外周血CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞对老年脓毒症患者预后的预测价值

目的 探讨外周血CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞对老年脓毒症患者预后的预测价值。方法 采用回顾性队列研究,选取2015年2月—2016年8月西安交通大学第二附属医院重症医学科住院的年龄≥60岁的脓毒症患者75例,依据ICU结局分为存活组(n=54)及死亡组(n=21)。收集患者一般资料,诊断脓毒症当天进行急性生理和慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)评分及序贯器官衰竭(SOFA)评分,检测外周血液标本TNF-a、IL-10及CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞。结果 死亡组平均年龄大于存活组(P<0.05)。死亡组较存活组有更高的APACHEⅡ评分、SOFA评分及休克比例,差异均有统计学意义(P<0.05)。死亡组外周血CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞、TNF-a、IL-10较存活组更高(P<0.05)。存活组的耐药菌感染比例低于死亡组,但差异无统计学意义(P>0.05)。无论单因素还是对一系列协变量进行调整的多因素Logistic回归分析均显示,较高的外周血CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞比例与高的ICU死亡率相关(OR, 1.21;95%CI, 1.10~1.33)(OR, 1.30;95%CI, 1.07~1.58);APACHEⅡ评分预后预测的AUC为0.78(95%CI 0.67~0.90),将最适诊断界点22.5分作为预测死亡可能的临界点,敏感性和特异性分别为61.9%和75.2%。SOFA评分预后预测的AUC为0.80(95%CI,0.68~0.92),将最适诊断界点9.5分作为预测死亡可能的临界点,敏感性和特异性分别为71.4%和77.8%。外周血CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞预后预测的AUC为0.91(95%CI,0.83~0.99),将最适诊断界点60.2%作为预测死亡可能的临界点,敏感性和特异性分别为81.0%和92.6%。结论 老年脓毒症患者外周血高CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞比例与ICU死亡率增加相关,一定程度上可用于评估此类人群的病情严重程度及预测预后。

CD28^(+)、CD56^(+)在多发性骨髓瘤患者中的表达及其对预后的评估价值

目的分析CD28^(+)、CD56^(+)在多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达及其对预后的评估价值。方法纳入103例MM患者,于入院时检测其CD28、CD56表达情况。随访2年统计预后结果,比较不同预后(存活、病死)患者资料,通过COX分析MM患者预后相关因素,分析CD28^(+)、CD56^(+)与MM患者国际分期系统(R-ISS)分期、β2微球蛋白(β2-MG)的相关性,绘制DCA曲线分析CD28^(+)、CD56^(+)预测MM患者预后的价值。结果103例MM患者2年内共19例病死,84例存活,2年存活率为81.55%(84/103)。COX分析显示,R-ISS分期Ⅲ期、β2-MG、CD28^(+)、CD56^(+)均为MM患者病死的影响因素(HR>1,P<0.05)。Kendall's tau-b相关性分析显示,CD28^(+)、CD56^(+)均与MM患者R-ISS分期呈正相关(P<0.05);Spearson相关性分析显示,CD28^(+)表达与MM患者β2-MG水平呈正相关(P<0.05),CD56^(+)表达与MM患者β2-MG水平无相关(P>0.05)。DCA曲线分析显示,当高风险阈值为0.0~0.31时,CD28^(+)、CD56^(+)表达预测MM患者预后净受益率大于0,有临床意义,净受益率最大值为0.184。结论CD28^(+)、CD56^(+)在MM患者中表达异常,对预后有一定预测价值。

CD28在初诊多发性骨髓瘤患者中的表达及其与肿瘤负荷和临床预后的相关性

目的研究CD28在初诊多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达及其与肿瘤负荷、临床预后的相关性。方法以回顾性分析为法,观察对象为2021年1月至2023年1月淮南市第一人民医院的89例初诊MM患者。所有患者均经流式细胞术对其骨髓标本予以免疫表型分析,参考CD28表达水平分为CD28^(+)(研究组,n=30)与CD28-(对照组,n=59)。对比两组患者的实验室特征、CD28表达水平、遗传学异常发生率和近期疗效,分析CD28表达对无进展生存期(PFS)的影响。结果两组患者的年龄、性别构成比、白蛋白、乳酸脱氢酶、肌酐、血红蛋白、钙水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);研究组β2微球蛋白表达水平、克隆浆细胞比率、骨髓浆细胞(BMPC)比率、国际分期系统(ISS)-Ⅲ期患者比率分别为(6.61±1.14)mg/L、(21.68±5.82)%、(41.83±8.62)%、73.33%,均明显高于对照组[(5.68±1.07)mg/L、(10.97±4.12)%、(27.01±7.14)%、47.46%],差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组患者1q21扩增发生率、≥2个遗传学异常的高危病例发生率分别为40.00%、26.67%,均明显高于对照组(18.64%、8.47%),差异均有统计学意义(P<0.05);两组13q14-、IgH重排、17p-发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。化疗4个周期之后,研究组患者的治疗总有效率为60.00%,明显低于对照组(88.14%),差异有统计学意义(P<0.05)。中位随访10个月,研究组患者中位PFS为(10.72±1.23)个月,明显低于对照组[(14.08±1.34)个月],差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析显示,CD28^(+)表达及≥2个遗传学异常、ISSⅢ期、血红蛋白<60 g/L、年龄≥60岁并非影响MM患者PFS的危险因素;多因素分析显示,影响MM患者PFS的独立危险因素为CD28^(+)表达、诱导效果<PR。结论CD28^(+)与初诊MM患者临床特征、肿瘤负荷及预后有着密切联系,CD28^(+)可辅助评估初诊MM患者的预后。

CD4^(+)CD28^(−)T细胞的特点及其在疾病中的作用研究进展

在健康的年轻人体内,传统CD4^(+)T细胞的CD28表达高达97.5%,而研究发现在老年人、慢性炎症和持续感染的患者体内CD4^(+)T细胞的CD28阳性率显著下降,甚至不足50%,即出现CD4^(+)CD28^(−)T细胞积累。CD4^(+)CD28^(−)T细胞是一群独特的CD4^(+)T细胞亚群,本文综述了该亚群的表型特征、功能特点及其在慢性病毒感染、自身免疫病和心血管疾病中的作用,为CD4^(+)CD28^(−)T细胞相关疾病的治疗和预后改善提供了新策略。

外周血T细胞亚群PD-1和CD28参考范围和影响因素

目的建立健康成人外周血T细胞亚群PD-1和CD28表达参考区间,并探究其与常规实验室指标的相关性。方法收集2022年11月至2023年1月在本院体检的120例健康体检者外周血,用流式细胞术检测淋巴细胞中CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+)T细胞及其表面PD-1和CD28的表达,CD8^(+)T根据CD28和PD-1表达不同细分6个亚群,对这些指标的比例和绝对值建立参考范围。T细胞各亚群与常规指标进行相关性分析。结果健康成人外周血PD-1(%)表达率:CD4>CD3;CD28(%):CD4>CD3>CD8;PD1和CD28阳性计数:CD3>CD4>CD8。女性CD4^(+)(%)显著低于男性;年龄与CD8和CD3计数以及CD28计数负相关,与CD8^(+)CD28^(+)上PD-1表达呈正相关;红细胞以及血小板计数与CD8相关亚群上PD-1hi和PD-1int的表达和计数呈正相关,但和CD4^(+)(%)呈负相关。CD8^(+)CD28-亚群PD-1的表达和计数与ALB呈正相关;CD8^(+)CD28^(+)亚群PD-1计数和LDL呈正相关。结论本文建立了健康成人外周血T细胞亚群PD-1和CD28表达参考区间,并发现性别、年龄、红细胞、血小板、血脂和营养状态等对T细胞亚群以及PD-1和CD28表达均可造成影响。

隔药饼灸对环磷酰胺诱导免疫抑制兔共刺激分子CTLA-4、4-1BB、CD28的影响

目的探讨隔药饼灸对环磷酰胺诱导免疫抑制兔共刺激分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、4-1BB、CD28的影响。方法选择大耳白兔32只,随机分为空白组、模型组、艾条灸组和隔药饼灸组,每组8只。模型组、艾条灸组和隔药饼灸组予环磷酰胺诱导免疫抑制模型。模型制备成功次日,艾条灸组和隔药饼灸组分别予艾条灸和隔药饼灸,隔日1次,共10次。空白组和模型组不予艾灸。艾条灸组和隔药饼灸组末次干预次日,空白组和模型组同时间,采集腹腔静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清CTLA-4、4-1BB、CD28;腹腔静脉取血后,摘取脾脏和肝脏,免疫组化法检测脾脏和肝脏组织CTLA-4、4-1BB蛋白表达。结果模型组血清CTLA-4、CD28水平均高于空白组,血清4-1BB水平低于空白组(P均<0.05);与模型组比较,艾条灸组和隔药饼灸组血清CTLA-4、CD28水平均降低,血清4-1BB水平均升高(P均<0.05);与艾条灸组比较,隔药饼灸组血清CTLA-4、CD28水平均降低,血清4-1BB水平升高(P均<0.05)。模型组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均高于空白组,4-1BB阳性表达均低于空白组(P均<0.05)。与模型组比较,艾条灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均降低(P均<0.05),肝脏组织4-1BB阳性表达升高(P<0.05),而脾脏组织4-1BB阳性表达升高不明显(P>0.05);隔药饼灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均降低(P均<0.05),4-1BB阳性表达均升高(P均<0.05)。艾条灸组与隔药饼灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4、4-1BB阳性表达比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论隔药饼灸能够通过调节共刺激分子CTLA-4、4-1BB、CD28而改善环磷酰胺诱导免疫抑制兔的免疫功能,其效果优于艾条灸。

CD28、CD117、CXCL12在多发性骨髓瘤患者髓外浸润及其预后中的应用价值

目的探讨CD28、CD117、趋化因子配体12(CXCL12)与多发性骨髓瘤患者髓外浸润的关系及对预后的评估价值,以期为临床早期制订干预方案提供参考。方法选取96例2020年5月至2022年5月在该院就诊的多发性骨髓瘤患者作为研究对象,根据是否发生髓外浸润分为发生组、未发生组,比较两组临床资料及CD28、CD117、CXCL12表达情况,分析CD28、CD117、CXCL12表达与多发性骨髓瘤患者髓外浸润的关系;随访6个月后,比较不同预后患者CD28、CD117、CXCL12表达情况,并分析其对多发性骨髓瘤预后的评估价值。结果本研究96例多发性骨髓瘤患者中发生髓外浸润38例(发生组),未发生58例(未发生组)。发生组CD28、CD117、CXCL12阳性患者比例高于未发生组(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,CD28、CD117、CXCL12阳性均为多发性骨髓瘤患者髓外浸润的独立危险因素(P<0.05)。随访6个月后,有21例多发性骨髓瘤患者死亡,且死亡患者入院时CD28、CD117、CXCL12阳性患者比例高于生存患者(P<0.05);多发性骨髓瘤CD28、CD117、CXCL12阳性患者的死亡风险分别为阴性患者的7.091、29.231、20.143倍(P<0.05)。结论CD28、CD117、CXCL12阳性可用于评估多发性骨髓瘤患者髓外浸润情况,为临床早期预测预后提供参考,以针对性地展开后续治疗,改善预后。

CD8^(+)CD28^(-)T细胞对单倍型造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病的影响

目的:探讨CD8^(+)CD28^(-)T细胞对单倍型造血干细胞移植(haplo-HSCT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响。方法:回顾性分析60例行haplo-HSCT的血液病患者移植后CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数与aGVHD的关系,并比较不同CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数组间慢性移植物抗宿主病(cGVHD)、感染及预后的差异。结果:60例行haplo-HSCT患者中有40例发生aGVHD,发生率为66.67%,中位发生时间为32.5(20-100)天。Haplo-HSCT后30天,aGVHD组CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数显著低于无aGVHD组(P=0.03)。ROC曲线表明移植后30天CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数在一定程度上可预测aGVHD的易感性。移植后30天低细胞计数组(CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数<0.06/μl)患者的aGVHD发生率显著高于高细胞计数组(CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数≥0.06/μl,P=0.011)。多因素Cox回归分析进一步验证了移植后30天CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数是aGVHD发生的独立风险因素,低细胞计数组aGVHD的发生风险是高细胞计数组的2.222倍(P=0.015)。不同CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数组间cGVHD、真菌感染、EB病毒感染、巨细胞病毒感染的发生无统计学差异。不同CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数组的总生存率、非复发相关死亡率、复发率没有显示出明显的统计学差异。结论:行haplo-HSCT后30天CD8^(+)CD28^(-)T细胞延迟重建的患者更易发生aGVHD,并且CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数在一定程度上可预测其易感性。单倍型造血干细胞移植后CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数与cGVHD、真菌感染、EB病毒感染、巨细胞病毒感染无关,且与移植后的生存预后无显著相关。

外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期宫颈癌患者腹腔镜根治术后预后的预测价值

目的分析外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期宫颈癌(CC)患者腹腔镜根治术后预后的预测价值。方法招募2018年9月至2020年9月于儋州市人民医院接受腹腔镜根治术治疗的早期CC患者204例,根据患者术后随访期间预后情况分为预后不良组(43例)和预后良好组(161例)。比较两组临床资料。采用Spearman秩相关分析外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平与CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平的相关性。采用多因素logistic回归分析早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良的预测价值。结果预后不良组CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)水平,术后切缘阳性占比以及术中宫旁浸润占比高于预后良好组,CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,早期CC患者外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平与CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平呈负相关(r_(s)=-0.478,P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,较高的CEA、CA125、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平是促进早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良发生的独立危险因素(P<0.05),较高的CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平是抑制早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良发生的独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平能有效预测早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良(P<0.05),两项指标联合可进一步提高预测效能[AUC(95%CI)=0.939(0.898~0.979),P<0.001],灵敏度和特异度分别为86.00%、88.20%。结论外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平与早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良有关,二者能有效预测早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良。

Th1/Th2、CD28、ICOS、PD-1和CTLA-4在桥本甲状腺炎患者外周血中的表达及与甲状腺相关实验室指标的相关性

目的探讨辅助性T淋巴细胞1与辅助性T淋巴细胞2比值(Th1/Th2)、CD28、可诱导共刺激分子(ICOS)、程序性死亡受体1(PD-1)和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)在桥本甲状腺炎(HT)患者外周血中的表达及与甲状腺相关实验室指标的相关性。方法收集2021年在该院门诊或住院治疗的HT患者40例为HT组,另选择同期健康体检者40例为对照组。采用全自动化学发光免疫分析仪检测血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)水平,采用酶联免疫吸附试验检测血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4和IL-10水平,采用流式细胞仪检测外周血中Th1与Th2细胞,以及CD3^(+)CD4^(+)T淋巴细胞表面共信号分子CD28、ICOS、PD-1、CTLA-4水平。结果HT组血清FT4和TPOAb水平均明显高于对照组,TSH、FT3水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。HT组外周血中Th1细胞及其相关细胞因子IFN-γ和IL-2水平,以及Th1/Th2明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。HT组外周血CD3^(+)CD4^(+)T淋巴细胞表面CD28、ICOS和PD-1水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组CTLA-4水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。FT4水平与Th1细胞、Th1/Th2水平呈正相关(P<0.05);TSH水平与Th1细胞、Th1/Th2和IL-2水平呈负相关(P<0.05);TPOAb水平与Th1细胞、Th1/Th2、IFN-γ、IL-2、CD28及ICOS水平呈正相关(P<0.05)。结论HT患者外周血中Th1细胞及其相关细胞因子IFN-γ和IL-2水平较健康体检者均明显上调,其CD3^(+)CD4^(+)T淋巴细胞表面CD28、ICOS和PD-1的表达也均明显上调。Th1细胞及其相关细胞因子,以及CD28、ICOS和PD-1可能在HT的发病机制中发挥了重要作用。

外周血Hcy、CD28、CD152水平对儿童中枢神经系统血管炎的诊断及预后评估中的价值

目的探讨外周血同型半胱氨酸(Hcy)、CD28、CD152水平对儿童中枢神经系统血管炎(CNSV)的诊断及预后评估中的应用价值,为早期诊断及预后预测提供参考。方法选取2019年1月至2022年1月该院60例CNSV患儿作为观察组,观察组予以免疫治疗,治疗6个月。另选取同期体检健康者60例作为对照组。检测观察组入院时、对照组体检时外周血指标水平及观察组治疗1个月、3个月及6个月后外周血指标水平,分析其对儿童CNSV的诊断价值及复发的影响因素,并分析外周血Hcy与CD28、CD152交互效应对儿童CNSV复发的影响。结果入组后观察组外周血Hcy、CD28、CD152水平均高于对照组,联合诊断儿童CNSV的曲线下面积为0.912,较单独指标高,差异有统计学意义(P<0.05);复发患儿疾病分期为活动期比例及治疗6个月后外周血Hcy、CD28、CD152水平均高于未复发患儿,差异有统计学意义(P<0.05);疾病分期、治疗6个月后外周血Hcy、CD28、CD152均为儿童CNSV复发的独立危险因素(P<0.05);治疗6个月后Hcy与CD28、Hcy与CD152间无相乘交互效应(P>0.05);治疗6个月后Hcy与CD28、治疗6个月后Hcy与CD152同时暴露时复发风险分别是非暴露的6.535、6.171倍。结论外周血Hcy、CD28、CD152对儿童CNSV有较高诊断价值,且均为复发的独立危险因素,治疗6个月后Hcy与CD28、Hcy与CD152同时暴露可增加儿童CNSV复发的危险性,存在相加交互效应。

B7-H5/CD28H在恶性肿瘤发生发展中的研究进展

B7-H5/CD28H是新近发现的免疫抑制信号通路,通过调节T细胞和NK细胞功能、细胞黏附以及血管生成等方式在恶性肿瘤的发生发展过程中发挥着作用。而且,B7-H5与CD28H表达水平与恶性肿瘤的预后密切相关。本文就B7-H5和CD28H的结构、功能及其表达水平与恶性肿瘤的预后关系进行综述,以期探究该信号通路在恶性肿瘤免疫治疗中的应用前景。

重型血友病A患儿血清炎性因子、外周血T细胞表面CD28与CEC、vWF的关系研究

目的探讨重型血友病A患儿血清炎性因子、CD28与循环内皮细胞(CEC)、血管性血友病因子(vWF)的关系,为临床诊治该疾病提供依据。方法选取郑州大学附属儿童医院2020年6月至2022年6月收治的50例重型血友病A患儿作为观察组,根据患儿是否出现急性关节出血分为出血组21例和未出血组29例,另选取同期在本院行常规体检的50例儿童作为对照组。比较两组研究对象CD28、白介素-6、白介素-1β、CEC、vWF表达水平,并分析观察组上述指标之间的相关性。结果观察组外周血T细胞表面CD28水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),血清白介素-6、白介素-1β、CEC、vWF水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);出血组外周血T细胞表面CD28水平低于未出血组,差异有统计学意义(P<0.05),血清白介素-6、白介素-1β、CEC、vWF水平高于未出血组,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,CEC、vWF与CD28呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05),与白介素-6、白介素-1β呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清炎性因子、CEC、vWF促使了重型血友病A病情发展,外周血T细胞表面CD28则抑制重型血友病A发展。

慢性再生障碍性贫血CD8^+T细胞CD28表达与中医辨证分型关系的探讨

目的探讨慢性再生障碍性贫血 (chronicaplasticanemia ,CAA)患者外周血CD8+T细胞CD2 8分子的表达与中医辨证分型的关系。方法采用流式细胞仪技术 ,测定门诊和住院CAA患者 4 5例、健康对照人群 2 4名的外周血CD8+T细胞CD2 8分子的表达水平 ,从免疫学角度讨论其与中医分型关系。结果(1)CAA患者的CD8、CD2 8、CD8+CD2 8+表达水平及CD8+CD2 8+/CD8+CD2 8- 均高于健康对照组 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。 (2 )CAA肾阴虚患者CD2 8、CD8+CD2 8+表达水平及CD8+CD2 8+/CD8+CD2 8- 均高于肾阳虚患者 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。结论 (1)CAA患者外周血共刺激分子CD2 8异常高表达 ,提示CD2 8失调可能在CAA免疫发病中起重要作用。 (2 )CAA患者外周血CD2 8、CD8+CD2 8+的表达水平及CD8+CD2 8+/CD8+CD2 8- 可以作为CAA辨证分型的参考指标 ,肾阴虚患者的免疫紊乱较肾阳虚患者严重。

鼠抗人CD28分子单克隆抗体的研制及生物学特性研究

目的制备鼠抗人CD28分子的单克隆抗体(mAb)，研究其在T细胞的活化、增殖及信号传导中的作用。方法以小鼠淋巴瘤细胞转染人CD28基因的细胞株(CD28-T)为免疫原，采用B淋巴细胞杂交瘤技术，获取分泌特异性mAb的杂交瘤细胞株。以体内诱生法生产腹水，并以免疫亲和层析法对其纯化。以快速定性试纸法鉴定mAb的Ig亚类，竞争抑制法分析mAb识别的抗原表位，3H-TdR掺入法研究mAb对T细胞的刺激效应。结果成功地获得了5株分泌特异性抗人CD28 mAb的杂交瘤细胞株，鉴定的1株(克隆18G8)属IgG2a，腹水效价(流式细胞仪分析)达1:2 400以上。该mAb能60％阻断标准鼠抗人CD28抗体与相应抗原的结合，提示其识别的抗原表位与标准mAb不完全相同。mAb 18G8可取代B7-1分子介导的协同刺激信号，促进人外周血T细胞增殖(SI=7)。结论18G8是1株功能性mAb，具有重要的研究和应用价值。

寻常疣和跖疣患者外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子CD28,CD40的检测

目的探讨寻常疣和跖疣患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及共刺激分子CD28,CD40的表达情况。方法采用流式细胞仪检测实验组60例(寻常疣、跖疣患者各30例)和健康对照组30例的外周血T淋巴细胞亚群和CD28,CD40分子在淋巴细胞上的表达水平。结果寻常疣组、跖疣组与健康对照组相比:外周血CD4+T淋巴细胞(34.57%,35.39%,42.02%)明显减少,差异有统计学意义(P<0.01);CD4+/CD8+比值(1.38,1.44,1.72)降低,差异有统计学意义(P<0.05);淋巴细胞上CD28的表达(52.80%,51.87%,37.41%)明显增加,差异有统计学意义(P<0.01),CD40的表达(12.88%,11.94%,15.82%)减少,差异有统计学意义(P<0.05)。而寻常疣和跖疣两组间,外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子CD28,CD40的表达,差异无统计学意义(P>0.05)。实验组患者的疣体数量和外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子CD28,CD40的变化均无相关性(P>0.05)。结论寻常疣和跖疣患者体内存在T淋巴细胞亚群改变和共刺激分子CD28,CD40表达异常,可能与其免疫功能紊乱和病程慢性化有关。

慢性肾小球肾炎患者外周血Th1/Th2及CD28^+细胞的变化及其临床意义

目的探讨慢性肾小球肾炎(CGN)患者外周血Th1/Th2及CD28+细胞百分率的变化在疾病进程中可能的细胞免疫学机制。方法采用流式细胞术检测50例CGN患者及30名正常人(对照组)外周血Th1/Th2和CD28+细胞的百分率,用SPSS 16.0软件对试验结果进行统计分析。结果与对照组比较,CGN患者外周血CD3+CD4+细胞百分率和CD4/CD8比值明显降低(P<0.05),Th1和Th2细胞百分率差异无统计学意义(P>0.05),但Th1/Th2比值明显增高(P<0.05);CGN患者CD28+、CD4+CD28+细胞百分率明显减少(P均<0.01)。结论 CGN患者体内T细胞免疫功能紊乱和活化受限,细胞免疫功能低下,Th1和Th2细胞失衡,通过对CGN患者外周血Th1/Th2及CD28+细胞的检测,有助于了解患者的细胞免疫状态,为临床诊断和免疫治疗提供参考依据。

5株鼠抗人CD28单克隆抗体的研制及生物学特性的研究

目的:制备鼠抗人CD28分子功能性单克隆抗体,研究其对T细胞活化、增殖及信号转导等方面的生物学效应。方法:以天然高表达CD28分子的人多发性骨髓瘤细胞株U266和小鼠淋巴瘤细胞转人CD28基因细胞株CD28-T分别作为免疫原和检测细胞株,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行单抗的研制;以快速定性试纸法鉴定单抗亚类;腹水诱生法和免疫亲和层析法进行单抗的制备和纯化;经间接免疫荧光法分析单抗对不同细胞膜表面CD28分子的识别;采用竞争抑制法分析单抗识别的抗原位点;利用3H-TdR掺入法分析单抗对PBTC的刺激效应和免疫荧光法分析PBTC活化前后的表型变化。结果:成功获得5株鼠抗人CD28功能性单克隆抗体,分别命名为2D5、2F5、3B6、3F8和8G8,其中2D5为IgG2a亚类,其余均为IgG1亚类;流式细胞仪分析结果显示,5株单抗均能良好识别CD28-T、U266、XG1和Jurkat细胞表面的CD28分子;竞争抑制试验表明,2D5和8G8能完全阻断标准抗人CD28单抗与U266膜CD28分子的结合,其余3株为部分阻断;3H-TdR掺入法实验结果表明,单抗8G8联合激发型CD3单抗能明显促进PBTC的增殖,刺激指数为7.4,活化细胞CD4、CD25、ICOS、41BB及OX40分子的表达上调。结论:5株单抗均为抗人CD28单克隆抗体,具有重要的基础研究及潜在的临床应用价值。

人外周血CD8^+T细胞CD28、CD56及CD57表达水平的老年性改变

目的 :通过对健康老年人与青年人外周血CD8+T细胞CD2 8、CD5 6及CD5 7表达水平的比较性研究 ,探讨免疫衰老的细胞学机制。方法 :采用三色免疫荧光标记流式细胞术分析青年组 ( 2 0 - 35岁 )与老年组 ( 6 0 - 75岁 )外周血CD8+CD2 8+、CD8+CD5 6 +及CD8+CD5 7+T细胞水平。结果 :老年组外周血CD8+CD2 8+T细胞明显低于青年组 ,阳性百分率分别为 34 0 7± 5 2 9和 49 84± 7 43(P <0 0 5 ) ;而老年组CD8+CD5 6 +T细胞及CD8+CD5 7+T细胞均明显高于青年组 ,前者阳性百分率分别为 6 6 0± 2 40和 2 10± 0 35 ,后者阳性百分率分别为 41 82± 6 0 1和2 2 89± 2 80 (P <0 0 5 )。结论 :老年人CD8+T细胞CD2 8、CD5 6及CD5 7的表达率均随年龄增长有明显改变 ;CD2 8表达下降可能是引起免疫系统功能降低的重要原因 ,而CD5 6、CD5 7表达水平的增加则可能是机体对细胞免疫功能下降的一种代偿性适应。

骨髓间充质干细胞通过上调CD8^+CD28^-T细胞抑制T细胞的增殖

本研究旨在探讨CD8+ CD2 8- T细胞在间充质干细胞 (MSC)抑制T细胞增殖中的作用。应用尼龙毛柱分离T淋巴细胞 ,再经CD8磁珠分选出CD8+ T淋巴细胞 ;用植物血凝素 (PHA)刺激与或未与MSC共培养 3天的CD8+ T细胞 ,应用MTT法测定T细胞的增殖 ;应用流式细胞术分别检测与或未与MSC共培养 8天的CD8+ T细胞亚群的变化及用PHA刺激与或未与MSC共培养 3天的CD8+ T细胞亚群的变化。结果表明 ,MSC抑制PHA刺激引起的CD8+ T细胞的增殖 ,且这种抑制作用是剂量依赖性的 ;流式细胞术结果显示 ,与未经MSC处理的CD8+ T细胞相比 ,MSC显著上调共培养 8天的CD8+ T细胞中的CD8+ CD2 8- 亚群 ,及经PHA作用 72小时后的CD8+ T细胞中的CD8+ CD2 8- 亚群。结论 :MSC通过上调CD8+ CD2 8- T细胞发挥抑制作用。