3H—胸腺嘧啶核苷参入法测定甲亢病人T淋巴细胞功能及其临床意义的初步探讨

本文测定了正常人和四组甲亢病人(n=117)外周血T淋巴细胞(T 细胞)和血清中T_3T_4含量,结果显示:1、四组甲亢病人T淋巴细胞明显低于健康人;2、经抗甲状腺药物治疗后病情缓解、T_3T_4正常、T 细胞功能逐渐恢复;

^(3)H─TdR体内滞留诱发生殖毒性研究

研究了摄入氚标记胸腺嘧啶核苷（^(３)Ｈ－ＴｄＲ）在机体滞留过程诱发的生殖毒性效应。拟合了^(３)Ｈ－ＴｄＲ在睾丸、肝、脾、肾、股骨和血活中的滞留方程通式为：Ｒ（ｔ）＝Ａｅ－λａｔ＋Ｂｅ－λβｔ。比较了在不同组织的快组份和慢组份的有效半减期，估算了在不同脏器部位的累积吸收剂量。^(３)Ｈ－ＴｄＲ可诱发雄性生殖细胞的生殖毒性，表现为显性致死突变和显性骨骼畸形。关于显性致死突变与摄入了^(３)Ｈ－ＴｄＲ放射性活度之间呈正相关。Ｙ＝８０ . ２０Ｉ＋７４．１３；而显性骨骼畸形享与摄入^(３)Ｈ－ＴｄＲ放射性活度间的关系式为：Ｂ＝０．０７９１＋０．１６。

17β-雌二醇长时程作用促进成骨细胞HOS TE85^(45)Ca摄取及间质矿化

目的 研究 17β 雌二醇 (17β estradiol,E2 )对HOSTE85细胞骨形成的长时程效应。方法 3H 胸腺嘧啶参入法 (3H TdR)测细胞增殖 ;4 5Ca沉积法测细胞钙摄取 ;茜素红染色法测间质矿化。结果 E2 (0 1～ 10nmol·L- 1 )作用14d剂量依赖地刺激细胞3H TdR参入、增加4 5Ca摄取并增加茜素红染色面积。ICI1 82 ,780 (1 0nmol·L- 1 )能部分抑制E2作用 ,使其3H TdR参入分别减少了 36 5 6 % ,19 6 %和 15 4 % ,4 5Ca的摄入则分别减少了 2 2 2 7% ,37 2 8%和 4 0 1% ,茜素红染色面积减少。结论 E2 通过增加细胞数量。

槲皮素及异鼠李素对去甲肾上腺素促人血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的观察槲皮素、异鼠李素和去甲肾上腺素对培养人血管平滑肌细胞增殖的影响.方法利用培养的人主动脉平滑肌细胞,采用细胞计数和3H-胸腺嘧啶掺入法,观察槲皮素、异鼠李素和去甲肾上腺素对血管平滑肌细胞增殖、DNA合成的影响,以及槲皮素、异鼠李素和酚妥拉明对去甲肾上腺素促血管平滑肌细胞增殖、DNA合成的影响.结果槲皮素有明显抑制血管平滑肌细胞增殖和DNA合成的作用,而异鼠李素作用较弱.在所观察1～200 μmol/L的浓度范围内,槲皮素和异鼠李素均在200 μmol/L浓度发挥了最大的抑制作用,其抑制作用有剂量依赖关系.去甲肾上腺素有促进血管平滑肌细胞增殖、DNA合成的作用, 而这些促进作用能被酚妥拉明所阻滞.槲皮素和异鼠李素均呈剂量依赖性抑制去甲肾上腺素促血管平滑肌细胞增殖和DNA合成的作用, 且槲皮素和异鼠李素有明显的协同作用.槲皮素和异鼠李素对去甲肾上腺素刺激作用的抑制明显强于酚妥拉明. 槲皮素和异鼠李素对血管平滑肌细胞无细胞毒性作用.结论槲皮素和异鼠李素是细胞毒性低的天然黄酮类物质,对血管平滑肌细胞增殖、DNA合成尤其是对去甲肾上腺素刺激的血管平滑肌细胞增殖、DNA合成有较强的抑制作用.

大亚湾细菌生产力研究

采用~3H-胸腺嘧啶核苷示踪法测定了大亚湾的细菌生产力,结果表明,该海区的细菌生产力(C)的变化范围为0.50×10^(-3)～30.2×10^(-3)mg/(dm^3·h),和其他海区的比较说明,在采样期间,大亚湾海域的细菌生产力是较高的,并对细菌生产力的空间分布以及相关生物、化学要素之间的相互关系进行了讨论。

高糖、胰岛素对大鼠肝星状细胞增殖影响

目的通过观察不同浓度葡萄糖以及定量胰岛素与不同浓度葡萄糖并存对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖的影响,以进一步探讨糖尿病性肝纤维化的发生机制,为临床糖尿病相关性肝纤维化的发生和防治提供理论和实验依据。方法将体外培养的大鼠肝星状细胞株以不同浓度葡萄糖及不同浓度葡萄糖加定量胰岛素干预72h,以甘露醇作为高渗透压对照。采用CCK-8法测定各组细胞的吸光度值以明确HSC的增殖数目,3H-胸腺嘧啶掺入法(3H-TDR掺入法)测肝星状细胞DNA的DNA掺入量(Cpm)值以明确HSC的增殖状态。结果①HSC吸光度值较正常糖组及高渗透压组显著增加,且呈葡萄糖浓度依赖性增加。②HSCDNA的Cpm值与正常糖组相比显著上升,呈葡萄糖浓度依赖性增加,并且相同糖浓度的加胰岛素糖组显著高于未加胰岛素糖组值(P<0.05)。甘露醇组较正常糖组变化不明显,胰岛素甘露醇组Cpm值高于胰岛素正常糖组值。结论高糖、高胰岛素环境下,HSC被激活、增殖、DNA合成增加,可能是糖尿病肝纤维化的机制之一。

南极高纬度沿岸海域的细菌生产力

中国第18次南极科学考察期间,采用3H 胸腺嘧啶核苷示踪法测定了普里兹湾及邻近海区的细菌生产力,并对细菌生产力的水平、垂直分布及细菌生产力与相关要素之间的相互关系进行了研究和讨论.结果表明:该研究海域细菌生产力的变化范围为1.51~21.7 ngC·dm-3·h-1,平均为7.77 ngC·dm-3·h-1.细菌生产力空间分布特征:水平呈非均匀分布,东、南、西3面较高,北、中部较低,而垂直分布则有3种类型,即次表层极大值型、随深度递增型和极大极小叠加型.细菌生产力随培养时间的延长而增大,到一定时间后趋于最大值;细菌生产力昼夜变化的结果表明光照强度和水温对细菌生产力的测值有重要的影响.

环孢素A对晶状体上皮细胞的影响

目的 观察环孢素A(CsA)对体外培养的牛晶状体上皮细胞 (BLEC)增殖的影响。方法 对培养牛晶状体上皮细胞采用3 H TdR掺入法及MTT法 ,研究不同质量浓度CsA( 1～ 16 μg/ml)对体外培养的牛晶状体上皮细胞增殖的影响 ,并在光镜、电镜下进行观察。结果 CsA( 1～ 16 μg/ml)作用 2 4h和 72h对牛晶状体上皮细胞增殖有抑制作用 ,且呈剂量依赖性。 2 4h 5 0 %抑制质量浓度 (IC50 )为 10 37μg/ml,72hIC50 为 6 6 1μg/ml。CsA引起细胞形态学改变的主要特点是细胞胞浆内大量空泡形成 ,且随药物剂量增大 ,细胞形态改变越明显。结论 一定剂量的CsA可抑制体外培养的牛晶状体上皮细胞的增殖 ,为预防后囊混浊提供了新途径。

南极普里兹湾及其邻近海域细菌生产力的研究

本文阐述了在中国第 1 6次南极科学考察期间 ( 1 999/ 2 0 0 0南半球夏季 )运用3H 胸腺嘧啶核苷示踪法研究南极普里兹湾及其邻近海域细菌生产力的分布特征。结果表明 :该海区细菌生产力比较低 ,变化范围在 4.5— 1 91ngC·dm- 3·h- 1 ,平均为 5 0 .4ngC·dm- 3·h- 1 ,其水平与Ross海相当。细菌生产力的变化较好地反映了浮游植物变化的特性 ,BP与PP的比值为 0 .41。表层水体中BP与DOC的分布特征呈反相关关系。普里兹湾及邻近海域细菌生产力、初级生产力及溶解有机碳之间的关系表明 。

雷帕霉素阻断血管紧张素Ⅱ刺激血管内皮细胞增生的信号传导机制

目的:研究Rapamycin(Rapa)阻断血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激血管内皮细胞增生信号传导机制。方法:不同浓度AngⅡ刺激人脐静脉内皮细胞(ECV304),并用Rapa进行干预,采用3H胸腺嘧啶核苷掺入法和3H亮氨酸掺入法测定细胞DNA和蛋白质合成,流式细胞术检测细胞周期变化,免疫印迹(Westernblot)检测细胞信号蛋白P70s6k,ERK2及细胞周期蛋白CyclinD1、CyclinA、和CyclinB1表达的变化。结果:AngⅡ刺激细胞24h。细胞DNA和蛋白质合成均增加,并呈剂量依赖效应。AngⅡ10-6M组与对照组比较P70s6k,ERK2表达分别上调108.7%,54.7%,Rapa完全阻断P70s6k和CyclinD1的活化,而不影响ERK2的表达。结论:Rapa通过阻断PI3Kp70S6K信号通路抑制AngⅡ诱导的血管内皮细胞增生,抑制细胞周期蛋白CyclinD1的表达,阻止细胞G0/G1→S期。

甲醛对V79细胞DNA、RNA合成影响的体外实验研究

目的 研究甲醛对V79细胞DNA和RNA的损伤作用 ,探讨甲醛遗传毒性的分子机制。方法 中国仓鼠肺细胞 (V79)分别暴露于浓度为 75 ,15 0 ,30 0 ,6 0 0 μmol/L的甲醛中 ,1h、2h、4h ,采用3 H -胸腺嘧啶核苷 ( 3 H -TdR)、14 C -尿嘧啶核苷 ( 14 C UR)掺入技术检测甲醛致V79细胞DNA和RNA损伤情况。结果 所有 4个浓度组甲醛均明显影响细胞DNA和RNA的合成 ,3 H TdR和14 C UR掺入计数每分衰变数 (dpm值 )显著低于对照组 (P <0 .0 1) ,并有明显的剂量 -效应关系 (P <0 .0 1)。细胞暴露在甲醛中 4h ,各浓度组3 H TdR和14 C UR掺入dpm值显著低于暴露于 1h和 2h各浓度组的dpm值 (P <0 .0 1)。 结论 甲醛可以影响V79细胞DNA和RNA合成 。

神经生长因子对体外培养的大鼠颈上节神经突起生长及RNA和DNA合成的作用的放射自显影研究

神经生长因子(NGF)可促进靶神经节神经突起生长晕的生长。本文应用^(3)H-尿嘧啶核苷和^(3)H-胸腺嘧啶核苷放射自显影术,进一步研究该作用与神经元合成RNA和DNA的关系。用新生大鼠颈上节,按Maximow双盖片法进行培养。培养物分NGF组(培养液内添加NGF粗制剂)和对照组(不用NGF)。NGF组培养物被^(3)H-尿嘧啶核苷标记的神经元百分率及标记颗粒水平,均高于对照组,而且每当培养物神经突起生长晕生长速度即将出现高峰时,神经元^(3)H-尿嘧啶核苷标记颗粒水平都明显地增高,说明NGF可促进颈上节神经元的RNA合成,后者与神经突起的迅速生长有一定相互关系。在^(3)H-胸腺嘧啶核苷标记培养物神经元的实验中,观察到NGF可促进培养第3天的颈上节少量的神经元合成DNA。

表皮生长因子对猫角膜内皮细胞DNA合成的影响

目的 观察人表皮生长因子 (EGF)对体外培养的猫角膜内皮细胞损伤愈合速度及DNA合成的影响。方法 猫角膜内皮细胞体外培养传一代融合后 ,定量损伤直径 3mm范围内的细胞 ,培养液中加入 1、10、5 0和 10 0ng/mlEGF ,对照组不加EGF ,损伤后 1、3、5天倒置显微镜下照相转入计算机测量未愈合面积 ,作为判断不同浓度EGF影响角膜内皮细胞损伤愈合速度的指标。培养液中加入3 H 胸腺嘧啶核苷 ( 3 H -TdR) ,应用液体闪烁计数仪测量3 H TdR的掺入量 ,反映不同质量浓度EGF对角膜内皮细胞DNA合成的影响。结果 一定质量浓度的EGF加快猫角膜内皮细胞损伤愈合速度并促进DNA合成 ,显示剂量依赖性 ,10～ 5 0ng/ml时加快愈合速度作用达高峰 ,10ng/ml时促进DNA合成作用达高峰 ,浓度再增高时作用下降。结论 一定质量浓度的EGF能促进体外培养的猫角膜内皮细胞损伤愈合速度 ,并促进其DNA合成。

槲皮素及异鼠李素对人血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的观察槲皮素(QUE)及异鼠李素(ISOR)对培养人血管平滑肌细胞增殖的影响。方法本实验利用培养的人主动脉平滑肌细胞(VSMC),采用细胞计数、3H-胸腺嘧啶核苷酸(3H-TdR)掺入法,观察QUE、ISOR、去甲肾上腺素(NE)对VSMC增殖、DNA合成的影响,以及QUE、ISOR、酚托拉明(Ph)对NE促VSMC增殖、DNA合成的的影响。结果①QUE有明显抑制VSMC增殖、DNA合成的作用,而ISOR作用较弱。在所观察的1～200(滋mol/L的浓度范围内,QUE和ISOR均在200滋mol/L浓度发挥了最大的抑制作用,其抑制作用有剂量依赖关系。②NE有促进VSMC增殖、DNA合成的作用,而这些促进作用能被Ph所阻滞。③QUE和ISOR均剂量依赖地抑制NE促VSMC增殖和DNA合成的作用,且QUE和ISOR有明显的协同作用。④QUE和ISOR对NE刺激作用的抑制明显强于Ph的作用。⑤QUE和ISOR对VSMC无细胞毒作用。结论QUE和ISOR是细胞毒性很低,对VSMC的增殖、DNA合成尤其是对NE刺激的VSMC增殖、DNA合成有很强的抑制作用的天然黄酮类物质。

老年前期正常人外周血淋巴细胞转化率实验室观察

目的:研究正常人老年前期免疫功能水平。方法:对所在社区及周边部分老年前期正常人用3H-TDR掺入法测定淋巴细胞转化率(以下简称淋转率)。结果:老年前期女子组淋转率平均值为246.17,老年前期男子组淋转率均值185.14,中青年对照组淋转率均值为455.31(P<0.01)。