Amivantamab联合lazertinib一线治疗EGFR敏感突变晚期NSCLC:评MARIPOSA研究

1文献来源Cho BC,Felip E,Spira AI,et al.Amivantamab plus lazertinib versus osimertinib as first⁃line treatment in patients with EGFR⁃mutated,advanced non⁃small cell lung cancer(NSCLC):primary results from MARIPOSA,a phaseⅢ,global,randomized,controlled trial[J].Ann Oncol,2023,34(2S):S1306.

非小细胞肺癌EGFR基因少见突变P733L对第1代和第3代EGFR-TKI敏感性的研究

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因少见突变P733L对第1代和第3代EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)的敏感性。方法:通过四唑盐比色法和平板克隆实验分析EGFR L858R和P733L肺癌细胞对第1代和第3代EGFR-TKI的敏感性;通过Transwell实验分析第1代和第3代EGFR-TKI对EGFR L858R和P733L肺癌细胞迁移的抑制作用;通过检测凋亡蛋白分析第1代和第3代EGFR-TKI促进EGFR L858R和P733L肺癌细胞凋亡的作用。结果:第1代和第3代EGFR-TKI对EGFR L858R和P733L细胞的增殖、克隆形成和细胞迁移都有抑制作用。与EGFR野生型肺癌细胞相比,第1代和第3代EGFR-TKI处理后,EGFR L858R和P733L细胞的EGFR激酶活性受到抑制,细胞凋亡明显增加。结论:EGFR P733L突变细胞对第1代和第3代EGFR-TKI的敏感性与EGFR L858R突变细胞的敏感性相似,本研究为EGFR基因少见突变从EGFR-TKI治疗中获益提供了实验证据。

EGFR siRNA序列的筛选及其对HepG2细胞活性的影响

目的构建EGFR shRNA重组真核表达载体,并筛选抑制效果最好的EGFR shRNA序列。方法应用在线工具设计人EGFR siRNA序列,采用限制性内切酶BamHI和HindIII切割真核表达质粒pcDNA3.1(+),构建三种人EGFR的siRNA干扰序列载体(psilencer 4.1-CMV neo-EGFR siRNA)。将重组质粒载体转化大肠杆菌DH5α感受态并筛选阳性克隆,通过DNA测序鉴定重组质粒。应用脂质体lipo2000将三种人EGFR siRNA干扰序列载体转染到HepG2细胞,通过荧光显微镜观察转染效率,实时定量PCR检测EGFR mRNA表达水平,MTT法检测细胞活性。结果Psilencer 4.1-CMV neo-EGFR siRNA重组质粒被成功克隆。EGFR shRNA-1、EGFR shRNA-2和EGFR shRNA-3敲低EGFR mRNA的效率分别是80%、60%和70%以上。shRNA-2和shRNA-3使细胞活性分别下降50%(P<0.05),但shRNA-1对细胞活性无明显影响(P>0.05)。结论重组psilencer 4.1-CMV neo-EGFR siRNA质粒可下调肝癌细胞株EGFR表达水平和细胞活性。EGFR shRNA-3较EGFR shRNA-1和shRNA-2对HepG2细胞的抑制作用更显著。

贝伐珠单抗联合阿法替尼治疗EGFR突变的NSCLC对血清VEGF的影响及预后分析

目的探究在表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)突变的非小细胞肺癌(Nonsmall Cell Lung Cancer,NSCLC)患者中应用贝伐珠单抗联合阿法替尼的治疗效果以及对血清血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)及预后的影响。方法随机选取滨州市中心医院于2019年6月—2021年6月收治的70例EGFR突变的NSCLC患者为研究对象,采用随机数表法分为单一组(阿法替尼治疗)与联合组(阿法替尼联合贝伐珠单抗治疗),各35例。比较两组患者的近期效果、肿瘤标志物水平、血管生长因子水平、生存预后情况以及不良反应发生情况。结果联合组患者客观缓解率为68.57%,高于单一组的45.71%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.777,P<0.05)。治疗后,两组患者的细胞角蛋白19片段、糖类抗原125、癌胚抗原水平、血清碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子以及血小板衍生生长因子水平均有所降低,且联合组低于单一组,差异有统计学意义(P均<0.05)。经过30个月的随访发现,联合组患者的中位无进展生存时间、中位总生存时间长于单一组,差异有统计学意义(P均<0.05)。两组患者各项不良反应发生率对比,差异无统计学意义(P均>0.05)。结论贝伐珠单抗联合阿法替尼治疗EGFR突变的NSCLC患者的疗效显著,可明显改善患者的预后,为患者提供了更好的治疗选择和生存机会。

稳定过表达犬EGFR蛋白的MDCK细胞的建立及其对凋亡和细胞周期的影响

表皮生长因子受体(EGFR)在许多实体肿瘤中过度表达,建立稳定过表达犬EGFR蛋白的MDCK细胞株,有利于为研究犬或人类肿瘤疾病提供良好的细胞模型和研究基础。首先制备目的片段以构建EGFR基因过表达载体,与慢病毒包装载体共同转染至293T细胞中,48 h后提取上清液经纯化获得EGFR基因过表达慢病毒液。将其转染至MDCK细胞中,经嘌呤霉素筛选和单细胞克隆后观察感染效率,RT-qPCR和Western Blot、间接免疫荧光分别检测基因及蛋白的表达,建立EGFR蛋白过表达MDCK细胞株。使用流式细胞仪分别检测过表达及对照细胞株的细胞凋亡和细胞周期。犬EGFR基因位于18号染色体,由编码跨膜糖蛋白的30个外显子组成。经反应体系,PCR产物交换入线性化表达载体,获得了阳性转化子8个,大小为738 bp。所获EGFR基因过表达慢病毒滴度为3.5×10^(8 )TU/mL。转染MDCK细胞后在荧光显微镜下观察荧光效果显著,经检测EGFR基因及其蛋白在细胞中的表达量显著升高。间接免疫荧光试验显示,EGFR在细胞中表达明显增强。过表达细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率显著上升,且在G2/M期发生阻滞。成功建立一株稳定的犬EGFR过表达MDCK细胞株,犬EGFR的过表达催化了细胞分裂,使DNA复制加快,同时刺激了细胞凋亡。

EGFR-TKIs治疗晚期非小细胞肺癌的研究进展

肺癌是我国及世界各国发病率和死亡率较高的恶性肿瘤之一。在过去的几十年里,预测靶向治疗的致癌驱动基因的识别,推动了肺癌治疗从组织学向分子亚型的彻底转变,从而建立了精确医学的新模式。表皮生长因子受体(EGFR)基因激活突变是2004年在肺癌中发现的第一个分子预测生物标志物,随着EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)的研制开发,晚期非小细胞肺癌进入了一个全新的靶向治疗时代。随着EGFR-TKIs类药物的迭代更新,药物的有效性、安全性以及相关的不良反应、耐药以及相互作用都是值得临床深入研究的内容。本文针对上述内容做一综述。

参莲胶囊联合奥希替尼对EGFR突变的晚期非小细胞肺癌(气阴两虚证)的疗效分析

[目的]探讨参莲胶囊联合奥希替尼对EGFR突变的晚期非小细胞肺癌(气阴两虚证)的疗效分析。[方法]选取2021年4月—2022年4月本院收治的表皮生长因子受体(EGFR)突变的晚期非小细胞肺癌患者110例,按照随机数表法分2组,对照组(55例)给予奥希替尼,研究组(55例)在对照组基础上加用参莲胶囊。比较两组治疗效果、用药安全性、欧洲癌症研究和治疗组织肿瘤患者生存质量量表(EORTCQLQ-LC43)评分以及癌胚抗原(CEA),细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1),糖类抗原125(CA125)。[结果]研究组总有效率高于对照组(P<0.01)。治疗后,两组患者血清CEA,CA125,CYFRA21-1水平明显低于治疗前(P<0.01),研究组血清CEA,CA125和CYFRA21-1水平明显低于对照组(P<0.05)。研究组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。治疗后研究组和对照组患者角色功能、生理功能、认知功能、社会功能、情感功能、总健康状况评分均较治疗前明显增加(P<0.05),治疗后研究组角色功能、生理功能、认知功能、社会功能、情感功能、总健康状况评分高于对照组(P<0.05)。[结论]参莲胶囊联合奥希替尼对EGFR突变的晚期非小细胞肺癌(气阴两虚证)的治疗效果较好,并具有安全性,还可以有效降低血清CEA,CA125和CYFRA21-1水平,提高患者生活质量,在临床上有着广阔的应用前景。

EGFR-TKI单药与传统化疗方案治疗进展期NSCLC安全性的网状meta分析

目的对一至三代表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)与传统化疗方案治疗进展期非小细胞肺癌(NSCLC)的安全性进行比较,同时采用网状meta分析方法评价三代EGFR-TKI与一、二代之间的安全性。方法检索PubMed、Embase、Cochrane图书馆、中国生物医学文献数据库、中国知网、万方数字化期刊全文数据库、维普数据库,检索时限均为从建库至2020年12月,搜集EGFR-TKI单药对比铂类为基础培美曲塞化疗方案的随机对照试验(RCT)。筛选文献、提取资料,并用Cochrane系统评价偏倚风险评估工具对纳入研究的RCT进行偏倚风险评估,采用RevMan 5.3软件、STATA 15.1软件进行meta分析。结果meta分析结果显示,试验组(EGFR-TKI单药)、对照组(培美曲塞联合铂类)患者的腹泻[相对危险度(RR)=2.16,95%置信区间(CI)0.742~6.297,P>0.05]、便秘(RR=0.44,95%CI 0.187~1.039,P>0.05)发生率比较差异均无统计学意义。试验组白细胞减少发生率、中性粒细胞减少发生率、贫血发生率、血小板减少发生率、食欲不振发生率、恶心发生率均低于对照组(RR=0.21,95%CI 0.10~0.41,P<0.001;RR=0.21,95%CI 0.08~0.55,P<0.001;RR=0.26,95%CI 0.13~0.51,P<0.001;RR=0.39,95%CI 0.24~0.64,P<0.001;RR=0.39,95%CI 0.28~0.55,P<0.001;RR=0.30,95%CI 0.24~0.37,P<0.001);试验组皮疹发生率高于对照组(RR=9.63,95%CI 6.30~14.72,P<0.001)。对一至三代EGFR-TKI的不良反应进行网状meta分析结果显示,三代EGFR-TKI奥希替尼组白细胞减少发生率要高于一、二代EGFR-TKI,贫血发生率与埃克替尼组相似,但高于吉非替尼组和阿法替尼组(均P<0.05)。结论一至三代EGFR-TKI的血液系统、消化系统不良反应发生率均低于传统化疗方案;三代EGFR-TKI与一、二代相比,在白细胞减少及贫血发生率方面各具优势。

FLAURA2研究:EGFR突变阳性晚期NSCLC一线治疗模式新探索

肺癌是我国发病率和死亡率最高的肿瘤,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)在肺癌中占比85%左右。在所有NSCLC患者中,仅约30%初诊时为可切除的早中期NSCLC[1]。自从2004年人表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)驱动基因被发现,NSCLC的分子分型治疗模式诞生,真正意义上颠覆了NSCLC既往的治疗方法。EGFR突变(EGFR mutated,EGFRm)作为NSCLC的常见驱动基因之一,在亚洲晚期肺腺癌患者中的发生率高达51.4%[2]。

宫颈癌中p16、Ki67和EGFR的表达及其临床意义

目的研究在宫颈癌中p16、Ki67、EFGR的表达与临床意义。方法选取2018年2月—2023年2月常州市肿瘤医院收治的70例宫颈癌患者,通过免疫组织化学染色法检测所有患者的p16、Ki67、EFGR表达情况,并分析其临床意义。结果在收治的70例患者中,p16阳性表达率为48.6%,Ki67阳性表达率为67.1%,EFGR阳性表达率为81.4%;宫颈癌患者体内p16、Ki67和EFGR所呈现出的表达情况同患者在病理层面的分级信息、临床分期信息及淋巴结转移信息密切关联(P<0.05)。结论临床收治的宫颈癌患者p16、Ki67、EFGR所呈现出的表达特征同肿瘤所具有的进展状况及远期预后存在密切关系,其所具有的阳性表达水平特点与病理层面的分级以及临床分期、机体淋巴结转移状况关联性较强。

四川地区肺腺癌手术标本EGFR突变现状与临床病理特征分析

肺癌为全球发病率第二高的癌症,其死亡率居所有癌症首位[1],晚期非小细胞肺癌中使用EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗后的无进展生存期比化疗后更长[2]。肺腺癌是非小细胞肺癌的常见组织学类型,EGFR突变在肺腺癌中最常见,但不同种族及地域突变种类和频率不同。本研究采用扩增阻滞突变系统(amplification refretory mutation system,ARMS)检测EGFR突变情况,探讨德阳地区EGFR突变与肺腺癌临床病理特征的关系。

某院非小细胞肺癌治疗中EGFR-TKI使用情况分析

目的 分析医院近三年表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)在非小细胞肺癌(NSCLC)治疗中的使用情况,为临床安全合理用药提供参考。方法 应用限定日剂量(DDD)法回顾性统计分析2020~2022年医院EGFR-TKI的销售金额、用药频度(DDDs)、限定日费用(DDC)及排序比等情况。结果 三年来我院EGFR-TKI的总销售额和DDDs稳步增长,一代EGFR-TKI的销售额、DDDs和占比逐年走低,以奥希替尼为代表的三代EGFR-TKI同期指标大幅上升,且排序比同步性良好。结论 我院近三年EGFR-TKI使用较为合理,其用药趋势与文献报道的情况基本相符,但仍需加强医保适应症审批制度,确保临床用药的安全、经济和有效。

Lupalbigenin通过EGFR信号通路抑制非小细胞肺癌NCI-H1975细胞增殖

目的:探究Lupalbigenin是否通过表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)信号通路诱导非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)系中NCI-H1975细胞增殖。方法:主要采用了MTT法检测细胞毒性;用细胞形态学观察、细胞迁移实验、细胞克隆形成实验观察及检测细胞增殖能力;通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测Lupalbigenin对EGFR和其下游MAPK信号通路蛋白ERK及其磷酸化水平及其凋亡相关Cleaved PARP、P21、CDK4、CDK6、CyclinD1和CyclinA2以及抗凋亡蛋Bcl-2的影响。结果:结果显示Lupalbigenin在NCI-H1975细胞系上IC_(50)值为3.246μmol/L,并且呈浓度依赖性抑制细胞增殖;细胞形态学观察结果显示与空白组比较,10μmol/L Lupalbigenin实验组处理细胞24 h导致细胞核固缩、细胞质凝聚及细胞凋亡显著增加;迁移实验和集落形成实验结果显示,5μmol/L LG能够显著抑制细胞迁移和菌落形成能力;Western Blot检测结果表明,Lupalbigenin在较短时间内对EGFR/ERK蛋白磷酸化表达有显著的抑制作用。同时,Lupalbigenin处理后,Cleaved PARP和P21蛋白的表达水平显著上调,CDK4、CDK6、CyclinD1和CyclinA2以及Bcl-2蛋白的表达水平显著下降。结论:综上,Lupalbigenin可以调控EGFR及其下游相关蛋白的表达,从而抑制NCI-H1975细胞的增殖。

基于EGFR/AKT和JAK2/STAT3通路研究α-常春藤皂苷单独或与顺铂联用对非小细胞肺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨α-常春藤皂苷(α-Hed)诱导非小细胞肺癌(NSCLC)细胞凋亡的作用靶点及其潜在机制,明确α-Hed与顺铂(DDP)联用后对相应的靶点蛋白表达的影响。方法:采用CCK-8法检测不同浓度α-Hed处理后NSCLC细胞A549、H1299和PC-9的存活率,采用AnnexinⅤ-FITC/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率,采用WB法检测细胞中C-caspase-3和Bcl-2蛋白的表达。通过网络药理学相关方法筛选α-Hed的潜在靶点,利用分子对接法分析其结合效果,WB法检测靶点蛋白的表达。通过CCK-8法、细胞集落形成实验和WB法检测α-Hed与DDP联用对NSCLC细胞的抑制作用。结果:给药24和48 h后,10、15和20μmol/Lα-Hed可以显著抑制NSCLC细胞增殖活力(均P<0.01);与对照组相比,20μmol/Lα-Hed处理后细胞凋亡率显著升高(P<0.01);α-Hed可上调NSCLC细胞中C-caspase-3的表达(P<0.05),下调Bcl-2的表达(P<0.05)。网络药理学和分子对接筛选出结合亲和力小于-5 kcal/mol的靶点AKT1、STAT3、EGFR和JAK2。WB法检测结果显示,α-Hed处理后A549、H1299细胞中EGFR、p-AKT/AKT、p-STAT3/STAT3和JAK2蛋白的表达均明显下调(均P<0.05)。α-Hed与DDP联用后,更显著地抑制NSCLC细胞的增殖(P<0.01),进一步下调EGFR、p-AKT/AKT、p-STAT3/STAT3和JAK2蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:α-Hed通过下调EGFR和JAK2的表达抑制STAT3和AKT的磷酸化,诱导NSCLC细胞凋亡,与DDP联用后其抑制效果增强,EGFR/AKT和JAK2/STAT3通路也进一步被抑制。

基于高分辨率T2WI的影像组学对直肠癌EGFR表达的预测价值

目的:探讨基于高分辨率T2WI的影像组学对直肠癌EGFR表达状态的预测价值。方法:回顾性分析经术后病理确诊且在接受治疗前行MRI检查的208例直肠癌患者的临床及影像资料,根据EGFR表达水平不同将患者分为阳性组和阴性组。在高分辨率T2WI图像上勾画病灶的三维容积兴趣区(VOI)并提取影像组学特征,将208例患者分为训练集(n=145)和测试集(n=63),并对特征进行降维,将降维后的特征建立支持向量机(SVM)、逻辑回归(LR)、随机森林(RF)及线性判别分析(LDA)四种分类器学习模型,分别绘制训练集和测试集的受试者工作特征(ROC)曲线,并获得曲线下面积(AUC)。结果:208例患者中,EGFR阳性表达99例(47.6%)。二元Logistic回归分析显示示低分化和淋巴结转移是EGFR阳性表达的独立危险因素(P<0.05)。训练集与测试集的患者在性别、年龄、TN分期及分化程度差异均无统计学意义(P>0.05)。4种影像组学模型均有一定的预测效能,其中SVM模型训练集与测试集的诊断效能均为最高,在训练集和测试集中的AUC分别为0.803、0.725。结论:基于高分辨率T2WI图像构建的影像组学模型对直肠癌EGFR表达状态具有一定预测价值。

卡瑞利珠单抗联合培美曲塞和奈达铂治疗EGFR/ALK野生型晚期非鳞状NSCLC的临床观察

目的观察卡瑞利珠单抗联合培美曲塞和奈达铂治疗表皮生长因子受体(EGFR)和间变性淋巴瘤激酶(ALK)野生型晚期非鳞状非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效和安全性。方法回顾性收集2021年8月至2023年5月于重庆医科大学附属第一医院就诊的92例EGFR/ALK野生型晚期非鳞状NSCLC患者资料,根据治疗方案的不同分为奈达铂组(46例)和卡铂组(46例)。奈达铂组患者给予注射用卡瑞利珠单抗+注射用奈达铂+注射用培美曲塞二钠;卡铂组患者给予注射用卡瑞利珠单抗+卡铂注射液+注射用培美曲塞二钠。两组均以21 d为1个周期,所有患者至少完成2个周期的治疗。观察两组患者的近期疗效和不良反应发生情况,分析影响患者无进展生存期(PFS)的因素。结果两组患者的客观缓解率、疾病控制率、中位PFS、3~5级治疗相关不良事件(TRAE)发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。奈达铂组患者的1~2级肾脏和泌尿系统TRAE、心慌、心包积液发生率均显著低于卡铂,恶心、呕吐和食欲降低发生率显著高于卡铂组(P<0.05)。患者的性别、年龄、有无吸烟史、美国东部肿瘤协作组织评分和TNM分期均不是影响患者PFS的因素(P>0.05)。结论卡瑞利珠单抗联合培美曲塞和奈达铂治疗EGFR/ALK野生型晚期非鳞状NSCLC的疗效显著,安全性较好。

尼妥珠单抗联合TP方案诱导化疗对EGFR阳性局部晚期鼻咽癌的近期疗效及其安全性

目的探讨尼妥珠单抗(NTZ)联合TP方案诱导化疗对表皮生长因子受体(EGFR)阳性局部晚期鼻咽癌的近期疗效及其安全性。方法前瞻性选取贵州省人民医院2020年1月-2022年12月收治的Ⅲ-ⅣA期鼻咽癌患者48例,采用随机数表法分为NTZ+多西他赛/白蛋白紫杉醇+顺铂(NTP)组(n=24)与多西他赛/白蛋白紫杉醇+顺铂(TP)组(n=24)。NTP组2或3个周期诱导治疗后序贯NTZ配合顺铂同步放化疗,采用免疫组化检测肿瘤组织EGFR表达水平,探究NTP组患者EGFR表达强度和尼妥珠单抗的治疗效果;比较两组诱导治疗结束后的近期疗效、肿瘤退缩率及不良反应发生情况。结果NTP组EGFR阳性表达率为100%,EGFR表达强度与联合NTZ的诱导治疗疗效相关(P<0.05);诱导治疗结束后的两组疗效比较,NTP组颈部淋巴结的客观缓解率(ORR)明显高于TP组(75.0%vs.45.8%,P=0.039),两组肿瘤原发病灶及总体(肿瘤原发病灶和颈部淋巴结)ORR比较差异无统计学意义(P>0.05);不良反应方面,NTP组白细胞减少、胃肠道反应发生率低于TP组(P<0.05),皮疹发生率高于TP组(P<0.05),两组肝功能异常、血红蛋白及血小板减少比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论鼻咽癌组织中存在不同强度的EGFR表达,EGFR表达强度较高时,联合NTZ诱导治疗临床获益更明显;NTZ联合TP诱导方案治疗对于局部晚期鼻咽癌颈部淋巴结的近期疗效和安全性较好。

DARS2调控EGFR促进膀胱癌的EMT、迁移及侵袭

目的探讨线粒体天冬氨酰-tRNA合成酶2(DARS2)对膀胱癌细胞上皮间质转化(EMT)、迁移及侵袭的作用及其机制。方法利用TIMER和GEPIA数据库分析DARS2在膀胱尿路上皮癌(BLCA)中的表达及其与临床病理分期的关系。RT-qPCR检测人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1,膀胱癌细胞5637、T24和TCCSUP中DARS2 mRNA水平。TCCSUP细胞分为:control组(未转染)、si-NC组(转染阴性对照siRNA)、si-DARS2-1组(胞转染DARS2 siRNA-1)、si-DARS2组(转染DARS2 siRNA-2)、si-DARS2+Vector组(转染DARS2 siRNA-2+空载质粒)和si-DARS2+OE-EGFR组(转染DARS2 siRNA-2+EGFR过表达质粒)。Western blot检测DARS2,EMT标志蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin及EGFR的表达水平。Transwell侵袭和细胞划痕实验分别检测细胞侵袭能力和迁移能力。结果DARS2 mRNA水平在BLCA中显著上调,并与病理分期正相关(F=3.57,P=0.0289)。与永生化人正常膀胱上皮SV-HUC-1细胞相比,DARS2在5637、T24和TCCSUP膀胱癌细胞中表达水平显著升高(P<0.05)。与si-NC组相比,si-DARS2组中E-cadherin表达水平显著上调(P<0.05),N-cadherin、Vimentin和EGFR蛋白表达水平显著下调(P<0.05);与si-NC组相比,si-DARS2组细胞侵袭数目和细胞迁移率显著降低(P<0.01)。与si-DARS2+Vector组相比,si-DARS2+OE-EGFR组E-cadherin蛋白表达水平显著下降(P<0.05),N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平显著升高(P<0.05),细胞侵袭数目和细胞迁移率显著增加(P<0.01)。结论敲低DARS2通过下调EGFR表达抑制膀胱癌的EMT、侵袭及迁移。

埃索美拉唑联合EGFR抑制剂AG1478对胃癌细胞增殖、凋亡和自噬的影响

目的:探讨埃索美拉唑联合表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂AG1478对胃癌细胞增殖、迁移、凋亡、自噬的影响与分子机制。方法:实验分为空白对照组、埃索美拉唑组、AG1478组和埃索美拉唑联合AG1478组,采用CCK-8法、EdU增殖实验、Transwell、划痕实验、流式细胞术、细胞免疫荧光法分别检测各组人胃癌AGS、SGC-7901细胞活力、增殖、迁移、凋亡和自噬变化。Western blotting检测EGFR、c-MYC、P53、cleaved-PARP、LC3B、PI3K、AKT、P-AKT蛋白的表达情况。结果:AG1478抑制胃癌细胞活力和EGFR表达呈浓度依赖性。埃索美拉唑和AG1478能够明显降低胃癌细胞活力、抑制其增殖和迁移,诱导细胞凋亡和自噬(P<0.05),且两者联合有协同作用(P<0.05)。埃索美拉唑和AG1478均能降低AGS和SGC-7901细胞PI3K、AKT、P-AKT蛋白的表达(P<0.05),两者联合对降低P-AKT的表达有协同作用(P<0.05)。结论:埃索美拉唑联合EGFR抑制剂AG1478对胃癌细胞增殖、迁移有抑制作用,且二者协同诱导细胞凋亡和自噬,两者联合可能是一种潜在的个体化治疗策略。

调经促孕方对胚胎着床障碍性不孕症小鼠子宫内膜容受性及AREG/EGFR/HIF-1α信号通路的影响

目的观察调经促孕方对胚胎着床障碍(EID)性不孕症小鼠子宫内膜容受性及AREG/EGFR/HIF-1α信号通路的影响,探讨其改善子宫内膜容受性的可能机制。方法80只昆明小鼠于妊娠第1日随机分为正常组、模型组、黄体酮组和调经促孕方组,每组20只,黄体酮组和调经促孕方组分别予相应药物灌胃。妊娠第4日,除正常组外,其余各组小鼠皮下注射米非司酮溶液(2.3 mg/kg)建立EID性不孕症模型,正常组皮下注射等体积丙二醇。妊娠第5日,每组随机取10只小鼠,剖腹取子宫,HE染色、Masson染色观察子宫内膜组织形态,扫描电镜观察子宫内膜胞饮突形态及数量,ELISA检测子宫内膜组织双调蛋白(AREG)含量,Western blot和免疫荧光检测子宫内膜组织表皮生长因子受体(EGFR)、p-EGFR、缺氧诱导因子(HIF)-1α表达。其余小鼠灌胃至妊娠第8日取材,记录平均胚胎着床点数。结果与正常组比较,模型组小鼠平均胚胎着床点数显著减少(P<0.01),子宫内膜腺体发育不良,胶原纤维增加,血管及胞饮突数量减少,子宫内膜组织AREG含量显著降低(P<0.01),p-EGFR、HIF-1α蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,调经促孕方组小鼠平均胚胎着床点数显著增加(P<0.05),子宫内膜胶原纤维增生减少,间质内腺体、血管及胞饮突数量均明显增加,胞饮突发育饱满、均匀,子宫内膜组织AREG含量显著升高(P<0.01),p-EGFR、HIF-1α蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01),免疫荧光检测结果与Western blot一致。结论调经促孕方能促进子宫内膜腺体和血管发育,增加胞饮突数量,改善EID性不孕症小鼠子宫内膜容受性,利于胚胎黏附及植入,从而提高妊娠率,其机制可能与激活AREG/EGFR/HIF-1α信号通路,改善子宫内膜血流灌注,恢复子宫内膜相对缺氧环境有关。