小染色体维持蛋白2在宫颈病变中的研究进展

微小染色体维持蛋白2(minichromosome maintenance protein 2,MCM2)是真核细胞DNA复制启动的许可因子。其mRNA水平在细胞周期中是呈周期性变化的,一些细胞周期相关因子通过调控MCM2可干预DNA的复制。其只在增殖细胞周期中表达,被视为特异性增殖相关因子,能够用于检测具有增生潜能的细胞和较好地区分正常组织、不典型增生及肿瘤组织。其异常表达反映了具有癌变潜能的细胞被锁定在细胞周期中不断地进行异常复制、增殖,其标记指数越高预示肿瘤恶性程度越高,预后越差,故MCM2是研究肿瘤细胞能动性及判定肿瘤预后的有效指标。MCM2与宫颈病变的关系经过了多年的研究,其作为肿瘤标志物加入宫颈病变的筛查提高了宫颈癌前病变的检出率并有助于宫颈癌预后的判定,而MCM2的抗体或抑制剂有望成为宫颈癌治疗的新靶点。

微小染色体维持蛋白2与细胞间隙连接蛋白43在非霍奇金淋巴瘤中的表达和临床研究

目的分析探讨非霍奇金淋巴瘤中微小染色体维持蛋白2(MCM2)和细胞间隙连接蛋白43(Cx43)的表达,并探讨其临床意义。方法选择2015年2月—2017年2月间在周口市中心医院接受治疗的55例非霍奇金淋巴瘤患者作为观察组,另选择35例反应性增生淋巴结患者作为对照组,分别采用SP法对两组患者的MCM2和Cx43表达,并对测定结果进行分析。结果经过对比研究,观察组患者MCM2的阳性表达率显著高于对照组,观察组的Cx43阳性表达率明显低于对照组患者(P<0.05)。同时,MCM2的表达与Cx43的表达没有显著关系,但是与患者的肿瘤恶性程度存在显著相关性,MCM2的表达还与患者肿瘤的临床分期和Ki-67存在显著相关性。结论非霍奇金淋巴瘤的恶性程度会导致MCM2和Cx43蛋白出现异常表达,因此,通过测定MCM2和Cx43蛋白对于诊断非霍奇金淋巴瘤具有重要价值。

维持性血液透析患者血清细胞分裂周期蛋白42、β_(2)微球蛋白、腓骨蛋白1水平与腹主动脉钙化的相关性

目的 探讨维持性血液透析(MHD)患者血清细胞分裂周期蛋白42(CDC-42)、β_(2)微球蛋白(β_(2)-MG)、腓骨蛋白1(FBLN1)水平与腹主动脉钙化(AAC)的相关性。方法 收集74例MHD患者的一般资料和生化指标,根据腹主动脉钙化评分(AACs)将患者分为无和轻度AAC组36例和中重度AAC组38例。比较2组血清CDC-42、β_(2)-MG、FBLN1水平,采用多因素Logistic回归分析探讨MHD患者发生AAC的危险因素。结果 中重度AAC组透析龄、血磷、全段甲状旁腺激素(iPTH)、CDC-42、β_(2)-MG、FBLN1水平高于无和轻度AAC组,差异有统计学意义(P<0.05)。MHD患者AAC与血磷、iPTH、CDC-42、β_(2)-MG、FBLN1、透析龄呈正相关(P<0.05)。高CDC-42、β_(2)-MG、FBLN1水平及长透析龄是MHD患者发生AAC的独立危险因素(P<0.05)。结论 血清CDC-42、β_(2)-MG、FBLN1水平与MHD患者AAC呈正相关,高CDC-42、β_(2)-MG、FBLN1水平及长透析龄是MHD患者发生AAC的独立危险因素。

红细胞分布宽度β_(2)-微球蛋白与维持性血液透析患者认知障碍的相关性研究

目的 探讨红细胞分布宽度(RDW)、β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)与维持性血液透析(MHD)患者认知障碍(CI)之间的关系。方法 收集2022年1月至6月于山西医科大学第三医院血液净化中心MHD患者195例临床及实验室资料,进行简易智力状态检查量表筛查。Logistic回归分析MHD患者发生CI的危险因素、受试者工作特征(ROC)曲线分析RDW、β_(2)-MG对MHD患者CI预测价值。结果 195例MHD患者中CI71例(36.4%)。Logistic回归分析显示RDW、β_(2)-MG是MHD患者发生CI的独立危险因素。RDW预测MHD认知功能障碍的灵敏度80.3%、特异度为83.1%,曲线下面积(95%CI)为0.856(0.803,0.909)(P<0.05)。β_(2)-MG预测MHD患者认知功能障碍的灵敏度87.3%、特异度为78.2%,曲线下面积(95%CI)为0.872(0.821,0.922)(P<0.05)。RDW联合β_(2)-MG预测MHD认知功能障碍灵敏度85.9%、特异度为88.0%,曲线下面积(95%CI)为0.949(0.922,0.975)(P<0.05)。结论 高RDW、β_(2)-MG对MHD患者认知障碍有一定预测价值,且两者联合检测对MHD患者认知障碍预测价值更高。

基于生物信息学分析微小染色体维持蛋白2在头颈部鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中微小染色体维持蛋白2(MCM2)的表达情况及意义。方法通过基因表达公共(GEO)数据库比较MCM2在HNSCC和正常组织中的表达差异。利用UALCAN数据库分析不同因素下MCM2在HNSCC和正常组织中的表达情况;TIMER数据库分析MCM2与免疫细胞的相关性;运用Linked Omics数据库和STRING数据库研究与MCM2密切相关的基因。最后运用GSCALite数据库分析相关关键基因的药物靶点。结果MCM2在HNSCC中表达高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。MCM2在不同年龄段、性别、肿瘤分级、临床分期和淋巴转移的HNSCC中表达均高于正常组织,且人乳头瘤病毒(HPV)阳性患者MCM2表达高于HPV阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。HNSCC中MCM2的表达与免疫细胞的浸润水平成正相关(P<0.05)。GSCALite数据库分析显示MCM2受NPK76-II-72-1、Navitoclax、GSK1070916和I-BET-762等药物调节。结论MCM2在HNSCC中高表达,可作为HNSCC诊断和药物治疗的新靶点。

p16/微小染色体维持蛋白2免疫细胞化学双染在宫颈癌筛查中的应用价值

目的探讨p16/微小染色体维持蛋白2(MCM2)免疫细胞化学双染在宫颈癌筛查中的应用价值。方法选取2022年7月至12月于徐州市肿瘤医院进行人乳头瘤病毒(HPV)分型及薄层液基细胞学检查(TCT)检测的525例宫颈癌筛查患者作为研究对象。所有患者均行HPV分型检测、TCT检测、p16/MCM2双染及阴道镜和活检。分析p16/MCM2表达与高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染、宫颈病变的关系,比较p16/MCM2、HR-HPV及TCT诊断宫颈病变的敏感度、特异度及准确率。结果HPV16/18阳性患者、其他HR-HPV阳性患者的p16/MCM2阳性占比高于HPV阴性,差异有统计学意义(P<0.017);HPV16/18阳性患者的p16/MCM2阳性占比与其他HR-HPV阳性比较,差异无统计学意义(P>0.017);宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ、宫颈鳞癌(SCC)患者中的p16/MCM2阳性占比高于良性病变患者,差异有统计学意义(P<0.005);p16/MCM2、HR-HPV诊断敏感度高于TCT,p16/MCM2、TCT诊断特异度高于HR-HPV,p16/MCM2诊断准确率高于TCT,差异有统计学意义(P<0.017);p16/MCM2与HR-HPV诊断敏感度、p16/MCM2与TCT诊断特异度、p16/MCM2与HR-HPV诊断准确率、HR-HPV与TCT诊断准确率比较,差异无统计学意义(P>0.017)。结论p16/MCM2免疫细胞化学双染诊断宫颈病变敏感度、特异度及准确率均较高,能够识别宫颈异常细胞,降低宫颈病变的漏诊率及误诊率。

血清β2微球蛋白浓度与维持性血液透析患者肾性贫血的相关性研究

目的探讨维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者肾性贫血和血β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)水平的相关性,为临床诊断和治疗肾性贫血提供新的观点和依据。方法选取2021年12月至2023年12月在武汉大学人民医院确诊为终末期肾病、病情稳定的MHD患者为研究对象,根据其血红蛋白水平分为贫血组和对照组,收集患者相关临床资料和实验室检查资料。使用SPSS 22.0软件包行数据的统计学分析处理。结果与对照组相比,贫血组血清β2-MG显著升高,患者血红蛋白与白细胞、总蛋白、白蛋白呈正相关(P<0.05),与超敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)及β2-MG呈负相关(P<0.05);多因素Logistic回归显示低血白蛋白、高β2-MG水平是MHD患者发生贫血的独立危险因素。结论MHD患者血清β2-MG水平升高与血红蛋白降低相关,低血白蛋白、高血清β2-MG是患者肾性贫血的危险因素。因此在治疗MHD患者肾性贫血时,需要尤其注意患者营养状态和β2-MG等大分子炎性毒素的清除,必要时先纠正营养不良和使用β2-MG吸附柱可能对纠正肾性贫血更为有利,从而进一步减少MHD患者心血管并发症的发生,改善预后。

血清β_(2)-微球蛋白水平对尿毒症维持性血液透析动静脉内瘘失功的诊断价值

目的:探讨血清β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)水平对尿毒症维持性血液透析动静脉内瘘失功的诊断价值。方法:选取2019年1月至2022年4月我院采用动静脉内瘘为血管通路进行维持性血液透析治疗的患者202例,根据动静脉内瘘功能分为失功组(48例)和对照组(154例)。采集患者上机前外周静脉血,采用Immulite 2000全自动化学发光免疫分析仪检测血清β_(2)-MG水平,同时检测其他实验室指标如血浆超敏-C反应蛋白(hs-CRP)、血浆D-二聚体(D-D)水平等。行肱动脉超声检查,观察血管壁钙化、血栓形成情况,计算肱动脉血流量、搏动指数和阻力指数。采用Logistic回归分析动静脉内瘘失功的影响因素。绘制ROC曲线,分析β_(2)-MG对动静脉内瘘失功的诊断价值。结果:失功组血hs-CRP、D-D和β_(2)-MG水平均高于对照组(P<0.05);失功组肱动脉血流量低于对照组,肱动脉搏动指数、阻力指数和血管壁钙化、血栓形成发生率高于对照组(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示血清β_(2)-MG水平、肱动脉血流量和肱动脉阻力指数为动静脉内瘘失功的影响因素,OR(95%CI)分别为1.446(1.211~1.726)、0.994(0.991~0.996)、1.158(1.034~1.298)。血清β_(2)-MG水平诊断维持性血液透析动静脉内瘘失功的ROC曲线下面积(95%CI)为0.705(0.654~0.864),以15.81 mg/L为截断值时敏感度为0.75,特异度为0.63。结论:血清β_(2)-MG水平是维持性血液透析动静脉内瘘失功的重要影响因素,对判断动静脉内瘘失功具有一定参考价值。

微染色体维持蛋白6高表达与肝细胞癌预后关系的研究

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者微染色体维持蛋白6(MCM6)表达水平与临床病理特征的相关性,并判断其在HCC中的预后作用。方法HCC患者的基因表达谱和临床资料从肿瘤基因组图谱(TCGA)肝癌数据库中获取得到。分析MCM6在HCC中的表达水平,评价MCM6在HCC中的预后作用。结果MCM6在HCC组织中的表达水平明显高于癌旁组织。HCC中MCM6高表达与病理分期、T分期、组织学分级明显相关。Kaplan-Meier生存分析提示MCM6高表达的患者预后、生存期限明显差于MCM6低表达水平的患者。多因素Cox分析显示MCM6高表达是HCC的独立预后因素。结论MCM6参与了HCC的进展,并可独立预测HCC的预后,可作为HCC的潜在诊断和预后标志物。