α-黑素细胞刺激素对皮肤黑素合成的调控作用

皮肤色素异常是整形美容外科常见的问题 ,目前还无较好的解决方法 ,主要是对皮肤色素沉着的机制还不完全清楚。近年来 ,逐步认识到α 黑素细胞刺激素 (α melanocyte stimulatinghormone ,α MSH)与黑素的合成有密切关系。α MSH通过与其黑素细胞表面受体—黑皮素 1受体 (melanocortin 1receptor,MC 1R)结合 ,使黑素细胞内酪氨酸酶的表达增加、活性增强 ,黑素合成增加并优先刺激优黑素细胞的合成 ;α MSH还可促进黑素细胞的增生和树突形成及黑素小体的转运 ,同时α MSH对黑素细胞的免疫保护作用及与其他外源性刺激因素协同作用而调控皮肤的色素沉着过程。α MSH的内源性拮抗剂刺鼠信号蛋白 (ASIP)可明显减弱其黑素合成作用 ,降低皮肤的着色能力。随着对α MSH调控黑素合成作用的更进一步了解 ,必将为解决临床上获得性色素沉着或色素脱失性疾病提供一种新的治疗方法。

α-黑素细胞刺激素处理的树突状细胞对小鼠心脏移植物存活时间的影响

目的:观察α黑素细胞刺激素(αMSH)处理的小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)预防同种异基因小鼠心脏移植排斥反应的效果。方法:在供者BALB/c小鼠DC培养的过程中加入αMSH,用流式细胞仪分析DC的表型变化,用ELISA方法检测培养上清中IL 12的分泌水平。在同种异基因心脏移植前,分别将αMSH处理后7 d的DC(αMSH DC)和正常培养7 d的DC(Day7 DC)输至受者C57BL/6小鼠体内,并另设输入PBS的小鼠为对照组,通过颈部Cuff法小鼠异位心脏移植模型,观察心脏移植物存活时间,并用ELISA方法测定受者血清细胞因子水平的变化。结果:αMSH DC表面分子的表达明显低于Day7 DC。αMSH DC培养上清中分泌IL 12 [(95.2±6.3) pg/ml]的水平也明显低于Day7 DC[(197.1±10.2) pg/ml]。与PBS组[(7.17±0.26) d]相比,Day7 DC组[(6.25±0.61) d]的心脏移植物存活时间缩短;而αMSH DC组[(15.08±1.32) d]的心脏移植物存活时间明显延长。与Day7 DC和PBS组相比,αMSH DC组移植后血清IL 2 和IFN γ细胞因子水平明显降低。结论:αMSH可以抑制体外培养的DC表面分子的表达和IL 12的分泌;αMSH处理的DC在体内能延长同种异基因心脏移植物的存活时间。

α-黑素细胞刺激素在自体移植皮片中的mRNA表达及意义

目的初步探索α-黑素细胞刺激素(α-melanocyte-stimulatinghormone,α-MSH)在自体移植皮片过度色素沉着中的作用。方法标本取自颈部自体中厚移植皮片术后1年,局部需再次矫正的18例患者。在切取颈部自体中厚移植皮片同时于每例移植皮片受区及原供区腹部周围分别切取正常皮肤作对照,切取范围1.0cm×0.5cm。分别利用RT-PCR、银染-丽春红染色法计算自体中厚移植皮片、原供区及受区周围自体正常对照皮肤中α-MSHmRNA电泳条带及表皮的灰度值,测定各组中α-MSHmRNA的半定量表达及黑色素的含量。结果α-MSH在自体中厚移植皮片中的mRNA表达明显高于自体正常对照皮肤,差异有统计学意义(P<0.01);自体中厚移植皮片表皮中黑色素含量较自体正常对照皮肤表皮中的黑色素含量明显增多,差异亦有统计学意义(P<0.01);且表皮中黑色素的含量与α-MSH的mRNA表达量呈正相关。结论α-MSH在自体中厚移植皮片中的表达较在自体正常对照皮肤中显著增高,致皮片中黑色素含量升高,在自体移植皮片过度色素沉着中起重要调控作用。

碱性成纤维细胞生长因子和α-黑素细胞刺激素对体外培养黑素细胞黏附和迁移的影响

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和α-黑素细胞刺激素(-αM SH)对黑素细胞黏附、迁移的影响。方法:从正常人包皮分离、纯培养黑素细胞,分别用bFGF和-αM SH处理培养黑素细胞;采用纤维连接素包裹的培养板观测黑素细胞黏附,用T ransw ell微孔膜法研究黑素细胞迁移。结果:bFGF和-αM SH均可促进黑素细胞黏附于培养板,bFGF可诱导黑素细胞迁移并呈剂量依赖性(P<0.05),-αM SH对黑素细胞迁移无明显影响(P>0.05)。结论:bFGF和-αM SH可以诱导黑素细胞的黏附和/或迁移,参与白癜风的恢复。

α-黑素细胞刺激素对体外培养黑素细胞迁移和细胞内钙离子浓度的影响

目的:探讨α黑素细胞刺激素(αMSH)对体外培养黑素细胞迁移和细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响。方法:从正常人包皮分离并纯培养黑素细胞,用αMSH处理纯培养的人表皮黑素细胞,用Transwell微孔膜法研究黑素细胞迁移,激光共聚焦扫描显微镜检测[Ca2+]i。结果:αMSH可诱导黑素细胞迁移,并使[Ca2+]i浓度升高。结论:αMSH可能通过诱导黑素细胞内的Ca2+浓度升高,从而促进黑素细胞的迁移。

α-黑素细胞刺激素对恶性黑色素瘤细胞Fas/FasL表达的影响及其与凋亡的关系

目的:研究α黑素细胞刺激素(αMSH)对恶性黑色素瘤细胞凋亡特性的影响。方法:采用流式细胞检测分析、DNA琼脂糖凝胶电泳方法检测α黑素细胞刺激素作用后恶性黑色素瘤细胞的凋亡情况,应用RT PCR检测恶性黑色素瘤细胞Fas/FasLmRNA的表达情况。结果:α黑素细胞刺激素作用1、3、24小时恶性黑色素瘤细胞凋亡率分别为14.9%、33.7%、46.7%,α黑素细胞刺激素能明显上调恶性黑色素瘤细胞Fas/FasL的表达,各处理组间差异比较均具有显著性(P<0.05);α黑素细胞刺激素作用24小时组细胞的DNA琼脂糖凝胶电泳显示明显“梯状(ladder)”条带。结论:α黑素细胞刺激素能上调恶性黑色素瘤细胞Fas/FasL的表达并诱导恶性黑色素瘤细胞的凋亡。

新型α-黑素细胞刺激素类似物对内毒素休克小鼠的保护作用

目的:评价新型α-黑素细胞刺激素(α-MSH)类似物对内毒素休克小鼠的保护作用。方法:雌性BALB/c小鼠经腹腔注射(ip)1μg脂多糖(LPS)和20 mg D-半乳糖胺(D-GalN)建立内毒素休克模型,30 min内ip给予2．5 mg·kg^(-1)新型α-MSH类似物,同时设置α-MSH,[Nle^4,D-Phe^7]α-MSH(NDP-MSH)和磷酸盐缓冲液对照。取小鼠眼眶血分离血清,以ELISA法测定TNF-α和IL-1β含量,用Griess试剂检测NO。观察小鼠生存情况,取主要脏器做常规组织病理检查。结果:新型α-MSH类似物能明显延长内毒素休克小鼠存活时间,其中位生存时间为32 h;显著降低血清TNF-α,IL-1β和NO水平(P＜0．01),并减轻重要脏器的炎症损伤。结论:新型α-MSH类似物对内毒素休克小鼠有显著的保护作用。

在羊驼皮肤黑色素细胞中α-黑素细胞刺激素对诱导一氧化氮合酶的影响

为研究α-黑素细胞刺激素(α-Melanocyte stimulating hormone,α-MSH)对诱导型一氧化氮合酶(NOS2)在羊驼皮肤黑素细胞中的影响。采用体外培养正常羊驼皮肤黑素细胞,检测不同浓度α-MSH(0、10-9、10-8、10-7mol/L)对羊驼皮肤黑素细胞中诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因表达量的影响;检测不同浓度一氧化氮供体(SNP)(0、10-5、10-4、10-3mol/L)对羊驼皮肤黑素细胞中阿黑皮素原(POMC,α-黑素细胞刺激素的前体)基因表达量的影响。结果表明:α-MSH处理羊驼皮肤黑素细胞5 d后,NOS2mRNA表达量有降低趋势,10-8mol/L较为明显;SNP处理5 d后,POMCmRNA表达量无明显变化。α-MSH能诱导羊驼皮肤黑素细胞NOS2mRNA基因表达量降低。

新型α-黑素细胞刺激素类似物亲和力和生物学效应的测定

检测新型α-黑素细胞刺激素(α-MSH)类似物与受体的亲和力和生物学效应。构建黑皮质激素受体表达质粒,经测序鉴定后以磷酸钙-DNA共沉淀法转染HEK-293细胞,48h后加入含900μg.mL-1G418的细胞维持液,稳定表达后以流式细胞仪检测。采用放射性配体结合分析测定新型α-MSH类似物对受体的亲和力,并以[3H]环磷酸腺苷(cAMP)测定盒检测新型α-MSH类似物作用细胞后的cAMP水平。结果显示,新型α-MSH类似物对MC1R,MC3R,MC4R及MC5R的抑制常数Ki分别为(0.159±0.040),(35.430±6.743),(19.293±2.780)和(2.230±0.670)nmol.L-1。其对MC1R,MC3R,MC4R及MC5R的EC50值分别为(0.45±0.07),(7.80±0.65),(2.55±0.23)和(0.33±0.09)nmol.L-1。新型α-MSH类似物是MC1R和MC5R高选择性的激动剂。

α-黑素细胞刺激素在不同实验动物表皮中的表达及意义

[目的]初步研究α-黑素细胞刺激素(α-melanocyte-sti mulating hormone,α-MSH)在不同实验动物表皮中的表达并阐明其意义,为色素障碍性皮肤病动物实验提供新的理论依据。[方法]对4组不同正常实验动物的表皮标本进行组织切片,应用免疫组织化学技术,观察α-MSH在4组不同实验动物表皮中的表达。[结果]α-MSH在白色昆明小鼠毛囊及白色FMN豚鼠表皮中呈阴性表达,在C57BL/6J小黑鼠毛囊黑素细胞及棕黄色HARTLY豚鼠表皮黑素细胞中呈阳性表达。[结论]白色昆明小鼠及白色FMN豚鼠适宜做色素增加动物实验研究,C57BL/6J小黑鼠及棕黄色HARTLY豚鼠适宜做色素减退动物实验研究;α-MSH可做为观测色素代谢障碍性疾病动物实验研究的一个重要指标。

α-黑素细胞刺激素基因修饰的树突状细胞延长小鼠移植心脏的存活时间

为观察α-黑素细胞刺激素(α-MSH)基因修饰的树突状细胞(DC)抑制同种异型基因小鼠心脏移植排斥反应的效果,以腺相关病毒(AAV)为载体将α-MSH基因导入BALB/c小鼠骨髓来源的未成熟DC,制备了α-MSH基因修饰的DC(α-MSH-DC)。在小鼠心脏移植前7 d,将α-MSH-DC输至受者C57BL/6小鼠体内,通过免疫组化方法观察供者α-MSH-DC在受者脾脏内存在的情况,用混合淋巴细胞反应(MLR)测定受者脾脏T细胞对供者同种抗原的反应性。通过颈部Cuff法小鼠异位心脏移植模型,观察心脏移植物存活时间,并用ELISA方法测定受者血清细胞因子水平的变化。结果显示,α-MSH-DC在受者脾脏内存在时间延长,能诱导受者脾脏T细胞的抗原特异性低反应性,使移植心脏存活天数延长至(19.3±2.35)d,较PBS对照组的(7.0±0.33)d明显延长(P<0.01)。使受者小鼠血清IL-2和IFNγ-水平显著降低(P<0.01),明显升高IL-4、IL-10水平(P<0.01)。表明移植前输入供者α-MSH基因修饰的DC能延长同种异型基因心脏移植的存活时间。

α-黑素细胞刺激素对同种异体小鼠异位心脏移植排斥反应的抑制作用

目的观察α-黑素细胞刺激素(α-MSH)对同种异基因小鼠移植心脏存活时间的影响,以了解其在移植免疫中的作用。方法小鼠颈部心脏移植的Cuff模型,腹腔给予α-MSH,观察移植心脏的存活时间和病理改变。结果移植小鼠给予α-MSH后,移植心脏的存活时间比对照组显著延长,心脏病理显著改善,其中以50μg组效果最佳。结论α-MSH能抑制同种异基因小鼠的心脏移植排斥反应。

α-黑素细胞刺激素对缺血再灌注损伤大鼠肠黏膜免疫功能的影响

目的 :探讨α 黑素细胞刺激素 (α MSH )对缺血再灌注 (I/R)损伤大鼠肠黏膜免疫屏障的保护作用及机制。方法 :采用大鼠小肠缺血 45min再灌注模型 ,治疗组于再灌注 5min内尾静脉注射α MSH。于再灌注后 2h用免疫放射法测定血清、肠黏膜组织中分泌型免疫球蛋白A (sIgA)的含量 ;四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法 (MTT)测定Peyer’s淋巴结 (PP)、上皮内淋巴细胞 (IEL)和固有层淋巴细胞 (LPL)增殖活力。结果 :肠I/R后血清和肠黏膜中sIgA含量下降 ,淋巴细胞增殖活性下降 (P <0 0 1) ;不同剂量的α MSH治疗组均能逆转I/R后sIgA含量下降和淋巴细胞增殖活力下降 ,差异有显著意义 (P <0 0 1) ,而不同剂量α MSH治疗组间各指标无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 :外源性α MSH可参与调节肠道相关淋巴组织免疫功能 。

α-黑素细胞刺激素对大鼠局灶脑缺血再灌注后炎症反应的影响(英文)

背景:研究表明,神经免疫调节肽α-黑素细胞刺激素(α-melanophore-stimulatinghormone,α-MSH)可通过抑制促炎因子释放、改善淋巴细胞活力等途径发挥其抗炎、抗菌、退热和免疫调节作用,在防治全身炎性反应综合征中可能有良好的应用前景。目的:研究α-MSH对缺血-再灌注后脑组织炎性细胞浸润及黏附分子(intercellularadhesionmolecule,ICAM-1)表达的影响。设计:随机双盲对照实验。单位:解放军第三军医大学西南医院急救部。材料:健康雄性Wistar大鼠60只,由第三军医大学实验动物中心提供。实验分3组,即假手术组、缺血组和α-MSH治疗组,每组根据缺血2h后再灌注6,12,24,48,72h5个时相点分为5组,每组各时相点4只。干预:制备大脑中动脉闭塞模型,在每个时间点取2只动物用免疫组织化学方法检测ICAM-1的表达情况。各时间点取2只动物用于检测髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性。在透射电镜下观察脑组织细胞超微结构。主要观察指标:ICAM-1阳性表达,MPO活性,细胞超微结构。结果:缺血再灌注后高倍镜下(×200)每平方毫米大鼠脑组织切片的I-CAM-1阳性细胞数在假手术组中稳定于(1.02±0.14)～(1.15±0.16)个/mm2;缺血组6h后ICAM-1开始上升,于12h达高峰,由(2.82±0.07)个/mm2增至(7.08±0.09)个/mm2。

α-黑素细胞刺激素对EAE豚鼠外周血IL-17、IL-23水平的影响

目的通过研究α-黑素细胞刺激素(α-MSH)对急性实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)豚鼠外周血IL-17、IL-23水平的影响,探讨α-MSH对EAE发病保护作用及免疫学机制。方法将40只雌性豚鼠随机分为正常对照组、EAE对照组和EAE高剂量治疗组、EAE低剂量治疗组,每组各10只。EAE对照组及EAE高剂量治疗组、EAE低剂量治疗组采用粗制髓鞘碱性蛋白(cMBP)诱发急性EAE,EAE高、低剂量治疗组自造模前7d始分别按1mg/(kg.d)及0.25mg/(kg.d)予腹腔注射注射α-MSH直至试验结束。观察4组豚鼠神经功能障碍评分变化,并用ELISA法测定IL-17、IL-23水平。结果 EAE高剂量治疗组、EAE低剂量治疗组神经功能障碍评分较EAE对照组显著降低(P<0.01,P<0.05),且EAE高剂量治疗组降低更明显(P<0.05)。EAE对照组及EAE低剂量治疗组豚鼠发病高峰期外周血IL-17、IL-23水平均较正常对照组升高(均P<0.01),EAE高剂量治疗组与正常对照组比较IL-17、IL-23水平差异均无统计学意义(P>0.05),EAE高剂量治疗组与EAE低剂量治疗组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。EAE各组豚鼠发病高峰期外周血IL-17、IL-23水平与神经功能障碍评分均呈正相关(r=0.79、P<0.05,r=0.84、P<0.01)。结论α-MSH对EAE豚鼠发病具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制IL-17、IL-23生成发挥调节作用的。

α-黑素细胞刺激素对EAE豚鼠外周血CD4^+CD25^+FoxP3^+Treg细胞比例的影响

目的探讨α-MSH对EAE发病保护作用及免疫学机制。方法 40只雌性豚鼠随机分为正常对照组、EAE对照组和EAE高、低剂量治疗组。采用粗制髓鞘碱性蛋白(cMBP)诱发急性EAE,EAE高、低剂量治疗组自造模前7d始分别按1mg/(kg.d)及0.25mg/(kg.d)予腹腔注射注射α-MSH直至试验结束。观察豚鼠神经功能障碍评分变化,并用流式细胞方法测定CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞比例。结果 EAE高、低剂量治疗组神经功能障碍评分较EAE对照组显著降低(P<0.01,P<0.05),高剂量治疗组降低更明显(P<0.05)。EAE对照组豚鼠发病高峰期外周血CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞比例较正常对照组下降(P<0.01),高、低剂量治疗组CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞比例较EAE对照组升高(P<0.01,P<0.05)以高剂量治疗组升高最显著(P<0.05)。EAE各组豚鼠发病高峰期外周血CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞比例与高峰期神经功能障碍评分呈负相关(r=-0.83,P<0.05)。结论α-MSH对EAE豚鼠发病具有保护作用,其作用机制可能是通过增加外周血CD4+CD25+FoxP3+Treg比例,增强对活化的自身反应性T细胞的抑制,发挥调节作用的。

α-黑素细胞刺激素及黑皮质素受体-4在能量平衡和繁殖中的功能研究

阿片黑素促皮质激素原(POMC)是黑皮质激素的前体物质,在机体中广泛分布。近年来,POMC及其衍生物黑素细胞刺激素(MSH)和黑皮质素受体-4(MC4R)在能量稳态和繁殖活动中的作用备受关注。研究发现,POMC神经元及其加工后的产物对摄食和体重的调节具有重要作用。此外,POMC神经元在下丘脑中与GnRH神经元紧密接触,由其产生的神经递质和神经肽可能对GnRH神经元具有重要的输入作用,从而直接或间接地调控下丘脑–垂体–性腺轴(HPG)中繁殖相关激素的合成并影响生殖活动。本文综述了黑皮质素系统对能量稳态和繁殖活动的调控作用以及目前MC4R在硬骨鱼类中的药理学研究,以期其能够在动物的生长发育和繁殖中具有应用前景。

α-黑素细胞刺激素对EAE豚鼠外周血单个核细胞分泌IL-4、IFN-γ水平的影响

目的:通过研究α-黑素细胞刺激素(α-MSH)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)豚鼠分泌IL-4、IFN-γ水平的影响,探讨α-MSH对 EAE发病有无保护作用。方法40只雌性豚鼠分为正常对照组、EAE对照组和EAE高、低剂量治疗组。两治疗组自造模前7 d始分别按1 mg/Kg/d及0.25 mg/Kg/d予腹腔注射注射α-MSH直至试验结束。观察豚鼠神经功能障碍评分变化,测定IL-4、IFN-γ水平。结果①α-MSH治疗组神经功能障碍评分较 EAE对照组显著降低(P<0.01, P<0.05),高剂量治疗组改变更明显(P<0.05)。②a-MSH治疗组分泌IFN-γ水平较EAE对照组降低(P<0.01,P<0.01),分泌IL-4水平较EAE对照组升高(P<0.01, P<0.01);a-MSH高剂量治疗组比低剂量治疗组升高或降低更明显。③各组IFN-γ/IL-4比值与与神经功能障碍评分呈正相关(P<0.01)。结论α-MSH对EAE豚鼠发病具有保护作用,其作用机制之一可能是通过剂量依赖性地调节IFN-γ/IL-4平衡发挥调节作用的。

α-黑素细胞刺激素对实验性变态反应性脑脊髓炎防治作用的初步研究

目的:探讨α-黑素细胞刺激素(α-MSH)对实验性变态反应性脑脊髓炎模型(EAE)的发病的保护作用。方法:40只雌性豚鼠随机分成正常对照组、EAE对照组、EAE低剂量治疗组和EAE高剂量治疗组,每组各10只。造模前7天开始干预,直至实验结束。记录发病豚鼠的潜伏期、进展期和高峰期神经功能障碍评分;检测外周血单个核细胞(PBMC)分泌IFN-γ、IL-4、IL-17及IL-23能力。结果:EAE高、低剂量治疗组虽均有发病,但潜伏期相对较长,神经功能障碍程度也相对较轻;α-MSH高、低剂量治疗组豚鼠PBMC分泌IFN-γ、IL-17、IL-23能力较EAE对照组降低(P<0.01),分泌IL-4能力较EAE对照组升高(P<0.01);高剂量治疗组改变较低剂量治疗组明显。结论:α-MSH对EAE豚鼠发病具有保护作用。