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miR-1202通过调控小鼠脑内的mGluR_4的表达在重度抑郁症中的作用 被引量:1
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作者 雷辉 顾乃兵 +1 位作者 刘志勤 常明则 《陕西医学杂志》 CAS 2015年第9期1109-1111,共3页
目的:探讨miR-1202在重度抑郁症中的作用及机制。方法:使用过表达miR-1202的腺相关病毒和慢性不可预见性应激模型的小鼠,通过旷场实验和强迫游泳实验等行为学实验来评估miR-1202的作用;通过Western-Blot实验来验证miR-1202的分子机制。... 目的:探讨miR-1202在重度抑郁症中的作用及机制。方法:使用过表达miR-1202的腺相关病毒和慢性不可预见性应激模型的小鼠,通过旷场实验和强迫游泳实验等行为学实验来评估miR-1202的作用;通过Western-Blot实验来验证miR-1202的分子机制。结果:在抑郁症模型小鼠海马区域中过表达miR-1202发现抑郁症症状有所缓解,WB检测实验验证miR-1202的靶基因为mGluR4。结论:在小鼠海马区域中的miR-1202通过mGluR4参与了重度抑郁症,这为未来治疗抑郁症提供了一个新的靶点。 展开更多
关键词 抑郁症/治疗 抑郁症/病理生理学 海马 基因/治疗应用 模型 动物 小鼠 @miR-1202 @mglur4
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mGluR4激动剂对氧糖剥夺SH-SY5Y细胞损伤的保护作用研究 被引量:3
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作者 吴静蕊 王龙虎 +1 位作者 杨海慧 闫晋晋 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期679-686,共8页
目的: 研究mGluR4 在SH-SY5Y 细胞氧糖剥夺模型中的预防作用,并探讨其相关机制。方法: 维甲酸( RA) 诱导体外培养SH-SY5Y 并构建氧糖剥夺模型,将细胞分为对照组、氧糖剥夺组( OGD) 、OGD + mGluR4 激动剂VU0155041 处理组、OGD + VU0155... 目的: 研究mGluR4 在SH-SY5Y 细胞氧糖剥夺模型中的预防作用,并探讨其相关机制。方法: 维甲酸( RA) 诱导体外培养SH-SY5Y 并构建氧糖剥夺模型,将细胞分为对照组、氧糖剥夺组( OGD) 、OGD + mGluR4 激动剂VU0155041 处理组、OGD + VU0155041 + SB202190 处理组。CCK8 检测细胞存活率; Annexin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡,Western Blot 检测蛋白表达水平; 流式细胞仪检测细胞增殖。结果: RA 诱导的SH-SY5Y 细胞中广泛表达mGluR4,而mGluR4 在小胶质瘤细胞中不表达; 10 μmol /L 的mGluR4 激动剂VU0155041 可显著预防OGD处理的SH-SY5Y 细胞活力; mGluR4 激动剂VU0155041 可显著预防OGD 引起的SH-SY5Y 细胞凋亡,并且mGluR4激动剂VU0155041 对细胞的保护作用与增殖无关; OGD 可促进p-p38 MAPK 通路的激活,并上调Cytc、active caspase 3 水平; 而mGluR4 激动剂VU0155041 可下调p-p38 MAPK 水平,下调Cytc、active caspase 3 水平,抑制细胞凋亡; p38 MAPK 通路阻断剂SB202190 可下调Cytc、active caspase 3 水平、抑制细胞凋亡。mGluR4 激动剂通过p38 MAPK 通路调控SH-SY5Y 细胞的存活。结论: mGluR4 激动剂通过p38 MAPK 通路调控SH-SY5Y 细胞的存活。 展开更多
关键词 脑缺血 氧糖剥夺 mGluR4 VU0155041 P38 MAPK
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脑型和味型代谢性谷氨酸受体的不同功能 被引量:2
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作者 杨慧 徐群渊 +1 位作者 Roper S Chandhari N 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期1-5,共5页
目的 利用脑型及味型mGluR4在体内外的表达 ,检测两种受体结构功能上的差异 ,从而证实它们在信号转导功能上的不同。 方法 将克隆得到的脑型及味型mGluR4分别通过脂质体介导转染CHO细胞。在L MSG和L AP4的作用下 ,检测两种受体的功... 目的 利用脑型及味型mGluR4在体内外的表达 ,检测两种受体结构功能上的差异 ,从而证实它们在信号转导功能上的不同。 方法 将克隆得到的脑型及味型mGluR4分别通过脂质体介导转染CHO细胞。在L MSG和L AP4的作用下 ,检测两种受体的功能。利用WesternBlot及原位杂交技术 ,分别检测它们在体内外的表达。 结果 转染脑型及味型mGluR4的CHO细胞 ,表达两种不同分子量的免疫活性蛋白 ,其中脑型分子量约为 12 0kD而味型约为 6 8kD。在L MSG和L AP4作用下 ,味型mGluR4对刺激物反应的浓度远高于脑型mGluR4。对大鼠脑组织及舌味蕾的原位杂交证明 ,mGluR4在小脑颗粒细胞有很高的表达 ,而在味蕾细胞表达率较低 ,阳性细胞仅占味蕾细胞的 5 %。 结论 味组织中的mGluR4与脑组织中mGluR4在结构和功能上有明显不同。味型mGluR4特异性表达于味蕾细胞 ,在高于脑内的浓度下 ,结合细胞外的谷氨酸 ,通过降低cAMP的浓度引发味觉信号转导。 展开更多
关键词 味型mGluR4 脑型mGluR4 味觉 谷氨酸L-AP4
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代谢型谷氨酸受体4亚型(mGluR4)高通量药物筛选模型的建立 被引量:3
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作者 张娅玲 白艳秋 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期457-463,共7页
为发现代谢型谷氨酸受体4亚型(mGluR4)的调节剂,通过荧光检测胞内钙浓度的方法,建立一个基于细胞功能性检测的高通量筛选(HTS)系统。将人mGluR4基因转染稳定表达Gα15蛋白的人胚肾细胞(HEK-293),用Zeocin筛选获得稳定表达mGluR4的细胞株... 为发现代谢型谷氨酸受体4亚型(mGluR4)的调节剂,通过荧光检测胞内钙浓度的方法,建立一个基于细胞功能性检测的高通量筛选(HTS)系统。将人mGluR4基因转染稳定表达Gα15蛋白的人胚肾细胞(HEK-293),用Zeocin筛选获得稳定表达mGluR4的细胞株,并通过钙流检测试验证实该细胞系的生物学功能。优化了实验系统中荧光染料的孵育时间,溶剂二甲基亚砜(DMSO)耐受性,以及溶剂氢氧化钠(NaOH)耐受性,建立了可靠稳定的筛选系统。钙流检测试验数据表明,mGluR4细胞系对其激动剂的活性程度排序是:L-(+)-2-Amino-4-phosphonobutyricacid(L-AP4)>L-Serine-O-phosphate(L-SOP)>L-Glutamicacid(L-Glu);拮抗剂是:(RS)-α-Methylserine-O-phosphate(MSOP)>(RS)-α-Methyl-4-phosphonophenylglycine(MPPG)。在96和384细胞微孔培养板中,得到该筛选系统Z’因子分别是0.80和0.65。结果表明,该稳定细胞系拥有一个稳定的检测系统,适合于mGluR4激动剂/拮抗剂的筛选。 展开更多
关键词 代谢型谷氨酸受体4亚型(mGluR4) 高通量筛选(HTS) Gα15 激动剂/拮抗剂
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