大肠癌组织Runx3基因启动子甲基化的研究

目的:检测大肠癌患者肿瘤组织及其相应的癌旁组织中Runx3基因表达和启动子区域甲基化状态,探讨甲基转移酶抑制剂5-aza-dc对结肠癌细胞系中Runx3表达的作用。方法:将手术切除的37例大肠癌组织和对应癌旁组织提取RNA和基因组DNA,采用RT-PCR检测Runx3基因的表达,甲基化特异PCR方法(MSP)检测Runx3基因启动子区域甲基化状态,用5-aza-dC处理结肠癌细胞系后,RT-PCR方法检测Runx3基因的表达。结果:37例大肠癌和对应癌旁组织中Runx3基因表达阳性率分别为100%(37/37),2.7%(1/37)。癌组织中Runx3基因表达明显降低(P<0.01)。MSP检测发现11例(30%)大肠癌标本及1例(3%)癌旁正常组织中Runx3基因呈甲基化状态。癌组织中Runx3基因甲基化明显高于癌旁组织(P<0.05)。结肠癌细胞系HT29 5-aza-dC处理后Runx3基因表达水平增加。结论:Runx3基因启动子甲基化和Runx3基因表达在大肠癌的癌旁组织和原发癌灶间存在显著性差异,可能与结肠癌的发生发展有关。

抑癌基因RUNX3调控下游基因VEGF,p21和TIMP-1I抑制胃癌细胞转移的研究

目的:研究抑癌基因人类相关转移因子3(RUNX3)对胃癌细胞转移的抑制作用及分子机制。方法:基因重组的方法构建含有RUNX3及RUNX3特异性SiRNA的表达载体;用侵袭实验研究RUNX3对胃癌细胞MKN28和SGC7901转移能力的影响;用RT-PCR和Western blot检测p21、TIMP-1、VEGF等转移相关基因的表达。结果:成功构建了含有RUNX3及其特异性SiRNA的表达质粒pcDNA3.1-RUNX3和pSilencer-RUNX3SiRNA,pcDNA3.1-RUNX3转染细胞后能上调RUNX3的表达,细胞侵袭能力下降;pSilencer-RUNX3SiRNA转染细胞后能显著抑制RUNX3的表达,细胞侵袭能力增加。RT-PCR及western blot检测发现RUNX3能上调p21和TIMP-1的表达,下调VEGF的表达。结论本研究说明了抑癌基因RUNX3具有抑制胃癌转移的作用,这种作用可能与RUNX3作为转录因子,调节下游基因p21,TIMP-1和VEGF的表达水平有关。

胃粘膜不同病变组织中Runx3蛋白表达的意义

目的:通过对Runx3蛋白在胃粘膜不同病变组织中的表达检测,探讨胃粘膜不同病变组织中Runx3蛋白表达的情况。方法:利用免疫组化法(S-P)检测178例胃癌高危人群胃粘膜活检标本及63例胃癌组织标本中Runx3蛋白的表达情况。结果:1178例胃粘膜组织中,Runx3蛋白在102例浅表性胃炎(CSG)中的阳性表达率为81.37%,在76例萎缩性胃炎(CAG)中的阳性表达率为72.37%,在伴有肠化生(IM)的60例中的阳性率为61.67%,在伴有异型增生(DYS)的9例中阳性表达率为55.55%,在胃癌(GC)中的表达率为41.26%。在CSG中的表达率最高,在胃癌表达率最低。2在63例胃癌中,Runx3蛋白在高分化腺癌、中分化腺癌、低分化腺癌中表达率分别是55.56%、40.00%、27.78%。结论:Runx3蛋白在慢性胃炎和伴肠化生中的表达较胃癌中高。说明Runx3蛋白参与胃癌的发生过程,可能是胃癌发生过程中的关键性基因。

RUNX3、DAPK基因甲基化及其蛋白表达与胃癌病情的研究

目的观察胃癌组织中RUNX3、DAPK基因启动子区甲基化状态及其对蛋白表达的影响,并分析其甲基化改变与临床病理特征的关系。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应检测胃癌组织及相应癌旁正常组织中RUNX3、DAPK的甲基化状态。应用免疫组化SP法检测RUNX3、DAPK蛋白表达情况。结果胃癌组织中Run3、DAPK基因的甲基化阳性率分别为77.8%(42/54)、90.7%(49/54)明显高于癌旁组织的38.9%(21/54)、40.7%(22/54)(P<0.01)。胃癌组织中RUNX3、DAPK蛋白免疫组化阳性率分别为42.6%(23/54)、31.5%(17/54)比癌旁组织96.3%(52/54)、98.1%(53/54)表达明显降低或缺失(P<0.01)。RUNX3基因甲基化阳性率与胃癌的临床分期、组织分化程度、肿瘤直径、淋巴结转移具有相关性(P<0.05)。DAPK基因甲基化阳性率和胃癌的临床分期、浸润深度、组织分化程度具有相关性(P<0.05)。结论 RUNX3、DAPK甲基化与胃癌的发生发展关系密切,甲基化影响其蛋白表达。

结直肠腺癌、腺瘤、正常黏膜中RUNX3的表达及意义

目的观察RUNX3在结直肠正常组织、结直肠腺瘤及结直肠腺癌组织中的表达,探讨RUNX3在结直肠正常黏膜→腺瘤→腺癌过程中的表达变化及临床意义。方法采用免疫组化法、荧光原位杂交技术检测RUNX3在30例癌旁正常组织、60例结直肠腺瘤(37例伴中低度异型增生,23例伴重度异型增生)及60例结直肠癌组织中的表达,结合临床资料分析其表达与临床病理参数的关系。结果 RUNX3在结直肠正常组织、腺瘤伴中低度异型增生、腺瘤伴重度异型增生及结直肠癌组织中的阳性率分别为86.67%、72.97%、43.48%、38.33%,差异具有统计学意义(P<0.008 3)。RUNX3 mRNA在结直肠正常组织、腺瘤伴中低度异型增生、腺瘤伴重度异型增生及结直肠癌组织中的阳性率分别为90.00%、78.38%、43.48%和40.00%,差异具有统计学意义(P<0.008 3)。RUNX3表达与结直肠癌TNM分期、浸润深度、淋巴结转移、肝转移、腹腔微转移具有相关性(P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤大小、部位、分化程度和组织学类型无关(P>0.05))。结论 RUNX3表达与结直肠黏膜癌变的发生、发展密切相关,有望成为结直肠癌诊断及监测的特异性生物学指标,并为结直肠癌的治疗起指导作用。

miRNA-130b在骨肉瘤组织中的表达及其对骨肉瘤细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨骨肉瘤组织中miRNA-130b的表达及其对骨肉瘤细胞增殖、细胞周期以及凋亡的影响。方法用Real-time PCR法检测48例骨肉瘤患者肿瘤组织与癌旁组织中miRNA-130b的表达水平。用脂质体法将miRNA-130b inhibitor瞬时转染入U2人骨肉瘤细胞,实时定量RT-PCR检测U2细胞miRNA-130b的表达,CCK8增殖实验检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡率,荧光素酶基因报告实验检测miRNA-130b与RUNX3之间的调控机制、荧光素酶的相对活性和转染后RUNX3及miRNA-130b的表达水平。结果骨肉瘤组织中miRNA-130b的表达明显高于癌旁组织,转染miRNA-130b inhibitor后U2细胞miRNA-130b的表达水平明显受抑制,人骨肉瘤细胞U2转染miRNA-130b inhibitor的细胞增殖速度明显下降,细胞周期阻滞在G0/G1期,凋亡率增高,细胞中RUNX3蛋白及m RNA表达水平明显升高;miRNA-130b显著抑制野生型RUNX3-3’UTR表达载体的荧光素酶活性;抑制miRNA-130b表达后,RUNX3表达明显升高;抑制RUNX3表达后,miRNA-130的表达无明显变化。结论 miRNA-130b在骨肉瘤中呈高表达水平,抑制miRNA-130b可能通过调控RUNX3抑制骨肉瘤细胞的增殖,并促进细胞凋亡。

RUNX3、Survivin在结直肠腺癌、腺瘤、正常黏膜中表达的临床意义

目的通过对人Runt相关转录因子3(RUNX3)、凋亡抑制因子生存素(Survivin)蛋白在结直肠腺癌中表达的研究,探讨RUNX3、Survivin与结直肠腺癌发生发展的关系。方法应用免疫组化(SP)、原位杂交法检测RUNX3、Survivin在30例正常结直肠组织、60例结直肠腺瘤、60例结直肠腺癌组织标本中的表达,分析它们与临床病理特征间的关系。结果 RUNX3、Survivin在结直肠腺癌、正常结直肠组织、结直肠腺瘤伴中低度异型增生和结直肠腺瘤伴重度异型增生中的阳性表达率分别为38.33%、73.33%,86.67%、10.00%,72.97%、13.51%和43.48%、52.17%,两者在正常结直肠组织、结直肠腺瘤伴中低度异型增生组织与结直肠腺癌、结直肠腺瘤伴重度异型增生组织比较,差异有统计学意义(P<0.05)。RUNX3、Survivin mRNA在结直肠癌组织、癌旁正常组织、结直肠腺瘤伴中低度异型增生和结直肠腺瘤伴重度异型增生中的阳性表达率分别为31.67%、63.33%,76.67%、6.67%,56.76%、10.81%和39.13%、43.48%,两者在正常结直肠组织、结直肠腺瘤伴中低度异型增生组织与结直肠腺癌、结直肠腺瘤伴重度异型增生组织比较,差异有统计学意义(P<0.05)。RUNX3和Survivin在结直肠腺癌组织中的表达呈负相关(r=-0.455,P<0.01)。RUNX3和Survivin的表达与结直肠腺癌的TNM分期、浸润深度、淋巴结转移、肝转移具有相关性(P<0.05)。结论 RUNX3、Survivin在结直肠腺癌中的不同程度的表达与结直肠黏膜癌变的发生、发展有关。

胃癌RUNX3表达对凋亡与增殖细胞转换的影响及其预后价值

目的探讨胃癌RUNX3基因表达对细胞凋亡与增殖细胞转换[凋亡率与增殖率之比值（AI/PI）]的影响及其与胃癌预后的关系。方法应用免疫组织化学分析RUNX3基因的表达;应用流式细胞术分析胃癌细胞的凋亡率和增殖率;采用Kaplan-Meier限乘法计算生存率。结果在60例胃癌中RUNX3基因的阳性表达率为46.7%。胃癌细胞RUNX3基因表达与淋巴转移和远处转移有关（P〈0.05）。胃癌细胞的AI/PI经频数分布表分析和检验均服从正态分布。胃癌细胞AI/PI范围显示为0.05～0.46,胃癌细胞AI/PI与淋巴转移和远处转移有关（P〈0.05）。胃癌细胞中RUNX3和AI/PI的表达之间存在明显相关关系（r=0.39,P〈0.05）。用Kaplan-Meier生存曲线经Logr-ank检验发现,RUNX3的阳性表达与生存相关（P〈0.05）。结论RUNX3基因可能通过影响凋亡与增殖细胞转换而影响胃癌的发生发展;RUNX3基因检测可作为胃癌临床病理学特点和预后的指标。

RunX3蛋白在胃癌中的表达及其临床病理学意义

目的探讨新型抑癌基因Runx3蛋白表达与胃腺癌发生、发展、临床病理特征及患者预后之间的关系。方法用免疫组织化学SP法,检测63例胃腺癌组织、19例胃黏膜不典型增生组织及10例因胃良性病变行部分切除的正常胃黏膜组织中Runx3蛋白的表达。结果(1)Runx3蛋白在胃癌中阳性表达率为39.7%,明显低于胃黏膜不典型增生组织68.4%及正常胃黏膜组织90%,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)Runx3蛋白阳性表达与胃癌组织病理分级、浸润深度、淋巴结转移有关,而与患者的年龄、性别、大小及临床分期无关。(3)Runx3蛋白表达阳性者的生存率高于表达阴性者的生存率(P<0.05)。Runx3蛋白阳性者,术后生存时间长。结论Runx3蛋白对胃癌的发生发展起重要作用,是评估胃癌患者预后的一项重要指标。

幽门螺杆菌感染增强胃癌组织Runx3基因甲基化与患者生存的关系

目的研究胃癌Runx3基因甲基化和幽门螺杆菌(H.pylori)感染、临床病理特征及患者生存的关系。方法筛选我院肿瘤外科2004年6月至2005年12月86例病理确诊的原发性胃癌患者,男性52例,女性34例,平均年龄52(28～78)岁。20例正常对照选自同期我院消化内科门诊。用甲基化特异性PCR(MSP)法检测胃癌组织、癌旁组织及正常对照组织中Runx3基因甲基化状况;用快速尿素酶诊断法和Warthin-Starry染色法检测胃癌患者及对照组H.pylori感染状况;用Kaplan-Meier限乘法计算生存率;用Cox比例风险回归模型进行多因素生存分析。结果①胃癌组织Runx3甲基化率(65.1%,56/86)明显高于相应癌旁组织(8.1%,7/86)和正常对照组织(0/20)(P<0.01)。②Runx3甲基化与组织分化(P=0.017)、浸润深度(P=0.004)及淋巴结转移(P=0.001)等显著相关。③H.pylori感染的胃癌组织Runx3甲基化率较未感染的胃癌组织高(P=0.003)。④Kaplan-Meier生存曲线经Log-rank检验发现Runx3甲基化与生存相关(P<0.01)。⑤多因素生存分析显示浸润深度、Runx3甲基化是胃癌的独立预后因素(P<0.05)。结论胃癌Runx3甲基化与肿瘤进展和转移有关,H.pylori感染增加Runx3甲基化,Runx3甲基化是胃癌的独立预后因素。

RUNX3和VEGF在宫颈癌组织中的表达及相关性

目的:探讨RUNX3和VEGF在宫颈癌组织中的表达及其与宫颈癌发生发展的关系。方法:采用聚合酶链反应(PCR)和免疫组化法检测RUNX3和VEGF在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌组织中的表达情况。结果:RUNX3蛋白和mRNA在正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ、宫颈癌中的表达呈下降趋势,而VEGF的表达呈上升趋势(P<0.05),RUNX3、VEGF蛋白和mRNA的表达呈负相关,与宫颈病变的进展程度、临床分期、病理分级及是否有淋巴结转移明显相关(P<0.05)。结论:RUNX3可能作为抑癌基因参与宫颈癌的发生发展,VEGF可作为反映宫颈癌细胞增殖能力的指标。RUNX3和VEGF可能与恶性肿瘤的程度、侵袭和转移有关。

Runx3与Ki67分子在慢性胃炎胃黏膜肠化生及胃癌组织中的表达及相互关系

目的:探讨人类runt相关转录因子3(Runx3)和Ki67分子在慢性胃炎胃黏膜肠化生和胃癌发生、发展中的作用及二者的相互关系,分析两者在胃黏膜肠化生和癌变过程中的作用.方法:采用免疫组化SP法对92例正常胃黏膜、胃黏膜肠化生及胃癌标本进行Runx3和Ki67染色.分析Runx3和Ki67在慢性胃炎胃黏膜肠化生和胃癌中的表达,以及与胃癌组织学类型和生物学行为关系,并分析Runx3和Ki67表达的相互关系.结果:Runx3在胃黏膜肠化生和胃癌组织的表达明显低于正常胃黏膜(26.7%,10.6%vs100%,均P<0.01).而Ki67分子在胃黏膜肠化生与胃癌中的表达率明显高于正常胃黏膜(40%,74.5%vs 2%,均P<0.01).Runx3的表达与胃癌的分化程度、浆膜浸润、淋巴结转移有关(χ2=7.729,7.661,4.656,P=0.021,0.006,0.031),Ki67的表达与分化程度、浆膜浸润、胃癌组织学类型有关(χ2=6.758,4.019,9.740,P=0.034,0.045,0.002).Runx3和Ki67在胃黏膜肠化生和胃癌中表达呈显著负相关(r=-0.453,P<0.01).结论:检测Runx3和Ki67表达可能有助于胃癌高危人群,尤其是慢性胃炎患者伴有肠化生-胃癌演变过程的人群的筛查、早期诊断.

结直肠腺癌中RUNX3表达与微淋巴管密度的关系及临床意义

应用免疫组织化学方法检测30例正常结直肠组织、60例结直肠腺癌中RUNX3的表达水平,同时以D2-40为标志物,检测结直肠腺癌组织微淋巴管密度（LMVD）,分析RUNX3和LMVD与临床病例参数之间的关系,并对患者进行随访,分析两者与结直肠癌预后的关系.RUNX3蛋白在结直肠腺癌中的阳性表达率明显低于正常结直肠组织（P＜0.01）;结直肠腺癌中的LMVD值明显高于正常结直肠组织（P ＜0.01）;RUNX3表达水平和LMVD与肿瘤浸润深度、肿瘤的肝转移、淋巴结转移和TNM分期具有相关性（P＜0.01）;本组患者中51例接受了随访,中位生存期为25.5个月（7～55个月）.多因素预后分析结果显示,RUNX3表达、LMVD、癌灶浸润深度、TNM分期、肝转移及淋巴结转移是影响结直肠癌患者预后的独立危险因素。

胃癌中RUNX3、cyclinE和P21蛋白表达与患者生存的关系

目的:探讨胃癌RUNX3蛋白表达对细胞周期蛋白的影响及其与胃癌患者生存和生物学特性的关系。方法:应用免疫组化,分析RUNX3蛋白的表达;应用流式细胞术,分析cyclinE和P21蛋白表达;采用Kaplan-Meier限乘法计算生存率。结果:在56例胃癌中RUNX3蛋白、cyclinE和P21蛋白的阳性表达率分别为44.6%、64.3%和32.1%。胃癌细胞RUNX3蛋白表达与淋巴转移和远处转移有关(P<0.05)。胃癌细胞cyclinE的表达与浸润深度、淋巴转移和远处转移有关(P<0.05)。而胃癌细胞P21的表达与远处转移有关(P<0.05)。胃癌细胞中RUNX3和P21的表达之间呈明显正相关(r=0.57,P<0.05),而与cyclinE的表达之间无相关性(r=0.25,P>0.05)。用Kaplan-Meier生存曲线经Log-rank检验发现,RUNX3和cyclinE的阳性表达与生存相关(P<0.05),P21的阳性表达与生存无关(P>0.05)。结论:RUNX3蛋白可能通过影响P21蛋白的表达影响胃癌的发生发展;检测RUNX3和cyclinE的表达可作为反映胃癌临床病理学特点和预后的指标。

结直肠癌中Runx3和C-myc基因的表达

目的探讨Runx3和C-myc基因在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系。方法采用实时荧光定量PCR技术检测38例结直肠癌病人的癌组织及相应癌旁正常组织(距癌缘>5 cm)中Runx3 mRNA和C-myc mRNA的表达水平;Western-blot免疫印迹法检测63例结直肠癌病人的癌组织及相应癌旁正常组织中Runx3蛋白和C-myc蛋白的表达水平。将实验数据按照临床病理特点进行分层分析,采用统计软件SPSS 13.0进行统计,了解Runx3、C-myc的表达与结直肠癌患者主要临床病理参数之间的关联性。结果 mRNA水平与蛋白水平提示:Runx3在结直肠癌组织中的表达下调,C-myc在结直肠癌组织中的表达上调,二者的蛋白表达呈负相关(Protein levels,r=-0.398,P=0.001)。且其各自的表达在不同Dukes分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移状态及病理分化类型差异均具有统计学意义(P<0.05),临床分期越晚、病理分化越低,Runx3表达下调、C-myc表达上调越明显。结论 Runx3和C-myc基因表达异常,参与了结直肠癌的发生、发展,并与病员临床病理参数密切相关。

肝细胞癌中Runx3基因启动子区甲基化研究

目的通过检测肝细胞癌中Runx3基因启动子区域甲基化状态及Runx3基因表达情况,探讨Runx3基因启动子区域异常甲基化状态在肝细胞癌发生和发展过程中的意义。方法采用DNA甲基化特异性PCR(MSP)技术分别对5种肝癌细胞系和52例肝细胞癌患者肿瘤组织及其癌旁组织Runx3基因启动子区域甲基化进行检测,同时采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测3种肝癌细胞系Runx3 mRNA在使用药物5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)前后的表达情况。结果在肝细胞癌组织中,Runx3基因启动子区域甲基化率占42.3%(22/52),而在相对应的癌旁正常组织中,Runx3基因启动子区域未发现高甲基化现象;Runx3基因启动子区域甲基化状态与患者临床病理参数均无相关关系;在5种肝癌细胞系中,有3种细胞Runx3基因启动子区域存在甲基化异常;用药物5-Aza-CdR处理后的3种肝癌细胞中Runx3 mRNA表达明显增强。结论Runx3基因启动子区域甲基化是导致Runx3基因失活的主要原因之一,与肝细胞癌发生早期密切相关,可作为肝细胞癌早期诊断的分子标记物及分子治疗的靶点。

RUNX3、β-catenin、C-myc在结直肠腺瘤癌变中的作用

目的检测人类runt相关转录因子基因(RUNX3)、β-连珠蛋白(β-catenin)、原癌基因(C-myc)在结直肠腺瘤癌变中的表达,探讨其在结直肠癌变中的作用。方法回顾性分析2014年1月—2016年1月首都医科大学附属北京潞河医院结直肠腺瘤癌变病例57例(结直肠瘤癌变组),另外选择结直肠腺瘤33例(结直肠腺瘤组),正常结直肠黏膜20例(正常组织组)。应用免疫组织化学的方法分别检测RUNX3、β-catenin、C-myc在结直肠腺瘤癌变组、结直肠腺瘤组及正常组织组中的表达情况。结果 RUNX3在结直肠腺瘤癌变组的阳性表达率显著低于结直肠腺瘤组及正常组织组(χ~2=29.788,P=0.000);β-catenin、C-myc在结直肠腺瘤癌变组阳性表达率显著高于腺瘤组及正常组(χ~2=24.338、52.711,P均=0.000)。在结直肠腺瘤癌变组中,RUNX3与β-catenin呈负相关(r=-0.475,P=0.000);β-catenin与C-myc呈正相关(r=0.362,P=0.006);RUNX3与C-myc无相关性(r=-0.200,P=0.136)。结论 RUNX3在结直肠腺瘤癌变组表达下调,从而影响β-catenin、C-myc表达上调,RUNX3、β-catenin、C-myc在结直肠腺瘤癌变中具有重要作用。

Runx3基因在胃癌中的表达及其表达下调机制

目的:观察Runx3基因在人胃癌组织及相应正常胃组织中的表达分布特点,并对其表达下调的机制进行初步研究．方法:对25例胃癌标本进行DNA、RNA和蛋白的提取,利用单链构象多态性(SSCP)和微卫星法,检测Runx3基因突变和缺失情况．用 MSP(methylation specific PCR)检测25例胃癌标本及细胞株(MGC803,SGC7901)的甲基化状态．分别以蛋白印迹法(western blot)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),检测Runx3蛋白质和mRNA水平．结果:在25例胃癌标本中发现一例杂合性缺失,未发现Runx3第三外显子突变．MSP法检测胃癌标本中55％(14/25)发生启动子区域的甲基化,同时在胃癌细胞株MGC803中Runx3 基因发生了部分甲基化．Western blot和RT- PCR发现Runx3在胃癌组织中表达明显低于相应正常胃组织(蛋白:50 178±14 404 vs 95 020±43 136,P<0．01;mRNA:0．66±0．31 vs 1．06±0．34,P<0．01)．结论:Runx3基因在胃癌组织中表达较正常组织明显下调,提示该基因与胃癌的发生和发展有关．Runx3基因表达下调的机制主要是因为启动子区域甲基化．

子宫颈癌中Smad4和Runx3表达与HPV16感染的关系

目的探讨子宫颈病变组织中Smad4、Runx3蛋白表达和HPV16感染的关系。方法采用免疫组化SP法检测Smad4、Runx3在慢性子宫颈炎、子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和子宫颈鳞癌组织中的表达;PCR技术检测相应标本中HPV16感染情况。结果 Smad4在慢性子宫颈炎、CIN和子宫颈鳞癌组织中阳性率分别为80%(20/25)、69.8%(44/63)、40%(18/45),差异有显著性(P<0.01),Runx3在各组中阳性率分别为84%(21/25)、69.8%(44/63)、40%(18/45),差异有显著性(P<0.05)。在子宫颈鳞癌组织中,Smad4蛋白与肿瘤分化程度及有无淋巴结转移相关;Runx3蛋白表达下调与肿瘤分化程度、临床分期及有无淋巴结转移密切相关,表达差异均有显著性(P<0.05);Smad4、Runx3两者之间表达无相关性;HPV16与Smad4表达呈负相关(r=-0.327,P<0.05)。结论 Runx3蛋白表达下调,以及HPV16通过影响Smad4蛋白表达缺失,共同阻断TGF/Smads信号转导通路,促使子宫颈病变不断发展。

结直肠癌和管状腺瘤中Runx3基因启动子甲基化状态的分析

目的探讨结直肠癌及管状腺瘤中Runx3基因甲基化状态和Runx3蛋白表达,确定Runx3基因在"腺瘤→腺癌"癌变通路中的作用、临床意义及Runx3基因在不同年龄层段的甲基化程度。方法应用TaqMan探针qPCR(MethyLight)法分别检测40例管状腺瘤组织、50例结直肠癌组织和20例正常组织中Runx3基因CpG岛甲基化状态,并通过测序法验证扩增序列,同时应用免疫组化法分别检测上述标本中Runx3蛋白表达。结果结直肠癌组、管状腺瘤组、正常组中Runx3基因启动子甲基化率分别为84%、45%、10%,差异有统计学意义(P<0.05);结直肠癌组、管状腺瘤组、正常组中Runx3蛋白阳性率分别为18%、45%、80%,差异有统计学意义(P<0.05);Runx3基因甲基化与蛋白表达在正常组、管状腺瘤组及结直肠癌组中均呈负相关(相关系数r值分别为-0.667、-0.616、-0.790,P均<0.05);管状腺瘤组和结直肠癌组中Runx3基因启动子甲基化频率与患者年龄呈正相关(相关系数r值分别为0.376、0.304,P均<0.05)。结论 Runx3基因甲基化可能诱导其蛋白表达下调,在结直肠"腺瘤→腺癌"的癌变通路中起重要作用,同时Runx3基因甲基化可能与患者年龄相关,随年龄增长,甲基化程度增高。