老年大鼠含淫羊藿血清对成骨细胞的增殖与分化的影响

目的 观察老年雄性大鼠含淫羊藿血清对新生大鼠颅骨成骨细胞增殖和分化的影响。方法 雄性 ,19月龄SD大鼠 2 4只 ,随机分为 3组 ,分别为生理盐水组、淫羊藿低剂量组 (1g ml)、淫羊藿高剂量组 (2g ml) ,按 0 5ml 10 0g的量 ,每日两次 ,连续灌胃 1个月 ,处死前 1h ,再灌胃一次 ,取血清 (灭活 ,过滤 ) ,最终稀释成 1∶2 0、1∶4 0、1∶80加入新生大鼠颅骨成骨细胞体系 ,用MTT法检测细胞增殖 ,另外 ,分别在第 2天、第 3天、第 4天动态观察细胞生长过程 ,做生长曲线和检测分化指标ALP。结果 老年大鼠含药血清在 1∶80稀释比 ,MTT测得的OD值给药组高于对照组 (P <0 0 5 )且以高剂量组高于低剂量组 (P <0 0 5 ) ,生长曲线表现为 ,在第 2天各组无明显差别 ,从第 3天开始 ,含药血清增殖速度加快 ,仍以高剂量组最快。ALP检测结果 ,含药血清OD值高于对照组 (P <0 0 5 ) ,但不同剂量之间没有差异 (P >0 0 5 )。结论 老年雄性SD大鼠连续服用淫羊藿水提液 1个月 。

超声波法提取淫羊藿中淫羊藿苷工艺研究

对超声波辅助提取淫羊藿中淫羊藿苷进行研究,以淫羊藿苷为考察目标,系统考察了超声波频率、乙醇浓度、超声提取时间、料液比四个因素对提取效果的影响。通过正交实验初步确定最佳提取工艺条件为:90%乙醇,超声波功率900 W,提取时间60 min,料液比1∶20。

牛冷冻精液稀释液中草药配方的初步研究

通过比较以淫羊藿为主要成分的单方及复方中草药提取液对牛冷冻精液解冻后精子活率、畸形率、顶体完整率及低温保存时间的影响,以期开发牛冷冻精液中式稀释液。将三种不同配方的淫羊藿提取液分别以6.25%、12.5%、25.0%、50.0%的体积分数添加于稀释液中,制作牛颗粒冻精,利用干解冻法(40～42℃)解冻后分别检查精子活率、畸形率和顶体完整率,评定其品质。结果表明:配方三取得了较佳的冷冻效果,其提取液添加12.5%时精子冻后活率平均达到0.56,极显著高于其他各组(P<0.01);精子顶体完整率最高达到76.80%,畸形率仅14.61%,低温保存时间长达138h。配方三最有利于生产牛冷冻精液。

一测多评法同时测定不同产地淫羊藿提取物中的4种黄酮类成份

建立一测多评法同时测定淫羊藿提取物中4种黄酮类化合物的含量,并验证了该方法的准确性和可行性。采用C色谱柱,乙腈-水为流动相,检测波长270 nm,建立朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C与内标物淫羊藿苷的相对校正因子,比较分析一测多评法与外标法含量测定结果的差异性。结果显示,6批不同产地和批号的淫羊藿提取物中4种黄酮类成分采用一测多评法与外标法的实测值之间无显著性差异。

淫羊藿提取物对急性髓系白血病SCID小鼠模型细胞生物学特性的影响

目的观察淫羊藿提取物对急性髓系白血病SCID模型小鼠细胞生物学特性的影响。方法 SCID小鼠共60只,随机选取其中的50只,采用腹腔注射对数生长期HL-60细胞株于经环磷酰胺预处理的SCID小鼠以建立急性髓系白血病SCID小鼠模型,4周后随机均分为模型组、阿糖胞苷组、观察1组、2组和3组,另10只正常小鼠设为空白对照组。观察1组、2组和3组分别用淫羊藿提取物10、5、2.5 m L/kg灌胃治疗5周,模型组和空白对照组灌胃等体积0.9%氯化钠注射液5周,阿糖胞苷组尾静脉注射阿糖胞苷。在治疗第5周时尾静脉采血,采用人工法计数外周血血象及分类;采用Western blotting法检测同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)和多聚腺苷二磷酸核糖多聚酶(PARP)蛋白表达;流式细胞学检测HL-60细胞膜CD13和CD71表达率及细胞各周期细胞百分率。结果观察2组、3组外周血白细胞、淋巴细胞和HL-60细胞总数明显降低,中性粒细胞升高,PARP蛋白表达量、CD13和CD71阳性表达率明显下降,PTEN蛋白表达量增加,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组HL-60细胞均被阻滞于G_1期,且G_1和S期细胞百分率呈浓度效应关系。结论淫羊藿提取物有与阳性药阿糖胞苷相似的药理作用,在体内对急性髓系白血病HL-60细胞株有一定的抑制作用,其机制可能通过下调CD13和CD71,裂解PARP以诱导急性髓系白血病细胞凋亡,增强PTEN蛋白表达并促使细胞阻滞于G_1期,从而发挥抑制白血病细胞的增殖作用。

固骨缓释胶囊有效部位的提取纯化

目的:优选固骨缓释胶囊中淫羊藿、骨碎补有效部位提取和分离纯化工艺的最佳条件。方法:以淫羊藿苷、柚皮苷、干膏收率(%)为指标,采用正交试验法考察最佳提取和分离纯化工艺,用HPLC法测定目标成分含量。结果:最佳渗漉工艺为过3号筛的粗粉以80%乙醇浸泡12h,流速为5mL·min^(-1)(以1kg药材计),渗漉量为6倍量;最佳精制工艺为加入1.5%活性炭,调pH值为1～2,加入8%食盐。结论:该最佳纯化工艺条件得到的结果稳定,活性成分含量高,可以用于工业生产。

层次分析-均匀设计法优选淫羊藿的提取工艺

目的:优选淫羊藿的最佳提取工艺。方法:采用均匀设计法,以朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ的提取率为指标,采用HPLC和综合加权评分法(以层次分析法确定权重系数分别为:0.08,0.08,0.08,0.68,0.08)考察提取方法、提取时间、固液比及乙醇体积分数等因素的影响,确定淫羊藿的最佳提取工艺。结果:影响提取效率的主次因素为体积分数>固液比>提取时间。淫羊藿的最佳提取工艺为20倍75%的乙醇,回流提取40min,验证试验朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ平均提取率分别为87.1%、85.3%、92.6%、85.3%、91.2%。含量及提取率均较高,综合得分分别为86.4,86.7,86.4,与预测结果86.6接近。结论:优选的提取工艺提取效率高,且稳定可行,可应用于淫羊藿药材、饮片及制剂的生产。