^(99)Tc^m-RC-160的制备及其生物活性分析

分别以抗坏血酸钠和酒石酸亚锡为还原剂,用直接标记法制备^(99)Tc^m-RC-160。采用抗坏血酸钠为还原剂时,标记率为45％;酒石酸亚锡为还原剂时,标记率为68％。其最佳标记条件为:酒石酸亚锡用量为500μg,反应温度为90℃,反应时间为30min。标记物经HLB小柱纯化后,放化纯度>95％;放置4h后,其放化纯度仍>95％。用Cystein将^(99)Tc^m从标记肽中置换出50％所需浓度为50mmol/L。这表明其体内外稳定性较好。标记物与受体有较高的亲和力(K_d=0.83±0.09 nmol/L,B_(max)=45±3nmol/g)。

hsstr2基因转染肿瘤细胞的受体显像研究

目的将人生长抑素受体2亚型(hsstr2)基因转染至该受体表达阴性的肿瘤细胞,并进行该受体介导的肿瘤显像。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获得hsstr2基因并构建真核表达载体,将hsstr2基因转染至肺腺癌A549细胞系(hsstr2表达阴性),用RT—PCR及流式细胞术检测受体表达情况;采用高表达细胞株进行该受体体外结合特性研究,建立裸鼠肿瘤模型,探讨该受体介导的肿瘤显像方法。结果获得经测序完全正确的hsstr2基因,RT-PCR及流式细胞术鉴定选取高表达的细胞株,体外结合实验测得平衡解离常数Kd=5.65×10-10mol/L,最大结合容量Bmax=2.01×104结合位点/细胞,半数抑制浓度IC50=1.88×10-9mol/L。裸鼠肿瘤模型显像示,静脉注射显像剂99Tcm-RC-160后0.5-1 h肿瘤显影明显,24 h后肿瘤部位第2次显影。结论将hsstr2转染至该受体表达阴性的肿瘤细胞并进行受体介导的肿瘤显像是可行的,适宜显像时间为0.5-1 h。