运用生物信息学探讨正肝方治疗肝癌的作用机制及实验验证研究

目的本研究基于生物信息学预测中药复方正肝方对肝癌的作用机制及靶点,并通过实验验证正肝方对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导的肝癌大鼠模型的抗癌作用机制的研究。方法通过TCMSP和HERB本草组鉴数据库收集正肝方化合物成分,并通过Uniprot蛋白数据库预测正肝方的潜在作用靶点,借助OMIM、TTD和Gene Cards数据库检索肝癌疾病靶点,然后对疾病-药物的靶点进行Venny分析,随后使用String数据库绘制蛋白互作网络,利用R 4.1.3软件和Metascape数据库对核心交集靶点进行基因本体(gene ontology,GO)富集及KEGG信号通路分析,最后运用Cytoscape 3.8.2软件进行可视化处理,构建“化合物-通路-靶点-疾病”网络图,最后利用Western blot实验进行验证。结果生物信息学结果显示,正肝方与疾病的共同靶点共有171个,正肝方治疗肝癌可能是通过木犀草素、槲皮素、β-谷固醇、常春藤皂苷元等主要活性成分,通过CASP3、Bcl-2、AKT1、IL6等核心蛋白靶点,调控Hippo信号通路、PI3K-Akt信号通路等发挥抗肝癌的作用。动物实验结果显示,Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax表达含量,正肝方治疗组Bax和Caspase-3蛋白表达量上调,Bcl-2蛋白表达量下调。结论本研究表明正肝方可能通过调控Caspase-3、Bcl-2、Bax凋亡相关蛋白抑制肝癌细胞的生长,促进肝癌细胞的凋亡以达到抗肝癌的作用。

海桐皮汤熏蒸对兔实验性膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的:探讨海桐皮汤熏蒸对实验性兔膝关节骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响。方法:取45只新西兰大白兔,随机取10只作为正常对照组(A组),其余35只采用Hulth方法造模,1周后取30只元膝关节感染实验兔,随机分为3组(每组10只):并随机分为模型组(B组)、水蒸气熏蒸组(C组)和海桐皮汤熏蒸组(D组)。分别采取相应的处理方法4周后处死取材,采用流式细胞术检测软骨细胞凋亡状况。结果:正常组兔关节软骨细胞凋亡率为18.57%,模型组29.41%,水治疗组和药物治疗组分别为28.26%、21.09%。与正常组相比,模型组、水蒸气熏蒸组、海桐皮汤熏蒸组有显著差异(P<0.05);与模型组相比水蒸气熏蒸组、海桐皮汤熏蒸组有显著差异(P<0.05);与水蒸气熏蒸组相比海桐皮汤熏蒸组有显著差异(P<0.05)。结论:海桐皮汤熏蒸可显著减少实验性兔膝关节骨性关节炎软骨细胞凋亡,从而延缓关节软骨的退变,促进软骨修复的作用。

黄芪保心汤对缺血心肌心功能及心肌细胞超微结构的影响

目的:通过结扎冠状动脉造成大鼠急性心肌缺血损伤模型,探讨复方黄芪保心汤对缺血心肌心功能及心肌细胞超微结构的影响。方法:结扎冠状动脉造成大鼠急性心肌缺血损伤模型,以目前治疗冠心病疗效确切的复方丹参滴丸作对照,试图观察黄芪保心汤对缺血心肌心功能(病理生理)及心肌超微结构(病理解剖)的影响。结果:实验性心肌缺血大鼠的心功能明显下降,心肌结构改变显著,黄芪保心汤和复方丹参滴丸均能增强大鼠的心肌收缩功能,改善心肌形态学和细胞超微结构的改变,与模型组相比,有显著性差异(P<0.05,P<0.01),但二者相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:以益气活血化痰立法的黄芪保心汤具有良好的抗心肌缺血作用,其作用机理可能与增强心肌收缩力、抑制心肌细胞的坏死和凋亡有关,提示中药复方制剂在防治心肌缺血方面大有潜力。

加味百合地黄汤对Lewis肺癌小鼠抗肿瘤转移作用机制的研究

目的探讨加味百合地黄汤对肺癌转移小鼠肿瘤转移干预作用及机制。方法复制移植性小鼠Lewis肺癌转移模型,用药后观察肺组织显微镜下转移灶数目、抑瘤率、抗转移率,免疫组化法检测瘤组织中P53、PCNA、Cyclin D1的表达情况。结果加味百合地黄汤对Lewis肺癌有非常显著的抑制作用,可抑制肿瘤细胞增殖,降低PCNA蛋白及Cyclin D1蛋白的表达。结论加味百合地黄汤有较好的抗肿瘤转移作用。

安胃汤对慢性萎缩性胃炎模型大鼠细胞凋亡因子表达的影响

目的:研究安胃汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)模型大鼠细胞凋亡因子表达的影响。方法:采用MNNG法建立CAG大鼠模型,将60只大鼠随机分为空白对照组(A组)、模型组(B组)、胃复春组(C组)、安胃汤低剂量组(D组)、安胃汤中剂量组(E组)、安胃汤高剂量组(F组)各10只,A、B两组给予3ml生理盐水灌胃,C组给予胃复春悬浊液按照0.078g/100(g·d)的剂量灌胃。D、E、F组分别给予0.5、1.0、2.0g/100(g·d)剂量的安胃汤灌胃,连续治疗4周。显微镜下观察胃黏膜组织形态的改变,使用QRT-PCR法和Western-blot法检测胃黏膜组织中Bax、Bcl-2、Fas、FasL mRNA及蛋白的表达,TUNEL法检测胃黏膜细胞凋亡指数。结果:镜下显示,B组胃黏膜明显萎缩,固有腺体萎缩消失,D、E、F组胃黏膜结构完整度呈递增趋势,固有腺体萎缩程度降低,数目增加,明显优于B组。与B组相比,C、D、E、F组的Bcl-2 mRNA相对表达量和蛋白表达量升高,Bax、Fas、FasL mRNA相对表达量和蛋白表达量降低(P<0.05);与C组相比,E、F组的Bcl-2mRNA相对表达量和蛋白表达量升高,Bax、Fas、FasL mRNA相对表达量降低(P<0.05)。与B组相比,C、D、E、F组凋亡指数均下降(P<0.05);与C组相比,D、E、F组凋亡指数均下降,且随着剂量的升高,下降程度更明显(P<0.05)。结论:安胃汤治疗CAG大鼠,能够通过调节Bax、Bcl-2、Fas、FasL等细胞凋亡因子水平,抑制胃黏膜细胞凋亡,改善胃黏膜萎缩,效果与安胃汤剂量正相关。

八珍汤对红细胞生成素影响的动物实验研究

为探讨经典名方八珍汤补血养血的作用机理 ,采用动物实验观察其对血清红细胞生成素 (EPO)及EPO样生长因子的影响。结果显示 :八珍汤能显著提高正常小鼠和大鼠的血清EPO水平 (P均 <0 .0 0 1 ) ,能显著促进正常和血虚大鼠脾条件培养液中EPO样生长因子的生成 (P均 <0 .0 0 1 )。提示八珍汤补血养血的作用机理与其能促进EPO及EPO样生长因子的分泌产生有关。

甲基强的松龙联合益肾通痹汤对大鼠压迫性神经根损伤的保护作用

目的:探讨甲基强的松龙联合益肾通痹汤对大鼠压迫性神经根损伤的保护作用。方法:将90只SD大鼠随机分为5组,即空白组、模型组、甲基强的松龙组、中药组、甲基强的松龙+中药组,每组18只。采用王拥军等建立的腰神经根压迫造模法对模型组、甲基强的松龙组、中药组和甲基强的松龙+中药组大鼠进行造模,空白组大鼠切开背部后立即缝合。造模成功后,甲基强的松龙组以小剂量甲基强的松龙腹腔注射,中药组以益肾通痹汤灌胃,甲基强的松龙+中药组以小剂量甲基强的松龙腹腔注射并以益肾通痹汤灌胃;空白组和模型组仅以相同剂量的蒸馏水灌胃。分别于造模后第7天、第14天及第28天对各组大鼠的行为学特征和神经根损伤区变化进行观察。结果:①行为学特征:7 d时甲基强的松龙、益肾通痹汤单独使用均能降低大鼠行为学特征评分,且二者联合使用具有协同效应(甲基强的松龙:F=61.309,P=0.000;益肾通痹汤:F=98.078,P=0.000;联合应用:F=39.654,P=0.001);14 d时甲基强的松龙、益肾通痹汤单独使用均能降低大鼠行为学特征评分,且二者联合使用具有协同效应(甲基强的松龙:F=156.902,P=0.000;益肾通痹汤:F=196.267,P=0.000;联合应用:F=29.512,P=0.002);28 d时甲基强的松龙、益肾通痹汤单独使用均能降低大鼠行为学特征评分,且二者联合使用具有协同效应(甲基强的松龙:F=96.098,P=0.000;益肾通痹汤:F=78.204,P=0.000;联合应用:F=19.090,P=0.001)。②正常神经元:7 d时各组正常神经元数量比较,差异有统计学意义(F=42.230,P=0.001);进一步两两比较,除模型组与中药组、甲基强的松龙组与甲基强的松龙+中药组比较差异无统计学意义外(P=0.087;P=0.069),其余各组间比较,差异均有统计学意义。14 d时各组正常神经元数量比较,差异有统计学意义(F=23.098,P=0.002);进一步两两比较,除模型组与甲基强的松龙组比较差异无统计学意义外(P=0.067),其余各组间比较,差异均有统计学意义。28 d时各组正常神经元数量比较,差异有统计学意义(F=34.543,P=0.001);进一步两两比较,除模型组与甲基强的松龙组比较差异无统计学意义外(P=0.098),其余各组间比较,差异均有统计学意义。③变性神经元:7 d时甲基强的松龙、益肾通痹汤单独使用均能减少变性神经元数量,且二者联合使用具有协同效应(甲基强的松龙:F=154.521,P=0.000;益肾通痹汤:F=102.721,P=0.000;联合应用:F=19.512,P=0.002);14 d时甲基强的松龙、益肾通痹汤单独使用均能减少变性神经元数量,且二者联合使用具有协同效应(甲基强的松龙:F=54.912,P=0.000;益肾通痹汤:F=60.451,P=0.001;联合应用:F=12.720,P=0.002);28 d时甲基强的松龙、益肾通痹汤单独使用均能减少变性神经元数量,且二者联合使用具有协同效应(甲基强的松龙:F=67.912,P=0.001;益肾通痹汤:F=53.109,P=0.001;联合应用:F=9.560,P=0.002)。结论:甲基强的松龙联合益肾通痹汤能够减轻机械压迫性神经根损伤所导致的神经功能及组织形态病理学改变,促进损伤神经元修复以及正常神经元再生,具有改善神经功能、保护神经根的作用。

附子理中汤及拆方干预脾阳虚模型大鼠

背景:中药复方多具有"双向调节"、"纠正偏性"从而恢复机体平衡的药效特点,实验拟采用附子理中汤及其拆方为干预药物,验证附子理中汤对脾阳虚证具有最佳的"温阳健脾"效果,为进一步了解附子理中汤多节点起效的机制提供基础资料。目的:以转化医学思维为指导观察附子理中汤及拆方对脾阳虚模型大鼠的药效。方法:采用肩胛间棕色脂肪切除术+高脂饲料喂养+隔日寒冷环境刺激的复合因素造模法制备脾阳虚Wistar 大鼠模型,造模后第 70 天分别灌胃附子理中汤、理中汤和附子干姜汤;对照组不造模,喂饲普通饲料,测量各组大鼠体质量、肛温和肛温温度曲线下面积。结果与结论:模型组大鼠体质量增长最慢,其余给药 3 组体质量增长较快,又以附子组增长最明显,与模型组比较,差异有显著性意义(P < 0.05)。模型组大鼠肛温均低于其余 4 组,与对照组比较,差异有显著性意义(P < 0.05)。附子组大鼠肛温升高明显,与模型组比较差异有显著性意义(P < 0.05)。模型组大鼠的肛温温度曲线下面积低于对照组,差异有显著性意义(P < 0.05)。附子组、理中组、附姜组大鼠的肛温温度曲线下面积高于模型组,差异有显著性意义(P < 0.05 或 P < 0.01)。结果可见附子理中汤以及拆方理中汤和附子干姜汤均能纠正脾阳虚大鼠脾失健运导致体质量减少或增长缓慢和脾失温煦导致体温低的病理状态,以附子理中汤的效果较好。

益脾养肝方对大鼠肝癌癌前病变组织PCNA、GGT蛋白表达的影响

目的:研究益脾养肝方对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的大鼠肝癌癌前病变病理组织和PCNA、GGT蛋白表达的影响。方法:将大鼠随机分成空白组、模型组、益脾养肝方大、小剂量组。采用腹腔注射DEN诱发大鼠肝癌前病变模型,给药16周后处死。观察大鼠一般情况和体重,肝功变化,肝组织HE染色以及免疫组化检测PCNA和GGT蛋白表达。结果:与模型组比较,养脾益肝方大、小剂量组的ALT、AST、GGT和ALP均明显降低,其中YPYGF大剂量组效果最佳(P<0.01)。病理组织结果显示,益脾养肝方可以改善大鼠肝癌癌前病变的病理形态,能显著抑制肝组织PCNA和GGT的蛋白表达。结论:益脾养肝方对于大鼠肝癌癌前病变具有抑制作用,其作用可能与抗细胞异常增殖和抗细胞氧化损伤有关。

补阳还五汤对小鼠脑出血后脑组织含水量的影响

目的:通过研究中医益气活血方补阳还五汤对小鼠脑出血脑组织含水量,进一步探讨益气活血中药作用于脑出血的作用机制。方法:将健康雄性ICR小鼠,随机分为以下五组:假手术组、出血组、出血+益气组、出血+活血组、出血+补阳还五汤组,利用纹状体注射胶原酶IV建立小鼠脑出血模型,假手术组和出血组以蒸馏水灌胃,出血+益气组、出血+活血组和出血+补阳还五汤组分别灌服补阳还五汤益气组分、活血组分及补阳还五汤全方药物。分别在造模结束后24h和72h取材,通过干湿重法检测脑组织含水量。结果:益气组、活血组和补阳还五汤组都可以减低小鼠脑出血后24h和72h脑出血基底节区的水肿含量。结论:补阳还五汤主要作用于基底节区以降低其对脑水肿的影响。

二冬汤含药血清对肺癌细胞A549的作用研究

目的:研究二冬汤含药血清对肺癌细胞A549的抑制作用、最佳给药方案及诱导细胞凋亡。方法:采用MTT法,观察不同给药天数、不同剂量、不同采血时间、不同培养时间的二冬汤血清对肺癌细胞A549的抑制效应,及应用FITC/PI流式细胞术检测最佳给药方案含药血清对A549细胞的凋亡率。结果:二冬汤含药血清对人肺癌细胞A549具有抑制作用,中剂量组[7.99g/(kg.d)]给药5天、10天,末次给药2h的含药血清与细胞培养48h后的抑制作用最明显,抑制率分别为42.27%和39.67%,与空白血清组比较,差异均有非常显著性意义(P<0.01);但从给药天数以及与肺癌细胞培养时间上来看,与空白血清组比较,差异无显著性意义(P>0.05);FITC/PI双染法显示二冬汤含药血清对A549的凋亡总计为(28.45±0.68)%,与空白血清组(6.75±0.46)%比较,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:二冬汤最佳给药方案为给药5天,末次给药2h后取血,此时制备的含药血清能诱导细胞发生凋亡。

风水肾炎汤对IgA肾病大鼠模型治疗作用及血清Scr、BUN、IL-21表达的研究

目的:研究自拟风水肾炎汤治疗IgA肾病大鼠模型效果及对血清Scr、BUN、IL-21、IL-4、TNF-α表达水平的影响。方法:购进100只实验用健康大鼠,随机均分为空白组、模型组、阳性药物组及治疗组四组。空白组正常喂养,其它三组制备为IgA肾病大鼠模型后模型组不予任何治疗、阳性药物组给予安慰剂、治疗组给予自拟风水肾炎汤治疗;治疗或喂养1个月后对比各组大鼠24h尿蛋白定量、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-21(IL-21)含量。结果 :各组间24h尿蛋白、Scr、BUN均具有统计学差异(P<0.05);各组间TNF-α、IL-4、IL-21均具有统计学差异(P<0.05)。结论:风水肾炎汤对于IgA肾病模型大鼠具有明确治疗作用,能够降低其尿液中蛋白含量以及其血清中肌酐、尿素氮水平,通过降低其血清中IL-21调控免疫反应实现保护肾功能的作用。

补肾调肝方对多囊卵巢模型大鼠血清TGF-β1、IGF-1、TNF-a及激素水平的影响

目的:探讨补肾调肝方对多囊卵巢模型大鼠血清TGF-β1、IGF-1、TNF-a及激素水平的影响。方法:选取雌性大鼠(SD)45只,随机分为PCO模型组36只和正常对照组9只。参照Poretsky法,将造模成功的36只模型随机分为4个组,各9只。分别给予补肾调肝汤68.66g/kg(中药大剂量组)、17.17g/kg(中药小剂量组),二甲双胍250 mg/kg(二甲双呱组)和蒸馏水1ml/100g(对照组)体重灌胃,1次/d,连续用14d。放射免疫法检测T、E_2、LH、FSH、INS水平;用ELISA法检测TGF-β1、IGF-1、TNF-a水平。结果:中药大剂量组与其他组比较,T水平明显降低,E_2水平、E_2/T比值明显升高,血清TGF-β1、IGF-1水平升高,TNF-a水平降低,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾调肝方能降低PCO模型大鼠血清T水平,升高E_2水平,也能够调节垂体LH、FSH的分泌,同时能够使PCO模型大鼠的血清TNF-a水平降低,TGF-β1、IGF-1水平升高,在一定程度上对恢复PCO模型大鼠的生殖功能有促进作用。

硝菔通结方对功能性便秘大鼠肠神经递质的影响

目的:探讨硝菔通结方对功能性便秘大鼠肠神经递质SP、NO、5-HT、VIP表达的影响。方法:成年SD雄性大鼠50只,随机分为空白对照组、模型组、硝菔通结方高、中、低剂量组,每组各10只。采用复方地芬诺酯灌胃建立SD大鼠功能性便秘模型,造模成功后治疗组给予不同剂量硝菔通结方灌胃。观察各组大鼠一般表现,首粒黑便排出时间,Elisa检测大鼠血清中SP、NO、5-HT,Q-PCR检测结肠组织中VIP mRNA的水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠粪便量少,首粒黑便排出时间明显延长;血清中SP水平明显降低,NO、5-HT水平明显升高;结肠组织中VIP mRNA水平降低。与模型组比较,硝菔通结方各剂量组大鼠粪便量增加,首粒黑便时间缩短;血清中SP水平升高,NO、5-HT水平降低;结肠组织中VIP mRNA水平升高。大剂量组变化最为明显。结论:大鼠便秘的发生可能与肠神经递质异常表达有关,硝菔通结方治疗功能性便秘的机制可能是通过改变相关肠神经递质SP、NO、5-HP、VIP的表达来实现。

加味黄芩汤对TNBS诱导的结肠炎大鼠肠道菌群结构及IL-6/STAT3信号通路的影响

目的:通过监测加味黄芩汤干预炎症性肠病大鼠模型肠道局部IL-6/STAT3信号通路的活性状态及大鼠肠道菌群改变情况,明确IL-6/STAT3信号通路与炎症性肠病肠道菌群平衡之间的关系。方法:将SPF级大鼠40只随机分成对照组、模型组、美沙拉嗪治疗组、加味黄芩汤治疗组、黄芩汤治疗组,每组8只。TNBS诱导结肠炎大鼠模型,分组进行药物干预。实验结束后取结肠组织做病理切片;放射免疫检测血清IL-6含量;酶联免疫分析法检测sIL-6Rα、gp130;RTPCR方法检测STAT3、IL-6mRNA含量,采用日本光冈知足法并通过细菌三级鉴定法将细菌鉴定到属的水平。结果:加味黄芩汤治疗组大鼠进食量及排便情况,肠黏膜炎性病变程度,与模型组、美沙拉嗪治疗组比较具有显著差异(P<0.05)。在血清IL-6、血清sIL-6Rα、gp130含量,STAT3、IL-6mRNA的表达水平等方面,加味黄芩汤治疗组与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。加味黄芩汤治疗组大鼠肠道菌群与对照组之间在属水平上存在统计学差异。结论:加味黄芩汤通过影响溃疡性结肠炎大鼠肠道菌群失调状态,进而降低大鼠血清IL-6、sIL-6Rα、gp130含量,缓解sIL-6Rα与IL-6形成复合物所引起的炎症反应;进一步影响IL-6/STAT3信号通路下调大鼠肠组织STAT3、IL-6mRNA的表达水平,达到缓解肠道局部炎症的目的。

养元柔肝汤对兔膝骨性关节炎模型滑液中TNF-α、HA的影响

目的探讨养元柔肝汤对实验性兔膝骨性关节炎模型滑液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、透明质酸(HA)的影响,并探讨其作用机制。方法将32只新西兰白兔随机分为4组,即正常对照组、模型对照组、养元柔肝汤组和葡立胶囊组各8只。兔膝骨性关节炎模型采用兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶的造模方法。养元柔肝汤组经胃管灌入兔胃养元柔肝汤药液,每次100 mL,每日2次。葡立胶囊组将葡立胶囊溶入水中经胃管灌胃,每次0.3 g,每日2次。正常对照组和模型对照组正常喂养。给药30 d。于治疗前、后分别提取兔膝关节滑液,分别采用酶联免疫吸附测定法和放射免疫法检测关节滑液中TNF-α、HA含量。结果养元柔肝汤组、葡立胶囊组治疗后较治疗前TNF-α水平均明显降低(P<0.05),HA水平均明显升高(P<0.05);养元柔肝汤组治疗后较葡立胶囊组TNF-α水平降低(P<0.05),HA水平升高(P<0.05)。结论养元柔肝汤可提高关节滑液HA水平,保护关节软骨,提高软骨细胞功能,促进软骨修复;降低关节滑液TNF-α水平,减轻炎症对关节软骨的破坏及所产生的疼痛。

支扩宁合剂对支气管扩张症大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶的作用

目的:研究支扩宁合剂对支气管扩张症模型中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的作用,探讨支扩宁合剂疗效机理。方法:建立SD大鼠支气管扩张症模型,观察呼吸道冲洗液中性粒细胞弹性蛋白酶含量及支扩宁合剂干预后的变化,探讨它们在支气管扩张症发病中的地位及支扩宁合剂的干预效果。结果:支扩宁合剂明显降低NE含量(P<0.01)。结论:支扩宁合剂能显著减少支气管扩张症气道中NE释放,抑制其蛋白分解活性,这可能是其疗效机理之一,有进一步研究开发价值。

加味黄芪桂枝五物汤联合甲钴胺治疗周围神经损伤的实验研究

目的:探讨加味黄芪桂枝五物汤联合甲钴胺治疗周围神经损伤的疗效。方法:将54只SD大鼠随机分为3组,每组18只,均采用左侧坐骨神经切断缝合建立坐骨神经损伤模型。造模后第3天,A组大鼠按1 mL·100 g-1以加味黄芪桂枝五物汤灌胃,每天1次,连续4周;同时按1 mL·100 g-1以甲钴胺和生理盐水制成的混悬液(0.05 mg·mL-1)灌胃,每天1次,连续4周。B组以甲钴胺和生理盐水制成的混悬液灌胃,用法、用量同A组。C组按1 mL·100 g-1以生理盐水灌胃,每天1次,连续4周。观察各组大鼠的一般状态,并测定坐骨神经功能指数、神经传导速度恢复率、复合肌肉诱发电位振幅恢复率、小腿三头肌湿重恢复率及神经轴突恢复率。结果:①一般状态。造模后1 d所有大鼠均蜷缩伤肢,3 d后跛行,切口均无感染。药物干预后第2周,3组大鼠左后小腿肌肉均有不同程度的萎缩,C组较A、B组更为明显,且C组部分大鼠出现跗关节肿胀和皮肤溃疡,多在第4周左右自行愈合。自药物干预后第4周开始,大鼠跛行逐渐改善,A组大鼠毛发光亮,运动灵活,爬行速度快;B组大鼠毛发较暗,运动较灵活,爬行速度较快;C组毛发暗淡,活动较差,反应较迟钝。②坐骨神经功能指数。药物干预后第1周、第2周、第3周及第4周坐骨神经功能指数的差异有统计学意义,即存在时间效应[(-75.61±8.20),(-62.89±7.36),(-30.89±6.14),(-18.33±6.88);(-75.39±7.70),(-60.67±7.53),(-33.11±6.43),(-24.11±7.32);(-80.33±6.78),(-65.67±7.88),(-55.22±7.26),(-29.56±7.88);F=2.015,P=0.000]。3组大鼠坐骨神经功能指数的组间差异总体上有统计学意义,即存在分组效应(F=82.434,P=0.000);药物干预后第3周和第4周A组的坐骨神经功能指数均高于B组和C组(P=0.004,P=0.000;P=0.023,P=0.000)。时间因素和分组因素之间存在交互效应(F=10.928,P=0.000)。③神经传导速度恢复率。3组大鼠神经传导速度恢复率比较,差异有统计学意义[(66.39±11.77)%,(53.72±14.40)%,(44.72±11.21)%,F=13.569,P=0.000]。A组大鼠神经传导速度恢复率高于B组和C组(P=0.004,P=0.000);B组高于C组(P=0.036)。④复合肌肉诱发电位振幅恢复率。3组大鼠复合肌肉诱发电位振幅恢复率比较,差异有统计学意义[(63.22±14.29)%,(45.06±11.72)%,(32.44±7.82)%,F=32.117,P=0.000]。A组复合肌肉动作电位振幅恢复率高于B组和C组(P=0.000,P=0.000);B组优高于C组(P=0.002)。⑤小腿三头肌湿重恢复率。3组大鼠小腿三头肌湿重恢复率比较,差异有统计学意义[(78.56±7.01)%,(65.78±8.19)%,(58.28±10.84)%,F=29.940,P=0.000]。A组高于B组和C组(P=0.000,P=0.000),B组高于C组(P=0.013)。⑥神经轴突恢复率。3组大鼠神经轴突恢复率比较,差异有统计学意义[(78.28±7.91)%,(69.89±8.08)%,(62.94±10.66)%,F=13.889,P=0.000]。A组高于B组和C组(P=0.006,P=0.000),B组高于C组(P=0.021)。结论:加味黄芪桂枝五物汤联合甲钴胺可有效促进受损周围神经的修复和再生。

断藤益母汤含药血清对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖及TNF-α分泌的影响

目的:探讨断藤益母汤含药血清对体外培养的类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞增殖以及肿瘤坏死因子-α的影响和机制。方法:体外培养类风湿关节炎滑膜成纤维细胞,取第3～5代细胞,分别加入按临床常规口服剂量折算制取的来氟米特和断藤益母汤家兔含药血清,对照组加入正常家兔血清,MTT法检测24h、48h、72h后各组含药血清对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的影响。ELISA法检测72h后各组细胞培养上清肿瘤坏死因子-α的含量。结果:相对于对照组,来氟米特和断藤益母汤含药血清作用48h、72h,二者均能显著抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖(Ρ<0.05),72h后来氟米特组抑制率明显高于断藤益母汤(Ρ<0.05);相对于对照组,两种含药血清对肿瘤坏死因子-α也有显著抑制作用(Ρ<0.05),组间差异不明显(Ρ>0.05);结论:成人临床常规剂量的断藤益母汤含药血清作用48h、72h后能显著抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖,并可降低该细胞肿瘤坏死因子-α分泌量,这可能是该方药改善类风湿关节炎患者临床症状的潜在机制之一。

萆苓痛风方对大鼠急性痛风性关节炎的实验研究

目的:评价萆苓痛风方对急性痛风性关节炎的抗炎镇痛作用及对血白细胞、血尿酸、血肌酐等的影响。方法:将70只雄性健康Wister大鼠随机分为模型组(A)、萆苓痛风方低剂量组(B)、萆苓痛风方中剂量组(C)、萆苓痛风方高剂量组(D)、别嘌呤醇组(E)、吲哚美辛组(F)、空白对照组(G)共7组,每组10只。观察不同时间点大鼠右侧踝关节周径、步态,治疗结束后测定血液中白细胞、尿酸、肌酐等的含量。结果:A组以造模后24h踝关节肿胀最为严重;B、C、D、E组以造模后6h踝关节肿胀最为严重,说明药物能减轻该模型的关节肿胀度;C组优于B组,C组与D组、E组疗效无明显差异(P<0.05),F组疗效优于C组、D组与E组;B、C、D、F组均能减轻大鼠的急性关节炎症,改善其步态;D组能减轻大鼠的急性炎症反应,效果优于其它组;C组降血尿酸作用优于B、D、F组,与E组相当;各组对血肌酐均无明显影响;A组可见滑膜下层大量中性粒细胞及淋巴细胞浸润;D组可见滑膜细胞不同程度增生,滑膜下层粘液变性,间质中性粒细胞减少甚至消失,可见散在淋巴细胞及浆细胞浸润。结论:中药萆苓痛风方对大鼠痛风性关节炎具有抗炎镇痛、降低血清中尿酸含量的作用,可用于急性痛风性关节炎的治疗,以C组效果最好。