Eicosapentaenoic acid代谢产物促进胰岛α细胞转分化为胰岛β细胞的作用研究

目的 探讨eicosapentaenoic acid(EPA)代谢产物促进胰岛α细胞向β细胞转分化的作用。方法 雄性C57BL/6J小鼠连续5 d腹腔注射60 mg/kg链脲佐霉素(streptozocin, STZ)构建1型糖尿病(T1DM)小鼠模型,2周后随机分为模型组、97%EPA饮食干预组、75%鱼油(50%EPA+25%DHA)饮食干预组,每周检测随机血糖;模型到期后,通过免疫荧光染色观察小鼠胰腺中胰岛β细胞再生情况。提取tdTomato荧光蛋白特意标记α细胞的小鼠(GCGicre小鼠与Rosa26tdTomato小鼠杂交获得)胰岛,加入1 mmol·L^(-1)STZ诱导β细胞凋亡,添加EPA代谢产物,培养48 h后,利用荧光染色观察胰岛素和tdTomato荧光的表达。在小鼠胰岛α细胞系αTC1培养基中添加EPA代谢产物,48 h后,利用荧光染色观察胰岛素和胰高血糖素的表达。结果 EPA和鱼油饮食干预均可明显降低T1DM小鼠的血糖水平,改善葡萄糖稳态,且胰腺中出现胰岛素和胰高血糖素共定位细胞;EPA代谢产物引起已发生β细胞凋亡的小鼠胰岛中发生tdTomato荧光蛋白和胰岛素共定位;EPA代谢产物可促进胰岛αTC1细胞系细胞分泌胰岛素。结论 EPA及其代谢产物可通过促进胰岛α细胞转分化为β细胞,进而增加胰岛素的分泌,缓解T1DM小鼠的高血糖症状。

胰腺α细胞向β细胞转分化研究进展

功能性胰岛β细胞数量的减少会导致血糖升高,研究发现,可通过增加功能性β细胞数量来改善高血糖。补充β细胞数量的途径有很多,其中包括诱导α细胞转分化为β细胞。了解胰腺β细胞的发育分化过程、α细胞转分化为β细胞相关转录因子变化情况以及现有的促进转分化相关途径,有助于寻找更多促进转分化作用靶点,从而为补充功能性β细胞找到新途径,为治疗糖尿病提供新思路。

初诊2型糖尿病患者血清25-羟维生素D水平与胰岛α细胞及β细胞功能的相关性

目的近年研究发现,维生素D缺乏与糖尿病的发生和发展有一定关系。文中旨在初步探讨初诊2型糖尿病患者血清25-羟维生素D[25(OH)D]水平与胰岛α细胞、β细胞功能的关系。方法选取2015年4月至2015年7月在南京军区南京总医院就诊的初诊2型糖尿病患者116例。采用电化学发光法测定其血清25(OH)D水平。根据不同水平将患者分为3组,即维生素D缺乏组:25(OH)D<20ng/m L(n=34);维生素D不足组:20ng/m L≤25(OH)D<30ng/m L(n=55);维生素D充足组:25(OH)D≥30 ng/m L(n=27)。所有患者均行馒头餐-胰岛素-C肽释放试验,比较3组患者的空腹血糖、空腹胰岛素、空腹C肽、空腹胰高血糖素、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、早期相胰岛素分泌指数(△I_(30)/△G_(30))、馒头餐-胰岛素-C肽释放试验30 min内C肽曲线下面积(AUC_(CP30))、180 min内C肽曲线下面积(AUC_(CP180))、葡萄糖曲线下面积(AUC_(PG))和胰高血糖素曲线下面积(AUC_(胰高血糖素))。结果 13组患者空腹血糖、空腹胰岛素、空腹C肽、空腹胰高血糖素、HOMA-IR、HOMA-β、AUC_(胰高血糖素)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。23组患者△I_(30)/△G_(30)、AUC_(CP30)、AUC_(CP180)、AUC_(PG)比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中缺乏组患者△I_(30)/△G_(30)、AUC_(CP30)、AUC_(CP180)均低于不足组、充足组,而AUC_(PG)(52.57±7.45)则高于不足组(48.18±10.32)、充足组(44.39±9.05),差异有统计学意义(P<0.05);不足组患者△I_(30)/△G_(30)、AUC_(CP30)、AUC_(CP180)均低于充足组[(3.07±1.60)vs(4.03±1.81)、(2.11±1.22)vs(3.14±1.93)、(15.18±5.24)vs(20.55±12.97),P<0.05],而AUC_(PG)则高于充足组(48.18±10.32 vs 44.39±9.05,P<0.05)。3Pearson相关分析结果显示,25(OH)D与△I_(30)/△G_(30)、AUC_(CP30)、AUC_(CP180)呈正相关(r值分别为0.4、0.268、0.255,P<0.01),与AUC_(PG)呈负相关(r=-0.403,P<0.05);偏相关分析结果显示,进一步校正年龄、性别、BMI、收缩压、舒张压、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇后,25(OH)D依然与△I_(30)/△G_(30)、AUC_(CP30)、AUC_(CP180)正相关(r值分别为0.416、0.292、0.274,P<0.01);与AUC_(PG)呈显著负相关(r=-0.39,P<0.01);Pearson相关分析及偏相关分析结果均显示25(OH)D与HOMA-IR、HOMA-β、空腹胰高血糖素、AUC_(胰高血糖素)无显著相关性(P>0.05)。结论初诊2型糖尿病患者25-羟维生素D缺乏与早期相胰岛素分泌和总体胰岛素分泌下降有关,与基础胰岛素分泌无关。25-羟维生素D水平与2型糖尿病患者胰岛α细胞功能无明显相关性。

胰岛α细胞机能与硒及维生素E关系的研究

目的：研究硒（Ｓｅ） 和维生素Ｅ（ＶＥ） 对胰岛α细胞机能的影响。方法：分别应用天然低Ｓｅ 、人工半合成低Ｓｅ 饲料及膳食低Ｓｅ 基础上注射链脲佐菌素（ＳＴＺ） 方法结合放免分析技术，检测胰岛α细胞合成与分泌胰高糖素机能。结果：天然及人工半合成低Ｓｅ 饲料引起以胰高糖素合成与分泌减退为特点的胰岛α细胞功能异常，补一定剂量的Ｓｅ或／ 和ＶＥ 可促进α细胞分泌活动，且胰高糖素的合成与分泌基本平行。低Ｓｅ 基础上ＳＴＺ 诱导的糖尿病（ ＤＭ） 大鼠，血清胰高糖素含量显著升高，单纯补Ｓｅ 或ＶＥ 不能明显降低其血清胰高糖素水平，只有联合补Ｓｅ 和ＶＥ 才表现了明显的作用，且ＤＭ 状态下，胰高糖素的合成与释放呈不平行状态。结论：Ｓｅ 和ＶＥ 两种抗氧化微量营养素具有维持胰岛α细胞正常机能。

糖尿病大鼠胰岛α细胞胰岛素受体分布和含量的初步研究

目的探讨糖尿病大鼠胰岛α细胞上胰岛素受体分布和含量的变化,及其与α细胞胰岛素抵抗(IR)的关系。方法运用免疫组化的双重荧光标记法对正常Wistar大鼠和1型糖尿病(T1DM)大鼠、2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛α细胞胰岛素受体进行定位及半定量分析。结果在正常大鼠和T1DM大鼠、T2DM大鼠胰岛α细胞的细胞膜上均有胰岛素受体蛋白表达。与正常大鼠比较,高脂饮食和T2DM大鼠胰岛α细胞上胰岛素受体的含量有下降趋势,但无统计学意义,T1DM大鼠胰岛α细胞上胰岛素受体的含量比正常大鼠明显减少。结论T2DM大鼠胰岛α细胞对胰岛素的抵抗与α细胞上胰岛素受体的减少无明显相关,是否与胰岛素受体的结合能力、受体酪氨酸激酶活性降低或受体后其他环节异常有关值得进一步研究;T1DM大鼠胰岛α细胞上胰岛素受体减少可能与使用大剂量链脲佐菌素有关。

胰岛α细胞对β细胞功能的影响

众多研究表明,胰岛移植的短期效果较显著,但长期效果仍不尽人意。在胰岛移植的早期,绝大多数病人可以获得明显的治疗效果,而后大多数的病人发生进行性的胰岛功能丧失,产生这种现象的原因至今仍不甚明了。如何解决移植胰岛的长期存活问题对于胰岛移植的临床应用至关重要。近年来人们对胰岛移植失败的原因进行了不断探索,发现胰岛移植后期的失败不仅与免疫反应有关,而且与移植物的细胞组成有密切关系,即胰岛细胞间的相互作用对移植物的功能维持可能有重要影响。因此,本文就胰岛α细胞及其分泌的胰高血糖素对β细胞功能的影响作一综述。

2型糖尿病患者胰岛α细胞和β细胞关系的研究

目的探讨2型糖尿病患者胰岛α细胞和β细胞的关系。方法将455例2型糖尿病患者根据空腹C肽水平及C肽增量(ΔC肽)分为A组(空腹C肽<1.9ng/ml,ΔC肽<1.1ng/ml)、B组(空腹C肽<1.9ng/ml,ΔC肽≥1.1ng/ml)、C组(C肽≥1.9ng/ml,ΔC肽<1.1ng/ml)和D组(C肽≥1.9ng/ml,ΔC肽≥1.1ng/ml),比较4组的性别构成、年龄、体重指数、血压、糖化血红蛋白、血脂、尿酸、空腹血糖及病程。行口服葡萄糖耐量试验及C肽、胰高血糖素释放试验,比较4组在试验前后各时间点血糖与胰高血糖素的比值(PG/GLA)及其ROC曲线下面积(AUCPG/GLA)的变化,并对C肽ROC曲线下面积(AUCC肽)及AUCPG/GLA等指标行相关性分析。结果 4组的性别构成、年龄、收缩压、舒张压、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇比较差异无显著性(P>0.05),体重指数、糖化血红蛋白、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、尿酸、空腹血糖及病程比较差异有显著性(P<0.05)。4组在口服葡萄糖耐量试验前后各时间点PG/GLA及AUC_(PG/GLA)比较差异有显著性(P<0.05)。Pearson相关分析显示,AUC_(PG/GLA)与AUC_(C肽)呈负相关(r=-0.353,P<0.01),多元逐步回归分析显示AUCPG/GLA与糖化血红蛋白(B=0.278,t=5.012,P<0.01)、空腹血糖(B=0.131,t=2.970,P<0.01)呈正相关。结论 2型糖尿病患者C肽和胰高血糖素之间关系密切,互为抑制,互为反馈。在保护胰岛β细胞功能的同时纠正胰岛α细胞功能的异常才能更好地控制血糖。

正常糖耐量者胰岛α细胞和β细胞第一时相分泌功能的变化

目的探讨正常糖耐量者胰岛α细胞和β细胞第一时相分泌功能的变化及影响因素。方法分别检测有家族史正常糖耐量者(FH+)40例、无家族史正常糖耐量者(FH-)55例空腹及左旋精氨酸(L-ARG)刺激后胰岛素(INS)、胰高血糖素(GC)及空腹游离脂肪酸(FFA)等指标。结果 (1)校正性别,年龄、BMI后,两组INS均2 min达分泌峰值,4 min开始下降,且FH+组峰倍数明显小于FH-组(P<0.05);(2)两组GC均2 min达分泌峰值,4 min开始下降。FGC和峰值倍数均无显著性差异(P>0.05)。结论遗传背景下,2型糖尿病发生主要源于β细胞的功能下降。

优降糖对Ⅱ型糖尿病胰岛13细胞和α细胞功能的影响

本文观察了11例Ⅱ型糖尿病(NIDDM)患者服用优降糖治疗前后血糖、胰岛素、C 肽和胰高糖素的变化,以探讨对胰岛β、α细胞功能的影响。结果表明:长期服用优降糖可显著改善胰岛β细胞功能,使患者基础及糖刺激后血清胰岛素、C 肽均增加,这样,不仅可降低空腹血糖,还可使β细胞对糖负荷的反应能力明显增强。此外,尚发现胰高糖素有不同程度降低,系优降糖直接抑制α细胞的分泌,抑或继发于β细胞功能的改善,有待进一步研究。

二肽基肽酶-Ⅳ抑制剂对糖耐量减低Wistar大鼠胰岛α细胞的影响

目的研究二肽基肽酶-Ⅳ抑制剂西格列汀对高糖高脂饲料喂养的糖耐量减低(IGT)Wistar大鼠糖代谢、脂代谢及胰岛α细胞的影响。方法选取4~5周龄雄性Wistar大鼠42只,按照随机数字表法分为健康对照组(NC组,14只)和IGT组(28只)。NC组以常规饲料喂养,IGT组以高糖高脂饲料喂养。喂养12周后IGT造模成功,成模后将IGT组随机分为IGT对照组和西格列汀组(Si组)2组,每组各14只。其中,Si组每日1次西格列汀灌胃[30mg/(kg·d)],NC组及IGT对照组均给予等体积生理盐水灌胃。于干预前和干预后4周分别检测空腹血糖(FBG)、血清胰高血糖素、餐后2h血糖(2hBG)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC);采用免疫组化法观察胰岛α细胞的面积,免疫荧光单标法测定胰岛α细胞胰高血糖素蛋白的表达。各组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用SNK-q检验。结果干预前,与NC组比较,IGT对照组及Si组2hBG、TG、TC水平均增高,胰岛α细胞面积及胰高血糖素蛋白表达均增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。西格列汀干预4周后,与同期IGT对照组及干预前Si组比较,Si组2hBG水平下降,胰岛α细胞面积及胰高血糖素蛋白表达均减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论西格列汀可下调胰岛α细胞面积及胰高血糖素蛋白表达,从而降低餐后血糖和胰高血糖素水平。

饥饿状态下大鼠胰岛α细胞免疫细胞化学及形态计量研究

应用免疫细胞化学方法对饥饿５ｄ大鼠和正常大鼠胰鸟α细胞进行显示，并用显微分光光度计和体视学技术对２组动物α细胞内胰高糖素的反应强度和α细胞在胰岛内所占数量和体积进行计量分析。结果表明：与正常对照组相比，饥饿大鼠胰岛α细胞内胰高糖素含量明显下降，但α细胞在胰岛内的相对数量和体积并无明显变化。提示：饥饿可导致胰高糖素释放，但由于大鼠胰岛α细胞在胰岛内并未出现相应数量和体积增加的代偿性改变，因此推测在持续性饥饿过程中α细胞对血糖不起主要调节作用。

Ⅱ型糖尿病模型db/db小鼠胰岛α细胞超微结构变化

目的:观察Ⅱ型糖尿病模型db/db小鼠胰岛α细胞的超微结构变化,探讨α细胞的病理改变与Ⅱ型糖尿病病因的关系。方法:选取3、5、8月龄尾静脉空腹血糖高于10.1mmol/L,且肥胖的db/db自发性糖尿病小鼠作为糖尿病组;选取相应年龄段尾静脉空腹血糖低于6.0mmol/L,体质量正常的db/+m表型正常小鼠作为对照组。于相应年龄段取胰尾,透射电镜观察胰岛α细胞超微结构。结果:糖尿病组胰岛α细胞胞质内分泌颗粒数量增多,可见致密芯与界膜间的间隙变窄,有的消失;线粒体和粗面内质网增多,细胞器结构未见明显改变。结论:胰岛α细胞超微结构改变和功能异常可能与Ⅱ型糖尿病的发病有关。

α细胞、胰高血糖素与2型糖尿病

胰岛α细胞分泌的胰高血糖素是胰岛素的主要拮抗激素,在低血糖时释放,通过增加肝糖输出,在维持血糖稳定中起到了关键作用。愈来愈多的研究表明,α细胞的病理改变及胰高血糖素的分泌异常也参与2型糖尿病的发病,减少胰高血糖素的分泌或阻断其作用可能成为治疗2型糖尿病的新方法。

α细胞功能紊乱在糖尿病发病机制中的作用

胰升血糖素是引起血糖增高的因素。尽管对2型糖尿病患者出现高胰升血糖素水平的潜在原因目前尚未完全清楚,但是阻断胰升血糖素作用或减少胰升血糖素分泌可降低空腹及餐后高血糖,由此而研发的药物在糖尿病的治疗中有广阔的前景。

维格列汀通过α细胞和β细胞“双调节”机制改善葡萄糖代谢的研究进展

维格列汀是一种有效的、具有选择性和可逆性的DPP-4抑制剂,而DPP-4是可致GLP-1和GIP快速失活的酶。GLP-1和GIP增强了胰岛素(β细胞)和胰高血糖素(α细胞)对葡萄糖的敏感性,对维持正常的葡萄糖稳态非常重要。维格列汀显示出了对α细胞和β细胞功能的双向调节作用。在α细胞中,如果葡萄糖水平偏高,GLP-1会减弱胰高血糖素水平,如果葡萄糖水平偏低,GIP会增加胰高血糖素水平。本文综述了维格列汀通过α和β细胞“双调节”机制发挥改善葡萄糖代谢作用的研究进展。

采用去β细胞技术建立胰岛α细胞大鼠模型

目的建立一种去除胰岛β细胞的α细胞大鼠模型。方法12周龄SD大鼠分为3组(n=8):正常对照组(NC)、模型1组(M1)和模型2组(M2),M1和M2组大鼠分别腹腔注射1次链脲佐菌素(STZ)100和150 mg/kg,5 d后处死大鼠,胰腺组织匀浆检测胰岛素(Ins)和胰高糖素(Glc)的含量;胰腺组织HE染色,Ins、Glc经免疫组织化学染色并图像定量分析。结果去β细胞大鼠(M1和M2组)胰岛面积约为正常大鼠的1/7,β细胞面积占胰岛面积比例由正常状态的74.3%分别下降到5.4%和5.2%,胰腺匀浆液Ins的含量不到正常的3%,而Glc的含量略有上升。NC组Glc阳性细胞位于胰岛周边,数量较少,M1和M2组Glc阳性的α细胞由周边向中央聚集,α细胞面积占胰岛面积比例由16.4%分别上升到76.5%和74.4%。结论STZ一次大剂量腹腔注射可获得完全去除胰岛β细胞的大鼠模型,且不影响α细胞的形态和功能,建立胰岛α细胞大鼠模型。

棘手的六重奏—糖尿病发病与胰岛α细胞及其临床处理

成年人的胰腺中散布着50-200万个胰岛，它们构成了胰腺的内分泌组织。目前已知胰岛至少存在5种内分泌细胞，alpha细胞分泌胰高糖素，beta细胞分泌胰岛素，delta细胞分泌生长抑素，epsilon细胞分泌饥饿素而pp细胞分泌胰多肽。胰岛不仅仅是一个大约有1000个内分泌细胞组成的细胞团，而且是一个有着高度密集的微血管系统和丰富的自主神经支配的，以及富含整合蛋白和核纤层蛋白等细胞外基质的，结构和功能极其复杂的微器官。组成胰岛的两种主要细胞alpha和beta约占细胞总数的90％以上。

游离脂肪酸对胰岛β细胞及α细胞功能影响研究

分为FFA正常组与升高组 ,分别对血糖、胰岛素、C肽、胰高血糖素 ( 0、 60、 1 2 0、 1 80min)结果进行对比分析。结果两组比较 ,其血糖、胰岛素、C肽、胰高血糖素 ( 0、 60、 1 2 0、 1 80min)均无显著性差异。结论FFA升高组对胰岛 β细胞及α细胞功能影响与正常组相比无差异。可能FFA不是一个独立的损害胰岛细胞功能的因素 ,以及同时存在一些保护胰岛细胞、抵消FFA毒性作用的因素有关。另外 。

雷公藤内酯醇联合高三尖杉酯碱对KG-1α细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨低浓度雷公藤内酯醇(triptolide,TPL)联合高三尖杉酯碱(homoharringtonine,HHT)对KG-1α细胞增殖与凋亡的影响及其可能机制。方法:应用CCK-8法检测不同浓度TPL和HHT单用及联用对KG-1α细胞增殖的影响,并计算其药物联合作用指数(combined index,CI);甲基纤维素集落形成实验检测细胞集落形成能力;流式细胞术检测细胞表面分子、细胞凋亡率及细胞周期变化;Western blot检测Akt信号通路相关蛋白在TPL及HHT作用前后的表达情况。结果:KG-1α细胞高表达CD34CD123而CD38缺失;TPL及HHT单用对KG-1α细胞增殖抑制并具剂量依赖性(r=0.952,r=0.992);低浓度联合用药与单药对比,前者细胞增殖、集落形成率更低,而细胞凋亡率增高;CI值亦提示低浓度TPL联合HHT呈高度协同作用。低浓度TPL联合HHT作用KG-1α细胞后,P-Akt^(Ser473)、P-Akt^(Thr308)、BCL-2、PARP及Survivin蛋白表达降低而PARP裂解增加。结论:低浓度TPL联合HHT可通过PI3K/Akt信号通路及下游蛋白协同抑制KG-1α细胞增殖,并诱导其凋亡。

大鼠胰岛α细胞及其分泌物对β细胞功能的影响

目的:探讨大鼠胰岛α细胞和胰高血糖素样肽1(GLP-1)对β细胞(INS-1细胞,即胰岛素瘤细胞)功能的影响,阐明α细胞与INS-1细胞混合移植对降糖效果影响的可能机制。方法:采用MTT法分析10%、20%和30%胰岛α细胞条件培养基和0.03、0.30、3.00和30.0mg·L^(-1) GLP-1作用下INS-1细胞的增殖能力;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测10%、20%和30%胰岛α细胞、胰岛α细胞条件培养基和不同浓度GLP-1作用下INS-1细胞胰岛素释放水平;采用激光共聚焦显微镜分析高糖和GLP-1作用下INS-1细胞内Ca2+浓度;采用Western blotting法分析不同浓度的胰岛α细胞条件培养基和不同浓度GLP-1作用下胰岛素蛋白表达水平;将INS-1细胞、INS-1细胞与α细胞的混合物移植至糖尿病裸鼠左肾包膜下,监测血糖,观察肾脏形态,采用免疫组织化学法检测移植部位细胞中胰岛素和胰高血糖素水平。结果:与对照组比较,胰岛α细胞条件培养基和GLP-1均可促进INS-1细胞增殖和胰岛素释放(P<0.05)。激光共聚焦显微镜分析,GLP-1可刺激INS-1细胞内Ca2+浓度升高(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,胰岛α细胞条件培养基和GLP-1作用下INS-1细胞中胰岛素蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与移植前比较,糖尿病裸鼠肾包膜下移植INS-1细胞35d时血糖明显下降(P<0.05),甚至出现低血糖,移植部位明显肿胀;移植INS-1和α细胞混合物的糖尿病裸鼠血糖无明显变化(P>0.05),移植部位未见明显肿胀。免疫组织化学染色,移植INS-1细胞部位的组织既表达胰岛素又表达胰高血糖素。结论:胰岛α细胞及其分泌物可促进INS-1细胞增殖和胰岛素释放,但α细胞与INS-1细胞混合移植给糖尿病裸鼠可降低INS-1细胞移植的降糖效果,其机制可能与INS-1细胞既表达胰岛素基因又表达胰高血糖素基因有关。