^(99)Tc^m-MAG_3注射液的放射化学纯度分析

^(99)Tc^m-巯乙酰三甘氨酸(^(99)Tc^m-Mercaptoacetyltriglyeine,MAG_3)是目前^(99)Tc^m标记比较理想的肾小管分泌型显像剂。^(99)Tc^m-MAG_3注射液中可能含有未标记的高锝酸根(^(99)Tc^mO_4^-)、还原水解锝(H-R-^(99)Tc^m)等放射化学杂质,这些杂质直接影响显像的清晰程度。因此对^(99)Tc^m-MAG_3注射液的放射化学纯度(RCP)的分析是评价^(99)Tc^m-MAG_3注射液质量的重要指标之一。

^(99m)Tc-3PRGD_(2) SPECT/CT显像在肿瘤中的应用进展

近年来,联肼尼克酰胺-3聚乙二醇-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸环肽二聚体单光子发射型计算机断层扫描(^(99m)Tc-3PRGD_(2) SPECT/CT)显像在肿瘤领域中的应用受到越来越多的关注。该显像技术是一种通过与整合素受体αVβ3的选择性结合从而特异性显示肿瘤以及血管生成区域的核医学检查方法,在肿瘤良恶性的诊断、恶性肿瘤治疗效果的评估以及预后中具有一定的价值。本研究主要针对^(99m)Tc-3PRGD_(2) SPECT/CT在常见肿瘤(乳腺癌、肺癌等)诊疗中的应用进行综述,探究该检查手段在患者个体化治疗中的推进作用及在肿瘤诊断和预后评估中的应用前景。

^(99)Tc^m-MAG_3-Lys-mPEG的制备及其在小鼠体内的分布

以mPEG-5000、Fmoc-Lysine和MAG3为原料,经过五步反应合成了载体MAG3-Lys-mPEG;对其进行99Tcm标记后,进一步研究了标记物的体外稳定性及其在小鼠体内的生物分布。结果表明,99Tcm-MAG3-Lys-mPEG的标记率>98%;标记物在体外有很好的稳定性,在生理盐水中放置24 h时,放化纯度>91%;在血清中温浴16.5 h时放化纯度仍>92%;标记物在小鼠体内的血液清除较快,在肾脏中的摄取最高,标记物主要经肾脏通过尿液排出体外。mPEG有可能用作反义核酸的有效载体。

新型^(99)Tc^m标记肾显像剂的研究 Ⅱ ^(99)Tc^m-MAG_2的合成及与^(99)Tc^m-MAG_3和^(99)Tc^(m^2)-DTPA的显像比较

合成了一种新型配体Bz-MAG 2(苯甲酰硫代乙酰基双甘氨肽),研究了该配体与^(99)Tc^m络合的影响因素(如反应体系pH值、反应温度和反应时间等),给出了络合产额≥98％的反应条件。在大白兔体内的显像结果表明:^(99)Tc^m-MAG_2的肾显像质量以及肾排泄速度都大大优于目前临床上常用的^(99)Tc^m肾显像剂^(99)Tc^m-DTPA(二乙撑三胺五乙酸),而稍次于^(99)Tc^m-MAG_3(巯基乙酰基三甘氨肽)。

~3H和^(99)Tc在黄土中的迁移特性比较

3 H和99Tc是低中放废物处置中 2个重要的核素 ,在处置场的安全评价中十分重要 .由于介质对3 H和99Tc的吸附较弱 ,常忽略其滞留性 ,并用3 H标定地下水的流速 .野外实验表明 :在包气带中 ,黄土对99Tc的吸附大于3 H ;在含水层中 ,黄土对3 H迁移的影响大于99Tc.本文根据实验数据 ,采用非平衡吸附模式NESOR程序分别模拟了3 H和99Tc在黄土包气带和含水层中的迁移过程 .模拟结果表明 :99Tc在黄土包气带中的分配系数范围为 0 0 5～ 0 0 5 5mL/g ;3 H在黄土含水层中分配系数为 0 1 1 6mL/g ,该参数是黄土对3 H和99Tc综合影响的结果 ,其滞留机理尚待研究 .

^(99m)Tc-MAG_3-ASON的制备及其在荷乳腺癌裸鼠中的分布

目的:探讨99mTc标记的反义寡核苷酸(ASON)的制备及其在荷乳腺癌裸鼠中的分布。方法:一步法合成巯基乙酰三甘氨酰-N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS-MAG3),并与c-erbB2 mRNA互补的5’末端氨基修饰的15个碱基的ASON偶联;随后进行99mTc的标记,并用Sephadex G25分离纯化99mTc-MAG3-ASON,并评价其稳定性;最后检测其在荷乳腺癌BALB/c裸鼠体内的分布。结果:99mTc-MAG3-ASON平均标记率为70.6%;纯化后,在室温下放置4h,其放化纯度为94.3%;与人血清孵育后,其放化纯度为93.8%;与血浆蛋白结合率为11.8%。乳腺癌组织的摄取率2h达峰值(6.09%ID/g)。结论:以NHS-MAG3为螯合剂制备的99mTc-MAG3-ASON具有良好的稳定性,在乳腺癌部位高浓聚,可望用于肿瘤的显像诊断和治疗。

^(99)Tc^m-3PEG4-RGD用于家兔易损斑块分子显像

目的探讨通过探测兔新生微血管活体评价动脉易损斑块的可行性。方法将15只雄性新西兰大白兔随机分成普食对照组(A组)、易损斑块组(B组)和稳定斑块组(C组),每组5只。于喂养2周后分别进行股动脉分离假手术(A、C组)和腹主动脉球囊拉伤术(B组),之后喂养不同成分饲料。于4、8、12周末静脉注射99 Tcm-3PEG4-RGD,注射后0.5h、1h、2h行SPECT/CT显像及同机CT平扫。4、8周末显像后对3组各处死1只实验兔,12周末处死剩余动物,行离体血管SPECT显像、病理及免疫组化染色分析。结果 3组实验兔注射99 Tcm-3PEG4-RGD后0.5hSPECT/CT图像显示,4周后3组兔腹主动脉区均未见放射性摄取增高,T/NT值差异无统计学意义(F=2.515,P=0.122);8周后B、C组局部放射性摄取增高(F=17.037,P=0.001);12周后B组腹主动脉局部放射性摄取明显高于A、C组(F=43.710,P<0.001)。8、12周末,B、C组腹主动脉中均含有新生微血管,且B组数量明显高于C组。B组兔腹主动脉斑块的AHA动脉粥样硬化分型为Ⅲ型及Ⅳ型,C组为AHAⅡ型。A组腹主动脉中无新生微血管及易损斑块。结论 99 Tcm-3PEG4-RGD分子显像对无创性评价兔动脉斑块稳定性具有一定价值。

N_2S_2或N_3S型配体的合成、^(99)Tc^m标记及生物分布研究

以MAG3为基本分子骨架 ,根据构效关系 ,分别引入合适的天然氨基酸 ,设计合成了 4种N2 S2 或N3S型小分子多肽新配体 ,并通过了IR ,1HNMR ,13CNMR ,MS谱学鉴定和元素分析表征。采用葡庚糖酸钙(GH)交换法对 4个配体进行了99Tcm 标记 ,研究了配合物在小鼠体内的生物分布特征。结果表明 ,99Tcm MVGG肾摄取较高 ,滞留时间较长 ,血清除快 ,且肾与其它组织的活度比值高 ,具备成为肾功能显像剂的条件 ;99Tcm MPGG肾初始摄取较高 ,R(肾 /血 )活度比值高 ,但肾清除较快 ,R(肾 /肝 )活度比值较低 ;99Tcm MVTC和99Tcm MPTC心肌初始摄取均较高 。

放疗后早期肿瘤组织内^99Tc^m-rh-Annexin V分布与Survivin、Caspase-3蛋白表达的相关性研究

采用^99Tc^m-rh-Annexin V作为凋亡显像示踪剂，观察小鼠放疗后早期肿瘤组织内Survivin、Caspase-3蛋白表达。结果显示，放疗组肿瘤组织内^99Tc^m-rh-Annexin V分布、TUNEL检测阳性细胞数及Caspase-3蛋白表达均明显多于对照组，Survivin蛋白表达A组明显高于B组，差异均存在显著性（P均＜0．01）。相关性研究表明，肿瘤组织的放射性摄取与TUNEL阳性细胞数呈明显正相关（r=0．942，P=0．000）；肿瘤组织内Survivin蛋白表达与Caspase-3蛋白表达呈明显负相关（r=-0．836，P=0．000）。肿瘤组织内^99Tc^m-Annex-inV分布与Caspase-3蛋白表达呈明显正相关（r=0．948，P=0．000），与Survivin蛋白表达呈明显负相关（r=-0．819，P〈0．01）。以上结果提示，肿瘤组织内^99Tcm—rh—Annexin V的分布可以反映放疗后早期肿瘤组织细胞凋亡的状况以及凋亡调控蛋白Survivin、Caspase-3表达水平的变化。

NHS-MAG_3为螯合剂的^(99m)Tc-寡核苷酸标记特性

目的 探讨以 NHS- MAG3作为螯合剂的 99m Tc-寡核苷酸 (99m Tc- ON)的标记特性。方法 将 NHS-MAG3与长度为 15个碱基的 c- m yc m RNA的反义 (ASON)、正义 (SON)和无义寡核苷酸 (MON)偶联 ,进行 99m Tc标记 ,Sephadex G2 5柱层析分离纯化 ,评价 99m Tc- ON的标记率、放化纯和稳定性 ;将 ON- MAG3偶联物置 - 2 0℃贮存 15 d、1月、2月后进行 99m Tc标记 ,观察标记率的变化 ,评价 ON- MAG3的稳定性 ;用三氯乙酸沉淀法测定 99m Tc-ON的血浆蛋白结合率。结果 99m Tc- ASON、99m Tc- SON和 99m Tc- MON的标记率分别为 6 8.4 1%、6 6 .2 4 %和6 9.38% ,纯化后放化纯分别为 96 .98%、95 .34%和 94 .6 2 %。三者在室温和血清中均较稳定。 ON- MAG3在 - 2 0℃保存 2月后 ,标记率未见明显下降。三种 99m Tc- ON的血浆蛋白结合率均小于 13%。结论 以 NHS- MAG3作为螯合剂的 99m Tc- ON具备优良的标记特性 ,标记率、放化纯较高 ,稳定性好 ,血浆蛋白结合率低 。

α_vβ_3受体显像剂^(99)Tc^m(N)(PNP6)(Cys-RGD)的制备及动物实验

为探讨99Tcm标记的小分子环形Cys-RGD肽用于αvβ3受体阳性肿瘤显像的可行性,以99Tcm(N)核联合协同配体二膦基胺类化合物二[二(乙氧基丙基膦)-乙基]-乙氧基乙基胺(PNP6)对环形Cys-RGD肽(c(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys)-Cys)进行了标记,并考察了标记物的体外稳定性及正常小鼠和荷FWK-1胰腺癌裸鼠模型的体内生物分布和平面显像。标记条件经优化后,标记率大于92%,且具有良好的体外稳定性。生物分布实验表明,99Tcm(N)(PNP6)(Cys-RGD)在血液中清除较快,主要通过肾脏排泄;注药后1h标记物在肿瘤中的摄取值为2.92±0.71%/g,注药后4h肿瘤与血和肿瘤与肌肉的放射性摄取比(T/NT)分别为11.0和3.1;注药后1h,肿瘤显像清晰。以上结果提示,99Tcm(N)(PNP6)(Cys-RGD)有望成为αvβ3受体阳性肿瘤显像剂。

^(99m)Tc(CO)_3-MECHDTC配合物的制备及其生物分布研究

采用fac-[99mTc(CO)3(H2O)3]+与N-甲基-N-环己基氨荒酸盐(MECHDTC)在室温下发生配体交换反应制得99mTc(CO)3-MECHDTC配合物.用薄层层析(TLC)法和高效液相色谱(HPLC)法鉴定该配合物的放射化学纯度(R)大于90%.该配合物是一种体外稳定性良好的脂溶性电中性物质.99mTc(CO)3-MECHDTC配合物和99mTcN-MECHDTC配合物在小鼠体内生物分布结果表明,前者在小鼠心肌和脑中摄取量均较低且明显低于后者,说明在MECHDTC配体中并不适合引入[99mTc(CO)3]+核.

新型心肌灌注显像剂^(99m)Tc-Q_3的临床前药理研究

为了给临床应用研究提供依据 ,作者对新型心肌灌注显像剂 99m Tc- N,N′-亚乙基 -二 (乙酰丙酮亚胺 )二〔三 (3-甲氧基 - 1 -丙基 )膦〕(99m Tc- Q3)进行了临床前药理研究。其内容包括 :99m Tc- Q3在兔体内的血药清除动力学、血浆蛋白结合率、小鼠体内分布、家犬显像及异常毒性试验等。结果显示 :1 9m Tc- Q3的放化纯度 >99% ,室温下放置 6小时稳定 ;2兔血药清除动力学符合一次静脉给药的药代动力学二室模型 ;3小鼠体内分布显示 99m Tc- Q3在小鼠心肌摄取早 ,摄取值高 ,且放射性滞留时间长 ,血、肺及肝药物清除均快 ;4从家犬显像可见 ,99m Tc- Q3在肺中清除迅速 ,1小时后肺部放射性水平接近本底 ,1 5分钟时心肌影像已清晰可见 ,3小时后才逐渐消退 ;5 99m Tc- Q3的兔血浆蛋白结合率低 (7.1 3± 0 .42 % ) ;6小鼠对药物的耐受剂量为人的 5 0 0倍。上述结果表明 ,99m Tc- Q3的体外性质稳定 ,心肌摄取早 ,摄取率高 ,且放射性滞留时间长 ,血、肺及肝清除快 ,安全 。

fac-[Μ(CO)_3]^+(Μ=^(188/186)Re,^(99)Tc^m)化合物的生物标记及应用

fac-[Μ(CO)_3]^+(Μ=^(188/186)Re,^(99)Tc^m)具有良好的放射生物学特性,是一种很有发展前途的标99记前体。本文综述了fac-[Μ(CO)3]+(Μ=188/186Re,Tcm)核标记生物小分子(生物素、雌激素……)、大分子蛋99白及多肽的研究进展,并探讨了其今后发展的方向。

新型心肌灌注显像剂^(99m)Tc-Q_3的标记方法学研究

为获得高质量的心肌灌注显像剂，作者进行了99mTc－N，N＇-亚乙基-二（乙酰丙配亚胺）二（三（3-甲氧基-1-丙基）膦］（99mTc－Q3）的制备方法学研究。采用多元正变试验法进行了制备99mTc－Q3最佳配方的筛选；用氯化亚锡化学还原法制备99mTc－Q3；用柱沉析法进行99mTc－Q3的分离和纯化、质量控制及体外稳定性试验；完成了无菌、热原、安全试验及家免显像验证。制备99mTc－Q3的最佳配方为“A2B2C2”（即：氢氧化钾、Sn2+及配体分别处于二水平的结果）。药物标记率和放化纯大于99％。药物体外稳定性好，标记后4小时测得其标记率仍然大于92％（92％～99．37％）。兔显像发现：注射99mTc－Q3后5分钟心肌便显影，至3小时心肌影像仍清晰可见。注射1小时后，血、肺中的放射性接近本底、提示：该方法可获得高质量的99mTc－Q3，而且为所有99mTc-显像剂的制备建立了标准化流程，在此基础上可进一步研制99mTc－Q3的一步法药盒。

^(99m)Tc-MAG_3-ASON药代动力学研究

目的:研究99mTc标记的MAG3-ASON螯合物的药代动力学特征。方法:制备99mTc-MAG3-ASON螯合物;随后用放射性计数法测定其半衰期,用3P97软件求出其分布半衰期、消除半衰期、中央室分布容积、总表观分布容积、总清除率;最后用三氯醋酸法测定其血浆蛋白结合率。结果:99mTc-MAG3-ASON的分布半衰期是2.11min;消除半衰期是95.19min;中央室分布容积是114.9ml;总表观分布容积是2430.8ml;总清除率是17.7ml/min。与人血浆孵育1.5h后,血浆蛋白结合率为11.82%。结论:99mTc-MAG3-ASON螯合物在体内的转运过程符合二室模型,其良好的药代动力学特征,可望用于肿瘤的显像诊断和治疗。

^(99)Tc^m(CO)_3-有机膦配合物的制备及其生物分布

以 [99Tcm(OH2 ) 3 (CO) 3 ]+ 为前体 ,对两种有机膦配体 (PPh3 和 Tetrofosmin)进行了 99Tcm(CO) 3核配合物的制备 ,得到了放化纯度大于 95 %的 99Tcm(CO) 3 -有机膦配合物 ;并进行了其电性、稳定性及小鼠生物分布的初步研究。99Tcm(I) (CO) 3 - tetrofosmin的小鼠体内分布结果表明 ,配合物主要通过肝脏系统进行代谢 ,血摄取量较低 。

一类新的^(99)Tc^m标记N_3S类肽配合物的构效关系研究

用分子力学方法寻找了12种新合成配体的99Tcm标记类肽配合物的优势构象,用半经验量子化学方法中的ZINDO/1进行了优化,并作了电子结构计算,获得了有关配合物物化性质的若干参数。对配合物的肾、肝摄取值和所得的参数进行了多元线性回归。回归方程表明:该类配合物的肾摄取值与分子偶极距及分子价态具有相关性,其肝摄取与分子体积相关。