多巴胺转运蛋白显像剂^(99m)Tc-TRODAT-1的合成

以可卡因为原料经水解、脱水、甲酯化、4-氯苯基溴化镁格氏反应、酯水解、酰氯化、酰胺化、酰胺还原、烷基化、酰胺还原、脱巯基保护基等反应 ,合成了配体 TRODAT- 1 ( 2 )。用氯化亚锡作还原剂 ,与高锝酸盐溶液反应 ,生成的多巴胺转运蛋白显像剂 99m Tc( V) - TRODAT- 1 ( 1 ) ,放射化学纯度大于 95% 。

帕金森病动物模型的^(99)Tc^m-TRODAT-1显像研究

目的 研究99Tcm TRODAT 1在正常猴及帕金森病 (PD)模型猴纹状体内的放射性分布 ,以探讨其早期诊断PD的价值。方法 分别对 2只正常猴、2只PD模型猴进行99Tcm TRODAT 1多巴胺转运蛋白 (DAT)显像 ,1只经 1 甲基 4苯基 1,2 ,3 ,6 四氢吡啶 (MPTP)预处理后行 7、11、18d连续显像 ;计算正常猴与PD模型猴纹状体与小脑放射性比值。结果 正常猴 3h纹状体与小脑的放射性比值为 1 5 6;PD模型猴损毁侧纹状体与小脑比值为 0 94 ,健侧为 1 5 2 ;MPTP预处理后 7d与正常猴比值相似 ,11d时下降 ,18d时明显降低 ,比值分别为 1 5 6、1 2 7、0 89。结论 99Tcm TRODAT 1能特异性地与DAT结合 ,可灵敏地反映PD模型猴DAT的摄取减少 ,对PD的早期诊断有一定的临床价值。

^(99m)Tc-TRODAT-1SPECT DAT显像评价帕金森病严重程度的研究

摘 要：目的 探讨99m Tc－TRODAT－1SPECT多巴胺转运体（dopamine transporter，DAT）显像评价帕金森病（PD）严重程度的意义。方法 对 18例健康自愿者、23例帕金森病患者行99m TC－TRODAT－1SPECT DAT断层显像，利用感兴趣区技术测定纹状体与小脑部位DAT比值。对PD患者进行UPDR评分和Hoehn－Yahr分级。结果 PD患者99m Tc－TRODAT－1SPECT DAT断层显像，纹状体DAT特异性摄取与 UPDR评分总分、日常活动评分、运动检查评分呈显著性负相关，与精神活动、行为、心境评分和PD患者年龄无相关性。结论99m Tc－TRODAT－1SPECT DAT断层显像有助于评估PD严重程度。

早期帕金森病患者脑^(99)Tc^m-TRODAT-1 SPECT显像研究

目的 探讨脑多巴胺转运蛋白 (DAT) 99Tcm 2 β [N ,N′ 双 (2 巯乙基 )乙撑二胺基 ]甲基 ,3 β (4 氯苯基 )托烷 (TRODAT 1)SPECT显像在帕金森病 (PD)早期诊断中的临床应用价值。 方法 对10例正常对照者及 50例早期PD患者行脑DAT99Tcm TRODAT 1SPECT显像 ,利用感兴趣区技术计算纹状体 (ST)与枕叶 (OC)、额叶 (FC)的放射性比值 [(ST -OC) OC ,(ST -FC) FC]。结果 对照组双侧ST摄取差异无显著性。早期PD患者双侧 (ST -OC) OC和 (ST -FC) FC较对照组明显降低 ;起病肢体对侧 (ST -OC) OC和 (ST -FC) FC比起病肢体同侧均明显降低 (P均 <0 0 0 1)。PDHoehn Yahr(H Y)Ⅰ级患者病变肢体对侧及同侧 (ST -FC) FC较对照组均明显降低 (P均 <0 0 5)。早期PD患者起病肢体对侧ST摄取与病程及H Y分级呈明显相关。结论 脑99Tcm TRODAT

不同临床类型、分期帕金森病患者^(99m)Tc-TRODAT-1 DAT显像特征分析

目的对帕金森病(PD)患者进行99mTc-TRODAT-1多巴胺转运蛋白SPECT显像,半定量分析纹状体/小脑、尾状核/小脑和壳核/小脑放射性计数比值,结合UPDRS评分,分析探讨不同临床类型、分期PD患者的特征。方法 58例临床确诊PD患者和10例对照组,在空腹6 h后,口服KClO4400 mg以封闭甲状腺、脉络丛和鼻黏膜,1 h后经肘静脉注射99mTc-TRODAT-1 30 mCi。3 h后进行99mTc-TRODAT-1多巴胺转运蛋白显像,取SPECT图像中基底节最清晰的1帧横断层图像勾画左右纹状体、尾状核和壳核感兴趣区(ROI),利用半定量分析法,分别计算纹状体与小脑、尾状核与小脑及壳核与小脑放射性计数比值。比较PD患者和对照组纹状体及主要区域DAT功能差异。并应用统一PD评定量表(UPDRS)对患者的运动功能进行评分,分析其UPDRSⅢ评分与起病肢体对侧、同侧及双侧纹状体/小脑放射性计数的相关性。分析不同分期纹状体/小脑,壳核/小脑,尾状核/小脑放射性比值。结果与正常对照组比较,不同分期的PD患者纹状体DAT功能均明显减低。在三组不同类型的PD患者中,强直为主与运动迟缓为主型PD患者的评分与纹状体、尾状核、壳核摄取值呈负相关(P<0.05),混合型PD患者的评分与纹状体、尾状核、壳核摄取值也呈负相关(P<0.05)。而震颤为主型PD患者的评分与纹状体、尾状核、壳核摄取值无明显相关性(P>0.05)。结论 99mTc-TRODAT-lDAT显像可作为评价PD严重程度的可靠指标,与PD患者UPDRS临床量表结合,能更好对PD患者进行诊断、分级和病情监测。

肝豆状核变性^(99m)Tc-TRODAT-1的SPECT脑DAT显像研究

目的研究肝豆状核变性(WD)患者99mTc-TRODAT-1 SPECT脑DAT显像特点及其与神经系统表现的关系。方法对18例有神经症状WD患者(脑型)、11例无神经症状WD患者(非脑型)和12例正常对照行99m Tc-TRODAT-1 SPECT脑DAT显像,利用计算机感兴趣技术(ROI)进行半定量分析(ST／CB比值作为半定量指标)。据WD神经症状改良评分表对18例脑型WD患者的神经症状进行评分。结果脑型WD患者ST／CB比值与正常对照组比较有显著性差异(P<0．01),非脑型WD患者ST／CB比值与正常对照组比较无显著性差异(P=0．13)。脑型WD患者神经症状改良评分与其ST／CB比值呈高度负相关,r=-0．78(P=0．001)。结论本研究结果提示WD患者DA能黑质纹状体通路突触前膜功能下降,其下降越明显,WD的神经症状就越严重。无神经症状的WD患者脑DAT功能无此改变。

^(99)Tc^m标记5-HT_(1A)脑受体显像剂的研制及其生物分布

为了寻找 99Tcm 标记中枢神经系统 5 - HT1A协同受体显像药物 ,合成了单齿受体配基 1- (2 -甲氧基苯基 ) - 4 - (2 -巯基乙基 )哌嗪 (简称 MPMEP)、三齿配体 N,N-二 (2 -巯基乙基 ) - N',N'-二乙基乙二胺 (简称 BMPDEEDA)和 N,N-二 (2 -巯基乙基 )卞胺 (简称 BMPBA) ,其结构经 IR、NMR及元素分析表征 ;以“3+ 1”混合配体进行了 99Tcm标记 ,并确定了标记反应的最佳条件 :p H=6 .0～ 7.0 ,6 0～70℃下 ,反应 2 0～ 30 min,经 CH2 Cl2 萃取脂溶性部分后 ,99Tcm O(MPMEP) (BMPDEEDA)和 99Tcm O(MPMEP) (BMPBA)的标记率分别达到 95 %和 90 %以上。采用 HPL C对标记产物进行了分离和纯化 ,纯化后的标记物放化纯度均 >98%。小鼠体内的生物分布结果表明 99Tcm O(MPMEP)(BMPDEEDA)和 99Tcm O(MPMEP) (BMPBA)配合物可以通过血脑屏障 ,在脑中有一定的摄取和滞留 ;99Tcm O(MPMEP) (BMPBA)在血液中清除较快 ,静脉注射后 2、30、6 0 min时 ,脑与血摄取比分别为 0 .31、0 .33、0 .32 。

^(99m)Tc-TRODAT-1单光子放射计算机断层显像早期诊断帕金森病的研究

目的 探讨99mTc TRODAT 1单光子放射计算机断层显像 (SPECT)早期诊断帕金森病 (PD)的价值。方法 分别对PD组和正常对照组进行99mTc TRODAT 1SPECT脑显像 ,使用SiemensECAMSPECT双探头。从横断面上选出基底节最清晰的一层进行相对定量分析 ,应用计算机感兴趣区 (ROI)技术在图像上分别勾划基底节 (BG)和枕叶 (OC)ROI,计算BG/OC放射性比值。结果 PD组 2 2例 ,按改良Hoehn和Yahn评分 :1级组 8例 ,1.5级组 14例 ;对照组 6例。99mTc TRODAT 1SPECT脑显像示 ,PD患者症状对侧BG受损情况明显重于症状同侧BG ,与正常对照组比较有明显的差异。BG/OC比值显示 :1级和 1.5级PD患者的症状对侧BG/OC比值均显著低于症状同侧 (P <0 .0 1) ;1.5级PD患者两侧BG/OC平均值 (1.2 0± 0 .17)与对照组 (1.5 5± 0 .12 )比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 0 1) ;1级PD患者症状对侧BG/OC(1.34± 0 .13)与 1.5级 (1.17± 0 .16 )比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;1级PD患者两侧BG/OC平均值 (1.4 0± 0 .15 )与对照组 (1.5 5± 0 .12 )比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;1级与 1.5级PD患者的BG/OC平均值之间差异有显著性 (P <0 .0 5 )。正常对照组BG/OC比值显著高于PD组 (1级和 1.5级 ) (P <0 .0 0 1)。1级与 1.5级PD患者症状同侧的BG/

A549肺腺癌多细胞球体药敏实验、Mdr1、MRP表达以及^(99m)Tc-MIBI摄取研究

目的探讨A549肺腺癌多细胞球体的多药耐药基因(mdr1)和多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达,甲氧基异丁基异腈(MIBI)摄取结果能否预测化疗效果。方法①血浆高峰浓度的化疗药物顺铂(DDP)、长春花碱酰胺(VDS)、氟尿嘧啶(5-氟尿嘧啶,5-FU)、羟喜树碱(HCP)、丝裂霉素(MMC)、多柔比星(阿霉素,ADM)分别进行药物敏感性实验。②单层贴壁细胞培养。96孔板1个,每组4孔,2×104细胞/孔。③MTT检测观察疗效。细胞加化疗药后培养48h,然后加MTT5mg/mL,每孔20μL,4h后用酶标仪(490nm)测量吸光度值。④RT-PCR检测A549细胞和MCF-7耐药株的mdr1和MRP表达,β2-MG作内参照。⑤96孔板内每孔一个球体,每孔掺入99mTc-MIBI9.25×104Bq(2.5μCi),分别于60和120min结束掺入并测量γ计数。结果①A549细胞药敏实验对DDP不敏感,对MMC、VDS、ADM、5-FU、HCP敏感。②MCF-7长春新碱耐药株(MCF-7/VCR)对DDP、VDS不敏感,对MMC、ADM、5-FU和HCP较敏感。③A549细胞及球体的Mdr1/β2-MG为0,MRP/β2-MG分别为0.76和0.62;MCF-7耐药细胞的mdr1/β2-MG和MRP/β2-MG分别为35和4.36。④A549多细胞球体对99mTc-MIBI120min的摄取值高于60min摄取值(P<0.05)。结论A549多细胞球体的mdr1和MRP表达水平较低以及MIBI摄取阳性提示无多药耐药性产生,与化疗药物敏感性检测结果基本一致。A549细胞对DDP耐药说明除mdr1和MRP之外,还存在与转运蛋白间接相关的其他耐药机制。

帕金森病SD大鼠模型的^(99)Tc^m-TRODAT-1放射自显影实验研究

目的:研究多巴胺转运蛋白(DAT)显像剂99Tcm-2β-[N,N’-双(2-巯乙基)乙撑二胺基]甲基3β-(4-氯苯基)托烷(99Tcm-TRODAT-1)用于帕金森病(PD)早期诊断的价值。方法:将SD大鼠分成三组:①正常组;②单侧帕金森病(PD)模型组(颅内单侧纹状体毁损);③多发性腔隙性脑梗死(简称多发性腔梗)模型组(颈动脉注射自体血栓术)。观察正常大鼠纹状体内99Tcm-TRODAT-1分布情况。比较各组纹状体99Tcm-TRODAT-1的摄取情况。结果:正常大鼠纹状体明显摄取99Tcm-TRODAT-1,单侧PD模型鼠毁损侧纹状体99Tcm-TRODAT-1摄取较健侧明显减少,多发性腔梗模型鼠的结果与正常组相似。结论:99Tcm-TRODAT-1显像剂被纹状体特异性摄取,能为PD病早期诊断提供有利依据。

一种新型潜在^(99m)TcN核标记5-HT_(1A)脑受体显像剂的制备研究

合成了一种含有(2-甲氧基苯基)哌嗪(MPP)活性基团的4-[(2-甲氧基苯基)哌嗪基]-二硫代甲酸盐(MPPDTF),式中MPP基团是与5-HT1A脑受体具有高亲和性的药效团.通过元素分析、红外光谱(IR)、核磁(1HNMR)及质谱(EI-MS)等表征确认了配体的结构.99mTcN核标记配合物按两步法制备:先由药盒法制得中间体([99mTc≡N]i2nt+),然后通过配体交换反应制得最终标记配合物(99mTcN(MPPDTF)2).配体交换反应条件在配体用量、反应pH值、反应温度以及反应时间等方面经过细致的优化,在最佳标记条件下可制得放射化学纯度大于98%的最终配合物.中间体和最终配合物的制备均经过TLC和HPLC鉴定.99mTcN(MPPDTF)2配合物为中性、脂溶性配合物(P=49.5±3.5,n=3),在室温下放置6 h以上放化纯无明显变化.

^(99m)Tc-TRODAT-1内照射辐射吸收剂量的计算

为估测99mTc -TRODAT - 1在全身靶器官的内照射辐射吸收剂量及生物学分布 ,对 3例帕金森病患者 (PD)、2例原发性震颤 (ET)患者静脉注射99mTc -TRODAT - 1后 ,用双探头SPECT采集 2 4h内系列全身前、后位图像 ;利用ROI技术获各时相全身各脏器的摄取放射性活度 ,采用MicrocalOrigin 5 .0应用程序中的非线性拟合方法得到各脏器的时间 -放射性曲线 ,通过各源器官的累积活度计算出放射性核素的滞留时间 ,然后由美国MIRDOSE 3.1应用程序得到各靶器官的内照射辐射吸收剂量。另外 ,注药后 3h进行脑断层显像。实验结果显示 ,99mTc -TRO DAT - 1全身各脏器内照射辐射吸收剂量均较小 ,脑断层显像 ,纹状体影像清晰。99mTc -TRO DAT - 1人体应用安全 ,是一种优良的多巴胺转运体 (DAT)显像剂。

一种^(99)Tc^m标记的5-HT_(1A)受体显像剂的合成与标记

合成了一种99Tcm标记的5-HT1A受体显像剂。该显像剂先由二硫二氮与6-溴己酰氯结合,再与2-(1-哌嗪)苯甲醚结合,经还原、脱保护反应得到标记前体,再对前体进行99Tcm标记。标记率达90%以上,薄层层析测得标记物放化纯度大于95%。

^(99m)Tc-TRODAT-1动物体内生物学分布特性的实验研究

目的:探讨国内研制的“一步法”药盒标记的多巴胺转运蛋白(DAT)显像剂99mTc-TRODAT-1在动物体内的生物学特性和显像效果。方法:①“一步法”药盒生产标记物;②正常大鼠体内生物分布特性的实验;③正常猴和偏侧PD模型猴给药后3h脑SPECT显像。结果:①TRODAT-1药盒标记简便。经TLC检测,标记率为79.9%,室温下放置2.5h稳定;②正常大鼠体内放射性清除迅速,主要由肝脏代谢后经肠道排出体外;③99mTc-TRODAT-1脑内浓聚较低,但纹状体(ST)区放射性摄取快速且保留较好,小脑(CB)清除较快,ST/CB值于2h达峰值(ST/CB=3.21),持续4h;④纹状体对99mTc-TRODAT-1的特异性摄取不受预先注射的氟哌啶醇的影响;⑤99mTc-TRODAT-1在大鼠体内分布无性别差异;⑥猴脑DATSPECT显像能基本清晰显示双侧ST正常影像及其病理改变。ST/CB值可以作为反映ST特异性摄取的参数指标。结论:“一步法”药盒制备的99mTc-TRODAT-1可用于脑SPECT显像研究,显像时间取给药后2~3h时间段为宜。

[^(99)mTc]TRODAT-1SPECT在帕金森病早期诊断中的应用

犤99mTc犦成像能量理想,购买方便,是临床常规应用的同位素。犤99mTc犦TRODAT-1是多巴胺转运体(DAT)的特异性配体,可以与DAT特异地结合,灵敏地显示脑内基底节区DAT的活性变化。因而可用于帕金森病(PD)的早期诊断。