^(188)Re-DTPA的制备及生物分布研究

以SnCl2·2H2O为还原剂,还原188ReO-4并与DTPA直接配合获得188Re DTPA,优化了标记反应条件;对188Re DTPA和Na188ReO4在正常小鼠体内分布进行了比较。实验结果表明,在最佳标记条件下,188Re DT PA的标记率大于95%;标记物体外稳定,经生理盐水稀释后,其稳定性下降。188Re DTPA在小鼠体内血液清除快,在甲状腺、胃及其它组织中的摄取率明显低于Na188ReO4,主要经肾脏通过尿液排出体外。

^(188)Re-DTPA-DG的制备及其在正常小鼠体内分布的研究

用氯化亚锡作还原剂,以188Re标记二乙三胺五乙酸—脱氧葡萄糖(DTPA-DG),纸层析法鉴定188Re-DTPA-DG的放化纯度、标记稳定性。取昆明种小鼠经尾静脉注射188Re-DTPA-DG,观察其体内分布及显像情况。结果188Re-DTPA-DG放化纯度>95%,室温体外稳定;188Re-DTPA-DG在正常小鼠血液中清除快,脑、肺、小肠、肌肉未见明显分布,主要经肾脏随尿液排出体外。提示188Re-DTPA-DG有望成为集肿瘤SPECT显像、诊断和治疗于一体的新型葡萄糖类似物。

^(188)Re-DTPA-DG的制备及其在荷瘤裸鼠体内的分布

制备了188Re-DTPA-DG,并观察了其在荷MCF-7乳腺癌裸鼠体内的分布。188Re-DTPA-DG制备时采用正交实验设计,结果表明,10mgDTPA-DG、100μL0.5mol/L葡萄糖酸钠溶液、100~200μL370MBq/mL新鲜淋洗的高铼酸盐、400μLpH5.0磷酸缓冲溶液、4mgSnCl2·2H2O,37℃恒温箱中反应3h为最佳标记条件。在此条件下,放化纯度为95%。标记物体外稳定性较好,室温放置6h,其放化纯度仍>92%。188Re-DTPA-DG在荷瘤裸鼠体内的分布结果显示,其在肿瘤中的摄取较高,静脉注射188Re-DTPA-DG后12h,肿瘤与周围肌肉的摄取比值(T/NT)高达12.76,显示出良好的肿瘤靶向性。

Na^(188)ReO_4、^(188)Re-DTPA和^(188)Re-MAG_3的生物分布及排泄比较

为比较Na188ReO41、88Re-DTPA和188Re-MAG3在冠状动脉再狭窄防治中的优劣,将这三种放射性药物注入到ICR小鼠和SD大鼠体内,观察其在小鼠体内的分布及在大鼠体内的排泄动力学。结果显示,188Re-MAG3在小鼠体内的血液清除明显快于188Re-DTPA和Na188ReO4,并且在各主要组织脏器的吸收也明显低于188Re-DTPA和Na188ReO4。注射后2 h,77.28%的188Re-MAG3经尿液排出体外,而此时188Re-DT-PA和Na188ReO4的尿液排出量不到注射剂量的50%1。88Re-MAG3在动物体内的行为明显优于188Re-DTPA和Na188ReO4,更适于冠状动脉再狭窄的防治。

^(188)Re-DTPA-DG内照射吸收剂量的估算

目的:估算188Re-DTPA-DG(二乙三胺五乙酸-脱氧葡萄糖)肿瘤治疗中肿瘤和主要器官内照射吸收剂量。方法:荷MCF-7乳腺癌裸鼠尾静脉注射后,在3、12、24h处死动物,测定小鼠体内各脏器放射性分布,换算至标准人体内分布数据,按MIRD法计算188Re-DTPA-DG全身、肿瘤和各主要器官的平均总吸收剂量。结果:肿瘤辐射剂量为255.32mSv/MBq,其他脏器内照射吸收剂量在0.002～6.850mGy/MBq之间,有效剂量为1.420±0.043mSv/MBq。结论:188Re-DTPA-DG可以作为临床上肿瘤治疗和诊断药物的可能。

放射性药物^(188)Re标记DTPA的制备和在大鼠体内的分布

球囊导管内充盈β放射性核素防治经皮冠状动脉成形术(PTCA)后再狭窄是一种崭新的技术, 其中,188Re是一种常用的放射性核素。为了尽可能降低在万一球囊破裂的情况下高剂量放射性对人体的损害,利用二乙三胺五醋酸(DTPA)迅速从泌尿系统排出的特点,通过探索188Re标记DTPA的方法和条件,成功地制备了188Re-DTPA化合物,并研究出最佳的标记条件从而使标记产率达到90%以上。188Re-DTPA和188ReO4-在大鼠体内分布的研究结果显示,甲状腺和胃肠道的放射性水平188Re-DTPA组明显低于188ReO4-组,188Re-DTPA经肾脏排泄明显快于188ReO4-,用MIRDOSE 3.0软件估算体内重要脏器的吸收剂量同样也显示了这一结果。188Re-DTPA组和188ReO4-组甲状腺的吸收剂量分别为0.041 nGy/Bq和0.563 nGy/Bq,胃的吸收剂量分别为0.043 nGy/Bq和0.118 nGy/Bq。因此,实验结果认为在血管内照射治疗中188Re-DTPA明显优于188ReO4-。

^(188)Re-BAC_5对鼻咽癌细胞影响的实验研究

采用直接标记法制备188Re-BAC5,并测定标记物的免疫活性,应用噻唑蓝(MTT)法观察188Re-BAC5对体外单层培养的鼻咽癌细胞(CNE-2)的抑制作用。建立鼻咽癌(NPC)肿瘤多细胞微球模型,观察188Re-BAC5对微球生长的抑制和破坏作用。对照组为188Re-BSA、188ReO4。结果显示:188Re-BAC5的标记率在80%以上,标记后的免疫活性分数为61%±15%。MTT法结果表明,188Re-BAC5组的抑瘤率比对照组明显提高(P<0.05);在肿瘤多细胞微球的抑制实验中,188Re-BAC5对微球生长有强烈的抑制和破坏作用,疗效明显优于对照组。本实验提示,188Re-BAC5有可能在对人鼻咽癌的放射免疫治疗中起到良好的作用。

肝癌^(188)Re放射免疫治疗的实验研究

目的：研究新型核素188Re标记的抗人肝癌单抗片段HAb18 F（ab′）2对荷肝癌移植瘤裸鼠的抑瘤效应。方法：建立荷人肝癌移植瘤裸鼠模型。选择肿瘤体积为（30～150）mm3的动物随机分5组，其中3组分别尾静脉注射188Re－HAb18 F（ab′）2 3．7、11．1和18．5MBq，给药2次，观察动物体重和肿瘤体积变化。处死动物，摘取瘤体，石蜡包埋，进行HE染色。结果：3组剂量均有不同程度的抑瘤作用，且随着剂量的增加，抑瘤效应增加。低剂量组和中剂量组动物平均体重和生理盐水对照组相比无显著性差异(P＞0．05)。组织学检查表明，随着剂量的增加，肿瘤细胞核形态发生明显的变化，从凝固、核碎裂直至溶解。结论：188Re－HAb18 F（ab′）2是一种新型核素的肝癌导向治疗剂，具有潜在的临床应用前景，本文的研究可为其过渡到临床研究提供参考依据。

磁性纳米微粒的^(188)Re标记

将组氨酸固载到氨基化磁性纳米微粒表面。以188Re的面式结构三羰基配合物fac-[188Re(CO)3(H2O)3]+为放射性标记前体,对磁性纳米微粒进行了标记。固载有组氨酸的磁性纳米微粒在70℃、pH6.6下反应40min,标记率为(91.4±0.3)%,并且标记物在37℃的小牛血清中有良好的体外稳定性,72h后放射性仍保留80%以上。

^(188)Re标记抗人前列腺癌单克隆抗体及其在荷瘤裸鼠体内的放射性分布

为探讨188Re标记抗前列腺癌单克隆抗体7E11C5.3的方法及其生物学分布,采用2-巯基乙醇直接还原法制备188Re-7E11C5.3标记物,常规测定标记率和免疫活性,在荷瘤裸鼠体内检测标记物的生物学分布。结果显示,188Re-7E11C5.3的标记率为(93.16±2.18)%,免疫活性分数为(74.86±1.86)%;经尾静脉注入裸鼠体内后,肿瘤组织摄取率在24h达高峰,非肿瘤组织在4h摄取率较高,以后均随时间延长逐步降低;血液放射性清除迅速;24h时T/NT值达最大,至72h仍可保持在较高水平。结果表明,188Re-7E11C5.3在裸鼠体内对前列腺癌移植瘤有良好的靶向定位作用,可用于前列腺癌放射免疫显像和治疗研究。

^(188)Re间接标记单克隆抗体的研究

采用先标记后偶联的方法 ,以NHS -MAG3 为双功能连接剂 ,研究了用188Re标记单克隆抗体的各种实验条件 ,得到了最佳标记方法和偶联方法。标记抗体188Re -NHS -MAG3 -IgG体外稳定性良好。完成了188Re -NHS -MAG3 -CL3在小鼠体内的生物分布实验 ,结果表明该配合物在体内稳定性良好。

^(188)Re标记多肽的研究进展

阐述了多肽放射性药物的优点 ,188Re -高铼酸钠的性质 ,188Re标记多肽的方法及其研究进展 。

^(188)Re-TCTMP的合成及在小鼠体内的分布

合成了氮杂环甲撑膦酸配体TCTMP(1,4,8,11 四氮杂环十四烷 1,4,8,11 四甲基膦酸),研究了亚锡还原下188Re TCTMP的制备条件,并探索了该配合物的体外稳定性及在正常小鼠体内分布。结果表明,pH=2,SnCl2量为0 8～1 6mg,配体量为50mg时,可以制得标记率大于95%的配合物188Re TCTMP;配合物具有很高的体外稳定性,室温下放置8d,标记率仍不低于95%。小鼠体内分布表明,配合物很快为小鼠骨骼摄取并保留较长时间;与188Re HEDP(1 羟基亚乙基二膦酸)相比,188Re TCTMP表现出更低的非靶组织摄取。因此,188Re TCTMP有望取代186,188Re HEDP,成为新型的缓解治疗骨肿瘤疼痛的放射性药物。

^(188)Re-C50对结肠癌细胞的凋亡诱导作用

目的 观察1 88Re 抗癌胚抗原 (CEA)单克隆抗体 (简称单抗 )C5 0放射免疫治疗 (RIT)对结肠癌细胞的凋亡诱导作用。方法 BALB c小鼠结肠癌模型分为治疗与对照组 ,每组 8只。治疗组每只瘤内注射 18 5MBq1 88Re C5 0 ,对照组每只瘤体内局部注射 0 16mgC5 0。 6h后取新鲜肿瘤组织制备肿瘤单细胞悬液 ,采用流式细胞仪 (FCM)行倍体与S期细胞比例检测 ;取肿瘤组织固定后行透射电镜观察与原位末端标记法 (TUNEL)检测。结果 RIT治疗后 6hC2 6结肠癌细胞在用碘化丙啶 (PI)染色的FCM直方图上出现典型凋亡峰 ,C2 6细胞凋亡百分比为 (16 6 4± 0 12 ) % ,对照组为 0 %。肿瘤S期细胞占 (10 4 1± 1 31) % ,对照组为 (33 14± 2 0 1) %。肿瘤G0 G1 期细胞占 (6 8 6 0± 4 82 ) % ,对照组为 (35 12± 2 6 3) % ,治疗后G1 期细胞呈明显阻滞现象。TUNEL检测肿瘤细胞出现凋亡改变 ,凋亡指数 (AI)为 (2 6 4± 0 97) % ,对照组无凋亡改变发生。电镜下癌细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变。结论 诱导结肠癌细胞凋亡是1 88Re C5 0抗肿瘤效应的重要作用机理。

^(188)ReN核配合物制备新方法研究

以丁二酰肼(SDH)作为N给予体,SnCl2作为还原剂,加入188ReO4-,在草酸存在下,制得产率大于95%的188Re≡N核中间体化合物。并在此基础上,制得了放化纯度大于90%的新型配合物188ReN-NEPT-DD(2,2,9,9-四甲基-4,7-二氮-4-乙撑哌啶-1,10-二硫癸烷)。该配合物具有较好的体外稳定性,室温放置48h后,放化纯度仍>90%。

瘤内注射^(188)Re-硫化铼混悬液治疗肝癌的实验研究

目的 评价188Re 硫化铼混悬液用于介入治疗肝癌的可能性。方法 30只荷人SMMC 772 1肝癌细胞株的裸鼠肿瘤内分别注射188Re 硫化铼混悬液和188Re NaReO4 溶液 ,进行生物分布研究。另 30只平均分成 6组 ,其中 4组分别注射 0 1mL的 3 7、7 4、18 5、2 9 6MBq的188Re 硫化铼混悬液 ;余下 2组作为对照组注射非放射性硫化铼混悬液和生理盐水。 6d后重复注射。结果 注射188Re 硫化铼混悬液的裸鼠 ,肿瘤内放射性摄取率 (%ID) 1h为 (90 96± 6 6 3) % ,2 4h为 (86 0 9± 2 2 5 8) % ,48h为 (87 6 2± 13 97) % ,高于正常组织。而注射188Re NaReO4 溶液的裸鼠 ,肿瘤内 %ID 1h为 (1 6 6± 0 35 ) % ,2 4h为 (0 0 2± 0 0 1) % ,48h为 (0 0 1± 0 0 1) % ,和正常组织无多大区别。当肿瘤边缘 (距肿瘤中心约 0 5～ 0 6cm)的吸收剂量为 5 0 7 6Gy时 ,肿瘤抑制率可达 89%。结论 188Re

^(188)Re-硫化铼混悬液药盒的研制

研制了一种药盒 ,能简单、快速、有效地制备188Re -硫化铼混悬液制剂。药盒由A、B、C 3瓶 (10mL/瓶 )组成 ,在无菌环境下 ,配制各种试剂。A瓶加入mol比为 70 :1的Na2 S2 O3 和KReO4溶液 1mL ,再加入一定量的赋形剂 ;B瓶加入 5mol/L的盐酸溶液 1mL ;C瓶加入摩尔比为 10 0 0 :1的PVP和NaOH溶液 1.5mL。B瓶加盖密封 ;A瓶和C瓶在冷冻干燥后 ,压盖密封。无菌、细菌内毒素及安全性检验均合格。常温下放置 ,制备188Re -硫化铼混悬液 ,在两个月内始终保持很高的标记率 (>98% ) ,颗粒度为 1— 5 μm(6 0 .1± 12 .7) % ;5— 10 μm(30 .9± 8.1) % ;>10 μm(9.0±4 .7) %。制备的188Re -硫化铼混悬液在 5天内非常稳定 ,放化纯度 >98% ,颗粒度为 1— 5 μm(49.9± 4 .4 ) % ;5— 10 μm(41.1± 5 .4 ) % ;>10 μm(9.0± 3.3) %。

^(188)W-^(188)Re发生器的研制

以酸性氧化铝为吸附剂，制备了一个１１８ＭＢｑ的１８８Ｗ－１８８Ｒｅ发生器，并对发生器性能进行了为期４个月的检测。结果表明，１８８Ｒｅ的淋洗产额在８０％—９０％之间，１８８Ｗ的穿透率约为１．０×１０－４％。由于采用了较大高径比的交换柱，使１８８Ｒｅ的放射性比活度较高，能满足用于放射免疫治疗研究的抗肿瘤单克隆抗体标记的要求。

MCF-7乳腺癌细胞摄取188Re-DTPA-DG的实验研究

目的:研究乳腺癌细胞(MCF-7)对188Re标记二乙三胺五乙酸葡糖胺(DTPA-DG)的摄取。方法:采用γ计数法在不同时间段评价乳腺癌细胞(MCF-7)对188Re-DTPA-DG(3.7kBq/10μl)的摄取。结果:乳腺癌肿瘤细胞(MCF-7)对188Re-DTPA-DG的摄取率明显高于对照组188ReO4-(P<0.05);实验组30min与4h细胞摄取率差异存在显著性意义(P<0.05),而对照组不同时间点细胞摄取率差异无显著性意义(P>0.05)。结论:188Re-DTPA-DG容易被乳腺癌细胞(MCF-7)摄取,使188Re在肿瘤细胞内发挥辐射效应成为可能,从而为临床肿瘤治疗提供理论依据。