^(188)Re间接标记单克隆抗体的研究

采用先标记后偶联的方法 ,以NHS -MAG3 为双功能连接剂 ,研究了用188Re标记单克隆抗体的各种实验条件 ,得到了最佳标记方法和偶联方法。标记抗体188Re -NHS -MAG3 -IgG体外稳定性良好。完成了188Re -NHS -MAG3 -CL3在小鼠体内的生物分布实验 ,结果表明该配合物在体内稳定性良好。

^(188)Re标记抗人前列腺癌单克隆抗体及其在荷瘤裸鼠体内的放射性分布

为探讨188Re标记抗前列腺癌单克隆抗体7E11C5.3的方法及其生物学分布,采用2-巯基乙醇直接还原法制备188Re-7E11C5.3标记物,常规测定标记率和免疫活性,在荷瘤裸鼠体内检测标记物的生物学分布。结果显示,188Re-7E11C5.3的标记率为(93.16±2.18)%,免疫活性分数为(74.86±1.86)%;经尾静脉注入裸鼠体内后,肿瘤组织摄取率在24h达高峰,非肿瘤组织在4h摄取率较高,以后均随时间延长逐步降低;血液放射性清除迅速;24h时T/NT值达最大,至72h仍可保持在较高水平。结果表明,188Re-7E11C5.3在裸鼠体内对前列腺癌移植瘤有良好的靶向定位作用,可用于前列腺癌放射免疫显像和治疗研究。

^(188)Re标记抗胃癌单克隆抗体3Hll的研究

目前，用于放射免疫治疗的核素主要有１３１Ｉ和发射纯β射线的９０Ｙ。由于１３１Ｉ体内脱碘和对周围有较大辐射量及９０Ｙ对骨髓有较大毒副作用等，限制了其使用［１，２］。目前人们更多的进行与９９Ｔｃｍ同副族Ｒｅ的同位素１８６Ｒｅ和１８８Ｒｅ的研究。１８６Ｒｅ...

^(188)Re标记抗CEA单克隆抗体及荷瘤裸鼠治疗实验研究

为建立18 8Re标记抗癌胚抗原 (CEA)单克隆抗体 (McAb )C50 的直接标记方法 ,探讨其标记条件 ,用抗坏血酸还原McAb ,并以葡萄糖酸钠为中间螯合剂 ,以氯化亚锡作还原剂 ,用188Re标记C50 。观察188Re标记McAb的体外稳定性 ,探讨还原剂SnCl2 浓度、螯合剂葡萄糖酸钠浓度、抗体浓度、加入抗体间隔的时间对标记物放化纯度的影响。SPECT显像观察荷瘤裸鼠瘤内注射188Re-C50 后放射性分布 ,对治疗后的瘤体行病理观察。实验结果显示 ,188Re标记C50 的合适条件为 :2 .2— 4 .0g/LSnCl2 、0 .3mol/L葡萄糖酸钠溶液、2 .5× 10 5— 5 .0× 10 5mol/LMcAb ,反应 2h后放化纯度可达 90 %。荷瘤裸鼠瘤内注射188Re -C50 后 ,放射性集中在瘤内 ,2周后瘤体明显缩小 ,镜下观察到肿瘤细胞破裂 ,坏死。

^(188)Re标记单克隆抗体BAC_5及对鼻咽癌细胞的抑制实验研究

目的 探讨放射性核素188Re标记抗鼻咽癌 (NPC)单抗BAC5的方法及188Re -BAC5对鼻咽癌进行免疫导向治疗的可行性 .方法 188Re -BAC5的制备采用直接标记法 ,采用MTT法观察188Re -BAC5对体外单层培养的鼻咽癌细胞 (CNE - 2 )的抑制作用 ,对照组为188Re-BSA、188ReO4 -.结果 188Re -BAC5的标记率在 80 %以上 ,MTT法结果表明188Re-BAC5组的抑瘤率比对照组明显提高 (p <0 .0 5 ) .结论 提示188Re

^(188)Re直接法标记抗人结肠癌单克隆抗体CL-3的研究

本工作对 188Re直接标记抗人结肠癌单克隆抗体 CL- 3的方法进行了详细的研究。以抗坏血酸作为抗体的还原剂 ,以 Sn Cl2 -柠檬酸还原 188Re O4 -溶液 ,进行抗体的直接标记。本方法操作简单、方便 ;标记率高 ( >95% )胶体含量小 ( <5% ) ;标记完后不需纯化分离 ;标记物有良好的体外稳定性和较高的免疫活性 。

^(188)Re直接标记抗人肝癌单克隆抗体片段HAb18的研究

本工作采用两步法进行 188Re直接标记抗人肝癌单克隆抗体 HAb18片段的研究。用 Sn Cl2 作为 188Re O4 -的还原剂 ,Na HSO3作为单抗片段双硫键的还原剂 ,观察了 188Re O4 -、抗体中双硫键的还原条件及抗体标记对还原率、标记率的影响。标记率为 85%～ 93% ,还原抗体片段巯基数为 2 .4个 /分子 ,免疫活性分数为 0 .91。实验结果表明 :标记物体外稳定性良好 ;标记物在小白鼠和荷瘤裸鼠体内血液清除快 ,并且主要通过肾脏排泄 。

^(188)Re标记单克隆抗体 2F7 的方法学研究

目的建立１８８Ｒｅ标记抗小细胞肺癌单克隆抗体（ＭＡｂ）２Ｆ７的方法，探讨其标记条件。方法以葡萄糖酸钠为中间螯合剂，用１８８Ｒｅ标记２Ｆ７，β疏基乙醇法还原ＭＡｂ。探讨还原剂ＳｎＣｌ２用量、ｐＨ值、ＭＡｂ浓度等对标记反应的影响。上行纸层析法测定标记率及胶体含量。直线回归外推法测定标记ＭＡｂ的免疫活性分数，并测定其在荷瘤裸鼠体内的生物分布。结果１８８Ｒｅ标记反应的适宜条件为：４０～８０ｇ／ＬＳｎＣｌ２，０１ｍｏｌ／Ｌ葡萄糖酸钠溶液，０５～２ｇ／ＬＭＡｂ，ｐＨ值５４～６８，标记率在２小时后可达９０％以上。荷瘤裸鼠体内生物分布测定表明，注射标记２Ｆ７４８小时后，瘤／血比约为２８，７２小时后则达３２。结论该标记方法操作简便，标记率高，无需在用药前进一步纯化，反应时间短，是较好的１８８Ｒｅ标记ＭＡｂ法。

单克隆抗体C50 ^(99)Tc^m标记药盒的制备

目的 探讨99Tcm C5 0放免显像药盒的制备方法。方法 用 2 亚氨噻酚盐酸盐修饰C5 0 ,通过99Tcm 葡庚糖酸钠 (GH)转换 ,将99Tcm 标记在C5 0上。用HPLC法分析修饰抗体和标记抗体 ,用纸层析法测定标记率和胶体 ,并用免疫分析法测定标记抗体生物活性。裸鼠尾静脉注射抗体后进行显像。结果 C5 0标记率为 97% ,其中99Tcm 胶体含量为 4% ,修饰抗体 4℃下可保存 3个月 ,标记抗体有良好的稳定性和免疫活性。荷瘤裸鼠 2 4h肿瘤部位与四肢肌肉的放射性比值为 4.0 3。结论该制备方法高效、便捷 ,并可用于其他单抗放免显像药盒的制备。

单克隆抗体Lym—1的^（90）Y预标记法研究

以ＤＯＴＡ类双功能螯合剂（ＤＯＴＡ－Ｐｅｐｔｉｄｅ）为联接剂，采用先把９０Ｙ标记到联接剂上，经纯化后再与单克隆抗体偶联的９０Ｙ预标记方法，使放射性得率大于３０％，并确定了标记产物的分析方法。结果表明使用９０Ｙ预标记方法把９０Ｙ标记到单克隆抗体上的过程是合理的，最终产品的放射化学纯度经ＨＰＬＣ和ＴＬＣ测定均大于９５％，相对于１２５Ｉ－ｌｙｍ－１的免疫活性经体外细胞结合法测定都大于１００％。

2-IT法^(99)Tc^m标记单克隆抗体的初步研究

目的 研究 2 -IT法99Tcm 间接标记单克隆抗体。方法 2 -IT修饰单抗后与99Tcm -GH反应 ,形成99Tcm-单抗 ,改变 2 -IT、GH量 ,获得最佳反应条件。结果 在 0 .1～ 1mg 2 -IT、1～ 2mgGH、99Tcm O-4 <1ml时 ,标记率保持在 90 %以上。结论 2 -IT法间接标记单抗方法简便 ,适于临床上应用。

^(99m)Tc标记的人成骨肉瘤单克隆抗体在荷瘤裸鼠体内的分布及显像研究

目的 研究骨肉瘤的放射免疫显像。方法 应用杂交瘤技术获得OS 732骨肉瘤单克隆抗体 ,用99mTc直接标记单克隆抗体 (McAb) ,将99mTc McAb经尾静脉注入荷人成骨肉瘤裸鼠体内 ,然后进行SPECT显像。结果 注射后6h ,肿瘤影像模糊 ,2 4h后 ,肿瘤部位可见明显的放射性浓聚 ,而对照组99mTc IgG除在肝脏稍有积聚外 ,放射性分布弥散 ,未见肿瘤显像。注射99mTc McAb后 2 4h ,肿瘤中的放射性明显高于其他组织 ,此时肿瘤与血液的放射性之比为 2 .2 5 ,而对照组仅为 0 .97,故有明显差别。结论 99mTc McAb在骨肉瘤组织中有明显放射性浓聚 ,因此 ,99mTc McAb放射性显像对骨肉瘤及其转移灶有很好的诊断价值。

微量^(131)I标记抗CD20单克隆抗体的标记及储存方法探讨

目的探讨微量131I标记抗CD20单克隆抗体的标记方法和储存条件。方法采用IODO-GEN碘化标记方法,检测不同标记时间(2、4、6、8分钟)和不同标记比例(l∶10、1∶15、1∶20)时标记物的标记率、放化纯度及免疫活性;并检测不同存放时间和储存条件下放化纯度的变化。结果标记时间4分钟以上标记率即可达90%、放化纯度达98%,标记4分钟的标记物免疫活性高于6、8分钟(P<0.05)。当重量(mg)与放射性活度(mCi)比为1∶10时,标记率、免疫活性高于1∶15、1∶20(P<0.05)。标记物内加l%人血清白蛋白注射液、37℃CO2孵箱储存放化纯度高于原液4℃储存(P<0.05)。结论微量、高比活度131I-Rituximab标记时重量(mg)与放射性活度(mCi)比为1∶10、标记时间为4分钟,宜内加1%人血白蛋白37℃CO2孵箱储存、时间不超过24小时。

单克隆抗体的^（99m）Tc标记

近年来用￣（９９ｍ）Ｔｃ单克隆抗体的研究越来越多见，本文着重介绍直接法中的还原剂和间接法中的配体及标记过程中的一些主要的原理。

188Re直接标记单克隆抗体

研究了用无载体的１８８Ｒｅ直接标记单克隆抗体的方法，以摩尔比为１∶３的柠檬酸－酒石酸作中间螯合剂，在ｐＨ＝５．２的条件下，用ＳｎＣｌ２将Ｎａ１８８ＲｅＯ４快速还原，再与已被ＮａＨＳＯ３还原的抗体交换配位。研究结果表明，反应２ｈ的标记率大于９５％，标记物的体内、体外稳定性良好并保持了抗体的免疫活性。

^(99)Tc^(m)直接法标记单克隆抗体的研究Ⅱ.抗坏血酸在直接法标记过程中的作用

分析和比较了在^（９９）Ｔｃ~ｍ直接法标记单克隆抗体过程中，抗坏血酸在各个环节中的作用和影响。结果表明，在抗体还原完成后加入防氧化剂抗坏血酸可以防止还原后的—ＳＨ重新氧化，得到的标记产物在标记率和体外稳定性方面均优于不加抗坏血酸的标记法。该方法已成功地用于对Ｆ（ａｂ＇）＿２片段的标记并进行了荷瘤裸鼠体内分布和肿瘤显像测定，得到了很好的体外显像结果。

^(131)I标记单克隆抗体C50在胃癌放射免疫导向手术中的应用

目的:探讨采用131I标记的癌胚抗原C50单克隆抗体在胃癌放射免疫导向手术(RIGS)中的应用价值。方法:胃癌患者22例术前通过胃镜直视下癌周粘膜下注射131I标记单克隆抗体C50(131I-C50mAb)进行放射免疫导向手术,术中取得组织标本离体测量其重量及γ计数,计算每克靶组织(T)和对照本底组织(NT)放射性计数比值(T/NT)。结果:胃镜直视下癌周粘膜下注射131I-C50mAb可有效区分组织有无癌浸润,分别选用T/NT界值8.0与9.0后判断胃壁肿瘤浸润、淋巴结转移的准确率分别为87.3%和92.6%。结论:C50可作为胃癌放射免疫导向手术的导向单克隆抗体,可为进一步使用手持式γ探测仪进行术中探测提供相应依据。

抗人活化血小板嵌合单克隆抗体SZ-51/Hu的纯化、鉴定和核素标记

目的 评价抗人活化血小板嵌合单克隆抗体SZ - 5 1/Hu核素标记及其用于临床血栓放射免疫显像的可行性。方法 用免疫亲和层析法纯化SZ - 5 1/Hu ,并对其特性进行鉴定 ,以过量的 2 -亚氨硫醇预处理SZ - 5 1/Hu ,采用99Tcm-葡庚糖酸钠 (GH)配体交换法标记。薄层层析法测定标记物的放化纯度。制备实验性狗股动脉血栓模型后 ,经静脉注入99Tcm-SZ - 5 1/Hu进行SPECT显像。结果 纯化的SZ - 5 1/Hu分子量为 16 0kD ,亲和常数 5 .5 10 4× 10 8L/mol,每个活化血小板的结合位点数平均为 10 2 6 2± 2 372个。99Tcm 抗体的标记率达 96 %以上。实验性狗股动脉血栓模型注射99Tcm-SZ - 5 1/Hu后 4h血栓显示清晰。结论 SZ - 5 1/Hu保留了原鼠源单抗SZ- 5 1/Hu相同的活化血小板 (GMP - 140 )结合特异性和亲和力。99Tcm 标记后仍保持良好的体内特异性血栓定位能力 ,可望用于临床血栓放射免疫显像。