超声波法合成2-^(18)F-2-脱氧-β-D-葡萄糖的初步研究

采用超声波法合成 2 - 18F- 2 -脱氧 -β- D-葡萄糖 (18F- FDG) ,以提高其合成效率。实验结果表明 :F取代前体 2位上亲核反应进行的程度与相转移催化剂和温度有关。无相转移催化剂时 ,84℃超声反应 10 min,亲核反应进行了 70 % ;而在 10 mg的 K2 .2 .2存在下 ,室温 (2 2℃ )下超声反应 10 min,亲核反应进行了 85 % ,在 84℃下超声反应 2 min,亲核反应进行了 95 %。同经典方法相比 ,超声波合成法 18F-利用率提高了 10 % ,反应管的放射性吸附下降了 5 %。超声法合成效率 (EOS)为 6 0 % ,校正校率 (EOB)为 78% ,合成时间为 4 0 min。仅用一根 C- 18纯化柱纯化 ,超声法合成的 18F- FDG中 18F-含量低于 1%。因此 ,采用超声波法合成 18F-

2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖的合成

以D 氨基葡萄糖盐酸盐和丁二酸酐为原料 ,采用简便的方法合成 2 (3 羧基 1 丙酰氨基 ) 2 脱氧 D 葡萄糖 ,产率大于 70 % ,结构经元素分析。

影响2-^(18)F-2-脱氧-β-D-葡萄糖合成效率因素再探

以单管法合成2-18F-2-脱氧-β-D-葡萄糖(18F-FDG)为例,再一次深入分析了影响合成18F-FDG效率的因素。结果表明:生产18F-的残留水会影响18F-FDG合成效率;反应管内的亲核反应温度偏高会降低中间体的水解程度并使反应管内放射性残留量上升;除乙腈的氮气流也会使最终放射性丢失;而碱水解中间体能大大减少合成时间。通过对合成时间优化和降低体系中水含量、控制气流,18F-FDG的不校正合成效率(EOS)从59.0%提高到69.3%。

2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖对人食管癌细胞的抗增殖研究

目的探讨2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(COPADG)对人食管癌细胞Eca-109和TE-1的增殖及其细胞周期的影响。方法采用体外细胞培养,通过MTT比色分析法观察不同浓度COPADG对Eca-109及TE-1细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测药物对细胞周期的影响;透射电镜下观察细胞的形态学变化。结果COPADG能有效的抑制人食管癌细胞Eca-109及TE-1的增殖,且存在时间及剂量依赖性(P<0.01);不同浓度的COPADG作用48 h之后,流式细胞仪检测均显示G0/G1期细胞比例增加(P<0.01),而S期细胞比例减少(P<0.01),在Eca-109细胞中出现了典型的凋亡峰;电镜下可观察到凋亡的典型形态学变化。结论COPADG能有效抑制人食管癌细胞Eca-109及TE-1的增殖,改变其细胞周期分布,导致明显的G0/G1期阻滞,并在一定浓度下诱导肿瘤细胞凋亡。

野油菜黄单胞菌2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡萄糖酸醛缩酶基因的突变分析

野油菜黄单胞菌野油菜致病变种是发酵工业生产黄原胶的菌种,通过对Xcc8004菌株全基因组序列进行搜索,发现该菌株拥有完整的ED、EMP、HMP等糖代谢途径。为评估ED途径对细胞功能的影响,选择基因组中编码ED途径的关键酶——2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡萄糖酸醛缩酶的基因eda进行诱变,构建非极性突变体。通过对突变体表型进行分析,发现eda基因的突变体在培养基中能够正常生长繁殖,但其胞外多糖产量则降低77.6%。用一段包含eda基因的DNA片段对突变体进行功能互补,能基本恢复胞外多糖产量。这表明eda基因对细胞合成胞外多糖有重要影响,也暗示ED途径对细胞生长是非必要的,而对细胞大量合成胞外多糖是必须的。

2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖诱导人结肠癌SWlll6凋亡的作用

目的:研究D-葡萄糖衍生物2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(COPADG)对人结肠癌SWlll6细胞生长增殖的影响,进而探讨COPADG诱导SWlll6细胞凋亡的作用.方法:用不同浓度的COPADG处理SWlll6,采用MTT法测定其对SWlll6细胞生长增殖的抑制作用,通过DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术观察其对SWlll6细胞诱导凋亡的效应.结果:COPADG能抑制SWlll6细胞的生长增殖,并呈一定的浓度、时间依赖性;COPADG能诱导结肠癌SWlll6细胞凋亡;DNA琼脂糖凝胶电泳呈现典型的DNA梯形条带图谱;流式细胞仪检测出现典型的亚二倍体凋亡峰.结论:COPADG在体外可显著诱导结肠癌SWlll6细胞凋亡.

2-(3-羧基-1-丙酰氨基)2-脱氧-D-葡萄糖对裸鼠食管癌影响的实验研究

目的:研究2-(3-羧基-1-丙酰氨基)2-脱氧-D-葡萄糖(COPADG)对食管癌裸鼠的抗肿瘤作用。方法:建立人食管癌裸鼠植瘤模型,随机分为对照组、COPADG组、氟尿嘧啶组(5-FU)和联合组(CF)。观察动物一般情况、体重、肿瘤质量和肿瘤体大小,计算抑瘤率,检测外周血细胞(PBC)和。结果: COPADG组、CF组和5-FU组肿瘤生长明显受到抑制,与对照组比较有显性差异(P<0.01),抑制率分别为54.16%、73.91%、38.78%。5-FU组和CF组PBC均减少、ALT和AST上升,与对照组、COPAI组比较有显著性差异(P<0.05),CF组较轻微,与5-FU组比较差异有显著性;对照组和COPADG组比较差异无显著性。结论COPADG有抑制食管癌裸鼠肿瘤生长的作用,且无明显毒副作用。

2-脱氧-D-葡萄糖对人卵巢癌SKOV-3增殖的影响

目的探讨2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)对人卵巢癌SKOV-3增殖及凋亡的影响。方法培养人卵巢癌SKOV-3细胞,将不同浓度2-DG(2.5 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L、20 mmol/L、40 mmol/L)作用人卵巢癌SKOV-3细胞不同时间后,MTT检测各组细胞生长抑制率;Hoechst33258染色后,荧光显微镜下观察细胞形态变化;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期。结果不同浓度2-DG对SKOV-3细胞均有增殖抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),并且呈现剂量和时间依赖性;结果还显示2-DG可使细胞周期阻滞在G0/G1期;流式细胞仪凋亡检测结果显示2-DG可诱导人卵巢癌坏死或凋亡。结论体外试验中,2-DG对SKOV-3细胞增殖有抑制作用,且呈剂量和时间依赖性。

羧基-D-氨基葡萄糖对人食管癌Eca-109细胞caspase-3活化及bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨D-氨基葡萄糖衍生物2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(COPADG)对人食管癌Eca-109细胞凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养Eca-109细胞;倒置显微镜下观察细胞形态学变化;流式细胞术检测COPADG作用后Eca-109细胞内半胱氨酸酶3(caspase-3)活化程度及bcl-2蛋白表达的变化;Annexin V/PI染色结合流式细胞术检测COPADG作用后Eca-109细胞凋亡率。结果COPADG作用显著增加Eca-109细胞凋亡率,且Eca-109细胞内caspase-3活性和bcl-2表达平均荧光强度明显增高。结论COPADG能显著诱导Eca-109细胞凋亡发生,并使Eca-109细胞内caspase-3显著活化以及bcl-2蛋白表达下调,并可能通过该机制诱导细胞凋亡的发生。

D-氨基葡萄糖衍生物对人食管癌Eca-109细胞Bcl-2及WTp53蛋白表达的影响

目的:探讨D-氨基葡萄糖衍生物2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(CO-PADG)对人食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:体外培养Eca-109细胞,CO-PADG作用Eca-109细胞不同时间;倒置显微镜下观察细胞形态学变化;MTT法检测不同时间点细胞增殖抑制率;流式细胞术检测COPADG作用后Eca-109细胞内Bcl-2及WTp53蛋白表达的变化;AnnexinV/PI染色结合流式细胞术检测COPADG作用后Eca-109细胞凋亡率。结果:COPADG作用显著增加Eca-109细胞增殖抑制率及凋亡率;COPADG作用使Eca-109细胞内Bcl-2蛋白表达明显下调而WTp53蛋白表达无变化。结论:COPADG显著抑制Eca-109细胞增殖并诱导细胞凋亡发生,细胞内Bcl-2蛋白表达下调,并可能通过该机制诱导细胞凋亡的发生。

2-脱氧-D-葡萄糖的合成研究

标题化合物具有多种生物活性,被广泛地应用在药品和食品领域。在研究活化二甲基亚砜(DMSO)时,偶然发现在碘化钾(KI)存在下氯甲基甲硫醚(CH3SCH2Cl)具有温和的路易斯酸性。因此,利用KI/CH3SCH2Cl体系,以3,4,6-O-三乙酰基-D-葡萄糖糖烯为起始原料,经催化水合和脱保护两步反应,便可高效制得标题化合物(异构体比例为1∶2),总收率77. 6%。该方法反应条件温和、反应收率较高,具有良好的工业应用前景。

JNK抑制剂对D-氨基葡萄糖衍生物诱导Eca-109细胞Caspase-3活化的影响

目的:观察特异性c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物(COPADG)诱导的Eca-109细胞Caspase-3激活及细胞凋亡的影响,并探讨COPADG诱导Eca-109细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养Eca-109细胞,以COPADG及SP600125与细胞作用,细胞间接免疫荧光染色观察P-JNK蛋白表达的改变,流式细胞术检测细胞凋亡率及Caspase-3活性的变化。结果:经SP600125处理后,COPADG诱导的Eca-109细胞P-JNK蛋白表达明显减弱,凋亡率明显减低,Caspase-3活性显著下调,与COPADG单作用组之间有显著性差异。结论:SP600125能够显著抑制COPADG诱导Eca-109细胞Caspase-3激活以及COPADG诱导Eca-109细胞凋亡,并间接证明JNK信号转导通路在COPADG诱导Eca-109细胞凋亡过程中发挥着重要作用。

SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物诱导Eca-109细胞凋亡的影响

目的:观察特异性JNK抑制剂[specificc-junNH2terminalproteinkinase(JNK)inhibitor]SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖{[2-(3-carboxy-1-oxopropyl)a-mino-2-deoxy-D-Glucose],COPADG}诱导Eca-109细胞凋亡的影响并探讨COPADG诱导Eca-109细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养Eca-109细胞,用COPADG及SP600125对细胞进行处理。细胞间接免疫荧光染色观察P-JNK蛋白表达的改变,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;MTT检测不同时间点的细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:经SP600125处理后,COPADG诱导的Eca-109细胞P-JNK蛋白表达明显减弱,同时,COPADG诱导的Eca-109细胞凋亡率明显减低,细胞增殖抑制率下降明显,与COPADG单独作用组之间比较差异有统计学意义。结论:SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物CO-PADG诱导Eca-109细胞凋亡具有抑制作用,并间接证明JNK信号转导通路在COPADG诱导Eca-109细胞凋亡过程中发挥着重要作用。

2维和3维采集对脑葡萄糖代谢半定量指标的影响

目的 研究 2维 (2D)和 3维 (3D)采集对脑葡萄糖代谢半定量指标有无明显影响 ,在实际工作中可否灵活采用 .方法 36例无神经疾病病史、症状和体征 ;脑磁共振成像无异常的受检者分为 2组 ,其中 2D组 15例 ,3D组 2 1例 .静脉注射18F -FDG后行PET脑断层显像 ,经计算机滤波反投影重建获得横断面、冠状面、矢状面断层影像 .横断面影像经处理层厚为 0 .5cm ,按常规分别选取代表双侧额叶、顶叶、颞叶、枕叶、小脑皮质的三层影像 ,勾画出各结构的边界 ,依据体重和注射剂量等参数求出平均SUV值 .将上述各部位的平均SUV值进行左右比较 ,计算出比值 ,称R(L/R) .将各脑叶的平均SUV值与小脑平均SUV值进行比较 ,计算出比值 ,称R(C/Cb) .上述数据进行统计学处理 .结果 2D和3D两组双侧额叶、顶叶、颞叶、枕叶、小脑皮质的平均SUV值 ,R(L/R) 和R(C/Cb) 皆差异无显著性 .结论 2D和 3D采集各有优缺点 ,当采用SUV作为半定量指标对脑葡萄糖代谢状况进行评价时 ,两种采集方式对结果无明显影响 ,故可根据实际情况 。

~3H-2-Δ~9-十七碳烯-6-甲氧基对苯醌的制备

目的 :制备 3H- 2 - Δ9-十七碳烯 - 6甲氧基对苯醌。方法 :应用 Moran等人的方法将化合物吸附在载体材料 (玻璃棉 )上、置真空曝射瓶内。通入氚气、辉光放电、电子束激发氚气分子撞击化合物反应 ,氚原子结合到化合物分子中 ,经柱层析分离纯化。结果 :产物的比放射性 2 .0× 10 - 2 GBq/ mg,放射化学纯度 99.97%。本品避光保存在有机溶剂中 3个月放射化学纯度为 92 .4%。讨论 :本法与 wilgbach法比较氧气用量小 ,反应时间短 ,化合物的辐射分解少和比放射性高。

^(18)F-FDG PET-CT对心脏骤停-心肺复苏后脑内葡萄糖代谢及脑损伤程度评价的研究进展

心脏骤停(CA)是指各种原因引起的心脏泵血功能突然停止,并伴有自主呼吸停止和意识消失的一种常见临床急症,是导致死亡的重要原因;CA/心肺复苏(CPR)后存活的患者可出现不同程度的神经功能缺损,从轻微的认知功能障碍到持续性植物状态甚至脑死亡。由CA/CPR导致的脑损伤病理生理机制尚不完全清楚。正电子发射计算机断层显像(PET)可用于脑功能损伤的检测,主要应用于脑代谢显像、脑灌注、脑血流显像及脑受体显像等,其中以代谢显像应用最为广泛。18-氟-2-脱氧-D-葡萄糖[简称:^(18)F-氟代脱氧葡萄糖(^(18)F-fluorodeoxyglucose),^(18)F-FDG]是一种脱氧葡萄糖类似物,属于葡萄糖代谢显像剂,是目前PET-CT显像中应用最广泛的非特异性正电子放射性药物;^(18)F-FDG PET-CT对CA/CPR后脑内葡萄糖代谢及脑损伤程度可以进行较为客观的评价,本文对此进行综述。

D-氨基葡萄糖衍生物诱导Eca-109细胞凋亡的机制

目的探讨2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖{2-[(3-carboxy-1-oxoprogy1)amino]-2-deoxy-D-Glucose,CO-PADG}诱导Eca-109细胞凋亡的机制。方法不同浓度COPADG作用于人食管癌Eca-109细胞24h,检测Eca-109细胞的抑制率、凋亡率、细胞内活性氧(reactive oxygen spe-cies,ROS)、线粒体跨膜电位。结果Eca-109细胞凋亡率与COPADG浓度呈正相关,r=1.0,P<0.01;Eca-109细胞线粒体膜电位水平与Eca-109细胞凋亡率相关,r=1.0,P<0.01;ROS水平与Eca-109细胞凋亡率呈正相关,r=1.0,P<0.01;ROS水平与Eca-109细胞线粒体膜电位水平呈负相关,r=1.0,P<0.01。结论COPADG可促进Eca-109细胞凋亡,提高Eca-109细胞内ROS水平,并降低线粒体膜电位。实验结果提示COPADG提高ROS,降低Eca-109细胞线粒体膜电位启动细胞凋亡通路促使Eca-109细胞凋亡,并且线粒体膜电位的下降是通过提高ROS实现的。

D-氨基葡萄糖衍生物诱导人结肠癌SW1116细胞凋亡的形态学变化

目的:研究D-葡萄糖衍生物2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖诱导人结肠癌细胞SW1116凋亡时,其形态学的变化.方法:选用不同浓度的2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖与人结肠癌细胞SW1116共同孵育不同时间后,采用倒置相差显微镜,荧光显微镜、透射电子显微镜观察人结肠癌细胞SW1116的形态结构变化.结果:经2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖的不同浓度作用24～96h后,观察发现:人结肠癌细胞SW1116出现体积缩小,荧光染色增强,胞核或胞质中可见致密浓染的颗粒状黄绿色荧光染色.细胞染色质固缩,积聚在核膜边缘呈新月状,内质网疏松并与胞膜融合形成空泡,并呈一定的浓度、时间依赖性.结论:2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖在体外具有诱导人结肠癌细胞SW1116凋亡的作用.

羧基-D-氨基葡萄糖衍生物对人食管癌Eca-109细胞线粒体膜电位的影响

目的研究2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(COPADG)诱导Eca-109细胞凋亡的机制。方法将COPADG作用于人食管癌Eca-109细胞24h,检测Eca-109细胞的抑制率、凋亡率、线粒体跨膜电位。结果随COPADG浓度的升高,Eca-109细胞的抑制率增加,Eca-109细胞凋亡率与COPADG浓度呈正相关,(γ=1.0,P<0.01);Eca-109细胞线粒体膜电位水平与Eca-109细胞凋亡率相关(γ=1.0,P<0.01)。结论COPADG可促进Eca-109细胞凋亡并降低线粒体膜电位,从而启动细胞凋亡通路,促使Eca-109细胞凋亡。

D-氨基葡萄糖衍生物对Eca-109细胞内活性氧、线粒体膜电位的影响

目的:探讨2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(2-[(3-carboxy-1-oxoprogy1)amino]-2-deoxy-D-Glucose,COPADG)诱导Eca-109细胞凋亡的机制。方法:不同浓度COPADG作用于人食管癌Eca-109细胞24h,检测Eca-109细胞的抑制率、凋亡率、细胞内活性氧(ROS)、线粒体跨膜电位。结果:Eca-109细胞凋亡率与COPADG浓度呈正相关(rs=1.0,P<0.01);Eca-109细胞线粒体膜电位水平与Eca-109细胞凋亡率相关(rs=1.0,P<0.01);ROS水平与Eca-109细胞凋亡率呈正相关(rs=1.0,P<0.01);ROS水平与Eca-109细胞线粒体膜电位水平呈负相关(rs=1.0,P<0.01)。结论:COPADG可促进Eca-109细胞凋亡,提高Eca-109细胞内ROS水平,并降低线粒体膜电位水平。实验结果提示COPADG提高ROS水平,降低Eca-109细胞线粒体膜电位水平,启动细胞凋亡通路,促使Eca-109细胞凋亡,并且线粒体膜电位的下降是通过提高ROS实现的。