血清lncRNAs ABHD11-AS1、miR-1231表达与胃癌根治术后复发转移及远期预后的相关性

目的探究血清长链非编码RNAα/β水解酶域11反义RNA1(lncRNAs ABHD11-AS1)、微小RNA-1231(miR-1231)表达与胃癌根治术后复发转移及远期预后的相关性。方法选取2018年7月至2020年7月进行胃癌根治术治疗的147例患者(胃癌组),根据复发转移情况,将患者分为复发转移组48例和未复发转移组99例,根据3年预后情况,分为生存组40例和死亡组107例,选取同期体检的健康人员132例作为对照组,采用实时荧光定量PCR法测定血清lncRNAs ABHD11-AS1、miR-1231表达水平,采用Pearson法分析血清lncRNAs ABHD11-AS1、miR-1231的相关性,采用Logistic回归分析影响胃癌根治术后复发转移的因素。结果与对照组比较,胃癌组lncRNAs ABHD11-AS1表达水平显著升高(P<0.05),miR-1231表达水平显著降低(P<0.05)。血清lncRNAs ABHD11-AS1和miR-1231表达呈负相关(r=-0.691,P<0.05)。复发转移组肿瘤直径>5 cm、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期、分化程度低分化、浸润深度T3+T4、有淋巴结转移的患者比例及lncRNAs ABHD11-AS1表达水平显著高于未复发转移组(P<0.05),miR-1231表达水平显著低于未复发转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤直径、浸润深度、lncRNAs ABHD11-AS1是胃癌根治术后复发转移的独立危险因素,miR-1231是保护因素(P<0.05)。死亡组lncRNAs ABHD11-AS1表达水平显著高于生存组(P<0.05),miR-1231水平显著低于生存组(P<0.05)。结论胃癌患者血清中lncRNAs ABHD11-AS1表达水平升高,miR-1231表达水平降低,与胃癌根治术后复发转移及远期预后密切相关,可能作为胃癌根治术后复发转移及远期预后的标志物。

circ_0000502靶向miR-1231调控甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖和凋亡

目的探讨circ_0000502对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法选取26例甲状腺乳头状癌组织及相应癌旁组织。将TPC-1细胞分为NC组、si-NC组、si-circ_0000502组、miR-NC组、miR-1231组、si-circ_0000502+anti-miR-NC组、si-circ_0000502+anti-miR-1231组。qRT-PCR检测circ_0000502和miR-1231的表达水平;MTT检测细胞活性;Transwell、流式细胞术检测细胞的迁移、侵袭和细胞凋亡情况;Western blotting检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0000502和miR-1231的靶向关系。结果甲状腺乳头状癌组织和细胞中circ_0000502呈高表达,miR-1231呈低表达。沉默circ_0000502或过表达miR-1231降低了TPC-1细胞增殖活力、迁移、侵袭细胞数,抑制PCNA、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达,促进细胞凋亡和Bax蛋白表达(P<0.05)。circ_0000502靶向调控miR-1231表达(P<0.05),下调miR-1231表达逆转了沉默circ_0000502对TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响(P<0.05)。结论沉默circ_0000502通过靶向上调miR-1231调控TPC-1细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡。

三七总皂苷调控miR-1231保护高糖下肾小球系膜细胞的研究

目的探讨三七总皂苷(PNS)调控miR-1231对高糖诱导的肾小球系膜细胞(HMCs)增殖及炎症反应的影响。方法将人肾小球系膜细胞(HMCs)分为空白对照组(CON),高糖组(HG)和三七总皂苷组(PNS)。采用CCK-8法检测PNS对高糖下HMCs增殖的抑制作用。采用Real-time PCR法检测miR-1231在各组的相对表达量,生物信息学分析法筛选与miR-1231相关的信号通路及其参与的生物学功能。采用ELISA法和Western blot法检测炎症因子的分泌情况。结果CCK-8结果表明,与高糖组相比PNS在浓度为6.25~200μg/mL状态下,对细胞过度增殖的抑制作用呈现明显的浓度依赖性(P<0.05),且50μg/mL的PNS已能够显著改善高糖诱导下HMCs的异常增殖(P<0.01)。PCR的结果显示,与对照组相比,高糖组miR-1231表达显著下降;与高糖组相比,PNS干预后显著升高(P<0.01)。对miR-1231进行生物信息学分析,预测到miR-1231的靶基因有IGF1、TMED1、GSTT2等;用GeneOntology和KEGG数据库对miR-1231进行通路富集和生物学功能分析,确定miR-1231与MAPK信号通路紧密相关,miR-1231的靶基因参与调控肾小球系膜细胞内蛋白质转运等生物功能。ELISA的结果表明,与对照组比较,高糖组上清液中TNF-α、IL-6表达增多(P<0.01);与高糖组比较,PNS组上述两种炎症因子表达下降(P<0.01)。Western blot的结果表明,高糖组细胞中TNF-α、IL-6蛋白表达水平较对照组显著升高(P<0.01);PNS组较高糖组相比TNF-α、IL-6蛋白表达量显著降低(P<0.01)。结论PNS可通过上调miR-1231的表达,缓解炎症,发挥对HMCs的保护作用。

circ_0001658靶向miR-1231对肝癌Huh-7细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨circ_0001658是否靶向miR-1231影响肝癌Huh-7细胞的增殖和凋亡。方法:肝癌组织中circ_0001658和miR-1231表达采用qRT-PCR进行测定。利用CCK-8法检测si-circ_0001658组、miR-1231组、si-circ_0001658+anti-miR-1231组、si-NC组、miR-NC组、si-circ_0001658+anti-miR-NC组细胞活性,克隆形成、流式细胞术检测细胞克隆形成、凋亡,Western blotting检测cleaved-caspase 3和cleaved-caspase9表达。双荧光素酶报告实验检测circ_0001658和miR-1231的靶向结合。结果:与癌旁组织相比,肝癌组织中circ_0001658表达量升高,miR-1231表达量降低。干扰circ_0001658或过表达miR-1231降低Huh-7细胞活性、克隆形成数,增加凋亡率、cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达量。circ_0001658靶向调控miR-1231的表达,下调miR-1231表达逆转了干扰circ_0001658表达对肝癌Huh-7细胞增殖和凋亡的作用。结论:干扰circ_0001658表达通过靶向负调控肝癌Huh-7细胞的miR-1231,抑制细胞增殖和诱导凋亡。

^(123)I的制备及其标记新型小分子融合肽的初步研究

本工作利用天然锑靶,通过121Sb(α,2n)123I核反应,在控制锑靶厚度为62.2～64.3mg/cm2和α粒子能量为26.5MeV的情况下,可以得到11.1TBq/(A.h)以上且核纯度高达98.6%的123I。利用制备的123I进行了小分子融合肽拟似物VHCDR1-VHFR2-VLCDR3的123I标记,并对标记物的体外稳定性及在正常小鼠体内的分布进行了初步研究。结果表明,123I标记VHCDR1-VHFR2-VLCDR3的标记率可达90%以上,123I标记物在体内不易脱碘且具有较高的体外稳定性。

结肠癌中miR-1231表达变化的临床意义

目的:观察结肠癌患者组织标本中miR-1231表达的改变,并探讨其相关的临床意义。方法:取鄂东医疗集团黄石市中心医院2016年2月至2017年8月收治的结肠癌患者94例,取癌旁非肿瘤组织作为对照。采用qRT-PCR检测miR-1231的表达。分析miR-1231表达的变化与各临床指标间的相关性。结果:结肠癌组织中miR-1231的2^(-△Ct)值为0.146±0.018,显著低于对照组织的0.282±0.047(P<0.01)。miR-1231的2^(-△Ct)值结肠癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小无相关性(P>0.05)。miR-1231的2^(-△Ct)值在TNM临床III,IV期患者为0.125±0.014,显著低于I,II期患者的0.161±0.028(P<0.05)。miR-1231的2^(-△Ct)值在中、低分化患者为0.131±0.015,显著低于高分化的0.174±0.032(P<0.05)。miR-1231值在淋巴结有转移患者为0.125±0.014,显著低于无转移的0.154±0.020(P<0.05)。Pearson相关分析显示miR-1231表达与患者的临床TNM分析(r=-0.361,P<0.05)、肿瘤分化(r=-0.342,P<0.05)、淋巴结是否转移(r=-0.354,P<0.05)呈负相关。结论:结肠组织中miR-1231低表达,其表达变化可能参与结肠癌的发生、发展、侵袭和转移过程。

miR-1231通过靶向EGFR/PI3K/AKT通路抑制脑膜瘤细胞增殖

目的探究miR-1231通过靶向EGFR/PI3K/AKT通路对脑膜瘤细胞增殖的影响。方法生物信息学软件分析预测并通过荧光素酶报告基因实验验证miR-1231与EGFR之间的靶向结合作用,RT-PCR检测脑膜瘤细胞miR-1231表达和EGFR mRNA表达,Western blot检测EGFR蛋白表达、PI3K和AKT磷酸化水平,CCK-8检测脑膜瘤细胞活力,集落形成实验和EdU实验检测脑膜瘤细胞增殖。结果与正常脑膜细胞相比,脑膜瘤细胞中miR-1231表达显著下调,而EGFR表达显著上调(P<0.05)。生物信息学软件分析预测并通过荧光素酶报告基因证明EGFR为miR-1231的靶基因。与miR-NC组相比,miR-1231组显著抑制脑膜瘤细胞增殖、抑制EGFR/PI3K/AKT通路(P<0.05);与anti-miR-NC组相比,anti-miR-1231组显著促进脑膜瘤细胞增殖、激活EGFR/PI3K/AKT通路(P<0.05);与miR-NC+EGFR-NC组相比,miR-1231+EGFR-NC组显著抑制脑膜瘤细胞EGFR/PI3K/AKT通路,并显著下调细胞增殖能力(P<0.05);与miR-NC+EGFR-NC组相比,miR-NC+EGFR组显著激活脑膜瘤细胞PI3K/AKT通路,并显著上调细胞增殖能力(P<0.05),且能逆转miR-1231+EGFR-NC对脑膜瘤细胞PI3K/AKT通路和细胞增殖能力的抑制作用。结论miR-1231通过靶向EGFR调节PI3K/AKT通路抑制脑膜瘤细胞增殖。

miR-1231通过靶向EGFR/PI3K/AKT通路抑制脑膜瘤细胞增殖研究

目的:探究miR-1231通过靶向EGFR/PI3K/AKT通路对脑膜瘤细胞增殖的影响。方法:生物信息学软件分析预测并通过荧光素酶报告基因实验验证miR-1231与EGFR之间的靶向结合作用;RT-PCR检测脑膜瘤细胞miR-1231表达和EGFR mRNA表达;Western blot检测EGFR蛋白表达、PI3K和AKT磷酸化水平;CCK-8检测脑膜瘤细胞活力;集落形成实验和EdU实验检测脑膜瘤细胞增殖。结果:与正常脑膜细胞相比,脑膜瘤细胞中miR-1231表达显著下调(P<0.05),EGFR表达显著上调(P<0.05);生物信息学软件分析预测并通过荧光素酶报告基因证明EGFR为miR-1231的靶基因;与miR-NC组相比,miR-1231显著抑制脑膜瘤细胞增殖和抑制EGFR/PI3K/AKT通路(P<0.05);与anti-miR-NC组相比,anti-miR-1231显著促进脑膜瘤细胞增殖和激活EGFR/PI3K/AKT通路(P<0.05);与miR-NC+EGFR-NC组相比,miR-1231+EGFR-NC显著抑制脑膜瘤细胞EGFR/PI3K/AKT通路(P<0.05),显著下调细胞增殖能力(P<0.05);与miR-NC+EGFR-NC组相比,miR-NC+EGFR显著激活脑膜瘤细胞PI3K/AKT通路(P<0.05),显著上调细胞增殖能力(P<0.05),且能逆转miR-1231+EGFR-NC对脑膜瘤细胞PI3K/AKT通路和细胞增殖能力的抑制作用。结论:miR-1231通过靶向EGFR调节PI3K/AKT通路抑制脑膜瘤细胞增殖。

Circ_0000502靶向调节miR-1231促进口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞增殖和抑制细胞凋亡的体外研究

目的:探讨环状RNA 0000502(circ_0000502)是否靶向微小RNA-1231(microRNA-1231,miR-1231)调控口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞HSC-3的增殖和凋亡。方法:实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)分析OSCC组织、癌旁组织中circ_0000502和miR-1231的表达水平。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)、流式细胞术分析circ_0000502和miR-1231表达对HSC-3细胞增殖和凋亡的影响。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR用于确定circ_0000502和miR-1231调控关系。结果:OSCC组织中,circ_0000502呈高表达,miR-1231呈低表达(P<0.05)。抑制circ_0000502或过表达miR-1231能显著降低HSC-3的细胞活力,提高细胞凋亡率(P<0.05)。与单独抑制circ_0000502比较,同时抑制circ_0000502和miR-1231后,HSC-3细胞活力显著升高,凋亡率显著降低(P<0.05)。结论:circ_0000502靶向负调控miR-1231能促进OSCC细胞HSC-3增殖,抑制细胞凋亡。Circ_0000502/miR-1231分子轴是OSCC的潜在治疗靶点。

卵巢癌组织miR-1231、miR-146b的表达与患者预后的关系

目的探讨卵巢癌组织中miR-1231、miR-146b的表达情况,并分析二者与患者预后的关系。方法选取我院收治的141例行卵巢癌根治术的患者作为卵巢癌组,取同期行腹腔镜手术治疗的69例良性卵巢组织病变患者作为对照组。比较2组患者组织中miR-1231、miR-146b表达水平。术后随访3年,根据卵巢癌患者预后分成预后良好组、预后不良组,单因素分析卵巢癌患者预后不良的相关因素,并经Cox多元回归模型分析卵巢癌患者预后不良的危险因素。绘制Kaplan Meier生存曲线,经log-rankχ^(2)检验分析不同miR-1231、miR-146b表达患者预后的差异。结果卵巢癌组miR-1231、miR-146b mRNA相对表达水平低于对照组(P<0.05)。预后不良组低分化、国际妇产科联盟(FIGO)分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移的占比高于预后良好组,术后放/化疗及miR-1231、miR-146b高表达的占比低于预后良好组(P<0.05)。Cox多元回归分析显示低分化、FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移是卵巢癌患者预后不良的危险因素,术后放/化疗及miR-1231、miR-146b高表达是预后的保护因素(P<0.05)。miR-1231、miR-146b高表达组3年累积生存率高于miR-1231、miR-146b低表达组(P<0.05)。结论卵巢癌组织中miR-1231、miR-146b表达降低,二者低表达会增加卵巢癌患者的预后不良风险。

从发酵液中萃取青霉素时用阴、阳离子表面活性剂作破乳剂的研究Ⅰ.阳离子表面活性剂

本文研究了青霉素萃取工艺中的乳化成因,并用常用的阳离子表面活性剂十五烷基溴化吡啶(PPB)及十二烷基三甲基溴化铵(1231)为破乳剂研究其破乳能力及其作用规律,结果表明,PPB和1231在较高浓度下都有较好的破乳效果.

北京市旅游发展总体规划研究

总结了编制北京市旅游发展总体规划的实际工作 ,结合区域旅游规划的一般原理 ,提出了省级旅游规划的 1 2 31工程模式。即一个目标的确定 ;资源和市场的表层和里层分析 ;吸引物及产品、接待设施和服务、整体旅游环境建设三个板块的设计 ;以及旅游发展的支持系统构建。该模式作为一种区域旅游规划的理论框架 ,较为适合旅游业已较成熟地区的管理规划研制。

miR-1231在胰腺癌患者血浆和胰腺癌细胞外泌体中的表达及临床意义

目的探讨miR-1231在胰腺癌患者血浆和胰腺癌细胞外泌体中的表达及其临床意义。 方法选取2016年4月至2017年8月在湖南省肿瘤医院确诊为胰腺癌的患者16例,选取16例同期健康志愿者作为正常对照组。收集16例胰腺癌患者和16例健康志愿者的血浆,采用实时荧光定量PCR法检测血浆外泌体中miR-1231的表达,分析外泌体中miR-1231的表达水平与胰腺癌患者临床病理特征的关系。分析胰腺癌细胞系MIA PaCa-2、PANC-1、SW1990、AsPC-1和BxPc-3以及正常胰腺上皮细胞(人胰腺导管上皮细胞和原代人正常胰腺上皮细胞)外泌体中miR-1231的表达。 结果实时荧光定量PCR检测结果显示,胰腺癌患者血浆外泌体中miR-1231的表达水平为1.06±0.46,低于健康志愿者(2.30±0.99),差异有统计学意义(P<0.05)。miR-1231在Ⅰ~Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期胰腺癌患者血浆外泌体中的表达水平分别为1.515±0.531和0.848±0.224,miR-1231在有、无远处转移的胰腺癌患者血浆外泌体中的表达水平分别为0.757±0.278和1.236±0.461,miR-1231在有、无淋巴结转移的胰腺癌患者血浆外泌体中的表达水平为0.838±0.261和1.337±0.522,差异均有统计学意义(均P<0.05)。胰腺癌患者血浆外泌体中miR-1231在不同年龄、性别、有无吸烟史、糖链抗原19-9(CA19-9)浓度和肿瘤部位的胰腺癌患者血浆外泌体中的表达水平差异均无统计学意义(均P>0.05),而在不同淋巴转移情况、不同远处转移情况和不同临床分期的胰腺癌患者血浆外泌体中的表达差异均有统计学意义(均P<0.05)。miR-1231在胰腺癌细胞外泌体中的表达水平为0.142±0.135,低于正常胰腺上皮细胞(1.127±0.179),差异有统计学意义(P<0.05)。 结论胰腺癌患者血浆和胰腺癌细胞外泌体中miR-1231的低表达可能与胰腺癌的发生发展有关,外泌体中miR-1231的表达可能成为胰腺癌新的诊断标志物或预后因子。