卵巢子宫内膜异位症恶变AXIN和β-catenin表达及意义

目的探讨轴蛋白(AXIN)与β-连环蛋白(β-catenin)在卵巢子宫内膜异位症(OE)恶变过程中的表达及临床意义。方法采用定量酶联免疫吸附试验(ELISA)及免疫组化方法,检测30例OE组织、17例非典型子宫内膜异位症(aEM)组织及30例子宫内膜异位症相关性卵巢癌(EAOC)组织中AXIN与β-catenin的表达情况,并分析β-catenin及AXIN与EAOC病人的年龄、FIGO分期、病理组织类型、肿瘤侧别等临床特征的关系。结果免疫组化检测显示,AXIN在OE组、aEM组、EAOC组的阳性表达率分别为76.7%(23/30)、41.2%(7/17)、30.0%(9/30),差异有统计学意义(χ^(2)=13.852,P<0.05);β-catenin在OE组、aEM组、EAOC组的阳性表达率分别为13.3%(4/30)、29.4%(5/17)、63.3%(19/30),差异有统计学意义(χ^(2)=16.661,P<0.05)。ELISA检测显示,AXIN在OE组、aEM组、EAOC组的表达水平逐渐降低,差异有统计学意义(F=1986.939,P<0.001);β-catenin在OE组、aEM组、EAOC组的表达水平逐渐升高,差异有统计学意义(F=7361.889,P<0.001)。EAOC病变组织中AXIN与β-catenin的表达呈负相关(r=-0.86,P<0.05);AXIN及β-catenin的表达与肿瘤FIGO分期、组织学分级有显著相关性(P=0.000~0.013)。结论AXIN低表达与β-catenin高表达可能参与了OE的恶变过程,且可能促进了EAOC的浸润转移。

32%氟吡菌胺·喹啉铜悬浮剂研制

采用湿法研磨工艺制备32%氟吡菌胺·喹啉铜悬浮剂。对其配方中润湿分散剂、增稠剂等进行了筛选,并通过产品应用性能测试,优化配方组成,确定最优配方:氟吡菌胺8%、喹啉铜24%、SP 30603%、助剂A 4%、NS-500LQ 1%、CZ-JC 1%、硅酸镁铝0.5%、气相白炭黑0.5%、黄原胶0.075%、尿素4%、卡松0.15%、消泡剂18600.3%、水补足100%。该配方悬浮率高,流动性好,性能稳定,表面张力和接触角低,田间使用效果良好。

Axin基因对人肾母细胞瘤细胞生物学特性的影响

目的:研究Axin基因对人肾母细胞瘤细胞G401生物学特性的影响为人肾母细胞瘤的分子病理机制及治疗、预后提供基础研究依据。方法:采用基因工程的方法构建含Axin基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-Axin,稳定转染G401细胞,建立高表达的G401细胞系。用MTT实验、克隆形成能力实验、侵袭能力实验三种方法检测Axin基因对G401细胞生物学特性的影响。结果:重组载体pIRES2-EGFP-Axin经PCR和双酶切鉴定结果显示:在约2500bp大小处出现一条特异性条带,转染G401细胞后,经Western blotting结果显示:Axin蛋白在G401细胞中成功表达,同时,转染了pIRES2-EGFP-Axin质粒的G401细胞生长速度显著减慢(P<0.05);G401细胞的克隆形成能力和侵袭力均显著降低(P<0.05)。结论:我们成功构建了重组真核表达载体PIRES2–EGRP–Axin,且通过Western blotting检测筛选获得稳定转染的G401细胞系,最后Axin体外实验对G401细胞生物学特性影响表明:Axin基因与肾母细胞瘤的发生发展有一定关系。

AXIN_2在人脑血管母细胞瘤中的表达及临床意义

目的:AXIN2在正常人脑组织和人脑血管母细胞瘤中的表达,以了解其在血管母细胞瘤发病机制中所起的作用。方法:应用免疫组织化学(S-P法)对30例人脑血管母细胞瘤、10例正常脑组织中AXIN2的表达进行检测和统计学分析。结果:脑血管母细胞瘤组织中AXIN2的表达水平明显低于高于正常脑组织中(P<0.05)。结论:AXIN2的表达与人脑血管母细胞瘤的发生具有明显的负相关性,AXIN2的检测和干预有可能为人脑血管母细胞瘤机制研究及临床治疗提供新的思路。

真核表达载体pIRES2-EGFP-Axin的构建及其在神经胶质瘤细胞内的表达

目的:构建真核表达载体pIRES2EGFPAxin,并在神经胶质瘤细胞系C6中进行表达。方法:用PCR的方法扩增Axin基因,构建真核表达载体pIRES2EGFPAxin,经NheI及SalI双酶切鉴定并测序。通过脂质体法转染C6细胞,用荧光显微镜检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,用免疫组化染色的方法检测细胞中Axin的表达。结果:构建了真核表达载体pIRES2EGFPAxin,用脂质体法转染神经胶质瘤细胞C6后,经荧光显微镜和免疫组化染色法检测,可见细胞内有EGFP及Axin的表达。结论:成功地构建真核表达载体pIRES2EGFPAxin,并在神经胶质瘤细胞C6中表达,为研究Axin对肿瘤的生物学作用以及Axin在肿瘤基因治疗中的应用奠定了基础。

Axin过表达下调β-catenin和TCF-4表达并抑制肺癌BE1细胞的增殖和侵袭

背景与目的Axin是Wnt通路的重要负性调节因子,其低表达和β-catenin、TCF-4的高表达与多种肿瘤有关。本研究旨在探讨axin在肺癌细胞中的表达与β-catenin和TCF-4的关系,及其对肺癌细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法将axin基因转染入axin低表达的肺癌BE1细胞系,应用免疫荧光方法观察转染组和对照组细胞中axin的表达对β-catenin和TCF-4的影响;采用RT-PCR方法检测axin和β-catenin、TCF-4mRNA表达的变化;采用流式细胞术、MTT和Transwell检测肺癌细胞凋亡、增殖和侵袭能力的变化。结果肺癌BE1细胞转染axin基因后(BE1-axin),axin的mRNA和蛋白水平均明显增加,β-catenin蛋白表达明显减少,TCF-4的蛋白和mRNA表达均明显下降。同时,BE1-axin细胞的凋亡率增加,增殖和侵袭能力明显下降。结论Axin过表达能下调β-catenin的蛋白表达和TCF-4的转录,抑制肺癌细胞的增殖和侵袭能力,并诱导肺癌细胞凋亡。

芒柄花黄素对人膀胱癌细胞T739增殖、凋亡的影响及机制探讨

目的观察芒柄花黄素对人膀胱癌细胞T739增殖与凋亡的影响及其机制探讨。方法分别采用0、15、30、60μmol/L的芒柄花黄素作用T739细胞后,CCK8法检测T739细胞的增殖情况,流式细胞术检测凋亡率的变化,Hoechst 33258荧光染色法观察凋亡情况,Western blot检测GSK-3β、Axin、β-catenin蛋白含量变化。结果 15、30、60μmol/L的芒柄花黄素以浓度和时间依赖方式明显抑制T739细胞的增殖(P<0.05),且作用T739细胞48 h后凋亡率随药物剂量增加显著上升(P<0.05),呈浓度-效应关系。Hoechst33258染色显示T739细胞随药物浓度的升高,凋亡明显增多。Western blot法显示GSK-3β及Axin蛋白表达随药物浓度升高而增加(P<0.05),β-catenin蛋白水平则随药物浓度升高而降低(P<0.05),且均呈浓度-效应关系。结论芒柄花黄素对T739细胞有显著的增殖抑制和诱导凋亡作用,其机制可能与芒柄花黄素上调GSK-3β、Axin蛋白表达和降低β-catenin蛋白水平有关。

轴抑制因子通过β-catenin调控MMP7、MMP9影响淋巴瘤细胞的侵和袭转移

目的探讨轴抑制因子(AXIN)通过β-catenin调控MMP7、MMP9对淋巴瘤细胞侵袭迁移能力的影响。方法用RT-PCR和Western blot法观察多株淋巴瘤细胞株里AXIN、β-catenin、MMP7、MMP9的表达情况;选取AXIN相对低表达的淋巴瘤细胞分组瞬时转染p CMV5-HA-Axin和pc DNA5-His-β-catenin质粒,采用RT-PCR和Western blot法观察其细胞中β-catenin、MMP7、MMP9 m RNA及蛋白表达变化;构建稳定高表达AXIN的淋巴瘤细胞后,分组瞬时转染AXIN-sh RNA和β-catenin-sh RNA后观察β-catenin、MMP7、MMP9 m RNA及蛋白变化;采用Transwell侵袭实验观察空白处理对照组、稳定高表达AXIN组、干扰AXIN的稳定高表达AXIN组细胞侵袭和迁移能力变化。结果多株淋巴瘤细胞株中AXIN与β-catenin、MMP7、MMP9表达呈负相关;选用AXIN相对低表达的人恶性B淋巴瘤细胞株Raji,过表达AXIN后发现AXIN升高后,β-catenin、MMP7、MMP9的蛋白表达降低,MMP7、MMP9、β-catenin m RNA未变化;当过表达β-catenin后发现MMP7、MMP9 m RNA和蛋白表达升高;另外,稳定高表达AXIN的细胞中干扰AXIN,β-catenin、MMP7、MMP9蛋白表达升高,MMP7、MMP9、β-catenin m RNA未变化;稳定高表达AXIN的细胞中干扰β-catenin,MMP7、MMP9表达降低;证实AXIN通过β-catenin调控MMP7、MMP9影响淋巴瘤细胞的侵袭和迁移。结论在淋巴瘤细胞中升高AXIN可引起β-catenin表达下降,进而MMP7、MMP9表达下降,抑制淋巴瘤细胞的侵袭和迁移。

胶质瘤中Axin基因点突变检测及表达研究

目的 检测胶质瘤中Axin基因的点突变及其表达情况 ,初步探讨Axin与胶质瘤发生的关系。方法 采用聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)技术及DNA测序方法检测Axin基因外显子 8,9及 10在 2 8例胶质瘤中的突变情况 ;同时对上述胶质瘤及正常脑组织进行免疫组化染色。结果 在 2 8例胶质瘤组织中Axin的第 10个外显子共有 6例样本 (2 1.4 % ) 3处发生了错义突变 ;3例 3处发生了同义突变 ;2 8例胶质瘤中 8例 (2 8.6 % )Axin表达阳性 ,正常脑组织中神经元表达阳性 ,神经胶质细胞表达阴性 ,检测到突变的样本中 1例表达阳性。

Wnt/β-连环蛋白信号通路在哺乳动物子宫发育中的调控作用及其机制

机体内生理活动程序化的有序运行均依赖于不同信号传导通路之间的相互协调,其中Wnt(名称来源于果蝇无翅基因Wingless和小鼠致癌基因int-1)信号通路受到学者们的广泛关注,已经成为分子生物学和细胞生物学领域的研究热点。本文研究了Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路在哺乳动物子宫发育中的调控作用及其机制,综述了糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)、结肠腺瘤样息肉基因(APC)、支架蛋白(Axin)和成骨细胞抑制因子(Dkk)对Wnt/β-catenin信号通路的调控机制及Wnt/β-catenin信号通路的核内激活,旨在进一步揭示子宫内调节机制,并为子宫疾病的治疗提供借鉴。

胃癌患者组织中p53、axin蛋白表达与hp感染和病理特征的关系分析

目的探讨胃癌组织中P53、轴蛋白(Axin)表达与幽门螺旋杆菌(Hp)感染和病理特征的关系。方法回顾性分析2017年2月-2019年5月医院收治的88例经病理证实的胃癌患者的临床资料。检测并统计胃癌组织及癌旁组织P53、Axin蛋白表达情况;检测胃癌组织中Hp感染情况,依据是否发生Hp感染将其分为Hp感染者与未感染者,统计Hp感染者与未感染者胃癌组织中P53、Axin蛋白表达情况;对比不同病理特征患者胃癌组织中P53、Axin蛋白表达情况。结果胃癌组织中P53蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05),胃癌组织中Axin蛋白阳性表达率显著低于癌旁组织(P<0.05);Hp感染者的P53蛋白阳性表达率显著高于未感染者(P<0.05),Axin蛋白阳性表达率显著低于未感染者(P<0.05);低分化程度、有淋巴结转移、浸润肌层/浆膜层的患者的P53蛋白表达率显著高于高、中分化程度、无淋巴结转移、浸润黏膜/黏膜下层的患者的P53蛋白阳性表达率(P<0.05),低分化程度、有淋巴结转移、浸润肌层/浆膜层的患者的Axin蛋白阳性表达率显著低于高、中分化程度、无淋巴结转移、浸润黏膜/黏膜下层的患者的Axin蛋白阳性表达率(P<0.05)。结论胃癌伴Hp感染者组织中P53蛋白阳性表达率高、Axin蛋白阳性表达率低,且P53、Axin蛋白与胃癌组织分化程度、淋巴结转移、浸润深度关系密切。

经典Wnt信号途径相关因子与大肠癌分期的关系

目的:探讨经典Wnt信号途径相关因子与大肠癌分期的关系。方法:搜集2013年1月1日至2014年1月1日皖南医学院第一附属医院胃肠外科收治的46例大肠癌患者的临床资料、血清样本及病理组织标本,根据Dukes分期分为四组。搜集10例正常的肠黏膜组织标本作为对照组1,应用免疫组化法检测大肠癌及正常肠黏膜组织中Wnt-2蛋白、β-catenin蛋白、Axin蛋白、APC蛋白的表达。搜集15例健康人的血清样本作为对照组2,应用酶联免疫吸附试验检测大肠癌患者和对照组2血清中Wnt-2蛋白、Axin蛋白的表达。结果:Wnt-2、β-catenin在大肠癌组织中高表达,Axin、APC在大肠癌组织中低表达,且各个分期之间差异有统计学意义;46例大肠癌患者血清中Wnt-2浓度明显高于健康人,各个分期之间的差异也有统计学意义。Axin血清浓度低于健康人,但是各个分期之间的差异无统计学意义。结论:经典Wnt信号途径相关蛋白的表达与大肠癌Dukes分期有关,经典Wnt信号途径相关因子可作为大肠癌筛查的血清学辅助指标,有助于提高大肠癌检出的灵敏度。

黑斑息肉综合征中Axin表达研究

目的研究Axin在结直肠腺癌、结直肠腺瘤、黑斑息肉综合征(PJS)息肉及正常结直肠黏膜组织中的表达,探讨其在PJS息肉演变中的作用。方法随机选取手术中切除的正常结直肠黏膜、PJS息肉、结直肠腺瘤息肉和结直肠腺癌组织标本各32份,采用免疫组织化学方法分别检测不同组织中Axin蛋白的表达与分布;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组织(各16份)标本中Axin mRNA的表达,并比较其表达水平的差异。结果上述各种组织中,Axin蛋白阳性表达均位于胞质,阳性表达强度以正常结直肠黏膜组织最强,结直肠腺癌组织最弱,各组差异具有显著性(P<0.05);RT-PCR所得产物电泳后经Image-Pro Plus软件分析,得到各组织中Axin基因积分光密度值(IOD)/内参IOD值(Axin IOD/GAPDH IOD):正常结直肠黏膜组织为0.991±0.120,PJS息肉组织为0.794±0.119,结直肠腺瘤组织为0.598±0.116,结直肠腺癌组织为0.313±0.087,不同组织的Axin mRNA表达水平有显著性差异(P<0.05)。结论正常结直肠黏膜、PJS息肉、结直肠腺瘤、和结直肠腺癌组织中Axin mRNA及蛋白表达水平呈依次减弱趋势,与其病理改变程度呈负性相关,PJS息肉中Axin的表达变化可能是PJS发生和演变的特征之一。

β-catenin、Axin在卵巢上皮细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨β-连环蛋白(β-catenin)和轴蛋白(Axin)在卵巢癌组织中表达情况及其临床意义。方法应用免疫组织化学染色法检测42例卵巢上皮细胞癌、20例卵巢良性肿瘤组织标本中β-catenin和Axin蛋白的表达情况,分析β-catenin、Axin表达与卵巢癌临床病理因素的关系。结果卵巢上皮细胞癌组织中β-catenin的异常表达率明显高于卵巢上皮性良性肿瘤组织(P<0.05),Axin阳性表达率明显低于卵巢上皮性良性肿瘤组织(P<0.05);β-catenin和Axin在卵巢上皮细胞癌中的表达呈负相关性(r=-0.442,P<0.05);β-catenin异常表达率和Axin阳性表达率与卵巢上皮细胞癌临床分期、组织学分级、有无淋巴结转移密切相关(P均<0.05),而与病理类型无明显关系(P均>0.05)。结论β-catenin、Axin表达与卵巢癌临床分期、组织学分级及淋巴结转移有关,β-catenin、Axin可作为预测卵巢癌侵袭转移及预后的指标。

胃癌组织Axin蛋白的表达与侵袭转移的相关性

目的:探讨胃癌组织Axin蛋白的表达与侵袭转移的相关性．方法:胃癌患者46例,均行胃癌根治切除手术．采集胃癌癌组织及远癌正常胃组织标本, 制备石蜡切片,采用免疫组化(SABC)法检测 Axin蛋白的表达,研究其表达和分布特点与临床病理间的关系．结果:正常胃组织Axin蛋白在基底部细胞表达强,表面成熟细胞中表达弱:胃癌组织、远癌正常胃组织中均有Axin蛋白表达,其阳性表达率分别为62．0％和91．3％,差异有统计学意义(P<0．01);Axin蛋白的表达与胃癌临床病理分期(TNM I,ⅡvsⅢ,Ⅳ:78．6％ vs 56．3％, P=0．035)、有无淋巴转移有关(无 vs 有:85．7％ vs 53．1％,P=0．034),与胃癌患者性别、年龄、肿瘤大小、生物学特征和是否侵及浆膜无关(P>0．05)．结论:Axin蛋白表达减弱与胃癌的发生以及肿瘤的临床进展和淋巴转移相关．

11名少牙畸形病人Pax 9、Msx 1、Axin 2基因突变的检测

目的:对少牙畸形病人血样标本中提取的DNA进行Pax 9、Msx 1和Axin 2核苷酸单链构象多态性和突变的检测,探讨少牙畸形的发病机制。方法:收集11名少牙畸形病人外周血标本,提取DNA,采用聚合酶链反应(PCR)、聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术结合DNA直接双向测序对病人DNA进行检测。结果:在11名病人中发现1个Msx 1单核苷酸多态位点,但没有发现有关Pax 9、Msx 1、Axin 2突变。结论:结合少牙畸形的高发病率及Pax 9、Msx 1、Axin 2基因突变的较低报告数值间的偏差,遗传因素在少牙畸形形成中的作用比原先预想的更加具有异质性。

Wnt/β-catenin通路相关蛋白在复发胶质瘤中的表达及其临床意义

目的探讨低级别和高级别复发脑胶质瘤中Wnt/β-catenin通路中相关蛋白β连接素(β-catenin)、磷酸化糖原合成激酶3β(p-GSK-3β)、结肠腺瘤性息肉病蛋白(APC)和轴抑制蛋白(Axin)的表达及其临床意义。方法采用免疫组化方法检测10例正常脑组织和30例各级别复发胶质瘤标本中β-catenin、p-GSK-3β、APC及Axin蛋白的表达。结果β-catenin蛋白在正常脑组织中不表达,在复发胶质瘤组织的阳性表达率为100%(P<0.01);p-GSK-3β蛋白、APC蛋白、Axin蛋白在正常脑组织中表达率(分别为90%、100%、100%)高于在复发胶质瘤组织的阳性表达率(分别为26.7%、13.3%、10%)(P<0.01);β-catenin在复发低级别胶质瘤和高级别胶质瘤中的阳性表达率均为100%;p-GSK-3β、APC、Axin蛋白在复发低级别胶质瘤阳性表达率(分别为35.7%、28.6%、21.4%)高于在复发高级别胶质瘤中的阳性表达率(分别为18.8%、0%、0%)(P<0.05)。结论β-catenin、GSK-3β、APC、Axin蛋白异常表达与复发脑胶质瘤发生密切相关,且磷酸化GSK-3β、APC及Axin蛋白低表达或不表达与胶质瘤恶性程度有关。

胶质瘤中Axin和β-catenin表达及临床意义的研究

目的探讨不同级别胶质瘤组织中轴蛋白(Axin)及β-连环素(β-catenin)的表达及其临床意义。方法制作82例不同级别胶质瘤的组织芯片,采用免疫组化SP法,检测芯片中Axin及β-catenin在不同级别胶质瘤中的表达。结果免疫组化检测显示Axin在低级别胶质瘤中表达(64.52%)较高级别胶质瘤(23.53%)高,差异有统计学意义(χ2=10.48,P<0.01),而β-catenin在低级别胶质瘤中表达(45.16%)较高级别胶质瘤低(80.30%),差异有统计学意义(χ2=13.61,P<0.01),Axin表达与β-catenin呈负相关(r=-0.035,P<0.05)。结论Axin、β-catenin可反映胶质瘤的恶性程度和病理分级,Axin在Wnt信号转导途径中起负调节作用。

肺腺癌患者胸腔积液中Axin、β-catenin和p53的表达及意义

目的观察胸腔积液中Axin、β-catenin和p53的表达,探讨三者表达的关系及意义。方法采用免疫细胞化学SP法观察40例原发性肺腺癌患者恶性胸腔积液和40例肺良性疾病患者反应性胸腔积液中Axin、β-catenin和p53的表达。结果在原发性肺腺癌胸腔积液中,Axin阳性率为30%(12/40),β-catenin细胞膜阳性率为15%(6/40),细胞质阳性率为60%(24/40),p53阳性率为57.5%(23/40)。Axin阳性率与β-catenin细胞膜表达呈正相关,与p53表达呈负相关。在肺良性疾病胸腔积液中Axin阳性率为77.5%(31/40),β-catenin无阳性表达,p53阳性率为1.25%(5/40)。结论在原发性肺腺癌胸腔积液中Axin表达降低,β-catenin细胞质阳性率高于细胞膜,差异有显著性(P<0.05),p53呈过表达。提示恶性胸腔积液中的癌细胞可能存在Wnt信号的激活。

β-连环蛋白和轴蛋白在食管癌中的表达及其与食管癌浸润和转移的关系

目的通过观察β-连环蛋白（β-catenin）和轴蛋白（Axin）在食管癌组织中的表达变化,探讨其在食管癌发病中的作用及其与食管癌浸润和转移的关系。方法选择45例食管鳞状细胞癌（食管癌组）,按分化程度分为高分化、中分化、低分化各15例;同时选取15例同体食管正常黏膜作为正常对照组,检测两组β-catenin和Axin的表达情况。结果食管癌组β-catenin表达阳性率为64.4%,正常对照组为6.7%,差异有统计学意义（P〈0.05）;食管癌组中高分化、中分化、低分化者β-catenin表达阳性率分别为40.0%、60.0%、93.3%,差异有统计学意义（P〈0.05）;有、无淋巴结转移者表达阳性率分别为89.5%、46.2%,差异亦有统计学意义（P〈0.05）;有、无纤维膜浸润者表达阳性率分别为72.4%、50.0%,差异无统计学意义（P〉0.05）。食管癌组Axin表达阳性率为37.8%,正常对照组为86.7%,差异有统计学意义（P〈0.05）;食管癌组中高分化、中分化、低分化者Axin表达阳性率分别为46.7%、33.3%、33.3%,差异无统计学意义（P〉0.05）;有、无淋巴结转移者表达阳性率分别为15.8%、53.8%,差异有统计学意义（P〈0.05）;有、无纤维膜浸润者表达阳性率分别为13.8%、81.3%,差异有统计学意义（P〈0.05）。食管鳞状细胞癌中β-catenin与Axin的表达呈显著负相关（P〈0.05）。结论 Axin表达降低可能促进了β-catenin的异常蓄积,相继激活下游靶基因基质金属蛋白酶-7,通过降解细胞外基质促进肿瘤的浸润。