基于UPLC-QTOF-MS解析苦荞黄酮组成及药理学网络分析

为优化苦荞黄酮提取工艺并明确其具体成分结构和含量及药理作用,本研究以四川省凉山彝族自治州甘洛县优质苦荞为研究对象,对超声提取苦荞黄酮工艺进行了优化,采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)对主要黄酮成分进行结构鉴定,并采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪对鉴定到的黄酮进行准确定量,同时利用中药系统药理学(TCMSP)系统分析其网络药理学特性。结果表明,超声辅助乙醇提取苦荞黄酮的最优条件为乙醇浓度90%(V/V)、超声功率140 W、超声温度70℃、超声时间60 min、提取溶剂与苦荞原料比50∶1(mL·g^(-1)),该条件下,提取液中共鉴定到黄酮16种,其中芦丁、表儿茶素和儿茶素含量分别达到115.81、72.99和23.08μg·mL^(-1)。这16种黄酮在防治心血管疾病、慢性炎症性疾病上具有重要作用。本研究可为苦荞精深加工综合利用尤其是功能性苦荞产品开发利用奠定基础。

红肉火龙果粉的发泡微波冷冻干燥制备与质量评价

制备浆果粉末产品是延长其货架期的有效手段。为降低干燥过程能耗和保留产品营养成分,该研究以平均含水率(87.03±1.26)%的新鲜红肉火龙果果浆为原料,采用冷冻干燥和喷雾干燥两种方法制备了火龙果粉末。以残余湿含量、色泽和典型生物活性成分甜菜红素、芦丁和总酚保留率为指标对产品质量进行了评价。用质量比为3%(w/w)的分离乳清蛋白和2.5%(w/w)的果胶为添加剂制备了未发泡和发泡2种样品,进行了传统和微波冷冻干燥试验。结果表明,使用石英底盘,在30˚C、20 Pa下,发泡样品比未发泡样品冷冻干燥时间缩短了39.06%;施加1 W微波功率时,未发泡和发泡样品微波冷冻干燥时间比无微波时分别缩短了18.75%和12.82%。用碳化硅底盘替代石英底盘,在30˚C、20 Pa和1 W下,发泡样品微波冷冻干燥时间比未发泡和发泡样品传统无微波冷冻干燥分别缩短了65.62%和43.59%。分别以5.5%(w/w)的分离乳清蛋白和15.6%(w/w)的麦芽糊精为添加剂,进行了喷雾干燥试验。工艺参数为进风温度150˚C、出风温度85˚C、进料速度28 mL/min。冷冻干燥产品的甜菜红素、芦丁和总酚保留率分别在72%、84%和75%以上,而喷雾干燥产品的保留率显著降低。该研究采用的冷冻干燥方法能够大幅缩短干燥时间、提高产品质量,为浆果类粉末产品的制备提供工业解决方案。

基于网络药理学与GEO差异基因芯片数据探讨芦丁治疗脊髓损伤的作用机制

为了探究芦丁治疗脊髓损伤的作用机制,基于网络药理学和GEO差异基因芯片数据分析,结合体内实验,筛选芦丁对脊髓损伤的作用靶点.首先通过TCMSP、Swiss Target Prediction和SuperPred数据库获得芦丁的作用靶点,同时采用GEO差异基因、CTD、OMIM、PharmGkb疾病数据库获取脊髓损伤的疾病靶点;然后应用Cytoscape软件采用蛋白互作的方式筛选芦丁治疗脊髓损伤的核心靶点,并采用R语言对核心靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析;最后采用Rutgers MASCIS脊髓损伤撞击器建立大鼠急性脊髓损伤模型,芦丁干预3 d后采用BBB运动评分法对大鼠后肢运动功能进行评价,采用酶联免疫吸附测定法检测脊髓中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β和NF-κB的表达水平以及ROS和MDA含量.结果发现:(1)芦丁共有56个对应的蛋白靶点,脊髓损伤筛选到4 624个疾病靶点,合并后得到5个核心靶点,即CASP3、ESR1、GSK3B、IL-6、MTOR;(2) GO功能主要集中在对氧化应激的反应、活性氧代谢过程、NF-κB结合等,KEGG通路分析显示,芦丁治疗脊髓损伤相关的通路包括PI3K-Akt信号通路、AMPK信号通路、HIF-1信号通路等;(3)分子对接实验和分子动力学模拟表明,芦丁与5个核心靶点均有良好且稳定的结合;(4)体内实验结果显示,脊髓损伤后使用芦丁进行药物干预处理可以降低脊髓的含水量,减少炎性因子和氧化应激因子的产生.上述结果证实,芦丁可以通过多个靶点以及多条通路在治疗脊髓损伤中发挥抗炎和抗氧化作用.

HPLC法同时测定杠板归不同部位中5种成分的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定杠板归不同部位(茎、叶、根)中5种成分的含量。方法采用Luna?-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为320 nm,柱温为30℃,测定杠板归不同部位中绿原酸、咖啡酸、芦丁、阿魏酸、槲皮素的含量。结果绿原酸、咖啡酸、芦丁、阿魏酸、槲皮素分别在0.046~4.6μg/mL,0.212~21.2μg/mL,0.055~5.5μg/mL,0.084~8.4μg/mL,0.114~11.4μg/mL范围内质量浓度与峰面积呈线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率为97.65%~102.09%,RSD为1.76%~2.44%。不同部位中5种成分含量差异较大,绿原酸和咖啡酸2个成分在叶中含量高,且远远高于根和茎中的含量;芦丁和阿魏酸主要存在于茎和根中,叶中未检测到;槲皮素在茎中含量最高,叶中次之,根中最低。结论建立的HPLC方法准确可靠、重复性好、专属性强,可用于杠板归不同部位中5个成分含量的同时测定。

不同发酵工艺对浙产六神曲中5种成分含量变化的影响

目的建立同时测定浙产六神曲中苦杏仁苷、香草酸、芦丁、阿魏酸、槲皮素的高效液相色谱法,并考察不同发酵条件对浙产六神曲中5个成分含量变化的影响。方法对同一批次六神曲样品,通过设置不同的发酵条件(温度为25℃、30℃、35℃,相对湿度为60%、70%、80%、90%)进行发酵并分别取样。色谱柱为Chrom Core AR C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈为流动相A,0.08%磷酸水溶液为流动相B,进行梯度洗脱;流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长220 nm。分析苦杏仁苷、香草酸、芦丁、阿魏酸、槲皮素5种成分的变化。结果苦杏仁苷、香草酸、芦丁、阿魏酸、槲皮素在选定质量浓度范围内线性关系、重复性、稳定性良好,平均加样回收率均达到要求。浙产六神曲最佳发酵工艺参数为温度30℃,相对湿度80%,发酵时间为3 d。结论本研究建立的方法操作简便、结果准确、重复性及稳定性均较好,可用于浙产六神曲的质量控制。浙产六神曲最佳发酵工艺参数为温度30℃,相对湿度80%,发酵时间为3 d。

聚芦丁合成实验在高分子材料课程中的教学实践

本文尝试将聚芦丁合成实验与《高分子材料》专业课教学进行有机融合,旨在培养学生对高分子合成有一个全面的认识,提高学生的学科素养。

高精料日粮添加芦丁对奶牛血清生化、免疫、抗氧化指标及瘤胃发酵参数的影响

试验旨在研究高精料日粮中添加芦丁对奶牛血清生化指标、免疫指标、抗氧化指标及瘤胃发酵参数的影响。采用单因素完全随机设计,将12头健康和泌乳状况相近的荷斯坦泌乳中期奶牛随机分为2组,每组6头。饲喂精粗比为60∶40的高精料日粮,一组诱导奶牛亚急性瘤胃酸中毒(SARA组),另一组在SARA组基础上添加1.8 g/d芦丁(芦丁组)。试验期为75 d,其中预试期15 d,正试期60 d。于正试期第60天晨饲前采集血液和瘤胃液样本,测定血清生化、抗氧化、免疫指标和瘤胃发酵参数。结果表明:与SARA组相比,芦丁组奶牛血清生化指标没有显著变化(P>0.05),血清超氧化物歧化酶(SOD)活性显著提高(P<0.05),血清总抗氧化能力(T-AOC)有提高趋势(0.05<P<0.10),丙二醛(MDA)含量降低(P>0.05),血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)含量显著提高(P<0.05)。与SARA组相比,芦丁组奶牛瘤胃乳酸(LD)含量降低,总挥发性脂肪酸(TVFA)含量和pH提高(P>0.05)。综上所述,高精料日粮中添加芦丁能提高瘤胃pH,增强机体抗氧化、免疫能力,在一定程度能缓解SARA对奶牛机体代谢损伤。

饲粮添加不同水平芦丁对肉鸡肉品质和抗氧化功能的影响

[目的]本试验旨在研究饲粮添加不同水平芦丁对肉鸡肌肉品质和抗氧化功能的影响。[方法]试验选取1日龄健康且体重相近的雄性肉鸡256只,随机分为4组,每组8个重复,每个重复8只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中分别添加250、500和1 000 mg·kg^(-1)芦丁。试验期第42天,每个重复取1只接近平均体重的肉鸡屠宰取样测定肉鸡肉品质、水分分布、脂肪酸含量、抗氧化等相关指标。[结果]与对照组相比,饲粮中添加250、500和1 000 mg·kg^(-1)芦丁显著降低了胸肌宰后24和48 h的滴水损失(P_(T)<0.05),添加250与500 mg·kg^(-1)芦丁分别降低胸肌的蒸煮损失与剪切力值(P_(T)<0.05),添加500和1 000 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了胸肌pH_(24 h)值(P_(T)<0.05),添加500 mg·kg^(-1)芦丁显著降低了肉鸡胸肌中自由水的弛豫时间(T_(22))值(P_(T)<0.05);饲粮中芦丁的添加量与pH_(24 h)值、24和48 h的滴水损失呈线性或二次相关(P_(T)<0.05)。在脂肪酸含量方面,饲粮中添加250和500 mg·kg^(-1)芦丁显著增加了肉鸡胸肌中硬脂酸含量(P_(T)<0.05),添加500和1 000 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了肉鸡胸肌中花生一烯酸和多不饱和脂肪酸(PUFA)含量(P_(T)<0.05),同时500 mg·kg^(-1)芦丁组胸肌中棕榈油酸和二十四碳一烯酸含量显著增加(P_(T)<0.05),1 000 mg·kg^(-1)芦丁组胸肌中γ-亚油酸含量显著降低(P_(T)<0.05)。在抗氧化能力方面,饲粮中添加500 mg·kg^(-1)芦丁显著降低了胸肌中MDA含量(P_(T)<0.05),提高了T-SOD活性(P_(T)<0.05),并显著增加胸肌中Nrf2和SOD mRNA的表达量(P_(T)<0.05),250 mg·kg^(-1)芦丁能够显著提高SOD mRNA的表达量(P_(T)<0.05)。饲粮中芦丁的添加量与MDA含量、Nrf2和GSH-Px mRNA表达量呈线性或二次相关(P<0.05)。[结论]肉鸡饲粮中添加芦丁可通过增强肌肉的保水性,提高胸肌pH_(24 h)值并调节肉鸡胸肌中脂肪酸比例从而提高了肉鸡肉品质,这与芦丁激活肌肉中Nrf2信号通路并增强其抗氧化能力有关。在本试验条件下,芦丁的适宜添加量为500 mg·kg^(-1)。

饲粮添加芦丁对断奶仔猪回肠形态结构和屏障功能的影响

旨在研究饲粮添加芦丁对断奶仔猪肠道形态结构、黏膜屏障、抗氧化功能、炎症和细胞凋亡等方面的影响。试验选取28日龄健康且体重相近的断奶仔猪16头,随机分为2组,每组8个重复,每个重复1头猪。对照组饲喂基础饲粮,试验(芦丁)组在基础饲粮中添加500 mg/kg芦丁,试验期14 d。结果表明:与对照组相比,饲粮添加500 mg/kg芦丁对仔猪回肠形态结构无显著影响(P>0.05),但显著提高了仔猪回肠黏膜中过氧化氢酶(CAT)活性(P<0.05),显著提高了B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)、超氧化物歧化酶1(SOD1)、超氧化物歧化酶2(SOD2)以及闭合小环蛋白-1(ZO-1)mRNA的表达量(P<0.05),显著提高了闭合蛋白(Occludin)mRNA和蛋白的表达量(P<0.05),显著降低了肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)mRNA的表达量(P<0.05)。结果提示:饲粮添加500 mg/kg芦丁可提高断奶仔猪抗氧化能力和肠屏障功能,减少炎症发生和细胞凋亡,这可能是其抑制断奶仔猪腹泻的重要原因之一。

芦丁调控miR-155和HMGB1/RAGE通路对糖尿病视网膜病变大鼠炎性反应的影响

目的:探讨芦丁对糖尿病视网膜病变大鼠炎性反应的影响及其机制。方法:采用腹腔注射链脲佐菌素的方法制备糖尿病大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组(0.9%氯化钠溶液灌胃)和芦丁低、中、高剂量组[分别以50、100、150 mg/(kg·d)芦丁灌胃],并取正常大鼠作为对照组(0.9%氯化钠溶液灌胃),每组20只,持续给药12周后,比较各组大鼠视网膜组织中伊凡斯兰渗透量、神经节细胞凋亡和微小RNA(miR)-155、高迁移率族蛋白1(HMGB1)、晚期糖基化终产物受体(RAGE)mRNA表达水平,以及炎症因子水平。结果:对照组、模型组和芦丁低、中、高剂量组中伊凡斯兰渗透量分别为(1.61±0.31)μg/g、(12.84±1.24)μg/g、(9.85±0.62)μg/g、(6.80±0.53)μg/g、(2.87±0.51)μg/g,神经节细胞凋亡指数分别为(1.09±0.45)%、(30.96±2.50)%、(24.65±2.48)%、(18.61±1.41)%、(8.36±0.54)%,miR-155表达水平分别为(0.38±0.03)、(1.92±0.15)、(1.55±0.12)、(1.09±0.10)、(0.55±0.05),HMGB1 mRNA表达水平分别为(0.26±0.03)、(0.77±0.05)、(0.68±0.04)、(0.57±0.04)、(0.34±0.03),RAGE mRNA表达水平分别为(0.18±0.02)、(0.67±0.04)、(0.58±0.03)、(0.45±0.03)、(0.23±0.02)。模型组和对照组比较,伊凡斯兰渗透量、凋亡指数和miR-155、HMGB1、RAGE mRNA水平均升高(均P<0.05);芦丁低、中、高剂量组中上述指标呈剂量依赖性降低(均P<0.05)。模型组、对照组与芦丁低、中、高剂量组,芦丁各组的炎症因子水平低于模型组(均P<0.05)。结论:芦丁可保护糖尿病大鼠视网膜损伤,延缓视网膜炎症效应,其作用机制可能与抑制miR-155和HMGB1/RAGE通路有关。

改性瓜尔胶/乳清蛋白/芦丁复合膜的制备、表征及其对双孢菇贮藏品质的影响

以改性瓜尔胶和乳清蛋白为原料复合成膜,研究发现当两者质量配比为1∶0.6时,综合复合膜的机械性能、阻隔性能和热稳定性能表现最优,此时膜的拉伸强度为39.92MPa,断裂伸长率为31.13%,热分解温度为147.85℃,通过两者间的复合可有效弥补单体膜的缺陷。另外,扫描电子显微镜和红外光谱的测试结果表明该膜具有光滑、透明的特征,且两者间的相容性好。通过向膜中添加芦丁,制备出改性瓜尔胶/乳清蛋白/芦丁复合膜(G’/W-R),结果表明,芦丁的加入可赋予膜良好的抗氧化性。同时,将复合膜应用于保鲜实验时,发现G’/W-R可有效延缓双孢菇褐变并维持较高的硬度,抑制呼吸速率,呼吸峰值仅为2.8×10^(3)mL/(kg·h),而整体质量损失率仅为对照组的25%。同时该处理有效抑制了过氧化氢、超氧阴离子自由基及丙二醛水平,有利于维持细胞膜的完整性和稳定性;终止自由基链反应,维持过氧化物酶、超氧化物歧化酶以及过氧化氢酶的活性,有效清除菇体中多余的活性氧,延长其保鲜期。

饲粮添加芦丁对肉仔鸡免疫功能和空肠形态、黏膜屏障、抗氧化功能的影响

[目的]前期研究发现饲粮添加250~1000 mg·kg^(-1)芦丁可提高21日龄肉鸡生长性能,本试验进一步研究芦丁对其肠道形态结构、黏膜屏障和抗氧化功能的影响。[方法]试验选取1日龄健康且体重(43±1)g相近的雄性AA肉鸡256只,随机分为4组,每组8个重复,每个重复8只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中分别添加250、500和1000 mg·kg^(-1)芦丁。21日龄时每个重复取1只肉鸡屠宰取样测定肠道屏障功能、免疫炎症、抗氧化等相关指标。[结果]与对照组相比,饲粮添加250 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了肉仔鸡脾脏器官指数、空肠黏膜总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC),以及空肠黏膜中闭合小环蛋白1(ZO-1)、闭锁蛋白(OCLN)、核因子E2相关因子2(Nrf 2)和SOD mRNA的表达水平,同时显著降低了血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和D-乳酸(D-LA)水平、空肠黏膜TNF-αmRNA的表达水平(P T<0.05);与对照组相比,饲粮添加500 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了肉仔鸡法氏囊器官指数、空肠VH/CD值,空肠黏膜T-SOD活性和T-AOC,空肠黏膜中B细胞淋巴瘤基因2(Bcl-2)、ZO-1和Nrf 2 mRNA的表达水平,并显著降低了血清TNF-α水平(P T<0.05);与对照组和250、500 mg·kg^(-1)芦丁组相比,饲粮添加1000 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了血清中免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白G(IgG)含量(P T<0.05);与500 mg·kg^(-1)芦丁组相比,饲粮添加250 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了肉仔鸡脾脏器官指数、血清脂多糖(LPS)水平和OCLN mRNA表达水平,并显著降低了血清D-LA水平(P T<0.05);与1000 mg·kg^(-1)芦丁组相比,饲粮添加250 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了肉仔鸡脾脏器官指数,同时降低了空肠黏膜TNF-αmRNA的表达水平(P T<0.05);与1000 mg·kg^(-1)芦丁组相比,饲粮添加500 mg·kg^(-1)芦丁显著提高了肉仔鸡空肠黏膜中Bcl-2 mRNA的表达水平,并显著降低了血清中LPS水平(P T<0.05)。[结论]饲粮添加250 mg·kg^(-1)或500 mg·kg^(-1)芦丁均可以促进免疫器官发育,增强免疫能力和改善肉仔鸡空肠形态结构,提高空肠屏障功能,其对肉仔鸡空肠抗氧化功能的改善作用可能与激活Nrf2信号通路有关。本试验条件下推荐芦丁适宜添加剂量为250 mg·kg^(-1)。

3种中药成分对玉米赤霉烯酮致小鼠肝脏损伤的缓解作用

【目的】探究中药对玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEA)致动物肝损伤的缓解作用。为临床研发新中兽药和饲料添加剂提供理论依据。【方法】将63只8周龄昆明雌鼠随机分为7组,每组9只。对照组,上、下午灌胃生理盐水各1次;ZEA组,上午灌胃20 mg/kg ZEA,下午灌胃生理盐水;槲皮素、山奈酚、芦丁和成分复方组为中药成分治疗组,上午灌胃20 mg/kg ZEA,下午分别灌胃50 mg/kg槲皮素、50 mg/kg山奈酚、100 mg/kg芦丁、100 mg/kg成分复方(V_((槲皮素))∶V_((山奈酚))∶V_((芦丁))=1∶2∶2);阳性对照组,上午灌胃20 mg/kg ZEA,下午灌胃100 mg/kg维生素E;每只每次均灌胃0.2 mL,连续7 d。于第8天称量各组小鼠体重,眼球摘除采血,分离血清,脱颈处死小鼠,剥离肝脏并称重,计算肝脏指数,检测血清肝脏功能、抗氧化酶活性和肝脏炎症指标。【结果】生长发育检测结果显示,与对照组相比,ZEA组小鼠体重降低、肝脏重量升高(P<0.05);与ZEA组相比,芦丁和成分复方组体重升高(P<0.05)。血清肝脏功能检测结果,与对照组相比,ZEA组血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性均升高(P<0.05);与ZEA组相比,中药成分和维生素E治疗组各个酶活性均降低(P<0.05)。肝脏氧化应激检测结果显示,与对照组相比,ZEA组肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性、谷胱甘肽(GSH)含量和总抗氧化能力(T-AOC)均降低(P<0.05),丙二醛(MDA)和LDH含量升高(P<0.05);与ZEA组相比,中药成分和维生素E治疗组SOD、CAT活性、GSH含量和T-AOC均升高(P<0.05),MDA和LDH含量降低(P<0.05)。炎症因子检测结果,与对照组相比,ZEA组机体肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6含量升高、IL-10含量降低(P<0.05);与ZEA组相比,中药成分和维生素E治疗组机体TNF-α、IL-1β和IL-6含量降低(P<0.05),槲皮素和维生素E治疗组肝脏IL-10含量升高(P<0.05)。【结论】3种中药成分槲皮素、山奈酚、芦丁和维生素E均可缓解ZEA致小鼠肝脏的损伤,山奈酚效果最佳。

饲粮中添加芦丁对努比亚山羊体尺指标、瘤胃发酵和器官发育的影响

为研究饲粮中添加芦丁对努比亚山羊体尺指标、瘤胃发酵和器官发育的影响,试验选择2月龄健康、体重相近的努比亚山羊母羊36只,随机分为3组,每组12只羊。分别饲喂基础饲粮(对照组)、基础饲粮+25 mg/kg芦丁(试验Ⅰ组)和基础饲粮+50 mg/kg芦丁(试验Ⅱ组)。试验预饲期10 d,正试期60 d。饲养结束后进行屠宰。结果表明:(1)与对照组相比,正试期第10天试验Ⅰ组和Ⅱ组山羊管围分别显著提高5.57%(P<0.05)、6.93%(P<0.05),正试期第60天试验Ⅱ组管围和体高分别显著降低6.54%(P<0.05)、8.23%(P<0.05),试验Ⅱ组体长相对于Ⅰ组显著提高3.69%(P<0.05)。(2)与对照组相比,试验Ⅰ组山羊丙酸和总挥发性脂肪酸浓度分别显著降低42.14%(P<0.05)、21.62%(P<0.05)。试验Ⅱ组乙酸和总挥发性脂肪酸浓度分别显著降低29.23%(P<0.05)、29.43%(P<0.05)。(3)与对照组相比,试验Ⅰ组山羊瘤胃产琥珀酸丝状杆菌、溶纤维丁酸弧菌、乳酸菌和黄色瘤胃球菌基因相对表达量分别提高271.57%(P<0.01)、1686.09%(P<0.05)、280.00%(P<0.01)和16226.73%(P<0.01),试验Ⅱ组白色瘤胃球菌、溶纤维丁酸弧菌、栖瘤胃普雷沃菌、乳酸菌和黄色瘤胃球菌基因相对表达量分别提高130.56%(P<0.01)、381.74%(P<0.05)、188.00%(P<0.01)、546.00%(P<0.01)、25624.75%(P<0.01),嗜淀粉瘤胃杆菌基因相对表达量降低57.89%(P<0.05)。试验Ⅰ组与试验Ⅱ组嗜淀粉瘤胃杆菌、产琥珀酸丝状杆菌、白色瘤胃球菌、溶纤维丁酸弧菌、栖瘤胃普雷沃菌和乳酸菌基因相对表达量对比差异极显著(P<0.01)或显著(P<0.05),黄色瘤胃球菌基因相对表达量对比差异不显著(P>0.05)。(4)与对照组相比,试验Ⅰ组山羊心脏重量、瓣胃重量和指数分别显著降低14.50%(P<0.05)、24.00%(P<0.05)、20.00%(P<0.05),试验Ⅱ组肝脏重量和指数分别提高12.54%(P<0.01)、14.95%(P<0.01),瓣胃重量和指数分别显著降低29.41%(P<0.05)、28.57%(P<0.05)。(5)与对照组相比,试验Ⅰ组山羊十二指肠VH/CD和回肠VH分别显著降低0.13%(P<0.05)、15.42%(P<0.05),试验Ⅱ组十二指肠VH、CD、回肠VH、VH/CD分别显著降低29.19%(P<0.05)、20.92%(P<0.05)、18.23%(P<0.05)、26.14%(P<0.05),空肠CD显著提高15.63%(P<0.05)。综上所述,本试验条件下,饲粮中添加高剂量芦丁可以增加努比亚山羊部分瘤胃菌群的数量,影响瘤胃发酵,对胃肠道发育产生负面影响。

^(60)Co-γ辐照提升苦荞黄酮提取效率研究

为探究^(60)Co-γ辐照对苦荞麸皮中黄酮类物质提取效率的影响,本研究采用不同剂量(0、6、12、18、24、30 k Gy)的^(60)Co-γ对苦荞麸皮进行辐照预处理,通过热回流法提取苦荞黄酮,比较^(60)Co-γ辐照对苦荞黄酮提取得率、主要黄酮类物质单体含量和总含量、抑菌活性及苦荞麸皮微观结构的影响。结果表明,6~30 k Gy剂量的^(60)Co-γ辐照预处理可提高苦荞黄酮提取得率,其中12 k Gy组提取得率最高,为6.97%,较对照组的3.27%提高3.70个百分点;6~30 k Gy剂量的^(60)Co-γ辐照预处理可提高提取物中芦丁含量,12、18、30 k Gy剂量的预处理可提高提取物中烟花苷含量,其中12 k Gy组含量最高,芦丁和烟花苷含量分别为84.52、3.92 mg·g^(-1),较对照组的53.12、3.54 mg·g^(-1)分别提高59.11%与10.73%;6~24 k Gy剂量的^(60)Co-γ辐照预处理可提高苦荞主要黄酮总含量,其中12 k Gy组最高,为89.40 mg·g^(-1),较对照组的57.95 mg·g^(-1)提高54.27%。此外,^(60)Co-γ辐照可有效破坏苦荞麸皮组织结构,有助于苦荞黄酮的溶出;6~18 k Gy剂量的^(60)Co-γ辐照预处理增强了提取物对大肠杆菌的抑菌活性,其中18 k Gy剂量组的抑菌活性最强,抑菌圈直径达9.93 mm;12~24 k Gy剂量的^(60)Co-γ辐照预处理增强了提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌活性,其中12 k Gy剂量组的抑菌活性最强,抑菌圈直径达10.30 mm。本研究可为苦荞黄酮的高效提取提供研究基础与技术参考。

不同工艺槐米茶中芦丁冲泡溶出率比较的研究

本研究采用紫外分光光度法对12款槐米茶冲泡液中的芦丁含量进行了测定,研究了不同制作工艺对槐米茶的芦丁冲泡溶出率的影响。结果表明:12款槐米茶经过5次冲泡后,芦丁总溶出率在4.06%~13.13%。不同制作工艺对槐米茶中芦丁的冲泡溶出率有较大影响,芦丁整体溶出率由高到低分别是:熏蒸杀青10 min、晒干、微波炉低火模式处理10 min;熏蒸杀青10 min、晒干、炒黄;挤压破坏槐米结构,大火炒制杀青4 min,继而炒干、炒黄;90℃直接烘干。

肺热清解煮散质量标准研究

目的建立肺热清解煮散的质量标准。方法采用薄层色谱法对制剂中桑白皮、野菊花和地龙进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定制剂中阿魏酸、桑皮苷A、芦丁的含量,色谱柱为Hypersil ODS2 C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),阿魏酸、桑皮苷A、芦丁测定的流动相分别为乙腈-0.3%磷酸水溶液(23∶77,V/V)、乙腈-0.1%磷酸水溶液(10∶90,V/V)、乙腈-0.1%磷酸水溶液(34∶66,V/V),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为316 nm(阿魏酸)、238 nm(桑皮苷A)、280 nm(芦丁),进样量为5μL。结果样品中桑白皮、野菊花、地龙的薄层色谱分离效果良好,特征斑点显色清晰,且阴性对照无干扰。阿魏酸、桑皮苷A、芦丁的质量浓度分别在0.0320~0.3200 mg/mL、0.0083~0.0500 mg/mL、0.0520~0.3100 mg/mL范围内与峰面积积分值线性关系良好(r≥0.9997,n=6);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均低于3.0%(n=6);平均加样回收率分别为99.39%,99.52%,99.63%,RSD分别为2.72%,1.08%,0.70%(n=6)。结论该方法操作简便、重复性好、结果准确,可用于肺热清解煮散的质量控制。

ZIF-67@AB-8的制备及对芦丁的吸附研究

黄酮类化合物主要存在于自然界的植物中,属于植物的次生代谢产物,黄酮类化合物对治疗心脑血管疾病有着显著的效果,因此对黄酮类化合物的分离利用显得尤其重要。目前,大孔吸附树脂和金属有机框架材料被认为是吸附分离黄酮类化合物的有效材料。本研究利用大孔吸附树脂AB-8为模板,制备了ZIF-67,并以芦丁为标准样品,研究了ZIF-67@AB-8对黄酮类化合物的吸附效果,对吸附条件进行了优化,考察了ZIF-67和树脂的比例以及吸附时间对黄酮类化合物吸附效率的影响。结果表明:以3 g二甲基咪唑与3 g六水硝酸钴制备的ZIF-67@AB-8(2 g)对芦丁具有良好的吸附效果。在浓度为80 mg/L的芦丁溶液中,加入0.025 g ZIF-67@AB-8并在摇床中以220r/min的转速充分搅拌8 h,其对芦丁的吸附效率高达97.76%。研究结果为黄酮化合物的分离开辟了新的途径。

水溶性芦丁/羟丙基-β-环糊精包合物的制备及其抗氧化活性、稳定性研究

芦丁具有多种药理活性,为解决其水溶性差导致的应用缺陷。本文通过溶剂蒸发法制备了芦丁/羟丙基-β-环糊精(Hydroxypropyl-beta-cyclodextrin,HPCD)包合物,分析了包合物的结构、溶解性、抗氧化活性和稳定性。结果表明,HPCD能够有效包埋芦丁,包合物中二者摩尔比为1:1,其包封率和载药率分别为89.33%、26.67%,包合物在水中的溶解度是游离芦丁的51倍。芦丁被包合后,其晶体衍射峰完全消失,提高了最大失重速率温度(266℃到318℃),且固态包合物呈现出不规则的片状结构,表明HPCD成功包合了芦丁。包合物清除DPPH和ABTS^(+)自由基的IC_(50)显著低于芦丁(P<0.05),并且其铁离子还原能力是芦丁的1.2倍。稳定性实验表明,自然光处理6 d后游离芦丁和包合芦丁保留率分别为31.80%、66.70%,50℃热处理15 d后保留率分别为66.91%、87.38%。因此HPCD不仅提高了芦丁的水溶性,也提升了其抗氧化活性和稳定性,使芦丁可在不同环境中发挥其保健功能。

反相高效液相色谱法测定绞股蓝50%总皂苷提取物中芦丁和槲皮素的含量

目的建立绞股蓝50％总皂苷提取物中芦丁与槲皮素的含量测定方法。方法采用高效液相色谱仪，使用TURNER Kromasil^TN C18色谱2（250mm×4．6mm，5μm），流动相为0．4％磷酸水溶液-甲醇-乙腈进行梯度洗脱，流速为0．5ml·min^-1。检测波长为360nm；柱温为40℃。结果芦丁在0．37～3．70μg范围内有良好的线性关系，r=0．9999。槲皮素在0．05—0．50μg范围内有良好的线性关系，r=0，9999；芦丁的平均加样回收率为99．2％，RSD为1．69％；槲皮素的平均加样回收率为99．1％，RSD为2．21％。结论该方法简便快捷，准确度高。