基于^(31)P核磁共振探究退化高寒湿地土壤磷素演变特征及影响因素

探明高寒湿地不同退化程度土壤磷素组成特征及其形态演变的驱动机制对于湿地生态恢复过程中养分和碳汇的科学管理具有重要意义。以若尔盖自然保护区内相对原生沼泽(RPM)、轻度退化沼泽(LDM)、中度退化沼泽(MDM)、重度退化沼泽(HDM)为对象,采用液相31P核磁共振波谱技术、分段式结构方程模型研究了高寒湿地退化过程中土壤磷素演变特征及主要影响因素。结果表明,高寒湿地退化导致植物群落组成由湿生向中生演替,土壤有机质与氮含量降低。正磷酸盐和磷酸单酯含量随湿地退化呈先增加后降低的趋势,其中正磷酸盐在HDM中相较于RPM降低46.45%,磷酸单酯在LDM、MDM和HDM中相较于RPM分别增加27.02%、54.96%和41.74%;焦磷酸盐和磷酸二酯含量随湿地退化逐渐降低。分段式结构方程模型的拟合结果显示,植被生物量、土壤养分和微生物活性是影响湿地土壤磷素演变的主要因素,其中微生物活性是正磷酸盐、焦磷酸盐和磷酸二酯的正向影响因子,是磷酸单酯的负向影响因子,植物生物量是正磷酸盐和磷酸二酯的正向影响因子,土壤养分虽对各形态磷没有直接影响,但可通过调控微生物活性间接影响焦磷酸盐和磷酸二酯含量。综上所述,湿地退化通过改变植物群落组成、降低土壤养分含量和微生物活性,促进了土壤磷酸二酯分解;重度退化湿地土壤磷有效性因磷酸单酯矿化能力减弱、正磷酸盐含量降低而减小。

用^(1)H定量核磁共振法同时确定成盐化合物的质量分数和各组分的比例

^(1)H定量核磁共振(^(1)H quantitative nuclear magnetic resonance,^(1)H qNMR)方法具有操作简便、实验快速等优点.本文通过该方法可准确测定富马酸丙酚替诺福韦在样品中的含量,并给出丙酚替诺福韦和富马酸的比例,结果与其他分析测试所得结果相符.该方法以氘代二甲基亚砜(DMSO-d^(6))为溶剂,采集待测样品的核磁共振氢谱,对比丙酚替诺福韦定量峰、富马酸定量峰与内标物响应峰面积,分别计算丙酚替诺福韦和富马酸的质量分数.富马酸丙酚替诺福韦和富马酸与内标物的质量比值在0.91~1.24范围内线性关系良好,^(1)H qNMR法测得二者质量分数分别为100.06%和10.90%,与质量平衡法测得的结果基本一致.本研究建立的核磁共振定量方法不仅可准确、快速地测定丙酚替诺福韦和富马酸这2种成分的质量分数和比例,还为多组分、成盐的化学原料药的比例确定、绝对含量测定提供参考.

用^(31)P核磁共振研究鸡腿肉中4种多聚磷酸钠的水解

用31P核磁共振技术(NMR)研究了添加到鸡腿肉(CT)中的焦磷酸四钠(TSPP)、焦磷酸二氢二钠(DSPP)、三聚磷酸钠(STPP)和六偏磷酸钠(HMP)的水解变化。按200 mL.kg-1的比例分别将5种腌制液(50 g.kg-1NaC l、50 g.kg-1NaC l+60 g.kg-1TSPP、50 g.kg-1NaC l+60 g.kg-1DSPP、50 g.kg-1NaC l+60 g.kg-1STPP、50 g.kg-1NaC l+60 g.kg-1HMP)均匀注入鸡腿肉样品中3。1P核磁共振技术分析结果表明,TSPP、DSPP和STPP在鸡腿肉中均发生水解。TSPP和DSPP水解成正磷酸钠,STPP水解成焦磷酸钠和正磷酸钠,生成的焦磷酸钠又被水解成正磷酸钠。DSPP的水解速度比TSPP慢得多,10 h时DSPP相对含量仍然为0.62,TSPP相对含量仅为0.21。STPP在10 h时水解完全,而此时水解产生的焦磷酸钠的相对含量高达0.49。HMP在鸡腿肉中比较稳定,没有水解产生焦磷酸盐。

湖泊磷的核磁共振(NMR)分析--1环境标准样品的^31P-NMR表征

通过对环境标准样进行31P-NMR测试,研究了磷的化学结构与化学位移的关系.结果表明:无机正磷酸盐(PO43-)化学位移在6.412×10-6,焦磷酸盐的化学位移在-4.353×10-6;多聚磷的化学位移分布特点是:主链末端磷化学位移在-3.53×10-6至-4.40×10-6之间,中间磷在-18.159×10-6至-20.246×10-6之间,有机磷中单酯和二醑的化学位移分别在4.3540×10-6至6.3652×10-6和-0.107×10-6至2.195×10-6之间,部分二脂不稳定,会降解为单脂;膦酸盐的化学位移在18.670×10-6至21.460×10-6之间,磷酸肌酸位于-0.380×10-6,有机多聚磷中α-P的化学位移在-8.833×10-6至-9.449×10-6之间,由于偶合作用产生P峰的裂分,P峰的偶合符合核磁中n+1的规则.结构环境影响31P的化学位移值的偏移.

多聚磷酸盐在鸡腿肉中水解的^(31)P核磁共振研究

利用31P核磁共振(NMR)对添加到鸡腿肉中的焦磷酸四钠(TSPP)和三聚磷酸钠(STPP)所发生的水解进行了研究。三组新鲜鸡腿肉样品,按照200ml腌制液/kg的比例分别注入新配制的腌制液5%NaCl、5%NaCl+6%TSPP、5%NaCl+6%STPP。结果表明,TSPP和STPP在肉中均发生水解。TSPP水解成正磷酸钠,STPP水解成焦磷酸钠和正磷酸钠,生成的焦磷酸钠随即水解成正磷酸钠。STPP水解速率大于TSPP。

四种多聚磷酸钠在鸡胸肉中水解的^(31)P核磁共振研究

本文利用31P核磁共振技术(NMR)研究了添加到鸡胸肉(CB)中的焦磷酸四钠(TSPP)、焦磷酸二氢二钠(DSPP)、三聚磷酸钠(STPP)和六偏磷酸纳(HMP)所发生的水解。研究结果表明,TSPP、DSPP、STPP和HMP在鸡胸肉中均发生水解。TSPP在10h内完全水解为正磷酸盐。DSPP水解较慢,10h后仍占核磁共振总可测磷的40%。STPP在10h时已经完全水解为焦磷酸盐和正磷酸盐,10h之后由三聚磷酸钠产生的焦磷酸盐继续水解。在HMP腌制液处理的鸡胸肉匀浆物中,没有焦磷酸盐存在,两端的磷原子到10h时的相对含量为零,内部磷原子的相对含量在10h内基本保持不变。

Cos-7细胞胞内pH的^(31)P核磁共振测定

生物细胞内pH的测定对于细胞内代谢、游离离子及离子通道的研究有重要的意义,而且一些酶的活性也与细胞内pH密切相关。猴的肾细胞cos-7细胞常用于外源基因的转染表达,研究这一细胞株细胞内的pH,可为基因转染提供可靠的依据。本文采用31P核磁共振对cos-7细胞胞内的pH进行了分析测定。

^(31)P磁共振波谱回顾及其在肝脏等脏器中的临床应用

常规方法检测肝脏ATP需要大量组织标本 ,在同一批动物或人体的重复检测是不可能的 ,并且不能监测早期或可逆性细胞损伤中的轻微新陈代谢变化。3 1PMRS是活体检测高能磷酸盐的唯一手段。无机磷 (Pi)与磷酸单酯 (PME)比率 (细胞生存和代谢的标志 )以及各种ATP可以重复定量检测。在细胞死亡和随后的器官病变之前 ,利用3 1PMRS ,可检测到早期轻微能量变化引起的β ATP明显减少 ,Pi/ β ATP比率减少以及PME/ β ATP比率的显著升高[1] 。在正常肝脏的波谱中 ,含磷总量的PME波峰为 4 .77% (可信区间CI:4 .11～ 5 .4 2 ) ,在轻度肝硬化 [5 .80 % (95 %CI:5 .4 6～ 6 .14 ) ,P =0 0 0 5 1,对正常肝 ]和重度肝硬化 [9.6 4 % (95 %CI:8.71～ 10 .5 7) ,P =0 .0 0 0 2 ,对正常肝和P =0 .0 0 1,对轻度肝硬化 ]明显升高[2 ] 。在对所有原发或继发肿瘤患者的研究中 ,PME/PDE比率是增加的 ,作者认为3 1PMRS是检测肝脏疾病进展和治疗效果的有效方法[3 ] 。

应用^(31)P磁共振波谱对心肌梗死后能量代谢变化的评价

目的 探讨3 1磷磁共振波谱 (3 1PMRS)在心肌梗死临床应用价值 ,评价心肌活力 ,为心肌梗死治疗方案决策提供依据。方法 健康志愿者 12例行3 1PMRS和共振成像 (MRI)检查 ,结果作为正常对照组。选择 10例心肌梗死病人 ,进行MRI和3 1PMRS检查 ,所有病人经冠脉造影等检查证实。结果 与正常对照组比较 ,患者存活心肌PCr/ATP比值无显著差异 ;病变区无活力心肌r-ATP -SNR(thesignaltonoiseratio)与对照组和存活心肌比较明显降低。结论 ①3 1PMRS可以提供存活心肌和梗死 (无活力 )心肌能量代谢变化特征 ,为3 1PMRS评价心肌活力的临床应用提供方法论。②顿抑心肌状态 ,高能磷酸盐代谢变化不是心肌顿抑心功能异常的直接病因。③3 1PMRS显示人心肌梗死能量代谢的变化 ,用3 1PMRS可以预测血管重建后心功能恢复情况。

人淋巴瘤白血病细胞系Molt-4的^(31)P核磁共振研究

用３１Ｐ核磁共振（ＮＭＲ）观察了人淋巴瘤白血病细胞系Ｍｏｌｔ—４的３１Ｐ谱．ＮＭＲ测试温度为３７℃、２０℃和４℃时．随着测试时间增长，细胞３１Ｐ谱中ＡＴＰ峰降低，无机磷峰升高．细胞３１Ｐ谱的变化随测试温度降低依次减缓．实验温度为４℃，从收集细胞至开始ＮＭＲ累加在３０ｍｉｎ内．ＮＭＲ累加在６０ｍｉｎ内，获得活细胞的稳定的３１Ｐ谱．根据细胞内无机磷的化学位移数值，对细胞内ｐＨ值进行了测定．

在体心脏^(31)P磁共振波谱化学位移成像技术

磁共振波谱 (MRS)分析是在体心脏研究的重要非侵入性手段 ,作者对化学位移成像波谱分析的技术原理于在体心脏 3 1 P

犬顿抑心肌^(31)P磁共振波谱

目的 :观察顿抑心肌状态时心肌能量代谢变化规律。方法 :8条健康犬以麻醉开胸结扎冠状动脉左前降支 30min后再灌注 ,建立顿抑心肌动物模型 ,定期用 3 1 P磁共振波谱 (MRS)检查高能磷酸盐代谢变化。结果 :顿抑心肌再灌注后 2 h,Pcr/ β- ATP和 p H下降 ,Pi/ Pcr上升 ,Pcr/ β- ATP在再灌注 4h后可恢复至正常 ,而 Pi/ Pcr上升持续到再灌注后 3d,12 d恢复正常水平。结论 :13 1 P MR波谱方法能非侵入性测定心肌能量代谢 ;2 Pi/ Pcr变化较 Pcr/β- ATP和 p H的变化显著 ;3顿抑心肌能量代谢逐渐恢复后 ,持续性的心肌力学障碍与心肌细胞

兔血小板的^(31)P核磁共振分析

血小板的分泌、变形、聚集等可能与很多疾病的发生有关,研究血小板内的含磷化合物的含量和代谢能更好地考察血小板的这些功能,因此运用31P核磁共振方法对兔血小板进行了研究并测定了pH值。血小板与活体器官、组织不同,其研究体系相对简单,而且测试对象用NMR分析适宜,因此避免了器官、组织和活体等在NMR分析过程中的很多干扰因素。核磁共振技术的无损伤性可使血小板在接近生理条件下进行测试,省去了其它方法复杂繁琐的分离提取等步骤,有利于作用机制的研究。

生物体^（31）P核磁共振的研究

通过对^（３１）Ｐ核磁共振（（３１）－Ｐ－ｎｕｃｌｅａｒｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅ，^（３１）Ｐ－ＮＭＲ）的Ｉｎｖｉｖｏ谱图介绍，总结了该方法用于定量计算ＡＤＰ、ＡＭＰ、游离［Ｍｇ^（２＋）］、ｐＨ、自由能变化（△Ｇ）及定性研究多种含磷化合物的代谢过程，突出其无创性，显示了该技术的应用前景。

心脏移植物^31P磁共振波谱可为早期功能障碍提供评价依据

据Caus T[Eur J Cardiothorac Surg，2005，28（4）：576—580]报道，移植后结果与体外评估的移植物移植前MRS评分相关。这一结果可能有助于更安全地使用来自边缘供者的移植物。

一种脑代谢研究的有效方法——高分辨率磁共振波谱分析

介绍了一种脑代谢研究的有效方法 .成年大鼠脑经漏斗法液氮冷冻 ,制备脑组织高氯酸提取物并冷冻干燥 ,所得固体溶于D2 O后用1 H和31 P磁共振波谱 (MRS)检测 .结果表明 :脑高氯酸提取物的磁共振波谱有着极好的分辨率 ,31 PMRS可以分辨出ATP、ADP、磷酸肌酸(PCr)、无机磷以及多种磷酯和糖磷 ;1 HMRS可以分辨出乳酸 (Lac)、N 乙酰天冬氨酸 (NAA)、胆碱 (Cho)、肌酸 (Cr)、GABA、肌醇 (Ino)、琥珀酸 (Suc)以及多种氨基酸 .各波峰积分后得到各种物质的相对含量 ,而这些代谢中间产物的相对含量变化可以反应脑内的代谢状况和脑受损伤情况 .

基于^(31)P NMR的自然成土过程中有机磷组分演变特征及影响因素研究进展

土壤有机磷(P_(o))是土壤中重要的磷库,其形态、含量与生物有效性随成土过程而发生变化,进而影响土壤磷素供应、养分平衡及生态系统生产力。然而,与土壤无机磷(P_(i))相比,以往的研究对P_(o)的重视不够,这主要是由于土壤中P_(o)的提取、分析和鉴定方法难于P_(i)。近年来,随着液相^(31)P核磁共振(^(31) P NMR)波谱技术在土壤学领域的应用,为定量分析土壤P_(o)组分及含量提供了新的技术手段,同时为更好地理解生态系统演化过程中不同形态P_(o)的转化特征奠定了基础。本文主要总结了土壤P_(o)的种类和性质,介绍了液相^(31)P NMR分析土壤P_(o)的原理和方法,在此基础上综述了自然成土过程中不同形态P_(o)的转化特征及其影响因素,并指出了需进一步研究的方向和关键科学问题:包括量化成土过程中不同形态P_(o)转化速率、途径与环境阈值,阐明不同发育阶段土壤P_(o)与C、N等养分之间的耦合关系及其固释机理,构建不同类型土壤P_(o)演化模型。回答上述问题有助于更好地理解地球关键带磷素生物地球化学循环,为不同发育阶段土壤养分管理与调控及土壤资源可持续利用提供理论依据。

磷酸酯类阴离子表面活性剂的^（31）P－NMR波谱分析

用^（３１）Ｐ核磁共振波谱定性定量分析了烷基磷酸酯盐（Ｉ）和烷基聚氧乙烯醚磷酸酯盐（Ⅱ）中各含磷组分及其含量。研究了溶液ｐＨ值、氯化钠含量、样品浓度等对各组分^（３１）Ｐ化学位移的影响。探讨了影响定量准确度的因素；找出了最佳分析条件。

土壤磷形态组分分级及^(31)P-NMR技术应用研究进展

农田生态系统中土壤磷形态转化,影响土壤磷对作物的有效供应。土壤磷分为无机磷和有机磷两大部分。化学连续提取法(chemical sequential fractionation,CSF)研究土壤磷形态分级,采用不同的化学提取剂,分级提取土壤中组成或分解能力接近的有机无机含磷化合物,是目前表征土壤磷素形态的重要方法。但该方法虽历经改进,仍难以确切反映土壤磷的实际组成,提取的不同磷形态间存在重叠,有机磷和无机磷组分分级存在一定的误差;不同分级磷组分对作物的有效性,需谨慎评估。核磁共振波谱技术(nuclear magnetic resonance,NMR)根据核磁共振波谱图上共振峰的位置、强度和精细结构来研究土壤中含磷化合物的分子结构。液相31PNMR可以同吋检测出土壤中多种磷组分,如正磷酸盐、磷酸单酯、磷酸二酯、膦酸脂、焦磷酸盐和多聚磷酸盐,识别土壤提取物磷形态,可将有机磷与无机磷分开。本文综述了应用31P-NMR技术研究土壤磷形态组分的一些进展,总结了样品制备过程、NMR测试参数及在土壤磷形态转化研究中的应用。二维31P-NMR技术发展为鉴定分析土壤中更多种类的含磷化合物提供了契机。

^(1)H定量核磁共振波谱法测定那红地那非的含量

目的:建立采用^(1)H定量核磁共振(qNMR)波谱法测定那红地那非对照品的含量。方法:在^(1)H qNMR中,使用Bruker Ascend 600超导核磁共振谱仪,以氘代氯仿为溶剂,采用noesyigld1d脉冲序列,弛豫延迟时间为30 s,扫描次数32次。结果:以那红地那非δ8.15和δ9.14的氢质子响应信号作为样品定量信号,以1,3,5-三甲氧基苯δ6.09的氢质子响应信号作为内标物定量信号。样品δ8.15与内标物δ6.09信号响应面积比与质量比的线性回归方程为y=0.119 7x+0.003 4,相关系数为0.999 1,重现性实验的RSD为1.66%(n=5),重复性实验的RSD为0.76%,测得那红地那非的含量为97.48%;样品δ9.14与内标物δ6.09信号响应面积比与质量比的线性回归方程为:y=0.116 8x+0.004 5,相关系数为0.999 1,重现性实验的RSD为1.69%,重复性实验的RSD为0.43%,测得那红地那非的含量为95.35%。^(1)H qNMR法测得那红地那非的含量(两组响应信号测得的含量平均值)为96.42%,与质量平衡法结果(96.54%)以及HPLC外标一点法结果(97.07%)一致。结论:本研究建立的核磁定量方法可用于那红地那非的含量测定,该方法准确、快速,并为质量平衡法对标准物质定值提供有力的佐证。