^(99)Tc^m-c(RGD)_2在荷不同肿瘤裸鼠体内的生物分布及显像研究

目的利用放射性核素^(99)Tc^m标记的新型环RGD肽二聚体,即c(RGD)2,在荷人脑胶质瘤U87裸鼠、荷人肝癌细胞HepG2裸鼠、荷人宫颈癌细胞Hela裸鼠模型中进行生物分布实验及肿瘤显像研究,以探讨该探针用于整合素αvβ3受体高表达的肿瘤早期特异性诊断的前景。方法采用氯化亚锡直接标记法将^(99)Tc^m标记于c (RGD)2,标记产物经Sephadex G10分离纯化,建立荷U87、HepG2、Hela裸鼠模型,分别进行体内分布实验及肿瘤显像研究,分析^(99)Tc^m-c(RGD)2在不同肿瘤中的摄取差异。结果^(99)Tc^m-c(RGD)2在三种肿瘤模型中,肿瘤/心脏、肿瘤/脾、肿瘤/血液比值较高。而肿瘤/肾和肿瘤/膀胱比值较低,均小于1。其余脏器组织的T/NT比值增高不明显。荷U87瘤裸鼠和荷HepG2裸鼠尾静脉注射显像剂0. 5 h后即可见肿瘤显影,且边界清晰。随时间延长,至6 h肿瘤显影更加清晰。在荷Hela裸鼠中肿瘤显像不清晰,腹部脏器显影呈浓聚。对^(99)Tc^m-c(RGD)2在三种肿瘤中的摄取值进行方差分析,并选择常用的Bonferroni法进行进一步的两两组间比较。结果三组间均值两两比较差异P值均<0. 05,有统计学意义。结论^(99)Tc^m-c(RGD)2主要经泌尿系统排泄,且血液清除率快,在重要脏器如心脏、肝脏摄取较低。探针对U87和HepG2肿瘤均展示出靶向性及良好的显像特性,其中对脑胶质瘤U87有更好的生物分布及显像结果。而在Hela中显像及生物分布结果并不理想。

用^(99)Tc^m-DTPA肾动态显像判断2型糖尿病肾小球功能

目的 探讨用99Tcm DTPA肾动态显像判断 2型糖尿病患者肾小球功能的临床价值。方法正常对照者 12例 ,2型糖尿病患者 5 1例 ,根据尿微量白蛋白测定结果分组 ,分别行99Tcm DTPA肾动态显像测定总肾与分肾肾小球滤过率 (GFR)。结果 ① 2型糖尿病各组总肾及分肾GFR均低于对照组。②总肾及分肾GFR与尿微量白蛋白呈显著负相关 ,r分别为 - 0 4 5 7,- 0 4 12和 - 0 4 2 4 (P均 <0 0 1)。③ 5 1例 2型糖尿病患者中有 5例总肾GFR正常 ,而分肾GFR异常。结论 用99Tcm DTPA肾动态显像判断 2型糖尿病患者早期肾小球功能损害有一定价值。

α_vβ_3受体显像剂^(99)Tc^m(N)(PNP6)(Cys-RGD)的制备及动物实验

为探讨99Tcm标记的小分子环形Cys-RGD肽用于αvβ3受体阳性肿瘤显像的可行性,以99Tcm(N)核联合协同配体二膦基胺类化合物二[二(乙氧基丙基膦)-乙基]-乙氧基乙基胺(PNP6)对环形Cys-RGD肽(c(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys)-Cys)进行了标记,并考察了标记物的体外稳定性及正常小鼠和荷FWK-1胰腺癌裸鼠模型的体内生物分布和平面显像。标记条件经优化后,标记率大于92%,且具有良好的体外稳定性。生物分布实验表明,99Tcm(N)(PNP6)(Cys-RGD)在血液中清除较快,主要通过肾脏排泄;注药后1h标记物在肿瘤中的摄取值为2.92±0.71%/g,注药后4h肿瘤与血和肿瘤与肌肉的放射性摄取比(T/NT)分别为11.0和3.1;注药后1h,肿瘤显像清晰。以上结果提示,99Tcm(N)(PNP6)(Cys-RGD)有望成为αvβ3受体阳性肿瘤显像剂。

2-IT法^(99)Tc^m标记单克隆抗体的初步研究

目的 研究 2 -IT法99Tcm 间接标记单克隆抗体。方法 2 -IT修饰单抗后与99Tcm -GH反应 ,形成99Tcm-单抗 ,改变 2 -IT、GH量 ,获得最佳反应条件。结果 在 0 .1～ 1mg 2 -IT、1～ 2mgGH、99Tcm O-4 <1ml时 ,标记率保持在 90 %以上。结论 2 -IT法间接标记单抗方法简便 ,适于临床上应用。

DTPA-2SN的合成及其^(99)Tc^m标记

制备了DTPA双酸酐(DTPAA),通过DTPAA与磺胺反应合成DTPA-2SN;对DTPA-2SN进行了99Tcm标记。采用薄层层析法测定标记率,Sep-Pak C18小柱纯化,鉴定放化纯度,并观察其体外稳定性。结果显示,DTPAA产率为85%,DTPA-2SN的产率为80%,二者经鉴定与其化学结构式相符。DTPA-2SN易于被99Tcm标记,标记率可达90%±3%,标记物经Sep-Pak C18小柱纯化后,放化纯度>95%。连续观察4h99Tcm-DTPA-2SN放化纯度均大于95%,稳定性良好。

多巴胺D_2受体显像剂^(99)Tc^m-mEBZM生物学评价

将ECD(L,L-ethyl cysteinate dimer)分子与对多巴胺D2受体具有较高亲和力的苯酰胺分子(BZM)偶联,制备99Tcm-mEBZM,并研究了99Tcm-mEBZM在大鼠和小鼠体内的生物分布。结果显示,99Tcm-mEBZM具有较高的体外稳定性和较高的脂溶性,在小鼠的生物分布中呈现较高的进脑量(2 min时为2.97％ID·g-1),小鼠与大鼠的纹状体/小脑比值可达到1.55,提示标记物与纹状体的结合具有特异性。

^(99)Tc^m(CO)_3-BPHRGD的制备及正常鼠体内生物分布

制备了99 Tc m(CO)3-BPHRGD,并进行体内外生物学评价。在pH=7、75℃条件下反应30min,99 Tc m(CO)3-BPHRGD的标记率均大于80%,纯化后标记物的放射化学纯度大于98%;体外稳定性实验显示,在37℃时,标记物在生理盐水、胎牛血清及半胱氨酸溶液中具有很好的稳定性;正常小鼠体内生物分布数据显示,99 Tc m(CO)3-BPHRGD在血液中清除较快,主要通过肝肾代谢。

多巴胺D_2受体显像剂^(99)Tc^m-m-Br-p-EBZM的合成

以与多巴胺有较高亲和力的2-溴-4-(1-乙基-吡咯烷基-2-甲基)-氨甲酰基-5-甲氧基-苯胺为母体进行结构改造,再与L,L-乙撑基胱氨酸二聚物(L,L-ethylenecysteinedimer,ECD)分子偶联合成了标记前体m-Br-p-EBZM,再通过两步法进行99Tcm标记,制备99Tcm-m-Br-p-EBZM,并对其进行了稳定性的考察。结果成功制备了99Tcm-m-Br-p-EBZM,放化纯度>98%,且有较好的稳定性和较高的脂溶性。表明99Tcm-m-Br-p-EBZM可能成为理想的多巴胺受体显像剂。

羰基锝硝基咪唑化合物^99Tc^m(CO)3-MNLS的标记和生物学评价

本文采用直接标记法在水相中将羰基锝中间体[99 Tcm(CO)3(H2O)3]+与含磷酸基团的硝基咪唑衍生物2-(2-甲基-5-硝基咪唑-1-基)乙基磷酸盐(2-(2-methyl-5-nitro-1H-imidazol-1-yl)ethyl dihydrogen phos-phate,MNLS)配位得到99 Tcm(CO)3-MNLS配合物;研究了99 Tcm(CO)3-MNLS的最佳标记条件、理化性质及其在荷EMT-6肿瘤小鼠体内的生物分布。结果表明,当MNLS质量为10mg、pH=4.0～8.0、80℃下反应15min时,99 Tcm(CO)3-MNLS配合物放化纯度大于99%。电泳试验结果提示,99 Tcm(CO)3-MNLS为水溶性的电中性配合物,具有良好的体外稳定性。动物分布试验显示,99 Tcm(CO)3-MNLS在荷EMT-6肿瘤小鼠体内有较高的肿瘤摄取值,且滞留较好;此外,99 Tcm(CO)3-MNLS较99 Tcm-MNLS在骨中的摄取值明显降低。以上结果为研发新型乏氧组织显像剂提供了重要参考。

^99Tc^m3P4-RGD2与^99Tc^m—MIBI SPECT显像诊断乳腺癌的对比研究

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤，早期明确诊断及尽早行外科手术等治疗是降低死亡率的关键因素。^99Tc^mMIBI是一种亲脂性阳离子物质，已被有效地用于乳腺癌早期诊断并得到临床广泛认可。^99Tc^m3P4-RGD2是一种与整合素αvβ3具有特异性高亲和力，含有RGD三肽序列的新型环状二聚体显像剂，其在诊断乳腺癌、肺癌、食管癌及恶性脑胶质瘤方面具有较高的诊断价值。

关于化学元素及核素的使用

化学元素及核素在医学写作时一般多采用符号，都是拉丁字母正体大写。离子态是右上角用数字加“-”或“＋”表示。例如Na^＋、Ca^2＋、P^3-等等，不采用Ca^＋＋、P^--、Al^＋3、O^-2表示。核素的核子素（质量数）应写在元素符号的左上角，例如：^131I、^32P。表示激发状态的m写在右上角，例如：^99Tc^m、^133In^m。在科技论文和专著中不应写核素的中文名称，即不能写成^131碘、铟^133m、P^32、Tc^99m。

四种显像剂在NCI—H358肺癌裸鼠模型中显像效果和生物分布的比较

目的比较^18F-脱氧葡萄糖（^18F-FDG）、^99Tc^m-甲氧荩异丁基异腈（^99Tc^m-MIBI）^99Tc^m-氮-二（N-2基N-2氧基二硫代氧基甲酸盐）[^99Tc^m-N（NOET））]和^99Tc^m-RGD-4CK娃像剂任NCI—H358肺癌裸鼠中的摄取，评价4种硅像剂对低代谢肺胆瘤的诊断价值。方法建立人非小细胞肺癌NCIH358细胞裸鼠移植瘤模型20只，随机分为4组，分别经尾静脉注射^18F-FDG、^99Tc^m-MIBI、^99Tc^m-N（NOErr），和^99Tc^m-RGD-4CK移像剂，进行显像和生物分布研究。结果SPECT全身平面显像显示，^18F-FDG组倚瘤小鼠胸部放射性核素明妙浓聚，与肿瘤组织部分重叠，以敛肿瘤轮廓显示不清晰；^99Tc^m-MIBI组荷瘤小鼠右前肢肿瘤处隐约显影，轮廓不清；^99Tc^m-N（NOET）2组和^99Tc^m-RGD-4CK组荷瘤小鼠右前肢肿瘤部位硅影均清晰。^18F-FDG组、^99Tc^m-MIB组。^99Tc^m-N（NOET）：组和^99Tc^m-RGD-4CK组肺癌裸鼠模型显像的肿瘤勺肌肉放射性比值（T／NT）分别为1．85±0．07、0．99±0．16、2．78±2．26和3．40±0．27，生物分布的T／NT值分别为2．32±0．14、0．44±0．08、2．59±0．53和3．43±0．36，其^99Tc^m-RGD-4CK组的rf／NT值明显高于其他组（均P〈0．01）。结论^99Tc^m-RGD-4CK对人非小细胞肺癌NCI—H358细胞移植瘤的湿像效果好于^18F—FDG，在诊断低代谢的非小细胞肺癌时，^99Tc^m-RGD--4CK妊像町能比^18F—FDG显像更具优势。