Journal of Gastroenterology and Hepatology|新型分泌蛋白C6ORF120通过激活PI3K/Akt/mTOR通路活化肝星状细胞促进肝纤维化发生发展

最近研究表明,活化的星状细胞可被逆转为静息状态,且在一定程度上,肝纤维化也可被逆转。然而,目前直接抗纤维化药物的缺乏是治疗肝纤维化的一大难题。因此,深入研究肝纤维化的可能机制对于临床药物研发是极其必要的。2024年3月,北京大学地坛医院教学医院王昕等在Journal of Gastroenterology and Hepatology发表题为“Novel protein C6ORF120 promotes liver fibrosis by activating hepatic stellate cells through the PI3K/Akt/mTOR pathway”的研究论文,探讨新型分泌蛋白C6ORF120在肝纤维化中的功能与机制。

堆型艾美耳球虫裂殖子外分泌蛋白对细胞凋亡的抑制作用

为了研究堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)裂殖子的外分泌蛋白对马-达氏牛肾(MDBK)细胞凋亡的抑制作用,本试验建立Transwell小室间接共培养体系,即将E.acervulina裂殖子与MDBK细胞共培养,采用流式细胞术分别检测共培养1.5、3和6 h MDBK细胞的凋亡情况,利用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)对共培养6 h后的细胞上清液中的成分进行鉴定。结果显示,1.5、3和6 h共培养组MDBK细胞的总细胞凋亡率分别为(5.92±0.19)%、(8.13±0.32)%和(11.57±0.37)%,与对照组相比,总细胞凋亡率均极显著降低(P<0.01)。LC-MS/MS分析共鉴定到65个E.acervulina的外分泌蛋白,包括热休克蛋白、微线蛋白、能量代谢酶分子、蛋白磷酸酶分子和未知功能蛋白等。结果表明,E.acervulina裂殖子外分泌蛋白可抑制MDBK细胞凋亡,具体哪种蛋白在抑制细胞凋亡中发挥作用有待后续进一步研究。

金黄色葡萄球菌巨噬细胞胞内生存关键分泌蛋白筛选体系的构建

目的建立金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)巨噬细胞胞内感染状态下分泌蛋白高通量筛选体系,探索金葡菌胞内生存所需关键分泌蛋白。方法利用课题组建立的金葡菌分泌蛋白真核系统表达载体库,通过DNA转染表达技术,得到能够在细胞内表达金葡菌分泌蛋白的RAW264.7巨噬细胞阵列。金葡菌感染RAW264.7后,清除胞外菌,观察金葡菌胞内生存情况。最后通过构建相应分泌蛋白的过表达及敲除金葡菌验证筛选结果。结果通过探索RAW264.7质粒转染剂量、金葡菌感染复数(multiplicity of infection,MOI)以及感染时间,确立筛选体系的最优质粒转染剂量为1.0μg/孔、MOI为1.0、感染时间为4 h。筛选结果结合相应分泌蛋白过表达和敲除菌株验证,成功筛选出hypothetical protein、Serine protease E等分泌蛋白具有促进胞内金葡菌生存功能。结论成功构建金葡菌巨噬细胞胞内生存关键分泌蛋白筛选体系。

非酒精性脂肪性肝病合并T2DM患者血清成纤维细胞生长因子-21和分泌型卷曲相关蛋白5水平变化及其临床意义探讨

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)合并T2DM患者血清成纤维细胞生长因子-21(FGF21)和分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)水平变化及其临床意义。方法2020年5月~2023年3月我院诊治的NAFLD患者101例【单纯性脂肪肝(NAFL)64例、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)25例和肝硬化(LC)12例】和NAFLD合并T2DM患者81例(NAFL 58例、NASH 16例和LC 7例),检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。采用ELISA法检测血清FGF21和SFRP5水平。结果NAFLD合并T2DM患者FBG、血清FINS、HOMA-IR和血清FGF21水平分别为(8.7±1.4)mmol/L、(28.9±5.8)μIU/mL、(11.1±2.7)和(304.8±36.0)pg/mL,均显著高于NAFLD患者【分别为(5.5±1.2)mmol/L、(20.8±4.1)μIU/mL、(5.1±1.5)和(267.6±34.5)pg/mL,P<0.05】,而血清SFRP5水平为(6.8±1.2)pg/mL,显著低于NAFLD患者【(10.3±2.2)pg/mL,P<0.05】;NAFLD合并T2DM患者血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平分别为(6.7±1.0)mmol/L、(3.7±0.6)mmol/L、(1.3±0.2)mmol/L和(3.4±0.8)mmol/L,与NAFLD患者【分别为(6.2±0.9)mmol/L、(4.1±0.5)mmol/L、(1.3±0.3)mmol/L和(3.2±0.7)mmol/L】比,差异无统计学意义(P>0.05);T2DM合并NAFL、合并NASH和合并肝硬化患者血清SFRP5水平分别为(7.8±1.1)pg/mL、(6.4±0.8)pg/mL和(5.1±0.7)pg/mL,显著低于NAFL、NASH和肝硬化患者【分别为(11.9±2.1)pg/mL、(9.8±1.6)pg/mL和(8.4±1.1)pg/mL,P<0.05】,而血清FGF21水平分别为(295.6±31.2)pg/mL、(316.8±32.9)pg/mL和(353.6±36.7)pg/mL,显著高于NAFL、NASH和肝硬化患者【分别为(255.1±32.5)pg/mL、(279.5±33.4)pg/mL和(309.7±35.8)pg/mL,P<0.05】。结论NAFLD合并T2DM患者血清FGF21水平显著升高,而血清SFRP5水平显著降低,可应用于对病情严重程度的评估,值得深入研究。

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白在肿瘤中的研究进展

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine, SPARC)是肿瘤微环境中重要的基质成分,它作为正常细胞恶变和肿瘤发生发展过程中一个重要的分子,能够调节多种肿瘤相关细胞因子及其受体的相互作用,并调节多种信号通路以及蛋白水解酶的表达水平。由于它抑制和促进肿瘤进展的能力取决于细胞类型、肿瘤分期等,因此在多种类型的肿瘤中差异表达,并可能成为肿瘤早期诊断的新型生物标记物以及治疗的新靶点。本文就近年来SPARC在肿瘤研究中的进展作一综述。

慢性阻塞性肺疾病患者急性加重影响因素及血清分泌型卷曲相关蛋白1和Clara细胞分泌蛋白对其预测价值

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者急性加重的影响因素,以及血清分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)和Clara细胞分泌蛋白(CC16)对急性加重慢性阻塞性肺疾病(AECOPD)的预测价值。方法:选取COPD患者198例为研究对象,根据出院后3个月复诊是否发生AECOPD分为稳定期COPD组(102例)和AECOPD组(96例)。比较两组患者性别、年龄、体重指数(BMI)、是否吸烟、既往病史(糖尿病、高血压、肺心病和冠心病等)、病程等一般资料。比较两组患者C反应蛋白(CRP)、白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEU)、淋巴细胞(LYM)、血小板(PLT)、纤维蛋白原(FIB)、白蛋白(ALB)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)、纤维蛋白原/白蛋白比值(FAR)、血清SFRP1和CC16水平。采用Logistic回归分析发生AECOPD的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清SFRP1和CC16对AECOPD发生的预测价值。结果:两组患者性别、年龄、BMI、是否吸烟、既往病史(高血压、糖尿病、肺心病和冠心病)以及病程比较差异无统计学意义(均P>0.05)。AECOPD组CRP、WBC、NEU、LYM、PLT、ALB、FIB、NLR、PLR、FAR、SFRP1和CC16水平高于稳定期COPD组(均P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,NLR>3.53、PLR>120、FAR>3.5、SFRP1>4.8 ng/ml以及CC16>260 ng/ml是COPD患者发生AECOPD的独立危险因素(均P<0.05)。血清SFRP1和CC16对COPD患者发生AECOPD具有一定的预测价值,且两者联合的预测价值更高。结论:NLR、PLR、FAR、SFRP1及CC16是COPD患者发生AECOPD的独立影响因素。SFRP1联合CC16对COPD患者发生AECOPD的预测价值较高。

不同时间点静脉泵注前列地尔对行肝移植手术治疗的终末期肝病患儿血浆Clara细胞分泌蛋白及动脉血气分析指标的影响

目的观察不同时间点静脉泵注前列地尔对行肝移植手术治疗的终末期肝病患儿血浆Clara细胞分泌蛋白(CCSP)及动脉血气分析指标的影响。方法将择期行肝移植手术治疗的44例终末期肝病患儿随机分为C组20例与K组24例。C组患儿在新肝期开始静脉泵注0.5 ng/(kg·min)前列地尔至术毕,K组患儿手术开始后立即静脉泵注0.5 ng/(kg·min)前列地尔至术毕。比较两组患儿切皮前(T_(0))、无肝期30 min时(T_(1))、新肝期30 min时(T_(2))、手术结束时(T_(3))、术后12 h(T_(4))、术后24 h(T_(5))、术后48 h(T_(6))的血浆CCSP含量及动脉血气分析指标,以及术后儿科ICU住院时间、机械通气时间及肺部感染发生率。结果在T_(2)、T_(3)、T_(4)、T_(5)、T_(6)时,K组血浆CCSP含量均低于C组(均P<0.05)。不同时间点两组患儿PaO_(2)、PaCO_(2)、肺泡气-动脉血氧分压差、氧合指数的差异均无统计学意义(均P>0.05),但两组上述指标均有随时间变化的趋势(均P<0.05)。K组患儿术后机械通气时间、儿科ICU停留时间均短于C组(均P<0.05),但两组患儿术后肺部感染发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论肝移植手术开始后立即静脉泵注前列地尔可降低终末期肝病患儿血浆CCSP含量,缩短患儿术后机械通气时间和儿科ICU停留时间,安全性良好。

Cdc42蛋白参与中性粒细胞弹性蛋白酶诱导的人气道上皮细胞黏蛋白高分泌

目的探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)与中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导的气道上皮细胞黏蛋白(MUC)5AC高分泌的关系。方法体外培养人气道上皮细胞(16HBE),以Cdc42 siRNA和NE进行干预,将细胞分为6组:对照组、NE组、NE+Cdc42 siRNA组、Cdc42 siRNA组、阴性siRNA组、NE+阴性siRNA组。采用Western blot法检测Cdc42蛋白的相对含量,ELISA和免疫荧光检测各组细胞MUC5AC蛋白的表达水平。结果与对照组相比,NE组Cdc42蛋白含量明显增加(P<0.05),细胞MUC5AC蛋白表达水平亦显著增高(P<0.001);与NE组比较,NE+Cdc42 siRNA组的MUC5AC蛋白水平显著降低(P<0.05),其Cdc42蛋白含量亦明显降低(P<0.001);Cdc42 siRNA组以及阴性siRNA组的Cdc42蛋白、MUC5AC蛋白含量相较于对照组变化不大(P>0.05)。结论Cdc42在NE诱导的气道上皮细胞黏液高分泌的形成过程中可能发挥着重要的介导作用。

布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白VceC对山羊滋养层细胞内质网应激和性腺激素分泌的影响

旨在研究布鲁氏菌IV型分泌系统效应分子VceC对山羊滋养层细胞(GTC)内质网应激及性腺激素分泌的影响,为揭示其在布鲁氏菌感染宿主细胞中的作用,阐明布鲁氏菌胞内生存和引起动物流产的机制提供重要依据。本研究通过构建VceC的真核表达载体pEGFP-C1-VceC并转染GTC,Western blot检测内质网应激标志性分子GRP78和CHOP蛋白表达量变化,qRT-PCR和Western blot进一步检测未折叠蛋白反应(UPR)信号通路相关分子;ELISA检测细胞培养上清液的孕酮和雌激素的浓度变化。结果表明,成功构建了VceC真核表达载体pEGFP-C1-VceC,转染GTC后,12和24 h GRP78蛋白表达均显著升高(P<0.01),24 h后CHOP蛋白表达显著降低(P<0.05);qRT-PCR检测IRE1和XBP-1的mRNA表达量在24 h均显著升高(P<0.05),而PERK、ATF6和ATF4 mRNA的表达未发生显著变化(P>0.05),Western blot检测IRE1蛋白的表达在转染12 h后显著升高(P<0.01);VceC转染组细胞培养上清液中孕酮含量在转染12和24 h后显著低于空白组和空载体组(P<0.01),雌激素无显著差异(P>0.05)。证明布鲁氏菌VceC不仅能通过激活UPR中的IRE1通路从而激发GTC的内质网应激反应,还能改变GTC中孕酮/雌激素的比值。

分泌型磷酸蛋白2在肝细胞癌预后中的预测价值和参与免疫调控的潜在机制

目的本研究旨在探究分泌型磷酸蛋白2(SPP2)在肝细胞癌预后中的预测价值和参与免疫调控的潜在机制。方法探究SPP2在肝细胞癌预后中的预测价值的方法:从癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达综合数据库(GEO)分别获得了肝细胞癌的RNA-Seq表达数据和临床相关资料。此外,收集2015~2018年间在青海大学附属医院行手术切除治疗的21例肝细胞癌组织和癌旁组织标本进行IHC、Western Blot检测,分析SPP2在肝细胞癌中的表达情况。基于Kaplan-Merier生存分析法、单因素和多因素COX逻辑回归法分析SPP2表达与肝细胞癌患者预后的关系;探究SPP2参与免疫调控的潜在机制的方法:基于TIMER数据库和单样本基因集富集分析(ssGSEA)法评估SPP2与免疫细胞浸润的关系。结果来自TCGA和GEO队列的RNA-Seq数据显示,SPP2在肝细胞癌组织中的表达显著低于癌旁组织,且SPP2高表达的患者有更好的临床预后;单因素和多因素COX回归的分析结果表明,SPP2可以独立于其他临床因素,作为肝细胞癌的独立预后因子;IHC和Western Blot显示,SPP2在肝细胞癌组织中的表达低于癌旁组织,且在高病理分期中的表达更低,与SPP2高表达的患者相比,低表达SPP2的患者总体生存时间更短;免疫浸润分析显示,SPP2表达与肿瘤相关巨噬细胞及Th2细胞的浸润程度具有显著的负相关性。结论SPP2可作为肝细胞癌的潜在不良预后预测生物标志物,并有望成为监测肝细胞癌进展的特异生物标志物和潜在的治疗靶点;SPP2的表达水平与免疫细胞的浸润程度相关。

枸橼酸咖啡因辅助治疗对新生儿呼吸窘迫综合征患儿血清Clara细胞分泌蛋白、促肾上腺皮质激素和E选择素水平的影响

目的:探讨枸橼酸咖啡因辅助治疗对新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)的疗效及血清Clara细胞分泌蛋白(CC16)、促肾上腺皮质激素(ACTH)及E选择素(CD62E)水平的影响。方法:选取2020年11月~2021年11月某院收治的76例NRDS患儿作为研究对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组38例。所有患儿进行常规药物治疗,对照组在常规治疗基础上给予机械通气治疗,观察组在对照组治疗基础上加用枸橼酸咖啡因。比较两组患儿氧动力学指标[动脉血氧分压(PaO_(2))、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))、吸入气氧浓度(FiO_(2))和PaO_(2)/FiO_(2)]、血清CC16、ACTH和CD62E水平、肺功能指标[第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、FEV_(1)/FVC]、临床疗效及不良反应发生情况。结果:治疗后,两组患儿PaO_(2)和PaO_(2)/FiO_(2)较治疗前升高(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05);PaCO_(2)较治疗前降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);血清CC16、ACTH和CD62E水平较治疗前降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);FEV_(1)和FEV_(1)/FVC较治疗前升高(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05)。观察组临床总有效率(94.74%)高于对照组(78.95%,P<0.05)。观察组不良反应总发生率(7.89%)低于对照组(26.31%,P<0.05)。结论:在辅助呼吸治疗的基础上联用枸橼酸咖啡因可提高NRDS患儿的临床疗效,改善机体氧合状态和肺功能,降低血清CC16、ACTH及CD62E水平,且不良反应发生率较低。

血清激活素A和Clara细胞分泌蛋白-16及脑钠肽水平对急性呼吸窘迫综合征患者预后预测的临床意义

目的探讨血清激活素A(Activin-A)、Clara细胞分泌蛋白-16(CC-16)及脑钠肽(BNP)水平与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者病情严重程度的关系,及其预测预后的价值。方法采用回顾性研究方法,收集2017年1月至2020年9月海口市第三人民医院收治的ARDS患者的临床资料,包括发病当天的一般资料及入重症监护病房(ICU)1、3、7 d血清Activin-A、CC-16、BNP水平。根据氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))将ARDS患者分为轻度组(200 mmHg<PaO_(2)/FiO_(2)≤300 mmHg,1 mmHg≈0.133 kPa)、中度组(100 mmHg<PaO_(2)/FiO_(2)≤200 mmHg)、重度组(PaO_(2)/FiO_(2)≤100 mmHg);根据入ICU 28 d内的生存情况将ARDS患者分为存活组和死亡组。分析不同病情严重程度和不同预后ARDS患者血清Activin-A、CC-16、BNP水平的变化趋势;绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),分析血清Activin-A、CC-16、BNP水平对ARDS患者28 d死亡的预测价值。结果共入选103例ARDS患者,其中轻度ARDS 20例,中度ARDS 41例,重度ARDS 42例;28 d存活68例,死亡35例。不同病情程度及不同预后各组患者入ICU后1、3、7 d血清Activin-A、CC-16、BNP水平逐渐升高,均于3 d时达峰值,且ARDS重度组入ICU 1、3、7 d各指标均明显高于ARDS轻中度组〔Activin-A(ng/L):1395.36±164.20比806.40±121.75,1683.25±190.17比865.35±136.40,1594.80±172.65比842.50±124.37;CC-16(ng/L):63.58±15.30比53.48±13.37,89.24±19.38比57.85±15.36,82.62±15.74比54.60±13.26;BNP(ng/L):401.86±118.45比254.36±72.50,560.74±175.30比326.62±84.37,592.35±184.73比286.24±76.25,均P<0.01〕。死亡组入ICU 1、3、7 d各指标均明显高于存活组〔Activin-A(ng/L):1410.27±171.38比730.50±108.35,1820.36±205.37比806.25±121.27,1750.38±181.42比775.38±116.20;CC-16(ng/L):70.26±15.38比45.37±11.86,95.68±22.73比51.26±13.05,86.92±19.64比49.36±12.85;BNP(ng/L):452.73±131.62比205.60±63.24,615.60±190.37比272.35±81.50,648.25±210.62比238.36±68.40,均P<0.01〕。ROC曲线分析显示,各时间点血清Activin-A、CC-16或BNP水平对ARDS患者死亡均有一定预测价值,且以入ICU 3 d的预测价值较大,Activin-A、CC-16、BNP的曲线下面积(AUC)以及95%可信区间(95%CI)分别为0.852(0.785~0.907)、0.836(0.774~0.896)、0.793(0.735~0.853),最佳截断值分别为Activin-A 1248.36 ng/L、CC-1673.50 ng/L和BNP 468.30 ng/L。入ICU 3 d血清Activin-A、CC-16、BNP 3项指标联合预测ARDS患者死亡的AUC最大,为0.940(0.883~0.997),其敏感度和特异度均较高,分别为96.2%和88.5%。结论血清Activin-A、CC-16、BNP水平越高,ARDS患者病情严重程度越重,预后越差;入ICU后3 d血清Activin-A、CC-16、BNP水平3项联合检测对ARDS患者28 d死亡具有较好的预测价值。

SPP1、DEC1、C1QTNF6蛋白与口腔鳞状细胞癌患者临床病理指标及预后的关系

目的:探讨口腔鳞状细胞癌患者血清重组人分泌型磷蛋白1(SPP1)、软骨分化的表达基因1(DEC1)和补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6(C1QTNF6)的表达水平与其临床病理指标及预后的关系。方法:免疫组织化学染色法和电化学发光免疫分析法检测88例口腔鳞状细胞癌患者癌组织和血清中SPP1、DEC1和C1QTNF6蛋白的表达水平;Pearson相关性分析和Kaplan-Meier生存分析法分析患者血清SPP1、DEC1和C1QTNF6蛋白表达水平与其临床病理指标的相关性和对患者预后的影响。多因素Cox回归法分析影响口腔鳞状细胞癌患者预后的危险因素。结果:免疫组织化学染色结果显示口腔鳞状细胞癌患者癌组织中SPP1、DEC1和C1QTNF6蛋白的阳性表达率较癌旁组织分别增加了1.94、2.98和2.35倍(P<0.05或P<0.01);电化学发光免疫分析法结果显示口腔鳞状细胞癌患者血清SPP1、DEC1和C1QTNF6蛋白表达水平较正常人分别上调了8.61、6.20和4.03倍(P<0.05或P<0.01);Pearson相关性分析结果显示患者血清SPP1、DEC1和C1QTNF6蛋白表达水平与患者发生多灶嗜神经侵犯、肿瘤浸润程度、淋巴结转移、较高的TNM分期呈正相关(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析结果显示,血清SPP1、DEC1和C1QTNF6蛋白高表达水平的口腔鳞状细胞癌患者总生存率低;多因素Cox回归分析结果表明多灶嗜神经侵犯、肿瘤高浸润度、淋巴结转移和高的TNM分期是影响预后的危险因素(P<0.05)。结论:口腔鳞状细胞癌患者癌组织和血清中SPP1、DEC1和C1QTNF6蛋白表达水平升高,且与患者发生多灶嗜神经侵犯、肿瘤浸润和淋巴结转移、较高的TNM分期呈正相关,而与患者预后呈负相关。

重度颅脑外伤病人血清T细胞激活性低分泌因子、γ-干扰素诱导蛋白10表达及其预后相关性

目的探究重度颅脑外伤病人血清T细胞激活性低分泌因子(RANTES)、γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)水平及其与预后的关系。方法选取2016年1月至2019年7月中国人民解放军第四军医大学第二附属医院诊治的颅脑外伤病人174例进行研究,根据格拉斯哥昏迷评分(GCS)将病人分为轻度组(n=58例)、中度组(n=58例)、重度组(n=58例),并选取同期体检健康者58例进行对照研究(健康组)。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清RANTES、IP-10水平;Pearson法分析重度颅脑外伤病人血清RANTES水平与IP-10的相关性;比较两组不同预后重度颅脑外伤病人血清RANTES、IP-10水平;采用受试者操作特征曲线(ROC)评价血清RANTES、IP-10对重度颅脑外伤病人预后的评估价值。结果颅脑外伤病人血清RANTES[(1.36±0.38)µg/L、(1.68±0.43)µg/L、(2.06±0.60)µg/L]、IP-10[(247.49±54.45)ng/L、(290.53±62.76)ng/L、(362.18±68.82)ng/L]水平均显著高于健康者(0.88±0.27)µg/L、(194.08±48.33)ng/L(P<0.05),且血清RANTES、IP-10水平随疾病程度加重而升高;重度颅脑外伤病人血清RANTES水平与IP-10呈正相关(P<0.05);预后不良亚组重度颅脑外伤病人血清RANTES(2.45±0.68)µg/L、IP-10(406.32±72.45)ng/L均明显高于预后良好亚组(1.73±0.45)µg/L、321.29±63.37)ng/L(P<0.05);血清RANTES、IP-10水平预测重度颅脑外伤病人不良预后的曲线下面积(AUC)分别为0.82、0.80,截断值分别为2.02µg/L、355.31 ng/L,此时对应灵敏度分别为72.0%、72.0%,特异度分别为87.9%、78.8%;两者联合对重度颅脑外伤病人的不良预后预测价值的曲线下面积为0.90,特异度及灵敏度为84.8%、88.0%。结论重度颅脑外伤病人血清RANTES、IP-10水平均升高,检测血清RANTES、IP-10水平有利于评估病人预后情况,两者联合可有效提高对重度颅脑外伤病人不良预后的诊断效能。

川崎病患儿治疗前后抗体分泌细胞和免疫球蛋白样受体水平的变化

目的:探讨川崎病(KD)患儿B细胞亚群特异性抗体分泌细胞(ASC)、免疫球蛋白样受体(LILR)表达特征。方法:选取我院2018年1月至2021年3月收治的急性期KD患儿32例为观察组及体检健康儿童19例为对照组。其中11例KD患儿(类固醇组)Egami评分>3分,预测可能存在静脉注射免疫球蛋白(IVIG)无反应,采用类固醇药物治疗,其余21例患儿(IVIG组)均给予IVIG治疗,比较对照组与观察组治疗前后CD19^(+)B细胞群中ASC、白细胞LILR表达情况。结果:观察组KD患儿外周血单核细胞(PBMC)水平、B细胞亚群中ASC水平高于对照组(P<0.05)。IVIG组及类固醇组患儿治疗后PBMC水平、PBMC中CD4^(+) T细胞、CD8^(+)T细胞水平均高于治疗前(P<0.05),ASC水平低于治疗前(P<0.05),且类固醇组ASC占比低于IVIG组(P<0.05)。流式细胞术检查显示,4种抑制性LILR亚型在单核细胞上表达,LILRB1在每个B细胞亚群上表达,而LILRB2或LILRB3在B细胞亚群上的表达在急性期和治疗后均较少;LILRB4在ASC上呈现唯一表达,其急性期水平低于单核细胞;观察组ASC的LILRB1、LILRB4水平高于对照组,且治疗后低于治疗前(P<0.05)。结论:KD患儿急性期ASC呈升高趋势且富含LILRB4表达,治疗结果不受类固醇给药影响。ASC可能在KD发生发展过程中发挥着重要作用。

苁蓉益肾颗粒对多囊卵巢综合征患者内分泌功能、血清淀粉样蛋白P及白细胞介素-18水平的影响

目的 探讨苁蓉益肾颗粒对多囊卵巢综合征(Polycystic Ovary Syndrome, PCOS)患者内分泌功能、血清淀粉样蛋白P(Serum Amyloid P,SAP)、白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)水平的影响。方法 选取2018年6月—2020年6月期间河南省周口市中医院收治的90例多囊卵巢综合征患者,采用随机摸球法分为对照组和观察组,每组各45例。对照组采用氯米芬治疗,观察组在治疗组的基础上加用苁蓉益肾颗粒治疗。治疗2个疗程后,观察比较两组患者临床疗效、卵巢B超结果、内分泌功能指标、SAP及IL-18水平。结果 治疗后观察组总有效率93.33%(42/45)明显优于对照组73.33%(33/45),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗3个周期后两组患者平均卵泡数、平均卵巢体积均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组平均卵泡数、平均卵巢体积均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。停药后第3个周期观察组平均卵泡数及平均卵巢体积与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者血清雌二醇(Estradiol, E2)、睾酮(Testosterone, T)、黄体生成素(Luteinizing hormone, LH)水平均较治疗前降低,FSH水平均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组E2、T、LH水平均低于对照组,FSH水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者血清IL-18、SAP水平均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组血清IL-18、SAP水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 苁蓉益肾颗粒治疗PCOS的效果显著,能明显纠正患者内分泌失调,降低血清IL-18及SAP水平。

慢性阻塞性肺疾病患者血清Clara细胞分泌蛋白16、人中性粒细胞多肽表达及临床意义

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清Clara细胞分泌蛋白16(CC16)、人中性粒细胞多肽1-3(HNP1-3)表达及临床意义。方法 选取2018年6月—2022年6月收治的COPD 154例作为COPD组,同期健康体检者90例作为对照组。另根据气流受限程度将COPD 154例分为轻中度组(57例)、重度组(73例)和极重度组(24例)3组;根据病情分期将COPD 154例分为急性加重期组(52例)和稳定期组(102例)。比较COPD组和对照组血清CC16、HNP1-3水平及肺功能指标[第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC)],不同气流受限程度及病情分期组血清CC16、HNP1-3水平。采用Pearson相关性分析探讨COPD患者血清CC16和HNP1-3水平与肺功能指标相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CC16和HNP1-3对COPD急性加重的预测价值。结果 COPD组血清CC16水平及FEV1%、FEV1/FVC低于对照组,血清HNP1-3水平高于对照组(P<0.01)。不同气流受限程度COPD 3组随着气流受限程度加重,血清CC16水平逐渐降低,血清HNP1-3水平逐渐升高(P<0.05)。急性加重期组血清CC16水平低于稳定期组,血清HNP1-3水平高于稳定期组(P<0.01)。Pearson相关性分析结果显示,COPD患者血清CC16水平与FEV1%、FEV1/FVC呈正相关,血清HNP1-3水平与FEV1%、FEV1/FVC呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清CC16、HNP1-3及二者联合预测COPD急性加重的曲线下面积分别为0.738、0.867和0.893。结论 COPD患者血清CC16水平降低、HNP1-3水平升高,且与肺功能指标具有相关性。血清CC16和HNP1-3水平对COPD急性加重有一定预测价值。

哮喘儿童血清Clara细胞分泌蛋白、白介素-13的检测及意义

目的:探讨哮喘儿童血清Clara细胞分泌蛋白(CCSP或CC10或CC16)、白介素-13(IL-13)的变化和临床意义。方法;采用酶联免疫吸附法检测22例哮喘急性发作期儿童血清CCSP、IL-13水平,经治疗后于缓解期采血复查,并与20例健康儿童作对照观察。结果:哮喘急性发作期、缓解期儿童血清CCSP水平均较健康对照组儿童低(P<0.01),在急性发作期尤为明显。哮喘急性发作期儿童血清IL-13明显高于对照组(P<0.001),缓解期降至正常。无论是急性发作期还是缓解期血清CCSP与IL-13无相关性(P>0.05)。结论:CCSP具有抗炎作用,CCSP的减少可诱导或加重哮喘儿童的呼吸道炎症。IL-13参与哮喘的发病过程,在呼吸道炎症的形成、呼吸道重塑中起重要作用。

hUMSCs外分泌蛋白治疗实验性自身免疫性葡萄膜炎模型大鼠的机制初探

目的:探讨腹腔注射人脐带间充质干细胞外分泌蛋白(hUMSCs-S)治疗实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)模型大鼠的可能性及其相关作用机制。方法:6~8周龄Lewis大鼠72只,用随机数字表分方法均分为3组,分别为正常对照(CTRL)组、EAU模型组及hUMSCs-S治疗组,每组24只。EAU组与hUMSCs-S组大鼠采用光感受器间维生素A结合蛋白(IRBP)联合弗氏完全佐剂建立EAU模型,hUMSCs-S组大鼠在建模的同时予以腹腔注射hUMSCs-S,EAU组及CTRL组大鼠均腹腔注射等量PBS。裂隙灯显微镜拍摄记录各组大鼠眼前段情况,根据Caspi评分标准评价眼前段炎症程度;于免疫后第7天(初发期)、14天(高峰期)、21天(恢复期)取眼球组织制成石蜡切片进行HE染色、免疫组化及免疫荧光染色,分别用于眼球组织病理学评分、前房浸润细胞情况评估,观察眼球组织中CD3^(+)T细胞及紧密连接蛋白ZO-1的表达。无菌操作下采腹主动脉血,制备血清,行ELISA法检测各组大鼠血清中白细胞介素10(IL-10)和IL-17的浓度。结果:(1)通过裂隙灯显微镜观察和比较,EAU组大鼠出现明显眼前段炎症反应,在建模后第11~17天,hUMSCs-S治疗有降低眼前段Caspi评分的作用(P<0.05);(2)眼球组织切片HE染色结果显示,建模后第14天,hUMSCs-S组大鼠虹膜睫状体和视网膜结构破坏及前房炎细胞浸润数量均低于EAU组(P<0.05);(3)眼球组织切片免疫组化及免疫荧光染色结果显示,hUMSCs-S组大鼠虹膜睫状体、前房和视网膜中CD3^(+)T细胞浸润较EAU组减少,视网膜及视网膜色素上皮(RPE)层ZO-1表达量较EAU组增加;(4)ELISA法检测大鼠外周血血清IL-17及IL-10浓度结果显示,与EAU组相比,hUMSCs-S组大鼠外周血IL-17表达下降、IL-10表达增加(P<0.05)。结论:hUMSCs外分泌蛋白对EAU模型大鼠治疗有效;腹腔注射hUMSCs外分泌蛋白可影响EAU大鼠外周血中炎症因子表达,减少眼内炎症细胞浸润,减轻RPE层紧密连接蛋白的破坏程度。

血清Clara细胞分泌蛋白、总IgE与嗜酸性粒细胞阳离子蛋白在儿童哮喘检测中的临床意义

目的探讨血清Clara细胞分泌蛋白(CC16)、总IgE和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)检测在哮喘儿童中的意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定59例哮喘患儿急性发作期血清CC16水平,同时应用UniCAP100变态反应检测仪检测血清总IgE、ECP;另设30例健康儿童作为健康对照组。结果与健康对照组比较,哮喘组血清CC16水平显著降低、血清总IgE、ECP水平显著增高(t=2.93,2.72,4.52Pa<0.01);中重度哮喘发作患儿血清CC16水平显著低于轻度发作患儿(t=5.26P<0.05),中重度哮喘发作患儿血清总IgE显著高于轻度发作患儿(t=3.89P<0.05),血清ECP水平在哮喘轻度发作组与中重度发作组比较无统计学差异(t=1.57P>0.05);哮喘组血清CC16与总IgE呈显著负相关(r=-0.602P<0.05),血清CC16与ECP(r=0.153P>0.05)及总IgE与ECP(r=0.290P>0.05)无相关。结论血清CC16降低与总IgE、ECP水平增高在儿童哮喘发病过程中发挥重要作用;血清总IgE、CC16可反映哮喘发作严重程度;血清ECP水平高低并不能反映呼吸道炎症严重程度。