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UBE2L6在卵巢癌中的表达及其预后价值
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作者 郭晓云 王赞宏 于冰 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第4期447-454,共8页
目的探讨UBE2L6基因在卵巢癌组织中的表达,并分析其与患者预后的关系。方法收集2014年7月至2022年2月在山西白求恩医院住院治疗的150例卵巢癌患者及因子宫腺肌症进行全子宫+双侧附件切除的患者25例,采用免疫组化SP法检测卵巢组织中UBE2L... 目的探讨UBE2L6基因在卵巢癌组织中的表达,并分析其与患者预后的关系。方法收集2014年7月至2022年2月在山西白求恩医院住院治疗的150例卵巢癌患者及因子宫腺肌症进行全子宫+双侧附件切除的患者25例,采用免疫组化SP法检测卵巢组织中UBE2L6蛋白的表达情况,比较UBE2L6蛋白在卵巢癌组织与正常卵巢组织中的表达差异;并分析UBE2L6蛋白表达与卵巢癌患者临床病理特征之间的关系;通过χ2检验、COX风险回归分析筛选影响卵巢癌患者无进展生存期的独立危险因素,并采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线。基于基因表达在线数据库分析UBE2L6表达与卵巢癌临床病理指标相关性,通过Kaplan-Meier数据库检索UBE2L6表达与卵巢癌预后的相关性;利用京都基因与基因组百科全书富集分析预测基因功能;通过肿瘤免疫估计资源(TIMER)数据库分析UBE2L6在卵巢癌高表达与局部免疫浸润的相关性。结果与正常卵巢组织相比,UBE2L6在卵巢癌中高表达(P<0.05),与患者不良预后相关;COX风险回归模型分析显示,UBE2L6高表达是卵巢癌无进展生存期的独立危险因素(P<0.05)。基因富集分析显示UBE2L6可能通过炎症通路影响卵巢癌的发生发展及预后;TIMER数据库表明UBE2L6表达水平与B细胞(P=9.87×10^(-11))、CD8+T细胞(P=9.64×10^(-13))、中性粒细胞(P=2.13×10-22)、树突状细胞(P=6.50×10-15)及CD4^(+)T细胞(P=3.51×10^(-4))呈正相关,与肿瘤纯度呈负相关(P=7×10-8)。结论UBE2L6可能通过影响免疫细胞进而导致不良预后,其可能是卵巢癌治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 卵巢癌 UBE2l6 生物信息学 免疫浸润 预后 肿瘤微环境
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刺葡萄VdERD6L15基因克隆及功能分析
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作者 刘洁 杨盛迪 +3 位作者 曾雅婷 白描 杨国顺 李双江 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1770-1780,共11页
【目的】探究VdERD6L15在刺葡萄果实生长发育中的功能,从湘刺1号中克隆VdERD6L15基因及其启动子,进行基因功能研究和启动子活性分析。【方法】克隆VdERD6L15基因CDS序列,并对CDS进行生物信息学分析;构建VdERD6L15表达载体,并通过瞬时转... 【目的】探究VdERD6L15在刺葡萄果实生长发育中的功能,从湘刺1号中克隆VdERD6L15基因及其启动子,进行基因功能研究和启动子活性分析。【方法】克隆VdERD6L15基因CDS序列,并对CDS进行生物信息学分析;构建VdERD6L15表达载体,并通过瞬时转化烟草确定VdERD6L15基因编码蛋白的亚细胞定位;同时,通过在己糖缺陷型酵母菌株EBY.VW4000中异源表达VdERD6L15探究其功能;此外,通过启动子截短试验确定VdERD6L15启动子的核心区域。【结果】成功克隆刺葡萄VdERD6L15基因编码序列,该编码序列长1461 bp,可编码486个氨基酸,具有膜蛋白特征,属于单糖转运蛋白家族。亚细胞定位试验确认VdERD6L15蛋白主要定位于液泡膜上。通过在酵母菌株EBY.VW4000中进行异源表达,验证了VdERD6L15具有转运葡萄糖的能力。利用PlantCARE数据库对VdERD6L15启动子顺式作用元件进行分析,发现其主要包含光响应元件、干旱胁迫和激素响应元件。通过GUS染色分析,进一步确定候选基因VdERD6L15启动子的关键调控区域位于-500 bp到-1000 bp之间。【结论】VdERD6L15是一个定位在液泡膜上的糖转运蛋白,具有转运葡萄糖的功能;VdERD6L15启动子的核心元件位于ATG上游500~1000 bp之间。 展开更多
关键词 刺葡萄 VdERD6l15 单糖转运蛋白 亚细胞定位 启动子活性
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一个成株抗白粉病小麦-簇毛麦T2DS·2V#6L易位系的选育
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作者 侯富 金银禹 +3 位作者 张婷 王洋 孔令娜 张瑞奇 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期827-834,共8页
白粉病是威胁全球小麦生产的一种严重病害,从小麦野生近缘种发掘成株抗白粉病基因资源对培育持久抗性品种十分重要。本研究从硬粒小麦-簇毛麦01I139(V#6)双二倍体AABBVV-3与普通小麦NAU0686杂交、回交的后代中鉴定到一个小麦-簇毛麦2V#6... 白粉病是威胁全球小麦生产的一种严重病害,从小麦野生近缘种发掘成株抗白粉病基因资源对培育持久抗性品种十分重要。本研究从硬粒小麦-簇毛麦01I139(V#6)双二倍体AABBVV-3与普通小麦NAU0686杂交、回交的后代中鉴定到一个小麦-簇毛麦2V#6(2D)异代换系11-2V-1,利用11-2V-1在染色体2V和2D之间产生重组,将11-2V-1与高感白粉病普通小麦NAU0686杂交,F_(1)自交。利用GISH/FISH和分子标记对F_(2)世代131个单株进行分子细胞学鉴定,获得了小麦-簇毛麦T2DS·2V#6L易位系11-2V-2、2V#6S端体系11-2V-3和2V#6L端体系11-2V-4新种质。白粉病抗性鉴定发现,所有F_(2)单株苗期均高感小麦白粉菌生理小种E09,但成株期含有2V#6和2V#6L染色体臂的所有单株均表现高抗(IT=1~2),而仅含有2V#6S染色体臂或无外源染色体的单株均高感白粉病(IT=7~9),表明簇毛麦01I139的2V#6L染色体臂上携带成株抗白粉病基因,该基因可能与小麦-簇毛麦T2BS·2V#5L易位系携带的Pm62是等位基因。遗传效应分析表明,T2DS·2V#6L易位染色体在小麦背景传递正常,对主要农艺性状没有显著的负向影响,对穗长、每穗粒数和单株粒重还表现出一定程度的正向效应。因此,本研究创制的成株抗白粉病T2DS·2V#6L易位系11-2V-2为小麦抗白粉病育种提供了新抗源,也为后续簇毛麦2VL上优异基因遗传定位和图位克隆奠定了基础。 展开更多
关键词 小麦 小麦-簇毛麦T2DS·2V#6l易位系 白粉病 簇毛麦
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ERCC6L蛋白在胃癌组织中的表达变化及其与临床病理特征和预后的关系分析
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作者 王鹏飞 施磊健 +1 位作者 周骁宇 张洁 《安徽医药》 CAS 2024年第10期1994-1997,I0006,共5页
目的探究ERCC6L蛋白在胃癌组织中的表达变化及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取南通大学附属启东医院2015年4月至2017年5月行手术治疗的150例胃癌病人为研究对象,收集胃癌组织及癌旁非肿瘤组织,采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qP... 目的探究ERCC6L蛋白在胃癌组织中的表达变化及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取南通大学附属启东医院2015年4月至2017年5月行手术治疗的150例胃癌病人为研究对象,收集胃癌组织及癌旁非肿瘤组织,采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)及免疫组织化学法检测ERCC6L mRNA及蛋白表达水平,分析其与临床病理特征关系;采用Kaplan-Meier法分析ERCC6L蛋白表达与病人预后的关系;采用Cox回归分析影响胃癌病人预后的相关因素。结果胃癌组织中ERCC6L mRNA的相对表达量1.60±0.53显著高于癌旁非肿瘤组织1.01±0.12(t=13.30,P<0.001)、ERCC6L蛋白阳性表达率均显著高于癌旁非肿瘤组织(P<0.05)。ERCC6L蛋白表达与淋巴结转移、肿瘤浸润深度、TNM分期、远处转移、分化程度有关(P<0.05)。胃癌组织ERCC6L阳性表达病人5年总生存率(19.57%)显著低于ERCC6L阴性表达病人(60.34%,P<0.05)。ER⁃CC6L阳性表达、淋巴结转移、TNMⅢ~TNMⅣ和低分化均是影响胃癌病人不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论ERCC6L在胃癌组织中高表达,与分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、远处转移及预后密切相关,是影响胃癌病人预后的独立危险因素。 展开更多
关键词 胃肿瘤 ERCC6l 临床病理特征 淋巴结转移 预后
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烟碱转运候选基因NtABCG6L生物信息学及表达特征分析
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作者 龙本山 莫泽君 +4 位作者 张静瑶 彭丽沙 段丽丽 罗家骏 刘仁祥 《山东农业科学》 北大核心 2024年第4期20-27,45,共9页
为预测前期筛选到的可能影响烟草烟碱含量的NtABCG6L基因是否具有转运烟碱功能,本研究采用生物信息学方法对NtABCG6L基因的启动子序列以及编码蛋白的理化性质和结构进行分析,利用软件对烟碱与NtABCG6L蛋白进行分子对接,并分别在烟株打顶... 为预测前期筛选到的可能影响烟草烟碱含量的NtABCG6L基因是否具有转运烟碱功能,本研究采用生物信息学方法对NtABCG6L基因的启动子序列以及编码蛋白的理化性质和结构进行分析,利用软件对烟碱与NtABCG6L蛋白进行分子对接,并分别在烟株打顶0、7、14、21 d取根、茎、叶测定烟碱含量和NtABCG6L基因的相对表达量,以分析NtABCG6L基因表达量与烟碱转运效率的关系。结果表明,NtABCG6L基因共编码729个氨基酸;NtABCG6L蛋白分子量为81.29 kDa,理论pI值为8.97,含有ABC_transporter-like_ATP-bd、ABCG_dom、ABC_2_trans结构域,二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成,存在跨膜结构,主要定位在细胞膜上,预测NtABCG6L是一个跨膜转运蛋白。NtABCG6L蛋白与烟碱可以通过氢键结合,结合能为-2.95。NtABCG6L基因主要在烟草根部表达,打顶14 d表达量最高,其表达量与烟碱转运系数呈显著正相关关系,初步推测NtABCG6L基因参与了烟碱的转运过程。本研究结果可为进一步采用基因编辑技术明确其功能提供依据。 展开更多
关键词 烟草 NtABCG6l基因 生物信息学分析 烟碱转运 基因表达
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2018款奥迪A6L车载导航定位不准确
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作者 张明旭 陈继阳 《汽车维修技师》 2024年第14期132-132,共1页
本文针对2018年款奥迪A6L车主反映的车载导航定位不准确问题进行了详细的诊断与分析。处理R50天线插头针脚后,故障得到了解决。并强调了在面对新车故障时,应进行全面的故障排查,而不是仅仅依赖于替换部件。
关键词 奥迪A6l 车载导航 车辆定位
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400 G骨干传输网C6T与C6T+L6T技术工程应用研究 被引量:1
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作者 刘杰 《广东通信技术》 2023年第7期2-5,共4页
分析了400 G超长距WDM技术的特点,并从多个维度对比分析了C6T与C6T+L6T技术在骨干传输网工程应用的优缺点,最后结合不同应用场景的需求给出技术应用建议。
关键词 400G ROADM C6T C6T%PlUS%l6T 波长碎片率
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非洲猪瘟病毒MGF110-5L-6L蛋白诱导宿主细胞翻译阻滞和应激颗粒形成的作用机制 被引量:1
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作者 樊帅 钟函 +5 位作者 杨中元 何文瑞 万博 魏战勇 韩世充 张改平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1401-1416,共16页
【背景】非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引发的一种猪烈性传染病,是全球公认的养猪业“头号杀手”,至今尚无安全有效的疫苗和药物。病毒作为专性细胞内寄生物,必须通过“劫持... 【背景】非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引发的一种猪烈性传染病,是全球公认的养猪业“头号杀手”,至今尚无安全有效的疫苗和药物。病毒作为专性细胞内寄生物,必须通过“劫持”宿主翻译系统为病毒蛋白合成服务。其中翻译起始因子eIF2α作为翻译调控的核心节点,控制细胞应激反应和翻译重编程走向,对病毒毒力、嗜性、致病性及免疫逃逸等具有重要影响,eIF2α磷酸化调控无疑是病毒与宿主细胞竞争翻译资源的重要阵地之一。然而,关于ASFV编码蛋白与eIF2α磷酸化作用关系的认知极度匮乏。【目的】探究非洲猪瘟病毒MGF110-5L-6L蛋白对宿主细胞翻译阻滞和促进应激颗粒形成的作用机制,为深入揭示非洲猪瘟病毒的致病机制研究提供科学依据。【方法】在前期利用荧光素酶报告基因载体和绿色荧光报告载体,筛选发现外源表达MGF110-5L-6L极显著上调eIF2α磷酸化水平的基础上。选择猪肺泡巨噬细胞3D4/21和猪肾细胞PK-15作为研究用细胞系,利用质粒转染和特异性化学药物处理等方法,结合免疫印迹和激光共聚焦显微镜等检测技术,验证了MGF110-5L-6L蛋白与eIF2α磷酸化及其下游翻译效应之间的功能关系。随后,通过生物信息学网站预测、亚细胞定位和功能分析等,研究了MGF110-5L-6L蛋白与诱导细胞应激之间的相关性。【结果】证实外源表达ASFV多基因家族蛋白MGF110-5L-6L能够显著增强细胞内eIF2α磷酸化水平及激活转录因子ATF4表达量,诱导综合应激反应的发生;还可诱导细胞发生内质网应激和未折叠蛋白反应,并通过活化PERK和PKR激酶来诱发eIF2α的磷酸化,进而导致细胞蛋白翻译阻滞和应激颗粒形成。进一步证实,MGF110-5L-6L蛋白含有两个高度保守的半胱氨酸基序,且主要定位于内质网,少量分布于高尔基体、线粒体和溶酶体,还可诱导高尔基体和过氧化物酶体的亚细胞定位及形态出现显著改变,提示其可能通过影响内质网腔中氧化还原稳态、蛋白分泌途径或相关膜性细胞器发生等创造应激条件。【结论】报道了ASFV早期蛋白MGF110-5L-6L的结构、亚细胞定位及其潜在功能特征,揭示了MGF110-5L-6L蛋白与eIF2α磷酸化和宿主细胞蛋白翻译系统之间的功能关系,为深入认识ASFV的病原生物学与致病机制提供了新的科学参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 MGF110-5l-6l蛋白 eIF2α磷酸化 翻译阻滞 应激颗粒
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雌马酚通过调控自噬干预棕榈酸诱导的L6细胞肌管萎缩
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作者 于生财 倪向敏 +2 位作者 卢亨 张贵明 王建 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第15期1604-1611,共8页
目的观察雌马酚(equol,Eq)干预对棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的L6大鼠成肌细胞肌管萎缩的影响,并探讨其机制。方法体外培养L6细胞,以不同浓度的Eq、PA处理24 h,通过CCK-8法检测相对细胞活力确定Eq、PA干预的适宜浓度。将细胞分为对照... 目的观察雌马酚(equol,Eq)干预对棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的L6大鼠成肌细胞肌管萎缩的影响,并探讨其机制。方法体外培养L6细胞,以不同浓度的Eq、PA处理24 h,通过CCK-8法检测相对细胞活力确定Eq、PA干预的适宜浓度。将细胞分为对照组、模型组(PA:0.25 mmol/L)、干预组(PA:0.25 mmol/L+Eq:1μmol/L)和自噬抑制剂组(PA:0.25 mmol/L+Eq:1μmol/L+3-MA:1 mmol/L)。干预24 h后检测各组细胞葡萄糖摄取能力;HE染色观察细胞肌管生长情况;透射电镜观察细胞自噬小体数量;激光共聚焦显微镜观察经线粒体荧光探针标记的线粒体形态;Western blot检测MyHC、p62蛋白、LC3蛋白、MFN2和DRP1表达水平。结果干预24 h后,与对照组比较,模型组L6细胞葡萄糖消耗明显减低(P<0.05),肌管直径明显减小(P<0.05),自噬小体数量减少,线粒体裂变增加,MyHC、MFN2蛋白表达水平降低(P<0.05),而p62、DRP1表达水平及LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ比值增加(P<0.05);与模型组相比,干预组L6细胞葡萄糖消耗明显增加(P<0.05),肌管直径明显增大(P<0.05),自噬小体数量增加,线粒体裂变减少,MyHC、MFN2蛋白表达水平升高(P<0.05),而p62、DRP1表达水平及LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ比值降低(P<0.05);Eq对PA诱导的L6细胞葡萄糖消耗,肌管直径,自噬小体数量,线粒体裂变,MyHC、p62、MFN2、DRP1蛋白表达水平及LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ比值的影响可被3-MA有效抑制。结论Eq可有效改善PA诱导的L6细胞肌管萎缩,其部分机制与Eq通过促进自噬,减轻线粒体裂变有关。 展开更多
关键词 雌马酚 l6细胞 自噬 肌管萎缩 棕榈酸
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FWK-6L型上装式挖掘机在抚顺东露天矿的应用
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作者 鲍岩 《露天采矿技术》 CAS 2023年第3期115-117,121,共4页
为了提高东露天矿电铁采区新水平开拓降深能力,分析了上装式挖掘机的主要技术参数和上装式挖掘机生产效率,并设计出新式FWK-6L型上装式挖掘机。结果表明:新式FWK-6L型上装式挖掘机较原有的CЭ-3Y型上装式挖掘机,在挖掘高度、卸载高度、... 为了提高东露天矿电铁采区新水平开拓降深能力,分析了上装式挖掘机的主要技术参数和上装式挖掘机生产效率,并设计出新式FWK-6L型上装式挖掘机。结果表明:新式FWK-6L型上装式挖掘机较原有的CЭ-3Y型上装式挖掘机,在挖掘高度、卸载高度、挖掘半径、卸载半径方面均有所提高;装车时间大幅压缩,采装能力显著提高,加快了采区新水平开拓延深工程进度;采区降深速度由原有的每年降深7 m,提高至每年降深14 m,增大采区整体工作帮坡角,为油页岩富矿增产提供了保证。 展开更多
关键词 FWK-6l型上装式挖掘机 技术参数 生产能力 降深速度 整体工作帮坡角
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奥迪A6L发动机偶发耸车故障的维修
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作者 夏吴晓 刘涛 《汽车维修技师》 2023年第4期132-132,共1页
奥迪A6L发动机常常会出现偶发耸车故障,所以需要进行全面检查,再采取针对性的维修措施,以此保证奥迪A6L能够正常行驶。
关键词 奥迪A6l 发动机 偶发耸 故障维修
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MAN 6L16/24副机排气冒黑烟故障原因分析与解决方案
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作者 刘广利 《天津航海》 2023年第4期13-16,共4页
针对船舶副机排气冒黑烟的故障问题,文章介绍了船旗国对船舶排放黑烟的法律法规要求,分析了副机故障原因,提出了有效的解决方案,供同行们参考。
关键词 MAN 6l16/24副机 排气冒黑烟 黑烟危害 法规要求 喷嘴环 解决方案 原因分析
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Anti-Diabetic Activity of an Extract of Syzygium Jambolanum - A Review
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作者 Kirubanandan Shanmugam 《Journal of Clinical and Nursing Research》 2024年第3期220-231,共12页
Syzygium jambolanum is a promising natural treatment for diabetes.The potential benefits of S jambolanum for diabetes include lowering blood sugar levels,increasing insulin sensitivity,protecting pancreatic beta cells... Syzygium jambolanum is a promising natural treatment for diabetes.The potential benefits of S jambolanum for diabetes include lowering blood sugar levels,increasing insulin sensitivity,protecting pancreatic beta cells,and slowing the absorption of glucose into the bloodstream.The anti-diabetic activity of the crude extract of S jambolanum was evaluated in L6 myotubes and the lipid deposition in tissue was measured using Nile red Staining.Nile red staining confirmed that a considerable quantity of lipids had been deposited in the tissue treated with a crude extract of S jambolanum,comparable to the quantity of lipids deposited with a standard drug known as Rosiglitazone.This study analyzed the anti-diabetic activity of a crude extract of S jambolanum to understand its potential as a feedstock for extracting bioactive constituents to screen for bioactive molecules in the treatment of diabetes. 展开更多
关键词 Syzygium jambolanum l6 myoblasts Column chromatography Nile red staining
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基于STM32L051的电梯振动高温预警系统设计
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作者 周凯迪 周德明 +1 位作者 杨益 周杏 《电子制作》 2024年第8期78-81,共4页
本系统针对电梯运行振动及梯内温度问题,设计与研究了一套基于STM32L051C6T6的振动高温预警系统。系统采用三维加速度传感器MMA7361、低功耗温度传感器MAX6608、外存储器模块以及报警模块实现数据采集、处理、存储及预警功能;采用串口... 本系统针对电梯运行振动及梯内温度问题,设计与研究了一套基于STM32L051C6T6的振动高温预警系统。系统采用三维加速度传感器MMA7361、低功耗温度传感器MAX6608、外存储器模块以及报警模块实现数据采集、处理、存储及预警功能;采用串口通信模块与用户界面进行数据传输。用户界面设计采用构建用户界面的渐进式JavaScript框架Vue软件开发,可实现提取电梯运行历史数据及分析功能。系统测试结果表明,基于低功耗单片机设计的振动高温预警系统可以准确地实现振动及温度信号采集,并在超阈值的情况下启动报警装置,同时可通过用户界面实现电梯运行历史数据可视化,实现电梯运行安全性预警及监测控制。 展开更多
关键词 STM32l051C6T6 传感器 振动高温预警 Vue
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氧化苦参碱对H_2O_2诱导的L_6成肌细胞凋亡的影响 被引量:6
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作者 朱道立 王康乐 +1 位作者 陈佩林 姜雅琼 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第7期662-670,共9页
研究氧化苦参碱对L6大鼠成肌细胞H2O2凋亡的影响.采用过氧化氢损伤L6大鼠成肌细胞的方法,建立L6大鼠成肌细胞H2O2凋亡模型.使用剂量为0.3,0.15,0.75 g/L的氧化苦参碱处理细胞.应用MTT法统计存活率和流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,用D... 研究氧化苦参碱对L6大鼠成肌细胞H2O2凋亡的影响.采用过氧化氢损伤L6大鼠成肌细胞的方法,建立L6大鼠成肌细胞H2O2凋亡模型.使用剂量为0.3,0.15,0.75 g/L的氧化苦参碱处理细胞.应用MTT法统计存活率和流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,用DAPI荧光染色、HE染色以及Bax和Bcl-2抗体鉴定损伤程度,Western blot检测蛋白质差异.结果表明,H2O2损伤的成肌细胞存活率降低,凋亡率增加.各种剂量氧化苦参碱能提高成肌细胞的存活率,促使Bcl-2增高,Bax降低.对成肌细胞的保护程度随氧化苦参碱剂量增加而增强,在剂量为0.3 g/L时,效果显著,其次是0.15、0.75 g/L的氧化苦参碱.其生理生化机制是氧化苦参碱保护H2O2通过NFκB信号通路造成的大鼠成肌细胞凋亡模型.结果显示,氧化苦参碱具有作为新的抗氧化药物的潜力. 展开更多
关键词 氧化苦参碱 H2O2诱导凋亡模型 l6大鼠成肌细胞 BCl-2 BAX
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活性氧促使L6成肌细胞的分化 被引量:9
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作者 邱小忠 余磊 +4 位作者 廖华 张黎声 秦建强 杨俊 欧阳钧 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第11期1384-1386,共3页
目的探讨氧化应激对L6成肌细胞生长分化的影响。方法MTT法检测H2O2对L6细胞活力的影响;观察H2O2引起的细胞形态学变化,RT-PCR检测myogenin基因表达水平。结果在较短的处理时间内(1h),低浓度的活性氧(50μmol/LH2O2)有利于细胞的生长(P&l... 目的探讨氧化应激对L6成肌细胞生长分化的影响。方法MTT法检测H2O2对L6细胞活力的影响;观察H2O2引起的细胞形态学变化,RT-PCR检测myogenin基因表达水平。结果在较短的处理时间内(1h),低浓度的活性氧(50μmol/LH2O2)有利于细胞的生长(P<0.05);H2O2处理12h后,50和150μmol/L的H2O2能够诱导成肌细胞分化的标记分子-myogenin基因的表达,形态学研究结果表明H2O2能够诱导肌管的形成,促使成肌细胞的分化。结论活性氧可能是细胞内诱导细胞生长与分化的信号分子。 展开更多
关键词 H2O2 细胞分化 l6成肌细胞 MYOGENIN
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L6细胞胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型 被引量:10
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作者 杨亮 迟戈 +8 位作者 张俊 王良君 刘丽娜 樊淼 刘海东 李伟伟 张健飞 杨菁 隋鸿锦 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期248-251,共4页
背景:在胰岛素抵抗的细胞模型中,以游离脂肪酸诱导3T3-L1脂肪细胞和高胰岛素诱导的HepG2肝癌细胞最为常见,对分布最为广泛靶组织骨骼肌的胰岛素抵抗模型报道较少。目的:拟使用L6细胞株建立胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型。设计、时间及地点... 背景:在胰岛素抵抗的细胞模型中,以游离脂肪酸诱导3T3-L1脂肪细胞和高胰岛素诱导的HepG2肝癌细胞最为常见,对分布最为广泛靶组织骨骼肌的胰岛素抵抗模型报道较少。目的:拟使用L6细胞株建立胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-06/2008-05在辽宁医学院生物化学与分子生物学教研室完成。材料:L6细胞株由中国协和医科大学细胞中心提供。α-MEM培养基为美国Gibco公司产品。方法:复苏后的L6细胞置于α-MEM培养基中诱导培养14d,以考马斯亮蓝染色观察肌管出现来确定L6成肌细胞株分化完成。将分化后的细胞建立胰岛素抵抗模型,按1×106/孔接种于24孔板内,用含体积分数为0.02胎牛血清的α-MEM培养,以L6细胞贴满24孔板的板底为宜。换液后,向各孔内分别加入含体积分数为0.02牛血清白蛋白的α-MEM无血清培养基饥饿培养5h。设立2组,实验组的板孔内加入含1×10-7mol/L胰岛素的HEPES缓冲液(136mmol/LNaCl,4.7mmol/LKCl,1.25mmol/LMgSO4,1.2mmol/LCaCl2,0.2%牛血清白蛋白,20mmol/LHEPES,pH7.4)孵育1h;对照组的板孔内加入不含胰岛素的HEPES缓冲液孵育1h。弃上清后用HBS缓冲液冲洗,每孔内分别加入含0.1mol/L葡萄糖的HBS缓冲液100μL,孵育10min后取出置于冰板上快速回收上清。主要观察指标:考马斯亮蓝染色观察L6细胞出现肌管结构情况,葡萄糖氧化酶法检测上清中葡萄糖浓度。结果:诱导前L6细胞未见肌性结构出现,诱导分化后L6细胞内出现肌管结构。使用α-MEM无血清培养基饥饿培养1,3h,两组上清中葡萄糖浓度基本相似(P>0.05);使用α-MEM无血清培养基饥饿培养5h后,实验组上清中葡萄糖浓度明显高于对照组(P<0.05)。结论:诱导分化成肌后的L6骨骼肌细胞经α-MEM无血清培养基饥饿培养5h,在胰岛素浓度为1×10-7mol/L的刺激下可形成胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型。 展开更多
关键词 l6骨骼肌细胞 模型 α-MEM 胰岛素抵抗
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核糖体蛋白L6在前列腺癌中的表达及临床意义 被引量:6
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作者 张蒙 盛镔 +2 位作者 马鹏德 张昌文 徐勇 《天津医药》 CAS 2016年第1期75-78,共4页
目的探讨核糖体蛋白L6(RPL6)在前列腺癌组织中的表达及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和Western blot检测RPL6在前列腺癌组织(80例)及癌旁组织(62例)中的表达水平,分析RPL6 m RNA表达水平与前列腺癌患者的临床病理特征及... 目的探讨核糖体蛋白L6(RPL6)在前列腺癌组织中的表达及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和Western blot检测RPL6在前列腺癌组织(80例)及癌旁组织(62例)中的表达水平,分析RPL6 m RNA表达水平与前列腺癌患者的临床病理特征及预后之间的关系。结果 RPL6在前列腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05);血清前列腺特异性抗原(PSA)值高、Gleason评分高、临床分期晚、有淋巴结转移患者的RPL6m RNA表达水平增高(均P<0.05),而不同年龄、精囊侵袭、血管侵犯及手术切缘阳性情况患者的RPL6 m RNA表达水平无明显差异(均P>0.05)。RPL6 m RNA高表达前列腺癌患者的术后无生化复发生存率较低(χ2=4.530,P=0.033)。结论 RPL6表达水平增高与前列腺癌的发生发展及不良预后相关;或可用其作为初步判断前列腺癌患者预后的肿瘤标志物。 展开更多
关键词 核糖体蛋白l6 前列腺癌 实时荧光定量PCR 预后
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棕榈酸致大鼠L6肌细胞胰岛素抵抗与JNK1活化的关系 被引量:5
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作者 杨宁宁 王佑民 +1 位作者 陈冬 陈明卫 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第3期241-244,共4页
目的建立棕榈酸(PA)诱导的大鼠L6肌细胞胰岛素抵抗模型,初步探讨其机制与C-jun氨基末端激酶1(JNK1)活化的关系。方法不同浓度PA分别培养已分化的L6肌细胞2、4、8、12、24、36 h,用葡萄糖试剂盒分别检测各组培养液中剩余葡萄糖浓度,观察... 目的建立棕榈酸(PA)诱导的大鼠L6肌细胞胰岛素抵抗模型,初步探讨其机制与C-jun氨基末端激酶1(JNK1)活化的关系。方法不同浓度PA分别培养已分化的L6肌细胞2、4、8、12、24、36 h,用葡萄糖试剂盒分别检测各组培养液中剩余葡萄糖浓度,观察不同浓度PA对骨骼肌细胞葡萄糖摄取的影响。MTT法检测棕榈酸对L6细胞活性的影响。建立L6肌细胞胰岛素抵抗模型,Western blot检测正常组(NG组)和胰岛素抵抗组(IR组)的JNK1和p-JNK1的蛋白表达水平。结果 0.4 mmol/L的PA孵育24~36 h与0.6、0.8 mmol/L的PA孵育8~24 h后细胞上清液葡萄糖浓度明显高于NG组(P<0.05),MTT结果显示0.8、1.0 mmol/L的PA作用24、36 h时对细胞的活性有影响。Western blot结果显示:NG组JNK1和p-JNK1的表达量较低,IR组JNK1和p-JNK1的表达量上升,其中p-JNK1表达量上升较JNK1明显,但与NG组比较,IR组的JNK1表达差异无统计学意义,p-JNK1、p-JNK1/JNK1表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论通过一定浓度和时间的PA刺激可导致大鼠L6成肌细胞胰岛素抵抗的形成,其机制可能和JNK1的活化有一定关系。 展开更多
关键词 l6肌细胞 胰岛素抵抗 JNK 棕榈酸
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核糖体蛋白L6/Taxreb107的核定位信号的分析 被引量:2
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作者 王冀姝 杨曦 +3 位作者 李荣 周鹏 张淼丽 韩骅 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期144-148,共5页
核糖体蛋白L6 (RpL6 ,Taxreb10 7)含有三个具有核定位信号特征的基序 .用作者构建的核定位信号捕获系统分析了这些核定位信号是否具有介导蛋白质进行核转位的功能 .将RpL6 /Taxreb10 7分段插入核定位信号捕获载体的克隆位点后转化宿主酵... 核糖体蛋白L6 (RpL6 ,Taxreb10 7)含有三个具有核定位信号特征的基序 .用作者构建的核定位信号捕获系统分析了这些核定位信号是否具有介导蛋白质进行核转位的功能 .将RpL6 /Taxreb10 7分段插入核定位信号捕获载体的克隆位点后转化宿主酵母 ,发现其前两个核定位信号可以介导融合蛋白进入细胞核 ,而第三个核定位信号无此作用 .将RpL6 /Taxreb10 7分段与绿色荧光蛋白融合后转染培养的哺乳类细胞 ,证实了以上在酵母中所得的结果 .进一步发现RpL6 /Taxreb10 7的前两个核定位信号同时具有核仁定位的功能 .当在细胞中表达的早期 ,进入核内的融合蛋白优先定位于核仁 .这些结果一方面有助于理解RpL6 /Taxreb10 7核转位的机理 ,同时说明作者构建的核定位信号捕获系统也可用在蛋白质中寻找核定位信号 . 展开更多
关键词 核定位信号 核糖体蛋白l6 核转位 绿色荧光蛋白
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