乙醇及二甲基亚砜对人γδT细胞和αβT细胞凋亡与细胞活性的影响

目的 观察不同浓度的乙醇及二甲基亚砜 (DMSO)对人γδT细胞和αβT细胞凋亡与细胞活性的影响。方法 分别用结核杆菌低分子多肽抗原 (Mtb Ag)、CD3单抗(CD3mAb)刺激正常人外周血单个核细胞 ,分别获得Mtb Ag激活的T细胞 (αβT细胞为主 )及CD3mAb激活的T细胞(γδT细胞为主 ) ;用不同浓度的乙醇及二甲基亚砜分别作用于γδT细胞和γδT细胞 4、2 4h后 ,应用Annexin V FITC/PI染色 ,流式细胞术检测不同T细胞亚群的凋亡 ,应用四唑盐(MTT)法检测T细胞的活性。结果 Mtb Ag激活的T细胞中γδT细胞比例可达 70 %～ 90 % ;CD3mAb激活的T细胞中γδT细胞比例 >90 % ;与对照组相比 ,除浓度为 1 0 %及 2 0 %的DMSO作用于γδT细胞 2 4h的诱导凋亡作用明显 (P <0 0 5 )及浓度为 2 0 %的DMSO作用于γδT细胞 4h对细胞活性抑制明显 (P <0 0 5 )外 ,低浓度乙醇及DMSO(≤ 2 0 % )对人γδT细胞和γδT细胞的诱导凋亡作用及对细胞活性的抑制作用均无显著性 (P >0 0 5 ) ;与对照组相比 ,除 5 0 %乙醇作用于γδT细胞 4h及 5 0 %DMSO作用于γδT细胞 4h诱导细胞凋亡作用不明显 (P >0 0 5 )外 ,高浓度乙醇和DMSO(5 0 % )对γδT细胞和γδT细胞的诱导凋亡作用及对细胞活性的抑制作用均增加 (P <0 0 5 )。结论?

神经酰胺对人γδT细胞和αβT细胞的诱导凋亡作用

目的 :观察神经酰胺对人γδT细胞和αβT细胞的诱导凋亡作用。 方法 :用结核杆菌低分子多肽抗原 (Mtb Ag)和CD3单抗 (CD3mAb)分别刺激正常人外周血单个核细胞 ,获得Mtb Ag激活的T细胞 (γδT细胞为主 )及CD3mAb激活的T细胞(αβT细胞为主 ) ;用不同浓度的神经酰胺 (C2 Cer)分别作用于γδT细胞和αβT细胞 ,培养 3h后收获细胞 ,应用Annexin V FITC/PI染色 ,流式细胞术检测不同亚群T细胞的凋亡 ,应用四甲基噻唑氮蓝 (MTT)比色法检测T细胞的活性。结果 :Mtb Ag激活的T细胞中γδT细胞比例可达 70 %～ 90 % ,CD3mAb激活的T细胞中αβT细胞比例 >90 % ;与对照组比较 ,低浓度的C2 Cer(≤ 1 0 μmol/L)对人γδT细胞和αβT细胞的诱导凋亡作用和细胞活性抑制作用均不明显 (P >0 .0 5 ) ;而高浓度的C2 Cer对γδT细胞和αβT细胞的诱导凋亡作用和细胞活性抑制作用存在显著差异 :1 0 0 μmol/L的C2 Cer诱导γδT细胞、αβT细胞凋亡比例分别增加 1 0 .4 % (P >0 .0 5 )及 73.5 % (P <0 .0 1 ) ,活细胞区 (R1区 )的细胞比例分别为对照组的 88.1 % (P >0 .0 5 )和7.8% (P <0 .0 1 ) ;而 5 0 0 μmol/L时诱导γδT细胞和αβT细胞凋亡比例分别增加 71 .9%和 73.8% (P <0 .0 1 ) 。

老年肝脾αβT细胞淋巴瘤1例并文献复习

分析诊疗的1例老年肝脾αβT细胞淋巴瘤临床资料,并复习相关文献。肝脾αβT细胞淋巴瘤较为罕见,易误诊,其临床表现是以肝脾进行性增大、血象下降为主,通常淋巴结不受累,但骨髓易受累。其病情进展快,疗效差,生存期短。

微小RNAs与αβT细胞发育和功能的研究进展

近年来的研究显示,微小RNA(MicroRNAs,miRNAs)在机体免疫细胞发育和免疫应答中发挥了重要作用,尤其是miRNAs在αβT细胞的发育、活化、功能亚群分化和老化等一系列生物学过程中发挥了关键的调控作用。这些研究进展不仅对于深入认识机体免疫系统和应答机制,还对于相关临床疾病的治疗具有重要意义。

αβT细胞TCR偏向取用与SLE的研究概况

系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus,SLE）是一种以淋巴细胞异常、自身反应性T细胞活化、多种自身抗体产生、补体活化、免疫复合物沉积而导致多系统和多器官损伤为特征的自身免疫性疾病。

microRNA-7对小鼠肠系膜淋巴结αβT淋巴细胞组成的影响

目的:研究miR-7(MicroRNA-7,miRNA-7)对小鼠肠系膜淋巴结αβT淋巴细胞比例的影响并初步探讨其意义。方法:利用miR-7基因敲减(Knockdown,KD)小鼠模型,观察其肠系膜淋巴结大小、重量和淋巴结细胞总数,以及HE染色的病理学变化;流式细胞术(FACS)检测淋巴结中αβT淋巴细胞亚群(CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞)以及CD4+T细胞和CD8+T细胞的活化相关分子CD69、CD62L和功能相关因子IFN-γ表达的情况。结果:与野生型(Wild type,WT)小鼠相比,miR-7KD小鼠肠系膜淋巴结大小、重量指数和淋巴结细胞总数均显著增高(P<0.05),且HE染色显示MLNs有病理性改变;肠系膜淋巴结中αβCD3+T细胞比例增加显著,其中以CD4+T细胞比例变化最为明显(P<0.05),而CD19+B淋巴细胞比例明显下调(P<0.05),但各亚群细胞总数均明显增加(P<0.05);最后,CD4+T细胞和CD8+T细胞中的CD62L+细胞的比例均显著下调(P<0.05),而CD69+细胞和IFN-γ+细胞比例均显著上调(P<0.05)。结论:miR-7敲减后可显著影响肠系膜淋巴结中αβT淋巴细胞的组成比例,提示其对肠系膜淋巴结中淋巴细胞的组成和功能具有重要的调控作用。

γδT细胞生物学特性及研究进展

rδT细胞是T细胞的一个特殊亚群，多数为CD4-CD8-T细胞，主要分布于黏膜和上皮组织中，在外周血中占CD3＋T细胞的1％-5％，按T细胞受体（Tcellreceptor，TCR）类型不同，可将T细胞分为TCRαβ和TCRrδT细胞。rδT细胞的分布位置、发育途径、表型标志及抗原识别机制都与仪αβT细胞有着显著的区别。已有多项研究表明，rδT细胞不但可以直接识别并杀伤靶细胞．参与早期抗HIV的天然免疫，而且其分泌的各类细胞因子有助于诱发获得性免疫反应[1]，在机体的抗肿瘤、抗感染、抗过敏及自身免疫性疾病中发挥着重要的作用。本文就rδT细胞的生物学特性及其研究进展作一综述。

γδT细胞表达共刺激分子及协同信号通路的研究进展

根据T细胞受体的不同,人体T淋巴细胞分为αβT细胞和γδT细胞。近年αβT细胞共刺激信号在调节T细胞活化及耐受方面的研究取得了重要的进展,而在γδT细胞相关的研究较少。明确这些共刺激分子及其信号通路在γδT细胞免疫应答的不同阶段发挥的不同正向负向调节作用,将为病毒感染、肿瘤、自身免疫性疾病、移植后排斥等疾病的治疗提供新的前景。

外周血γδT和αβT细胞对胰腺癌细胞株的杀伤作用

目的比较外周血γδT细胞和αβT细胞对胰腺癌细胞株的杀伤作用,研究γδT细胞在胰腺癌过继免疫治疗中的作用。方法从胰腺癌病人外周血中分离出淋巴细胞,利用固相抗体包被方法体外特异性扩增γδT和αβT细胞,用流式细胞仪检测效应细胞的纯度,按一定的靶效比将效应细胞和胰腺癌细胞株体外混合培养。利用 MTT 法测定效应细胞的细胞毒作用。结果利用抗体包被方法可有效扩增γδT和αβT细胞,并达到较高纯度。外周血γδT细胞体外杀伤胰腺癌细胞株的作用与效应细胞纯度和靶效比成正相关,并对多株胰腺癌细胞株敏感;外周血γδT细胞的杀伤效果明显优于αβT细胞。结论外周血γδT细胞可以弥补传统效应细胞的不足,表现出较强的肿瘤免疫杀伤作用。

带γδ和αβ受体的T细胞(TCR)在人胎儿组织内分布的研究

本文用细胞免疫化学方法，在冰冻切片上，检测了胎儿不同组织和器官内带γδ和αβ受体的Ｔ细胞（ＴＣＲ）的分布，结果发现ＴＣＲ细胞的分布与，般Ｔ细胞不同，有相对固定的分布区，如胸腺内ＴＣＲ细胞主要分布在皮筋质交界处和髓质部；脾脏内的γδＴ主要位于边缘区，而αβＴ主要位于动脉周围淋巴鞘，在红髓和血窦两种细胞共存；淋巴结内只有少数ＴＣＲ细胞位于滤泡间或副皮质，滤泡内则未见。消化管内的ＴＣＲ细胞主要分布在小肠的固有膜，而胃、大肠和阑尾的固有膜内很少见；肝内ＴＣＲ细胞主要集中在血管和血窦周围；皮肤切片内的少数ＴＣＲ细胞见于真皮内，表皮基底层细胞内未见。这些细胞在胎儿期的免疫皮应及其生理功能还不清楚。

脾原发性αβT细胞淋巴瘤一例

患者女，52岁。因乏力、低热1个月余，于2007年4月9日入院。入院体检：两侧颈部均可触及1cm×1cm肿大淋巴结各1枚，脾肋下2cm。血象Hb71g／L，WBC1．2×10^9／L，中性0．42，淋巴0．50，单核0．08，PLT38×10^9/L。生化：乳酸脱氢酶（LDH）312U／L，

大鼠烫伤后小肠上皮内T细胞的变化

目的:探讨大鼠烫伤后小肠上皮内TCRαβT细胞和TCRγδT细胞在各肠段问的变化。方法:将大鼠随机分成正常对照组,烫伤后1、3和7d组。除正常对照组,其余的制作全身体表面积(TBSA)30%Ⅲ°烫伤模型。采用免疫组化和体视学测量方法,分别测出其T细胞数密度、平均体积和表面积体积比,并比较它们在肠段间的差异。结果:烫伤后(除回肠TCRγδT细胞)肠黏膜T细胞数密度均下降,第3天最低。无论正常或烫伤后,TcRγδT细胞平均体积均比TCRαβT细胞增大。结论:烫伤后(除回肠TCRγδT细胞)肠黏膜T细胞的数量均减少,第3天最少,但其平均体积和形状规则程度与烫伤前相比没有显著变化。

成人外周血αβ T细胞和γδT细胞体外活化CD69表达的比较性研究

目的：γδＴ细胞具有细胞毒效应，探讨γδＴ细胞体外活化的规律将有助于这类细胞的临床应用。方法：将成人外周血分别置于ＰＨＡ（４０ｍｇ／Ｌ）、ＰＤＢ（２×１０－７ｍｏｌ／Ｌ）及ＰＨＡ（４０ｍｇ／Ｌ）加上ＰＤＢ（２×１０－７ｍｏｌ／Ｌ）的条件下进行全血培养，在培养２ｈ和６ｈ后分别用双色免疫标记流式细胞法对外周血Ｔ细胞的ＴＣＲαβ、ＴＣＲγδ和ＣＤ６９分子进行分析。结果：Ｔ细胞在受刺激后２ｈＣＤ６９分子即有所增高，但其增加的程度因Ｔ细胞亚群和刺激剂不同而有差别，ＰＨＡ和ＰＤＢ分别使αβＴ细胞ＣＤ６９表达百分率由对照组的４４８±１３６升高到８７９±１６７和７３３６±２９８；ＰＨＡ和ＰＤＢ分别使γδＴ细胞ＣＤ６９表达百分率由对照组的１３６５±１７４升高到３５８４±１４０和９９０３±０９７。与２ｈ的情况相比，αβＴ细胞在各种刺激剂作用６ｈ后ＣＤ６９表达均有进一步的增高，γδＴ细胞在ＰＨＡ作用６ｈ后ＣＤ６９表达继续上调。结论：γδＴ细胞对多克隆活化剂的反应比αβＴ细胞更早和更强。这一特征更有利于体外扩增γδΤ细胞并将其用于临床免疫治疗。

成人外周血细胞中Th2功能亚群分化的体外实验研究

目的 :研究在中性条件和Th2极化条件下CD3单克隆抗体 (CD3mAb)激活的人外周血αβT细胞Th1/Th2型细胞因子的表达。方法 :用CD3mAb、IL 2刺激人外周血单个核细胞 (PBMC) ,作为CD3mAb激活的T淋巴细胞 (CD3AT)的中性条件培养 ;用CD3mAb、IL 2、rhIL 4和抗人IL 12抗体 ,作为Th2极化条件。分别收集PBMC和培养后第 7、14和 2 1天细胞 ,加PMA、ionomycin和monensin作用 6h后 ,用多色荧光抗体标记 ,在流式细胞仪上检测αβT细胞中胞内IFN γ或IL 4产生细胞的比例。结果 :PBMC中IFN γ+ 或IL 4 + αβT细胞分别为 2 3.6 %、2 .4 %。与中性条件相比 ,Th2极化条件下培养 3周 ,αβT细胞中IFN γ产生细胞明显减少 (P <0 .0 0 1) ,IL 4 + 产生细胞显著增加 (P <0 .0 0 1) ;同时产生IFN γ+ IL 4 + 细胞从 3.6 %增加至 6 .1%。结论

结核患者外周血αβT和γδT细胞亚群免疫亚型细胞分布的探讨

目的:检测健康成人和结核患者外周血αβT细胞亚群以及γδT细胞亚群分布情况。方法:采集健康成人及结核病患者外周血,用不同荧光素标记单抗染色后,用流式细胞术检测αβT细胞免疫亚型CD45RA+CD27+初始型细胞(Tnaive)、CD45RA-CD27中央记忆型T细胞(Tcm)+、CD45RA-CD27-效应记忆型T细胞(Tem)和CD45RA+CD27-效应型T细胞(Teff);γδT细胞中Vδ1、Vδ2、Vδ1-Vδ2-(即Vδ3-8)4种免疫亚型的百分率。结果:与健康成人比较,结核患者CD4+αβT细胞中Tnaive、Teff细胞的百分率降低(P<0.01),Tem细胞的百分率升高(P<0.01),Tcm细胞差异无统计学意义(P>0.05)。结核与健康成人比较,患者CD8+αβT细胞中Tnaive、Tcm细胞的百分率降低(P<0.01和P<0.05),Tem、Teff细胞的百分率升高(P<0.01)。与健康成人比较,结核患者Vδ1γδT细胞中Tnaive、Tcm细胞的百分率降低(P<0.05),Tem细胞的百分率升高(P<0.05),Teff细胞差异无统计学意义(P>0.05);结核患者Vδ2γδT细胞中Tcm细胞的百分率降低(P<0.05),Tem、Teff细胞的百分率升高(P<0.05,P<0.01),Tnaive细胞差异无统计学意义(P>0.05);结核患者Vδ3-8γδT细胞中Tem细胞的百分率升高(P<0.05),Tnaive、Tcm、Teff细胞差异无统计学意义(P>0.05)。结论:结核病患者外周血中αβT和γδT细胞亚群分布均有显著改变。

Tγδ17和Tγδ22细胞在健康成人外周血中的比例

目的:观察健康成人外周血中αβT细胞和γδT细胞中辅助性T细胞17(TH17)样细胞和TH22样细胞的比例。方法:采集18名正常人外周血用荧光抗体染色后用流式细胞仪检测αβT细胞、γδT细胞中白细胞介素-22(IL-22)、IL-17和γ干扰素(IFN-γ)表达细胞的百分比。结果:将正常人外周新鲜全血中CD3+T细胞分成γδT细胞和αβT细胞两群。TH1样细胞在αβT细胞中比例为14.31%,明显低于在γδT细胞中的61.07%(P<0.01),而TH17样细胞在αβT细胞中的比例为1.16%,明显高于在γδT细胞中的0.27%(P<0.01),TH22样细胞在αβT细胞中与γδT细胞中的比例分别为1.06%和0.91%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在γδT细胞中存在IL-17和IL-22均阳性的Tγδ17细胞和仅产生IL-22的Tγδ22细胞,但比αβT细胞中的TH17样细胞和TH22样细胞少。