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猪发育期牙胚釉原蛋白的分离纯化及其多克隆抗体的制备 被引量:5
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作者 徐琛蓉 杨爱玲 +3 位作者 章锦才广东省口腔医院口腔内科 殷春一 张蕴惠 张静仪 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期130-132,共3页
目的 制备猪釉质蛋白多克隆抗体 ,为釉原蛋白的检测提供条件。方法 选择 1月龄乳猪 ,分离埋于上下颌骨内的牙胚 ,刮取牙胚表面干酪样尚未完全矿化的釉质基质 ,通过盐酸胍抽提及SephadexG_2 0 0柱层析分离纯化猪发育期牙胚釉原蛋白 ,... 目的 制备猪釉质蛋白多克隆抗体 ,为釉原蛋白的检测提供条件。方法 选择 1月龄乳猪 ,分离埋于上下颌骨内的牙胚 ,刮取牙胚表面干酪样尚未完全矿化的釉质基质 ,通过盐酸胍抽提及SephadexG_2 0 0柱层析分离纯化猪发育期牙胚釉原蛋白 ,联合免疫家兔 ,抗血清经DE_5 2纤维素纯化 ,并经ELISA测定抗体效价。结果 SDS_PAGE电泳结果发现采用SephadexG_2 0 0葡聚糖凝胶过滤能达到较为理想的釉原蛋白分离纯化效果 ,用所提纯的猪釉原蛋白免疫家兔 ,成功地制得兔抗猪釉原蛋白抗血清 ,抗血清稀释达 1∶32 0 0 0时 ,采用ELISA法仍有明显的抗原抗体反应。结论 本实验成功制备得到抗釉原蛋白多克隆抗体 ,为釉原蛋白的检测提供了条件。 展开更多
关键词 发育期 牙胚釉原蛋白 分离 纯化 多克隆抗体 抗釉原蛋白多克隆抗体 DE-52纤维素
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香菇多糖提取分离的研究 被引量:17
2
作者 缪建 杨文革 +1 位作者 周彬 陆修涛 《生物加工过程》 CAS CSCD 2007年第3期74-77,共4页
采用DEAE-cellulose柱层析和Sephadex G-200柱层析从香菇子实体热水浸提的粗多糖中分离出两个多糖组分Len1-A、Len2-A,经旋光度法、Sepharose 4B柱层析、红外光谱等方法检测确定为均一多糖组分,且均为α-构型的吡喃糖,苯酚硫酸法测得其... 采用DEAE-cellulose柱层析和Sephadex G-200柱层析从香菇子实体热水浸提的粗多糖中分离出两个多糖组分Len1-A、Len2-A,经旋光度法、Sepharose 4B柱层析、红外光谱等方法检测确定为均一多糖组分,且均为α-构型的吡喃糖,苯酚硫酸法测得其糖质量分数分别为91.5%和92.3%,旋光度为+5.6°、+11.2°,相对分子质量为375×103、718×103。 展开更多
关键词 香菇多糖 DEAE—cellulose sephadex G-200 SEPHAROSE 4B
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酵母蛋白多糖的分离纯化及鉴定 被引量:18
3
作者 王义华 徐梅珍 +2 位作者 江萍 何照范 熊绿芸 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期515-518,共4页
以热带假丝酵母和八孢裂殖酵母为材料 ,通过化学抽提法得到多糖粗取物 ,经DEAE 纤维素阴离子交换柱分离纯化得到组分Ma和Mb ,经SephadexG 2 0 0柱层析鉴定 ,它们为均一成分 ,分子量分别为 4 38kD和 6 6 7kD ;蛋白分析表明Ma和Mb为蛋白多... 以热带假丝酵母和八孢裂殖酵母为材料 ,通过化学抽提法得到多糖粗取物 ,经DEAE 纤维素阴离子交换柱分离纯化得到组分Ma和Mb ,经SephadexG 2 0 0柱层析鉴定 ,它们为均一成分 ,分子量分别为 4 38kD和 6 6 7kD ;蛋白分析表明Ma和Mb为蛋白多糖 ;经薄层层析和高压液相分析 ,Ma主要含甘露糖 ,Mb则由甘露糖和半乳糖组成 ,其摩尔比为 1 3∶1 ;氨基酸组成分析表明Ma和Mb含有 4种极性氨基酸和 1 2种非极性氨基酸 ;经邻苯三酚自氧化法检测Ma与Mb均能抑制邻苯三酚自氧化 ,具有体外抗氧化能力。动物实验表明Ma和Mb具有抑制小白鼠肝癌H2 2实体瘤的作用。 展开更多
关键词 酵母 蛋白多糖 DEAE-纤维素 分离 纯化 鉴定
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枇杷叶多糖的分离纯化及组分鉴定 被引量:7
4
作者 黄素华 陈秋妹 +1 位作者 陈瑞红 洪燕萍 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2017年第4期42-48,共7页
提取纯化枇杷叶多糖,并对其组分进行研究。枇杷叶多糖提取液经大孔树脂除杂,醇沉后干燥即得枇杷叶可溶性总多糖。经DEAE-52纤维素柱层析及Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱层析,得到纯化后多糖,并采用Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱测定多糖的... 提取纯化枇杷叶多糖,并对其组分进行研究。枇杷叶多糖提取液经大孔树脂除杂,醇沉后干燥即得枇杷叶可溶性总多糖。经DEAE-52纤维素柱层析及Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱层析,得到纯化后多糖,并采用Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱测定多糖的分子量,水解多糖后采用薄层层析对枇杷叶多糖进行组分鉴定及单糖的组成比例测定。通过DEAE-52柱层析得3个枇杷叶多糖酸性组分,分别经过Sephadex G-200柱层析得到3个乳白色组分,分别为PSL-1、PSL-2、PSL-3。3个组分的洗脱曲线均为单一对称峰,初步判断3个组分含有单一成分的多糖。PSL-1、PSL-2、PSL-3分子量分别约为700、500、400 k Da。经过薄层层析初步推断出PSL-1含有鼠李糖和葡萄糖,含量之比为1∶0.602;PSL-2含有葡萄糖、半乳糖、鼠李糖,含量之比为1∶1.415∶1.408;PSL-3含有半乳糖和鼠李糖,含量之比为1∶1.03。 展开更多
关键词 枇杷多糖 DEAE-52纤维素柱层析 sephadex G-200葡聚糖凝胶柱层析 分子量测定 薄层层析 单糖组分
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人甲状腺球蛋白的纯化和鉴定 被引量:6
5
作者 陈广洁 席晔斌 +2 位作者 王保国 周文达 李伟毅 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期61-63,共3页
新鲜甲状腺组织经硫酸铵沉淀和两次SephadexG-200凝胶层析后,可获得较高纯度的甲状腺蛋白。经SDS-PAGE鉴定,显示了3条区带,主带为19S,另两条为27S和12S。经双向琼脂扩散和免疫电泳鉴定,提纯的甲状... 新鲜甲状腺组织经硫酸铵沉淀和两次SephadexG-200凝胶层析后,可获得较高纯度的甲状腺蛋白。经SDS-PAGE鉴定,显示了3条区带,主带为19S,另两条为27S和12S。经双向琼脂扩散和免疫电泳鉴定,提纯的甲状腺球蛋白未见血清蛋白质的污染。 展开更多
关键词 甲状腺球蛋白 纯化 鉴定 甲状腺疾病
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Analysis of the Constituents and Antisenile Function of Achyranthes bidentata Polysaccharides 被引量:40
6
作者 谈锋 邓君 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第7期795-798,共4页
Achyranthes bidentata polysaccharides (ABPS), water_soluble polysaccharides, isolated from the roots of Achyranthes bidentata Bl. of Amaranthaceae family, was divided into four parts, named as Con.1, Con.2, Con.... Achyranthes bidentata polysaccharides (ABPS), water_soluble polysaccharides, isolated from the roots of Achyranthes bidentata Bl. of Amaranthaceae family, was divided into four parts, named as Con.1, Con.2, Con.3 and Con.4, respectively, by chromatography on DEAE_Sepharose fast_flow column and Sephadex G_100 column in order. Con.1 was the constituent of high molecular weight and the other three were all of low molecular weight. Micro_Kjeldahl analysis showed that Con.1 contained 3.95% of nitrogen and neither did the other three parts. The antisenile effects of the four parts of ABPS were studied with Drosophila melanogaster. Results showed that Con.1 has no antisenile effect and all the others could significantly increase the average body weight by 3.85%-5.47% and significantly prolonged the average lifespan by 2.61%- 3.16% of D. melanogaster at the concentration of 2 or 5 mg/g (ABPS/medium). 展开更多
关键词 Achyranthes bidentata POLYSACCHARIDES DEAE_Sepharose fast_flow column chromatography sephadex G_100 column chromatography Drosophila melanogaster antisenile effect
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日本血吸虫种、期血清学抗原及其新型检测系统的研究──人“O”型血红细胞与抗日本血吸虫特异性抗体结合物的制备及其应用方法的建立 被引量:2
7
作者 蒋作君 郑南才 汪学龙 《安徽医科大学学报》 CAS 1994年第1期1-4,共4页
用日本血吸虫成虫特异性抗原(sj-SAAg)和虫卵特异性抗原(sj-SEAg)免疫家兔制备免疫血清,继用SephadexG200柱层析法提取家兔免疫血清中抗sj-SAAg和抗sj-SEAg的两种特异性多克隆抗体。将人... 用日本血吸虫成虫特异性抗原(sj-SAAg)和虫卵特异性抗原(sj-SEAg)免疫家兔制备免疫血清,继用SephadexG200柱层析法提取家兔免疫血清中抗sj-SAAg和抗sj-SEAg的两种特异性多克隆抗体。将人“O”型血红细胞分别与上述两种抗体结合制备红细胞—抗体结合物(RBC-Abs),并研究了该结合物的应用方法。初步研究结果表明,实验所用载体以混合纤维素膜最佳,检测31例急性血吸虫病人阳性率为96.8%,20例正常人假阳性率为5%。 展开更多
关键词 日本血吸虫病 红细胞 抗体 抗原
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不同方法提纯鸡减蛋综合征病毒的比较 被引量:3
8
作者 韩丽珍 吴彤 +2 位作者 张鹏 江浩 孟婷 《山地农业生物学报》 1998年第5期282-286,共5页
通过相关系数的计算与显著性检验,结合病毒蛋白浓度的大小,同时进行电镜观察,证实了由鸭胚增殖的EDS病毒采用60%饱和度的硫酸铵或10%聚乙二醇(MW6000)沉淀法初提后,再经SephadexG-200层析法提纯的效... 通过相关系数的计算与显著性检验,结合病毒蛋白浓度的大小,同时进行电镜观察,证实了由鸭胚增殖的EDS病毒采用60%饱和度的硫酸铵或10%聚乙二醇(MW6000)沉淀法初提后,再经SephadexG-200层析法提纯的效果优于DEAE52纤维素色谱法。 展开更多
关键词 鸡减蛋综合征 EDSV 病毒抗原
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几种提纯RHDV方法的比较研究
9
作者 杨龙圣 薛家宾 +4 位作者 丁国明 徐为中 陈兴祥 孔祥峰 胡元亮 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期13-16,41,共5页
运用离子交换层析法、凝胶过滤层析法和密度梯度离心法对已作初步处理的RHDV分别进行提纯,并通过血凝性鉴定、抗原蛋白含量检测、ELISA和SDS-PAGE凝胶电泳等方法检测其纯度。结果表明,通过Sephadex-200凝胶过滤层析法所提纯病毒的血凝... 运用离子交换层析法、凝胶过滤层析法和密度梯度离心法对已作初步处理的RHDV分别进行提纯,并通过血凝性鉴定、抗原蛋白含量检测、ELISA和SDS-PAGE凝胶电泳等方法检测其纯度。结果表明,通过Sephadex-200凝胶过滤层析法所提纯病毒的血凝性和蛋白浓度最高;稀释至相同的蛋白浓度之后,该法所提纯的病毒ELISA检测的OD值最大;SDS-PAGE电泳条带1条,经免疫转印分析证明,该条带为RHDV蛋白特异性条带。表明通过该法提纯的病毒,回收率最高、蛋白最纯。 展开更多
关键词 RHDV 凝胶过滤层析法 葡聚糖200 离子交换层析法 ELISA
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红壤中微生物总DNA的分离与纯化
10
作者 朱立成 邹小明 +1 位作者 蔡瑞玉 阙艳明 《井冈山大学学报(自然科学版)》 2007年第6期5-7,共3页
采用2种不同的土壤DNA直接提取方法,提取了4种不同类型红壤的微生物总DNA,并对提取的DNA用Sephadex G-200离心层析法进行了纯化。结果表明:2种方法都可以从红壤中提取到分子量大于10kb的DNA的片段,不同提取方法获得的DNA的产量存在较大... 采用2种不同的土壤DNA直接提取方法,提取了4种不同类型红壤的微生物总DNA,并对提取的DNA用Sephadex G-200离心层析法进行了纯化。结果表明:2种方法都可以从红壤中提取到分子量大于10kb的DNA的片段,不同提取方法获得的DNA的产量存在较大差异。方法二用冻融进行预处理再结合SDS和溶菌酶的化学裂解方法,是效果较好的DNA抽提方法。其提取DNA产量高,重复性好,适合于土壤少量样品的DNA提取。Sephadex G-200离心层析法能较好地去除土壤中的有机物杂质,DNA溶液由原来的黄褐色变得澄清透明,且不会使提取的DNA断裂或损失,是一种较好的土壤微生物总DNA纯化方法。 展开更多
关键词 土壤DNA提取 DNA纯化 sephadex G-200
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美国红鱼免疫球蛋白的分离纯化 被引量:4
11
作者 罗轻蕾 闫茂仓 +4 位作者 陈少波 谢起浪 单乐州 朱进 艾为明 《科技通报》 北大核心 2010年第4期623-627,共5页
对灿烂弧菌灭活疫苗接种后的美国红鱼提取血清,采用硫酸铵沉淀和SephadexG-200凝胶层析结合的方法分离纯化出美国红鱼血清免疫球蛋白,并且通过SDS-PAGE对纯化蛋白的部分特性进行分析。结果表明,通过硫酸铵沉淀法可以沉淀血清中大部分的... 对灿烂弧菌灭活疫苗接种后的美国红鱼提取血清,采用硫酸铵沉淀和SephadexG-200凝胶层析结合的方法分离纯化出美国红鱼血清免疫球蛋白,并且通过SDS-PAGE对纯化蛋白的部分特性进行分析。结果表明,通过硫酸铵沉淀法可以沉淀血清中大部分的蛋白,电泳条带比较丰富,但仍然含有较多的杂蛋白,经过SephadexG-200凝胶柱层析方法分离,获得纯度较高的免疫球蛋白,经β—巯基乙醇处理后解离形成重链和轻链两个亚单位,分子量分别为69.2 kDa,29.5 kDa,表明美国红鱼血清IgM的分子量与硬骨鱼IgM的分子量范围(H链60~81kDa,L链20-30kDa)是一致。 展开更多
关键词 美国红鱼 免疫球蛋白 硫酸铵沉淀 葡聚糖sephadexG-200凝胶层析
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二氢嘧啶酶的分离纯化与性质研究 被引量:4
12
作者 黄红辉 刘猛六 胡卓逸 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期389-392,共4页
二氢嘧啶酶产生菌Pseudomonasputida 980 1经过超声波粉碎及分级盐析 ,DEAE 纤维素和羟基磷灰石柱层析 ,SephadexG 2 0 0凝胶过滤得到纯化 2 49倍的酶液。SDS PAGE显示为单带 ,单体分子量为 380 0 0 ,SephadexG 2 0 0凝胶过滤测得分子量... 二氢嘧啶酶产生菌Pseudomonasputida 980 1经过超声波粉碎及分级盐析 ,DEAE 纤维素和羟基磷灰石柱层析 ,SephadexG 2 0 0凝胶过滤得到纯化 2 49倍的酶液。SDS PAGE显示为单带 ,单体分子量为 380 0 0 ,SephadexG 2 0 0凝胶过滤测得分子量为 15 6 0 0 0。二氢嘧啶酶对苯海因的km 为 2 .39× 10 -2 mol/L ,其最适 pH和最适温度分别是 8.5~ 8.7和 34℃~ 35℃。 1mmol/L的EDTA和 β 巯基乙醇对酶活力有强烈的抑制作用。 展开更多
关键词 二氢嘧啶酶 苯海因 分离 纯化
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Mitsraria sp.1412产壳聚糖酶的分离纯化及性质研究 被引量:2
13
作者 尹雅洁 谭光迅 胡远亮 《湖北师范大学学报(自然科学版)》 2019年第1期70-75,共6页
以实验室选育的Mitsuaria sp.1412菌株发酵产壳聚糖酶,采用硫酸铵分级沉淀,表明沉淀饱和度为60%~90%效果较好,壳聚糖酶纯化倍数达1.85倍。然后依次采用离心超滤、离子交换层析和Sephadex G-200凝胶柱层析进行纯化。SDS-PAGE凝胶电泳检... 以实验室选育的Mitsuaria sp.1412菌株发酵产壳聚糖酶,采用硫酸铵分级沉淀,表明沉淀饱和度为60%~90%效果较好,壳聚糖酶纯化倍数达1.85倍。然后依次采用离心超滤、离子交换层析和Sephadex G-200凝胶柱层析进行纯化。SDS-PAGE凝胶电泳检测表明,产物仅有一条清晰的条带,显示该壳聚糖酶的分子量为33.6 kD.酶学性质结果表明,该酶的最适反应pH和温度分别为5.5、50℃,并且该酶在pH5.0~8.0和35~45℃范围内,稳定性良好。酶最大反应速度V_(max)为2.8μmol/min,常数K_m为168.4 mmol/L.对该酶的酶解产物进行分析发现其酶解产物为壳二糖和壳三糖。 展开更多
关键词 壳聚糖 壳聚糖酶 分离纯化 酶学性质 sephadexG-200凝胶柱层析 SDS-PAGE凝胶电泳
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从草鱼血清中提取抗草鱼出血病的IgM 被引量:2
14
作者 黄永东 《南京农专学报》 1995年第1期26-29,共4页
采用sephadex G—200凝胶过滤法,对感染草鱼出血病的草鱼血清进行凝胶过滤,可提取草鱼免疫球蛋白IgM。试验结果:得到Sephadex G-200凝胶过滤的草鱼特异性免疫球蛋白IgM的分离曲线,经分析,在此分离曲线下收集的样品是草鱼特异性免疫球蛋... 采用sephadex G—200凝胶过滤法,对感染草鱼出血病的草鱼血清进行凝胶过滤,可提取草鱼免疫球蛋白IgM。试验结果:得到Sephadex G-200凝胶过滤的草鱼特异性免疫球蛋白IgM的分离曲线,经分析,在此分离曲线下收集的样品是草鱼特异性免疫球蛋白IgM。 展开更多
关键词 免疫球蛋白IgM 草鱼 血清 出血病 提取
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Sephadex G-200柱层析与蔗糖梯度速率区带离心对Sindbis病毒纯化的比较
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作者 黄祥瑞 于曼 +3 位作者 陈建龙 李红 司炳银 黄志尚 《军事医学》 CAS 1982年第6期739-742,共4页
在病毒的浓缩提纯中,广泛采用各种物理和化学相结合的方法。把“分子筛”柱层析作为一重要步骤,国内外均有报告。由于方法简便,适于大量制备,我们在早先工作的基础上,对PEG6000沉淀结合SephadexG-200柱层析浓缩提纯病毒进行了研究。
关键词 柱层析 蔗糖 二糖 梯度离心 SINDBIS sephadex G-200 洗脱物 区带离心 纯度分析 比活性 病毒纯化 血凝效价
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