利用^(15)N_(2)直接标记法研究水稻种植对稻田固氮量和固氮活性的影响

稻田固氮对土壤维持肥力有着重要的作用,但水稻种植与固氮菌及其活性之间的关系尚不清楚。本试验利用15N2直接标记法测定了下位砂姜土发育的简育水耕人为土在种水稻和不种水稻条件下的生物固氮量,及其在土壤不同层次(0~1、1~5、5~15 cm)和水稻中的分配,并通过实时荧光定量PCR技术测定了土壤中固氮菌nifH DNA及RNA基因数量。结果表明:种水稻处理显著提高了土壤各层固氮量,尤其提高了1~5 cm和5~15 cm土层土壤固氮量对总固氮量的贡献;种水稻处理的总固氮量是不种水稻处理的10.3倍;水稻植株中生物固定的氮占总固氮量的31.48%;在0~1 cm土层,种水稻处理显著提高了nifH RNA基因数量,而对nifH DNA基因数量的增加不显著。可见,水稻种植没有增加固氮菌的数量,稻田固氮量的增加是因为水稻种植极大地促进了固氮菌nifH基因的表达,提高了固氮菌的固氮活性。

^(188)Re标记小剂量奥曲肽方法学及其在小鼠体内分布的研究

目的 建立188Re标记小剂量奥曲肽(octreotide)的方法,观察其在小鼠体内的生物学分布。方法 SnCl2 ·2H2 O的用量为5 0～160 0 μg ,奥曲肽的用量为10、2 0或3 0 μg ,乙酸缓冲液的pH值从4.0至6.0 ,反应体系的温度为室温、60、80或10 0℃,淋洗液体积从0 .0 5至0 .2 0ml ,测定标记物的标记率及其在体外的稳定性。将标记物经小鼠尾静脉注射,于0 .5、1、2、4、2 4h取血液及主要脏器测量其放射性计数率值。结果 188Re直接法标记小剂量奥曲肽的最佳条件:葡庚糖酸钠(0 .3mmol/L) 0 .1ml,SnCl2 ·2H2 O(16g/L) 0 .0 5ml,乙酸缓冲液(pH =5 ) 0 .1ml,奥曲肽(0 .1g/L)0 .1ml,通氮气震荡反应1h ,再加入新鲜188Re淋洗液0 .1ml,10 0℃水浴3 0min ,188Re 奥曲肽标记率可达到(95 .3±1.8) % ,室温下放置2 4h放化纯为(89.6±2 .5 ) %。188Re 奥曲肽在正常小鼠体内主要分布于肝脏、肾脏及肠道。结论 研究建立的188Re标记奥曲肽操作简便,标记率高,体外稳定性好,无需进一步纯化,奥曲肽用量较小,预期能提高靶向定位质量,188Re 奥曲肽在小鼠体内主要被肠道、肝脏、肾脏等器官摄取。

^(125)I籽源连续照射诱导人乳腺癌细胞凋亡的研究

目的探讨^(125)I籽源低剂量率γ射线持续照射诱导MCF7人乳腺癌细胞凋亡过程中Bcl2Bax的变化情况。方法用9粒表面放射活度为2775MBq的6711型^(125)I籽源连续照射MCF7细胞72h后,采用RTPCR和Westernblot法检测Bcl2和BaxmRNA和蛋白表达。常规细胞流式法和AnnexinV标记法直接检测MCF7细胞凋亡率。结果MCF7细胞经125I籽源照射后较对照组Bcl2mRNA的表达降低,BaxmRNA的表达升高;Westernblot检测Bcl2Bax比值,结果对照组为189±009,125I籽源照射组为062±008,两者差异有统计学意义(P<005)。常规细胞流式法检测照射组(n=10)和对照组(n=12)细胞凋亡率分别为(2361±727)%和(281±168)%,P<005。AnnexinV标记法检测两组细胞早期凋亡率分别为(2146±829)%和(194±138)%,P<005。结论125I籽源连续照射能够诱导Bcl2Bax比值的降低,促进MCF7细胞的凋亡。